病理科免疫组化常用抗体
病理诊断中常用免疫组化抗体及其表达

常用抗体(按字母排序)AE1/AE3阳性部位:细胞浆对照:结肠、乳腺AE1可与大多数的酸性细胞角蛋白(I型)反应,而AE3识别所有已知的碱性细胞角蛋白(Ⅱ型)。
AEl/AE3抗体的混合物,包括CKl-8、10,14、15、16、19。
该抗体可与几乎所有的上皮反应(除肾上腺、肝细胞肿瘤,精原细胞瘤,一些肾细胞肿瘤,一些类癌和胰岛细胞)而与一些中间丝状蛋白无交叉反应。
此抗体可用于鳞状细胞肿瘤(包括梭形细胞变异型)、腺癌、移形细胞癌、小细胞癌、类癌、多型性腺瘤(上皮成分)、胸腺瘤、间皮瘤(包括肉瘤样成分)、脊索瘤、生殖细胞肿瘤(除外精原细胞瘤)、滑膜肉瘤和上皮样肉瘤的诊断中。
AFP阳性部位:细胞浆对照:胎儿肝脏AFP可标记卵黄囊(内胚窦)肿瘤、某些生殖细胞肿瘤和肝细胞肿瘤。
在肝细胞癌的诊断中,AFP的敏感性较低,只有44%的肝细胞癌阳性,但其特异性高,因此可与其他抗体联合应用于肝细胞癌的诊断中。
AR阳性部位:细胞核对照:前列腺AR在前列腺癌的发生中起着重要的作用,AR的表达与肿瘤的组织学分型呈一定的相关性,高分化的肿瘤AR的表达要高于低分化的肿瘤。
在前列腺癌中,AR已作为病人对激素反虚性的一项指标,对抗激素治疗的选择具有指导意义。
Bcl-2阳性部位:细胞膜,浆对照:淋巴结Bcl-2可用于滤泡性淋巴瘤和滤泡性增生鉴别:85%的滤泡性淋巴瘤细胞浆阳性,而滤泡性增生只有生发中心部位散在的T细胞阳性。
Bcl-2在单核样B细胞淋巴瘤中阳性,而在单核样B细胞增生病灶中阴性,因而具有鉴别价值。
Bcl-2还可以用于确定滤泡性淋巴瘤是否累及骨髓。
原发性乳腺癌通常Bcl-2阳性,而肺和胃肠道肿瘤转移到乳腺的罕见阳性(即使阳性,也是灶性弱表达)。
Bcl-6阳性部位:细胞核对照:淋巴结Bcl-6表达于正常的滤泡生发中心B细胞和其相关的淋巴瘤。
在滤泡性淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤以及结节性淋巴细胞为主的Hodgkin淋巴瘤中,可以检测到Bcl-6的表达。
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义

免疫组化检查在病理诊断中得应用及其意义免疫组化就是利用抗原与抗体特异性结合得原理,通过化学反应使标记抗体得显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽与蛋白质),对其进行定位、定性及定量得研究,称为免疫组织化学。
免疫组化实验中常用得抗体为单克隆抗体与多克隆抗体。
实验所用主要为组织标本与细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片与组织芯片)与冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片与细胞涂片。
其中石蜡切片就是制作组织标本最常用、最基本得方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定得影响,但可进行抗原修复,就是免疫组化中首选得组织标本制作方法。
石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成得交联破坏,而恢复抗原得原有空间形态。
常用得抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用得修复液就是pH6、0得0、01 mol/L得柠檬酸盐缓冲液。
免疫组化常用得染色方法根据标记物得不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲与组织化学法,后者就是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础得检测方法。
这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平得定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记AE1/AE3最常用,胞浆阳性着色,细丝状,与低、中分子量角蛋白反应,肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性,用于确定肿瘤为上皮源性;CAM5、2胞浆阳性着色,细丝状,包含CK8 与CK18,主要染色神经内分泌细胞与腺上皮,正常鳞状上皮阴性,用于染小细胞癌、胸腺瘤与梭形细胞癌、肝细胞癌:AE1/AE3 CAM5、2 (+),用于乳腺外得Paget’s病;CK34BE胞浆阳性着色,鳞状上皮与鳞状细胞癌阳性,用于染前列腺得基底层细胞,鉴别浸润癌,染涎腺肿瘤得肌上皮,用于染Mallory小体;EMA细胞膜/细胞浆阳性着色,上皮标记得替代品,浆细胞阳性,很好得内对照,用于染滑膜肉瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、L&H 富于淋巴细胞得结节状何杰金、脑膜瘤EMA(+)AE1/AE3(–)、浆细胞瘤;CK7与CK20胞浆阳性着色,两者联合应用可鉴别很多种癌得原发部位,CK7 常常在胃肠道得癌为阴性,CK20 只有胃肠道癌与Merkel 细胞癌阳性。
病理科常用抗体

免疫组化常用抗体标记物(一)上皮源性标记物1、一般性标记物(1) CK(角蛋白)CK亚型:CK5/6、CK7、CK8、CK10/13、CK18、CK19、CK20(2) EMA(上皮膜抗原)2、特异性和(或)相对特异性上皮标记物(1)CEA(癌胚抗原,标记胃肠道癌、肺腺癌等)(2)CA242(肿瘤相关粘液抗原、标记胰腺癌、结、直肠癌等)(3)TG(甲状腺球蛋白,标记甲状腺癌)(4)PSA(前列腺特异性抗原,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(5)PSAP(前列腺特异性酸性磷酸酶,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(6)34βE12(高分子量细胞角蛋白,标记前列腺基底细胞)(7)AFP(甲胎蛋白,标记肝癌、内胚窦癌等)(8)Hepatocyte(标记肝细胞癌)(9)β-HCG(β绒毛膜促性腺激素,标记胎盘滋养叶细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤)(10)CA125(卵巢癌抗原)(二)间叶源性标记物肌源性标记物1、Desmin(Des,结蛋白)2、Actin(肌动蛋白)3、SMA(平滑肌肌动蛋白)4、MSA(肌特异性肌动蛋白)5、Myosin(肌球蛋白)6、Myoglobin(MG,肌红蛋白)7、Myogen(肌浆蛋白)8、MyoD1(肌调节蛋白)(三)血管源性标记物1、FVⅧRAg(第8因子相关抗原)2、CD313、CD344、UEA-15、BNH9(四)组织细