细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示 , 细胞内DNA和RNA的原位显示
大学细胞生物学考试(习题卷19)
大学细胞生物学考试(习题卷19)第1部分：单项选择题，共227题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。
1.[单选题]下面有关核仁的描述错误的是（ ）。
A)核仁的主要功能之一是参与核糖体的生物合成B)rDNA定位于核仁区内C)细胞在M期末和S期重新组织核仁D)细胞在G2期，核仁消失答案:D解析:2.[单选题]下列关于小分子穿膜运输的描述，错误的是A)一般来说，相对分子量越小，穿膜的速率越快B)一般来说，水溶性越强，穿膜越容易C)带电荷的分子或离子难以穿膜D)非极性的小分子往往很容易穿膜答案:B解析:3.[单选题]恶性肿瘤容易扩散，跟哪一种细胞黏附分子的功能丧失有关?()A)钙黏蛋白B)选择素C)免疫球蛋白超家族D)整联蛋白E.以上都不是答案:A解析:4.[单选题]真核细胞中核糖体大亚基是由（ ）组成A)1个23S rRNA、1个5S rRNA 和30多种r蛋白B)1个23S rRNA、1个5.8S rRNA 和50多种r蛋白C)1个28S rRNA、1个5.8S rRNA 和30多种r蛋白D)1个28S rRNA、1个5.8S rRNA、1个5S rRNA和50多种r蛋白答案:D解析:5.[单选题]糖脂在细胞膜上是如何分布的？ （ ）A)全部分布在胞质面B)全部分布在非胞质面C)胞质面和非胞质面都有分布D)在细胞膜上无分布答案:B解析:6.[单选题]牛脊神经节切片所观察的神经节细胞外围分布有（ ）D)被囊细胞答案:D解析:7.[单选题]用磷脂酶处理完整的人类红细胞，以下哪种膜脂容易被降解 （ ）A)磷脂酰胆碱B)磷脂酰乙醇胺C)磷脂酰丝氨酸D)鞘磷脂答案:A解析:8.[单选题]下面哪一个成分不是叶绿体电子传递链的成分？（ ）[中山大学2017研]A)NADP＋B)泛醌C)质体蓝素（PC）D)细胞色素b6/f答案:B解析:9.[单选题]冰冻蚀刻技术主要用于（ ）。
[南开大学2011研]A)电子显微镜B)光学显微镜C)原子力显微镜D)激光共聚焦显微镜答案:A解析:主要电镜制样技术包括：超薄切片技术、负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜三维重构技术和扫描电镜技术等。
第二章细胞生物学的研究技术和方法
第二章细胞生物学的研究技术和方法一、选择题：1.在光学显微镜下所观察到的组织或细胞结构一般称为A.显微结构B.超微结构C.亚显微结构D.分子结构2.研究细胞的超微结构一般要利用下列哪种技术A.光学显微镜技术B.电子显微镜技术C.X射线衍射技术D.离心技术3.利用不同性质有机染料可对细胞中不同成分选择性染色，下列哪种结果有误A.碘液可使口腔上皮细胞的细胞质和细胞核呈深浅不同的棕黄色B.吉姆萨染液可使细胞核或染色体呈紫红色或桔红色C.甲基绿可使RNA分子呈蓝绿色D.派洛宁可使RNA分子呈红色4.适于观察无色透明活细胞显微结构的光学显微镜是A.相差显微镜B.暗视野显微镜C.荧光显微镜D.偏振光显微镜5.光学显微镜的分辨率（最小分辨率）可达A. 0.1?mB. 0.2?mC. 0.3?mD. 0.4?m6.关于电子显微镜，下列哪项有误A.组织或细胞在透射电镜观察前均需做超薄切片B.分为透射式和扫描两类C.分辨率最高可达0.2nmD.利用电子束作照明源7.关于透射式电子显微镜，下列哪项叙述是错误的A.适于观察细胞的外表形貌B.以电子束作为光源C.电子透过标本后在荧光屏上成像D.分辨率较高8.关于扫描电子显微镜，下列哪项有误A.20世纪60年代才正式问世B.景深长，成像具有强烈立体感C.电子扫描标本使之产生二次电子，经收集放大后成像D.适于观察细胞的内部构造9.福尔根反应（Feulgen reaction）是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内A.蛋白的分布与定位B.脂肪的分布与定位C.酸性磷酸酶的分布与定位D. DNA的分布与定位10.研究组织或细胞显微结构的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术11.研究细胞超微结构的主要技术A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术12.