各种生物学常用试剂配制
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常用试剂的配制
1.无Ca2+、Mg2+Hanks液
NaCl 4.5g KCl 0.2g
NaHCO
3
0.175g
Na
2HPO
4
·12H
2
O 0.076g
KH
2PO
4
0.03g
葡萄糖 0.5g
0.4%酚红 2.5ml
将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO
3调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。
2.甲基红试剂
(1)成份
甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml
95%乙醇 300ml
(2)用途:测定甲基红反应。
3.Hanks液(原液)
原液甲: NaCl 160g
KCl 8g
MgSO
4·7H
2
O 2g
MgCl
2·6H
2
O 2g
上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。
CaCl
2
2.8g溶于100ml双蒸水
上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
原液乙: Na
2NPO
4
·12H
2
O 3.04g
KH
2PO
4
1.2g
葡萄糖 20g
加入800ml双蒸水,溶解。
0.4%酚红溶液100ml
上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO
3
调整PH值。
4.0.4%酚红溶液
称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒
几乎完全解,加入0.lmol/LNaOHl0ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。
5.pH7.2 Tris-NH
4
CI溶液(红细胞崩解液)
Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g
NH
4
Cl(氯化氨) 3.735g
加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。
6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液
巴比妥 1.84g
加蒸馏水 200ml 加热溶解
巴比妥纳 10.3g
叠氮纳 0.2g
加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
7.磷酸盐缓冲液(PB)
A 液:为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH
2PO
4
·H
2
O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最
后补加蒸馏水至 1000ml 。
B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na
2HPO
4
.7H
2
O 3.6g(或 Na
2
HPO
4
·12H
2
O
71.6g, 或Na
2HPO
4
·2H
2
O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加蒸
馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。
8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)
硼酸钠(Na
2B
4
O
7
.10H
2
O) 0.46g
硼酸(H
2BO
3
) 0.51g
加蒸馏水至100ml 溶解。9.PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法一:
0.2mol/L Na
2HPO
4
( Na
2
HPO
4
·12H
2
O 71.6g加蒸馏水至1000ml)
0.2mol/L NaH
2PO
4
(NaH
2
PO
4
·2H
2
O 35.6g加蒸馏水至1000ml)
取0.2mol/L Na
2HPO
4
81.0ml 加0.2mol/L NaH
2
PO
4
19ml,再加1900mlH
2
O和
17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。
PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。
配制方法二:
甲液(0.1mol/LKH
2PO
4
溶液):KH
2
PO
4
13.608g,加蒸馏水至1000ml。
乙液(0.1mol/L Na
2HPO
4
溶液):Na
2
HPO
4
35.814g,加蒸馏水至1000ml。
取甲液19ml,乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。