胞源性标记物1、CD68/KP-12、Lysozyme(溶菌酶)3、α-AT(α1-抗胰蛋白酶)4、α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)5、Mac387(五)淋巴造血组织源性标记物1、全淋巴细胞(1)CD45/LCA(白细胞共同抗原)(2)TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)(3)CD30/ki-12、全B细胞(1)Igκ(2)Igλ(3) CD20/L26(4)CD79α(5)BLA36(B淋巴细胞抗原)(6)Pax-5(B细胞系特异性激活蛋白)3、B细胞亚型(1)CD10(2)CD21(标记滤泡性树突状细胞)(3)CD23(4)CD35(标记滤泡性树突状细胞)(5)CD384、全T细胞(1)CD3(2) CD5(3) CD43(4)CD45RO/UCHL-15、T细胞亚型(2)CD4(3)CD86、NK细胞(1)CD56(2)CD57/Leu-7(3) CD16/Leu-117、粒细胞和单核细胞(1)CD11c/LeuM5(2)CD15/LeuM5(3) Lysozyme(溶菌酶)(4)α-AT(α1-抗胰蛋白酶)(5)α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)(6) CD68(7) S-100蛋白(8)Mac3878、其他(1) EMA(上皮细胞膜抗原)(2) CD99(尤因肉瘤标记物)(3) ALK-1(间变性淋巴瘤激酶)(4) HLA-DR(6) Bcl-6(7) Bcl-10(8) Ki-67(9) CyclinD1(周期素D1)(10) CD25(11) CD34(六)神经源性标记物1、S-1002、NSE(神经原特异性烯醇化酶)3、Leu-74、Neurofilament(NF,神经微细蛋白)5、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)(七)神经内分泌源性标记物1、激素标记物(1)CA(儿茶酚胺)(2)5-HT(5-羟色胺)(3)垂体激素GH(促生长素)PRL(催乳素)ACTH(促肾上腺皮质激素)TSH(促甲状腺素)FSH(促滤泡素)LH(促黄体素)(4)甲状腺TG(甲状腺球蛋白)CT(降钙素)(5)甲状旁腺PTH(甲状旁腺素)(6)胰岛Insulin(胰岛素)Glucagon(胰高糖素)VIP(舒血管肠肽)PP(胰多肽)Someitostatin(生长抑素)Gastrin(胃泌素)2、非激素标记物(1)NSE(神经原特异性烯醇化酶)(2)CgA(嗜铬素A)(3)SY(突触素)3、激素受体(1)ER(雌激素受体)(2)AR(雄激素受体)(3)PR(孕激素受体)(八)细胞增殖标记物1、PCNA(细胞增殖核抗原)2、Ki-67(九)黑色素标记物1、S-100蛋白2、HMB453、Melanoma(十)癌基因和(或)抑癌基因1、Bcl-22、C-erbB-23、P534、P16(多肿瘤抑制基因)5、nm23(十一)病原体标记物1、Myocobacterium Bovis(分枝杆菌,抗卡介苗)2、HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原)3、HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原)4、HPV(人乳头状瘤病毒)5、HTLV-1(人类T细胞白血病病毒)。
常见肿瘤病理诊断中免疫组化抗体选择

泌尿与男性生殖系统肿瘤1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(9AMAC)、AR2.前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S3.肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD104.肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-675.膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P636.精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4淋巴造血系统肿瘤7.胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV*8.霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-59.非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD4310.间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*11.弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-6712.小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT13.T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin14.套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-6715.T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B16.淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD2017.Burkitt淋巴瘤:CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、TdT18滤泡性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki6719.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV*20.浆细胞瘤:CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ*21.坏死性淋巴结炎:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD16322.粘膜相关淋巴瘤:CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD123.血管免疫母细胞性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α24.组织细胞肉瘤:S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD4526.