分离细胞内不同细胞器的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术13.利用放射性同位素标记物能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是A.放射自显影技术B.免疫荧光镜技术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术14.用荧光染料标记的抗体处理细胞后在荧光显微镜下对细胞中特殊分子进行定位属于A.放射自显影技术B.免疫荧光镜检术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术15.直接取材于机体组织的细胞培养称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆16.当体外培养的细胞增殖到一定密度后以1：2以上的比例转移到几个容器中进行再培养,称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆17.模拟体内的条件使细胞在体外生存、生长和繁殖的过程称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆18.分离出单个细胞在适当的条件下使之增殖成均一的细胞群体称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆19.体细胞杂交又称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞融合20.适于观察细胞内超微结构的显微镜是A.透射电镜B.扫描电镜C.荧光显微镜D.倒置显微镜21.从血液中分离收集血细胞一般利用A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机22.从破碎的细胞中分离收集线粒体一般所需的仪器是A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机23.要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的A.切片B.滴片C.涂片D.装片24小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成细胞的（）来进行观察。
动物细胞的基本形态观察和显微测量
1．述光镜下肝细胞活体染色的线粒体的形态结构？
2．试描述光镜下软骨细胞液泡系的形态结构？
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
教学目标及其基本要求：
1、教学重点：
（1）掌握微丝的染色方法。
（2）了解光镜和电镜下的微丝基本形态和结构。
2、基本要求：
（1）掌握微丝的染色方法。
（2）了解光镜和电镜下的微丝基本形态和结构。
3.了解细胞的染色方法
4.显微测微尺的使用
教学难点
1.蟾蜍的处死及取材
2.血涂片的制备
3.侧微尺的使用
教学方法
注意理论和实际相结合，将实验课内容与理论课内容密切联系，调动学生的积极性，要求每个学生都亲自动手，分组操作。
教学手段（挂图、幻灯、多媒体……等）
细胞形态观察照片、，板书等。
使用的教材及参考资料
3.细胞的基本形态观察。2小时
1)原理
2)观察方法与结果：
a)制备观察蟾蜍脊髓前角运动神经细胞
b)蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察
c)蟾蜍肝脏压片的制备与观察
d)蟾蜍血涂片及人血涂片的制备与观察
e)人口腔上皮细胞观察
4.测微尺的使用。30分钟
教学重点及难点
教学重点
1.使学生了解如何利用显微镜观察细胞
2.掌握几种制片方法：压片和涂片。
（3）了解细胞松弛素B对微丝的作用及原理。
（4）了解考马斯亮蓝染料在细胞生物技术中的应用。
教学内容提要及时间分配
1.教师：
（1）讲述和提问微丝的作用及组装，细胞松弛素B的作用（15分钟）。
（2）讲解实验的具体操作和注意事项，正常对照在实验中的作用及Triton，M-缓冲液，戊二醛的作用（15分钟）。
生物化学重点笔记(基本知识)
生物化学重点绪论一、生物化学的的概念：生物化学（biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学，它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。