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤:S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD4527.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤:CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB4528.肥大细胞肿瘤:CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20消化系统肿瘤29.胃癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**30.肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**31.肝细胞癌:AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte32.肝胆管细胞癌:CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg33.食道癌:P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P6334.胰腺癌:CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、35.胰岛细胞瘤:CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK1939.肝炎病毒:HbsAg、HbcAg、HCV涎腺肿瘤37.涎腺粘液性囊腺癌:CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain38.上皮肌上皮癌:CK、P63、SMA、Vimentin、S-100、Myosin-heavy chain39.导管腺癌:CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin-heavy chain40.多形性腺瘤:CK、P63、SMA、S-100、GFAP、Myosin-heavy chain神经内分泌肿瘤41.神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/1842.肺神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/18、CD99、TTF-1、P63、Sp-B43.甲状腺乳头状癌:Tg、TTF-1、CK19、HMBE-1、Gelactin-3、Ki-67、TPO44.甲状腺髓样癌:Tg、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA45.肾上腺皮质癌:CK、CEA、Inhibin、Melan-A、CD10、CgA、Syn、S10046.肾上腺嗜铬细胞瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、47.肾上腺外副神经节瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、GFAP48.Merkel细胞癌:CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99软组织肿瘤49.促纤维增生性小圆细胞肿瘤:CK、EMA、CD99、S-100、Des、Syn、CgA、50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin51.上皮样血管平滑肌脂肪瘤:HMB45、S-100、Melan-A、CD34、CK、SMA、Vimentin52.上皮样血管瘤:CK、CD34、CD31、CD68、EMA53.孤立性纤维性肿瘤:CD34、Bcl-2、CD99、S-100、CK、Vimentin、SMA54.间皮瘤:CK5/6、HMBE-1、Calretinin、TTF-1、D2-40、CK、WT155.横纹肌(肉)瘤:MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD9956.滑膜肉瘤:EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S-100、Bcl-2、Vimentin57.皮隆突/恶纤组:CD34、CD68、S-100、SMA、Vimentin58.血管球瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-10059.血管周肌细胞瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-100、Desmin60.梭形/多形性脂肪:CD34、SMA、S-100、HMB45、CK、CD31、CD6861.脊索/副脊索瘤:SMA、S-100、EMA、CK、GFAP、CD6862.腱鞘巨细胞瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin63.平滑肌(肉)瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、S-100、CD34、Vimentin64.软骨母细胞瘤:CD99、S-100、CK、Vimentin65.结节性筋膜炎:CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin66.缺血性筋膜炎:VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin67.肌纤维瘤/肌纤维瘤病:VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin68.硬化性纤维母细胞瘤:VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD3469.乳腺型肌纤维母细胞瘤:DES、CD34、EMA70.钙化性腱膜纤维瘤:VIM、SMA、MSA、CD99、S10071.血管肌纤维母细胞瘤:DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin72.富于细胞性血管纤维瘤:VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA73.项型纤维瘤:VIM、CD34、CD99、DES、Actin74.Gardner纤维瘤:VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR75.