二、生物化学的发展：1．叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。
2．动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。
就在这一时期，人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。
3．分子生物学阶段：这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。
三、生物化学研究的主要方面：1．生物体的物质组成：高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成，此外还含有一些低分子物质。
2．物质代谢：物质代谢的基本过程主要包括三大步骤：消化、吸收→中间代谢→排泄。
其中，中间代谢过程是在细胞内进行的，最为复杂的化学变化过程，它包括合成代谢，分解代谢，物质互变，代谢调控，能量代谢几方面的内容。
3．细胞信号转导：细胞内存在多条信号转导途径，而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起，从而构成了非常复杂的信号转导网络，调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。
4．生物分子的结构与功能：通过对生物大分子结构的理解，揭示结构与功能之间的关系。
5．遗传与繁殖：对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究，也是现代生物化学与分子生物学研究的一个重要内容。
第一章蛋白质的结构与功能一、氨基酸：1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。
构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。
2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类：①非极性中性氨基酸(8种)；②极性中性氨基酸(7种)；③酸性氨基酸(Glu和Asp)；④碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。
二、肽键与肽链：肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。
医学细胞生物学实验课的目的和要求
前言一、医学细胞生物学实验课的目的和要求医学细胞生物学实验课是医学细胞生物学教学的重要组成部分，它既与医学细胞生物学课堂讲授的理论部分密切联系，同时又有它独特的目的和要求：1. 实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生从感性认识加深对课堂所获得的理性知识的认识和理解。
2. 通过光学显微镜的使用，临时标本的制作、细胞培养等技术操作，使学生掌握医学细胞生物学的基本实验方法和技能。
3. 通过实验，培养同学观察、比较、分析、综合等科学思维方法、独立工作能力和实事求是的科学态度。
4. 通过实验，使学生获得书写细胞生物实验报告、绘图、制表等方面的基本知识和技能训练。
二、医学细胞生物学实验报告的写作实验报告是科学研究的记录，同学们必须学会客观地、真实地记载实验过程和结果。
实验报告的形式一般可分以下三种：1. 文字报告：要求学员将观察所得和实验结果客观地用文字给以准确、详细的描述和记录。
文字力求简洁明了，条理清楚。
2. 绘图: 绘图是医学细胞生物学实验中常用的报告形式之一, 它既是根据所观察标本的真实记录和研究资料, 又可通过描绘学习更精细观察描述。
医学生物学实验绘图不同于一般艺术性绘图。
医学细胞生物学绘图的基本要求: ①绘图前应对标本加以仔细观察研究，并在正确的理解后方可动手绘制。
图中各种结构的大小应与实物成比例，力求准确，明暗之处以点疏密表示，切勿以铅笔涂施阴影；②绘图要求洁净明了，整齐有序，图的位置大小，要求分配适宜，线条力求匀整；③图绘好后，各部结构要用铅笔详细标注名称，标注的方法是：由所标注的部位引出直线，并将其名称注于线的末端，所引的线条应与报告纸上下沿平行，书写字应当横排，字迹要求端正。
3. 制表：将观察所得或实验结果，设计一表格，将有关结果逐项填入，表示其相应关系。
三、实验室规则1. 做好课前预习：实验课前，要认真阅读实验指导及与教材的有关内容，明确实验目的、要求和注意事项，了解实验内容、方法和步骤。
实验九细胞内蛋白质的分布与显示
细胞内蛋白质 的显色与分布
(必做，综合性实验，4学时）
实验目的
ห้องสมุดไป่ตู้
掌握原位显示细胞内酸性、 碱性蛋白质的方法并了解细 胞内蛋白质的一般分布
实验原理
酸、碱性蛋白质的显示及分布
组织经三氯乙酸处理后可将核酸（DNA &RNA）抽提掉， 细胞内保留下组蛋白和其它蛋白，组蛋白为碱性蛋白， 其它蛋白呈酸性为酸性蛋白。蛋白质为两性电解质，在 较其等电点为碱性环境中，蛋白质本身带阴电荷，在较 其等电点为酸性环境中，蛋白质本身带阳电荷，组蛋白 的等电点约8.5，酸性蛋白的等电点约4.6—6.75，固绿 为酸性染料，其色素离子带阴电荷，在pH 2.2时，组蛋 白和酸性蛋白均带阳电荷，均可以与固绿色素离子结合 而着色。在pH8.0时，组蛋白带有阳电荷，仍然可以与固 绿色素离子结合着色，而酸性蛋白带有阴电荷，不能与 固绿的色素离子结合，不能显色。
缓冲液(pH2.2) 洗30s 制片镜检
缓冲液(pH8.0) 洗30s 制片镜检
实验结果
• 经固绿（pH2.2）染色后,细胞 质和细胞核均呈绿色 • 经固绿(pH8.0) 染色后,只有 细胞核被染成绿色
固绿染色法示细胞内总蛋白
固绿染色法示细胞内碱性蛋白
实验报告要求
摘要及关键词
前言 材料和方法 结果与分析 参考文献
实验材料及试剂
仪器：显微镜 水浴锅 材料：洋葱鳞茎 试剂：10%甲醛； 5%三氯乙酸； 0.1%固绿（pH2.2和pH8.0）； 磷酸缓冲液（ pH2.2和pH8.0）； 蒸馏水
实验流程
洋葱鳞茎内表皮
10% 甲醛固定 15 min
蒸馏水洗3次（吸去水) 5%三氯乙酸 90oC 15min 用蒸馏水轻缓洗涤至无气味 0.1% 固绿染色5min （pH2.2） 0.1%固绿染色5min （pH8.0）
东南大学农学院2021级《细胞生物学》考试试卷(802)
东南大学农学院2021级《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. G蛋白偶联受体中，霍乱毒素使G蛋白α亚基不能活化，百日咳毒素使G蛋白α亚基持续活化。
（）答案：错误解析：霍乱毒素，使α亚基丧失GTP酶的活性并处于持续活化状态；百日咳毒素抑制Gi的活性。
2. 组蛋白与DNA之间的相互作用依赖于核苷酸的特异序列。
（）答案：错误解析：组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的，基本不依赖于核苷酸的特异序列。
3. 体外细胞培养很容易被微生物所污染，因此细胞工程所有的实验都必须在无菌条件下进行，所有的实验器械和试剂都是以相同的方式消毒灭菌。
（）答案：错误解析：细胞工程实验用到的灭菌方式有高压蒸汽灭菌，高温灭菌，以及过滤等方法。
不同的器材试验器械和试剂所需要的灭菌方式不尽相同，例如：玻璃品类压缩空气的器皿可以通过高压蒸汽烘干，金属可以通过灼烧的方法进行高温灭菌。
4. 经过流式细胞仪分离出来的细胞不能继续培养。
（）答案：错误解析：如果染色过程不影响细胞活性，经流式细胞仪分离出来的细胞可以继续培养。
5. 基因扩增的结果是某些特定基因的拷贝数增加。
（）答案：正确解析：基因扩增是指细胞中某些基因的拷贝数专一性地大量增加的现象。
6. 核孔复合物中的环孔颗粒是由8对组蛋白质组成。
（）答案：错误解析：组蛋白是组装染色体的蛋白质，不会存在于核孔。
7. 细胞内新合成的多肽链如果带有信号序列，它就被运送到细胞外成为分泌蛋白；如果不带有信号肽，就留在细胞内。
（）答案：错误解析：蛋白分选的接收机分选序列多种多样，所决定的蛋白质的最终去向不一，如含N端信号肽的多肽将分泌至细胞外，而含有核定位信号的蛋白将进入细胞核。
2、名词解释（40分，每题5分）1. 细胞生物学（cell biology）答案：细胞生物学是指由从细胞的显微结构、超微结构和大分子的各级水平研究细胞的各级结构与功能的关系，探索细胞生长、发育、分化、繁殖、遗传、变异、代谢、衰亡及进化等各种生命现象规律的。
07级实验二：DNA和RNA和过氧化物酶原位显示 (恢复)
方法： 方法：