钙化性纤维性肿瘤:Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD34、CK76.巨细胞血管纤维瘤:CD34、CD99、Bcl-277.韧带样型纤维瘤:Vim、SMA、Des、S10078.脂肪纤维瘤病:CD34、Bcl-2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD9979.炎症性肌纤维母细胞性肿瘤:Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD11780.低度恶性肌纤维母细胞瘤:Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK81.黏液炎症性肌纤维母细胞瘤:Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B转移性肿瘤鉴别82.转移性肺/肝癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CK、AFP、CD34、Hepatocyte83.转移性肺/胃肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、Sp-B、CDX-284. 转移性肺/前列腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、PSA、PSAP85. 转移性肺/甲状腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、TG86. 转移性腺/鳞癌:CKAE1、CKAE3、CK8/18、CK5/6、EMA、CD15、P6387. 转移性肺/鼻咽癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、EMA、EBV*88.食道低分化癌/神经内分泌癌:Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5/689.转移性卵巢粘液/浆液性癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CA125、CDX-2神经系统肿瘤90.垂体瘤:TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P5391.胶质瘤:GFAP、MBP、Vim、EMA、S-10092.少突胶质细胞瘤:Pax-5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S-100、CD5793.胶质肉瘤:GFAP、CD68、Vim、S-100、Ki-6794.节细胞胶质瘤:Syn、CgA、GFAP、S-100、CD68、Vim、Ki-6795.神经束膜瘤:S-100、EMA、GFAP、CK、Vim96.恶性外周神经鞘瘤:S-100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MBP97.脑膜瘤:GFAP、EMA、Vim、S-10098.神经纤维/神经鞘瘤:GFAP、EMA、Vim、S-100、CK99.中枢神经细胞瘤:GFAP、S-100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin100.室管膜瘤:EMA、CK、S-100、GFAP、Syn、CD57、MBP、101.脉络丛乳头状瘤:GFAP、CK、S-100、Syn、EMA、Ki-67、CgA102.颅咽管瘤:CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki-67103.颅内血管母细胞瘤:CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF乳腺及女性生殖器官104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15 105.浸润性筛状癌/腺样囊性癌:ER、PR、HER2、P63、Laminin 106.实性神经内分泌癌:ER、PR、HER2、GCDFP-15、CK7、CK20、CgA、Syn107.子宫内膜样肿瘤/宫颈腺癌:Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK117.非妊娠绒毛膜癌:CK、hPL、ß-Hcg恶性肿瘤预后与耐药监测指标P53、Bcl-2、PCNA、Ki67、P-gp、TOPOⅡα、GSTπ宫颈CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki-67、CD68、Pro-EXC1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(AMACR)、AR25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD45、CD207 50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin、Fli-1 104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15、P120-catenin108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin-α109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63、uroplakin III110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin-α、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin-α112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin-α113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin-α、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100、OCT3/4115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK、OCT3/4。
病理科开展免疫组化抗体作用使用范围

CK(35?h11)
30.
CK高分子量
细胞角蛋白(高分子量)
高分子量角蛋白抗体(34?E12)可以识别分子量为68kDa、58kDa、56.5kDa和50kDa的细胞角蛋白,是前列腺基底细胞的特异性标记物,有助于前列腺癌的诊断,可与P63联合应用标记前列腺基底细胞。
——
43.