骨髓涂片，要求涂薄 骨髓涂片， 0.5%硫酸铜溶液固定 分钟 0.5%硫酸铜溶液固定0.5分钟 硫酸铜溶液固定0.5 玻片晾干后，37° 玻片晾干后，37°C 水浴锅联苯胺混合染液 染色3 染色3分钟 1%番红染液复染1分钟 1%番红染液复染 番红染液复染1 细水冲， 细水冲，晾干后镜检
请班长安排今天做清洁的 同学，谢谢。 做完实验后，清理好自已 的桌面，交实验报告后 才能离开。
对于同学们参与这次教学活动的考核， 对于同学们参与这次教学活动的考核，本 着客观、公正的原则， 着客观、公正的原则，主要依据选题的合 理性和难度，展示方案的完整性、合理性、 理性和难度，展示方案的完整性、合理性、 正确性，演讲的实际效果， 正确性，演讲的实际效果，由任课教师评 出优秀及良好项目，作为平时成绩加分。 出优秀及良好项目，作为平时成绩加分。
方法： 方法： （1）制备蟾蜍血涂片 要求血膜较薄， 要求血膜较薄，充分晾干 70%酒精固定5 （2）70%酒精固定5分钟 玻片晾干或用吹风吹干后， （3）玻片晾干或用吹风吹干后，染 15分胞内过氧化物酶的原位显示 • 原理： 原理： 过氧化物酶能将联苯胺氧化为 蓝色或棕色产物， 蓝色或棕色产物，由此显示细胞内 过氧化物酶的存在和分布。 过氧化物酶的存在和分布。
细胞内DNA、RNA 实验二 细胞内 、 及过氧化物酶的原位显示 实验目的： 实验目的： 了解原位显示细胞内DNA、 了解原位显示细胞内 、 RNA、过氧化物酶的方法；熟悉血 、过氧化物酶的方法； 液涂片、骨髓涂片及固定染色方法。 液涂片、骨髓涂片及固定染色方法。
实验内容： 实验内容：
一、 细胞内DNA和RNA的原位显示 细胞内DNA和RNA的原位显示 原理： 原理： DNA和 RNA因聚合程度的不同 DNA 和 RNA 因聚合程度的不同 ， 可被甲基绿— 可被甲基绿 —哌洛宁混合染液染成不 同的颜色，DNA聚合程度高 聚合程度高， 同的颜色，DNA聚合程度高，被甲基 绿染成蓝绿色；RNA聚合程度低 聚合程度低， 绿染成蓝绿色；RNA聚合程度低，被 哌洛宁染成红色。 哌洛宁染成红色。
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4、送交动物尸体 5、检查水电门窗安全
2. 将动物尸体送到实验室门口动物尸体篓； 3. 清洗并检查自己桌面上的器材（弯盘、镊子等是否齐全）；
4. 做好显微镜使用登记，盖好防尘罩；
5. 将用过的载玻片刷洗干净后放入回收盆中; 6. 盖玻片、吸水纸等扔到垃圾桶中。 （弃入水槽中会引起下水道堵塞）
细胞生物学与遗传学教研室
第二次实验
Ⅰ 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
Ⅱ 细胞内握酸、碱性蛋白以及DNA和RNA在细胞内的 分布情况； 2.了解酸、碱性蛋白以及DNA和RNA显色反应的 原理和方法。
[实验原理]
1. 由于不同蛋白质分子所带酸性基团和碱性 基团数量不同，生理条件下，整个蛋白质
晾 干
0.1%酸性固绿 5min 0.1%碱性固绿 45min
[注意事项]
• 两人一组，每组制3张血涂片
• 其中只有2张血涂片需经过三氯醋酸处
理（为什么？）
[结果观察]
酸性蛋白
碱性蛋白
DNA和RNA的显示
[作业]
1. 请回答细胞化学法在本次实验中的应用。 2. 通过本次实验学到哪些基本操作技能？ 3. 请描述本次实验的显微观察结果。
带负电荷多则为酸性蛋白，带正电荷多则
为碱性蛋白。可用不同pH值的固绿染色，
即可显示细胞内酸性蛋白或碱性蛋白。 核酸的存在会影响实验结果 用三氯醋酸处理
2. 甲基绿和派洛宁是互不混淆、互不影响的 两种染色剂，由于其自身分子结构的特点， 它们可与两种聚合程度不同的核酸竞争性 结合，从而同时显示细胞内DNA和RNA的分 布部位。
[小结]
• • • 评价本次实验的得失 本次实验需要巩固的概念 细胞化学法 本次实验需要掌握的实验技能
1. 血涂片制作方法
2. 染色的规范操作方法 3. 洗涤方法（流水冲洗）
4. 正确的镜检方法（显微观察技术）
值日生工作：
1、检查显微镜 2、清点检查器材
3、清洁公共实验区、打扫卫生
镜检后作业与工作
[实验用品]
95%乙醇 三氯醋酸 甲基绿-派洛宁 0.1%酸性固绿 0.1%碱性固绿
[操作流程]
暴露 胸腔 制 血涂片
(3张)
取心脏血
氯仿麻醉
固 定
90 ℃ 三氯醋酸 20min
晾干
2张
洗 涤
95%乙醇，5-10min
1张
>1 min
洗 涤
染 色
镜检 洗涤 晾 干 甲基绿-派洛宁 10min 洗涤