CD15
——
此抗体可以标记外周血中所有嗜中性粒细胞、骨髓中的早幼粒细胞及中幼粒细胞,也可以与树突状网织细胞和R-S细胞反应,主要用于标记霍奇金淋巴瘤的R-S细胞。
可用于鳞癌和腺癌、间皮瘤和腺癌的鉴别诊断。亦可用于导管上皮良、恶性增生的鉴别诊断。
——
34.
CK7
细胞角蛋白7
存在于大多数正常组织的腺上皮和移行上皮细胞中,一般非上皮来源的细胞无表达。在卵巢、乳腺、肺的腺癌中呈阳性反应,而胃肠道的腺癌阴性,现通常认为CK7是腺癌和移行上皮细胞癌比较特异性的标志
——
35.
3.
MC
鼠抗-人肥大细胞胰蛋白酶
该抗体是肥大细胞较好的标记物。研究表明在皮肤、鼻与肺等变态反应性疾病中,肥大细胞胰蛋白酶表达水平均由增高。该抗体可与肥大细胞中的胰蛋白酶ɑ和?亚基反应,有助于评估此类疾病的肥大细胞中胰蛋白酶的含量。
MastCellTryptase
4.
CEA
癌胚抗原
CEA存在于某种恶性肿瘤组织中,如结肠癌、肺癌、乳癌、胃癌和胰腺癌,在正常结肠组织中也有少量CEA存在。此抗体与180kDa的CEA反应,也可与非特异性交叉反应抗原(NCA)反应,主要用于标记上皮性肿瘤,尤其是腺上皮来源的腺癌。
免疫组化抗体选择

免疫组化抗体选择免疫组化是一种广泛应用于生物医学研究的技术,可以利用特异性抗体对组织或细胞中的分子进行定位和分析。
在实际操作中,选择合适的抗体是至关重要的,因为抗体选择的正确性决定了实验结果的准确性和可信度。
本文将对免疫组化抗体选择的相关内容进行介绍。
一、抗体来源在抗体选择中,首先要确定抗体的来源。
常见的抗体来源有动物、人类和单克隆抗体等。
1.动物抗体:常用的动物抗体包括兔、小鼠、大鼠、绵羊、猪等。
其中,小鼠和兔的抗体较为常用。
小鼠抗体制备相对容易,价格较便宜,但存在交叉反应和不同克隆间的差异等问题;兔抗体的特异性较高,但价格相对较高,且易产生非特异性的背景信号。
2.人类抗体:人类抗体的来源可以是人体免疫细胞库、人类B淋巴细胞杂交瘤等。
人类抗体具有高度的特异性和亲和性,且不存在动物来源抗体引起的交叉反应等问题,但价格较高。
3.单克隆抗体:单克隆抗体是指来自同一种克隆细胞的抗体。
与多克隆抗体相比,单克隆抗体具有更高的特异性和更好的重复性,但价格较高,且制备过程复杂。
二、抗原选择抗体的特异性是由其结合的抗原决定的,因此选择合适的抗原对于获得特异性抗体是至关重要的。
1.天然蛋白:天然蛋白是最常见的抗原形式之一。
其中,重组蛋白是一种受欢迎的选择,因为其可以通过工程技术来优化其受体结合性能。
2.肽段:肽段也是常用的抗原,其具有较低的价格和良好的重复性。
通常,选择相应的肽段以覆盖目标蛋白质中的所需区域,从而提高抗原的特异性。
3.人工合成分子:人工合成分子可以通过选择特定的化合物或糖类等,以获得与目标分子不同的抗原。
这种抗原的优点在于其纯度高、具有良好的重复性以及可控性高。
三、特异性测试在选择抗体之前,需要进行一系列的测试来确定其特异性和亲和力。
1. Western Blot: Western blot是一种常见的蛋白质检测方法,可以用于检测抗体对蛋白质的特异性,同时检测蛋白质是否纯化以及蛋白质的大小。
在选择抗体时,可以将其与不同表达蛋白质的细胞系一起进行Western blot测试,以确定其特异性。
病理诊断中常用免疫组化抗体及其表达

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免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记【精品推荐-doc】

免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。
免疫组化实验所用的抗体有哪些?免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。
单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。
多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些?实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
石蜡切片为什么要做抗原修复?有哪些方法?石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。
常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。
免疫组化常用的染色方法有哪些?根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。
这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
抗体交叉反应的原因:指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。
产生的原因有以下几个方面:1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子,它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。
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免疫组织化学常用抗体标记谱系第一节上皮细胞标志1.细胞角蛋白Cytokeratin(CK)CK就是一种中间丝蛋白,就是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。
CK分子量为40~60KD,根据其分子量不同分为20余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)与低分子CK(LCK)。
2.广谱细胞角蛋白PCKPCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源得良恶性肿瘤、滑膜瘤与间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性、3。
高分子角蛋白HCKHCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,HCK(34βE12)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌得诊断。
4、低分子细胞角蛋白LCKLCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LCK主要用于内脏腺上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。
5。
细胞角蛋白7 CK 7CK7分子量为54KD。
主要标记腺上皮与移行上皮细胞,卵巢、肺与乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺与胃肠道上皮为CD7阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)与结肠癌(CK7—)得鉴别。
6。
细胞角蛋白8 CK8CDK8分子量为52、5KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌与导管癌得诊断,鳞癌一般不表达CK8。
有报道肝细胞癌主要表达CK8与CK18、7、细胞角蛋白10 CK10CK10分子量为56。
5KD、主要标记上皮得基底上层与颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞得分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌得诊断。
8。
细胞角蛋白13 CK13CK13分子量为53KD。
标记所有得复层上皮,包括角化与非角化上皮。
主要用于高分化鳞状细胞癌得诊断、9、细胞角蛋白18 CK18CK18分子量为45KD,属低分子量A型细胞角蛋白。
主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。
主要用于腺癌得诊断。
10、细胞角蛋白19 CK19CK19分子量为40KD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌得诊断。
肝细胞不表达CK19,因此可用于肝癌与转移性腺癌得鉴别。
11。
细胞角蛋白20 CK20细胞角蛋白20(CK20)分子量为46KD,主要标记胃肠道上皮、尿道上皮与Merkel细胞、主要用于胃肠道腺癌、卵巢粘液性肿瘤与Merkel细胞癌得诊断。
鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌与卵巢非粘液性肿瘤均不表达CK20。
12。
上皮膜抗原Epithelial membrane antigen, EMA EMA就是一组糖蛋白,广泛分布在各种正常上皮细胞膜及其肿瘤细胞中,分布范围与细胞角蛋白相似,但对内脏腺上皮得表达优于细胞角蛋白。
对上皮源性肿瘤,尤其就是低分化腺癌,最好与细胞角蛋白联合应用,可提高阳性率、13.上皮特异性抗原Epithelial Specific Antigen,ESA,ESA为分子量40KD得细胞表面糖蛋白,属较广谱得上皮细胞标志,大多数上皮细胞为阳性反应,在肿瘤细胞中,腺癌细胞表达强于鳞癌细胞。
ESA标记谱系似EMA。
14、前列腺特异抗原Prostatespecific antigen,PSAPSA就是由前列腺上皮细胞合成得一种糖蛋白,目前认为具有特异性得肿瘤标记物之一、主要用于前列腺癌与转移性前列腺癌得诊断,但不能作为良、恶性前列腺疾病得鉴别诊断,因为绝大多数得前列腺增生上皮均呈阳性反应。
15.前列腺酸性磷酸酶Prostate acide phosphatase,PSAP PSAP就是由前列腺上皮细胞合成得一种磷酸酶。
正常前列腺组织,增生得前列腺组织与前列腺癌均表达有PSAP、主要用于前列腺癌与转移性前列腺癌得诊断,但不能作为良、恶性前列腺疾病得鉴别诊断。
16。
甲状腺球蛋白Thyroglobuli,TGTG就是甲状腺滤泡上皮细胞合成得一种糖蛋白,对甲状腺滤泡上皮细胞与甲状腺上皮性肿瘤具有较高特异性,常用于各种甲状腺癌与转移性腺癌得诊断与鉴别诊断、17。
肝细胞抗原HPCHPC就是肝细胞较特异标记物,阳性颗粒定位于肝细胞浆。
主要标记肝细胞及肝细胞发生与良恶性肿瘤、非肝细胞无交叉反应、18.HCG-βHCG就是由胎盘合体滋养层细胞产生得一种糖蛋白激素,主要用于胎盘滋养细胞与生殖细胞肿瘤如葡萄胎、绒癌得诊断以及某些神经内分泌肿瘤得研究、第二节ﻭ软组织标记2.波形蛋白Vimentin波形蛋白主要分布于间叶细胞及其起源得肿瘤组织、上皮细胞及其肿瘤一般不含此蛋白。
常用于间叶来源得恶性肿瘤如间皮瘤、滑膜肉瘤、脑膜瘤等诊断,对癌与肉瘤、恶黑与癌、胸腺瘤与淋巴瘤、未分化癌与小细胞间叶肿瘤得鉴别诊断具有重要参考意义、3.结蛋白DesminDesmin为肌细胞得中间丝蛋白,正常分布于平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞与肌上皮细胞。
上述细胞来源得良恶性肿瘤desmin阳性反应、主要用于子宫、皮肤与胃肠道平滑肌肿瘤,横纹肌肿瘤与肌上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。
4、肌动蛋白(广谱)ActinMSA就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,广泛分布于几乎所有得肌型细胞中、5、Actin(HHF35)就是一种广谱得肌动蛋白,主要表达于骨骼肌、平滑肌、心肌与肌上皮细胞,肌源性肿瘤包括平滑肌瘤,平滑肌肉瘤与横纹肌肉瘤以及肌上皮肿瘤等均可呈阳性反应。
6。
肌动蛋白(横纹肌)Sarcomeric Actin横纹肌肌动蛋白就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,主要分布于骨骼肌与心肌细胞中。
用于各种类型得横纹肌肿瘤得诊断,亦可标记具有横纹肌细胞分化肿瘤。
7.肌调节蛋白MyoD1MyoD1就是横纹肌肿瘤得一种标记。
主要用于横纹肌肉瘤得诊断,阳性颗粒位于细胞核。
少数非肌源性组织包括腺上皮、神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤、腺胞状软组织肉瘤可见胞浆阳性、8、肌红蛋白MyoglobinMyoglobin就是骨骼肌肌浆中得一种肌红蛋白,有较高得组织特异性。
但对肿瘤得敏感性较差。
主要用于横纹肌肿瘤得诊断与鉴别诊断、少数恶性中胚叶混合瘤,睾丸畸胎瘤、肾母细胞瘤中肌母细胞亦可见阳性表达、9.肌球蛋白(骨骼肌)Myosin(Skeletal)骨骼肌肌球蛋白可分为I型肌纤维(慢收缩肌纤维)与II型肌纤维(快收缩肌纤维),主要用于横纹肌肿瘤或含有横纹肌成分得肿瘤得诊断与鉴别诊断。
10、MyogeninMyogenin为肌细胞生成素,就是横纹肌及其肿瘤较特异标记物,与MyoD1有一定互补作用、Myogenin对某些去分化得横纹肌肉瘤标记较理想,免疫表型为胞核型。
11。
肌动蛋白(平滑肌)Smooth muscle ActinSMA就是一种标记平滑肌得肌动蛋白,主用于检测血管平滑肌,平滑肌瘤与平滑肌肉瘤、肌上皮细胞与肌上皮瘤等。
在判断良恶性乳腺病变时,根据肌上皮细胞阳性与否与分布,可作为一个重要得参考指标、12。
肌球蛋白(平滑肌)Myosin(Smooth muscle)平滑肌肌球蛋白主要用于标记血管与内脏平滑肌细胞以及肌上皮细胞,被认为就是平滑肌较为特异与可靠得标记,有助于间叶肿瘤得诊断与分类,亦可用于乳腺肌上皮细胞得检测,有助于原位癌与浸润癌得区别。
13。
Caldesmon它就是一种与肌动蛋白与原肌球蛋白结合得钙结蛋白,具有调节平滑肌收缩得功能,将其作为平滑肌标志,用于良恶性平滑肌肿瘤得诊断与研究。
14、Calponin就是一种肌动蛋白结合蛋白,具有抑制平滑肌细胞收缩功能,主要分布于平滑肌细胞与肌上皮,对平滑肌肿瘤、肌上皮肿瘤诊断有意义,亦可用于乳腺肌上皮显示,判断乳腺良恶性。
15。
第八因子相关抗原Factor Ⅷ—relatedAntigne(FⅧ-RAg) FⅧ-RAg就是一种糖蛋白,广泛存在于血管内皮、肝窦、脾窦内皮以及淋巴管内皮细胞、就是血管内皮及其内皮源性良恶性肿瘤得特异性标记。
主要用于血管源性良性肿瘤与血管肉瘤得诊断。
少数附睾、子宫与输卵管得腺癌样瘤亦可表达、良性血管内皮肿瘤阳性表达强于恶性血管内皮肿瘤、血管外皮及其肿瘤细胞不表达FⅧ。
16.内皮细胞标记CD31CD31就是一种重要得血管内皮细胞标志。
主要用于良恶性血管源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
亦可用于各种肿瘤间质中血管生成得研究。
血管外皮细胞及其肿瘤细胞不表达。
17、内皮细胞标记CD34CD34主要标记骨髓干细胞与内皮细胞。
常用于良恶性血管源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
亦可用于各种肿瘤间质中血管生成得研究。
目前CD34也就是胃肠间质瘤较理想得标志物。
18、溶菌酶Lysozyme(Muramidase)Lysozyme与AACT均为组织细胞及其肿瘤得标记物。
主要用于组织细胞瘤、恶纤组、恶性组织细胞增生症与组织细胞恶性淋巴瘤等诊断,由于其特异性不强,应与AACT、CD68等联合应用,以提高其准确性。
19、α1抗糜蛋白酶A1ACTA1ACT就是一种蛋白酶,为巨噬细胞,组织细胞得标记,肝细胞与星形胶质细胞阳性表达,由于该抗体缺乏特异性,目前主要用于纤维组织细胞源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
20、间皮细胞 Mesothelial cell(MCA)MCA为间皮细胞标记,正常间皮细胞与间皮瘤阳性表达,阳性颗粒定位于细胞膜,多为薄膜型,某些腺癌亦可胞浆阳性,MCA主要用于间皮瘤得诊断、21、钙结合蛋白Calretinin(CR)CR就是一种钙结合蛋白,就是间皮细胞及其肿瘤较理想得标志,在上皮性间皮瘤得诊断中,敏感性可达100%,特异性约为50%,也可用于神经系统疾病得研究。
第三节神经组织标志1、胶质纤维酸性蛋白Glial Fibrillary Acidic protein(GFAP) GFAP为中间丝蛋白之一,主要用于星形胶质瘤包括星形细胞瘤、星形母细胞瘤、混合性胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、多数室管膜瘤等中枢神经系统肿瘤得诊断与鉴别诊断。
唾液腺肌上皮细胞及其肌上皮细胞瘤亦可阳性反应。
2.神经纤维细丝蛋白Neurofilament(NF)NF就是神经元特异性中间丝蛋白,由三个不同分子量(68、160与200KD)得亚单位构成得多聚体,以不同得比例分布于中枢外周神经元以及肿瘤中,其阳性见于节细胞神经瘤,副节瘤、小脑或外周神经母细胞瘤,肾上腺嗜铬细胞瘤,亦有助于某些神经内分泌肿瘤得诊断。
3、NestinNestin就是一种新得中间丝蛋白,在神经上皮干细胞中极为丰富,在原始神经外胚层肿瘤(PNET),星形胶质细胞瘤常呈阳性反应,故在这些肿瘤得诊断及研究中具有重要意义。
4。
S—100 ProteinS-100就是一种可溶性酸性蛋白。
有3种亚型,即S-100a、S-100r、S-100β。
S-100主要存在神经组织、垂体、颈动脉体、肾上腺髓质、唾液腺、少数间叶组织。
主要用于神经鞘瘤、恶黑、脂肪肉瘤及软骨肿瘤等得诊断与鉴别诊断。
亦可用于乳腺肌上皮标记,判断乳腺肿瘤得良恶性。
5。
嗜铬素A Chromogranin A(CgA)CgA就是人类肾上腺髓质中含量最高得一种可溶性酸性蛋白,广泛存在于神经元及其神经内分泌细胞与肿瘤细胞中。