微生物检验技术知识点

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微生物检验主要知识点总结

微生物检验主要知识点总结

微生物检验主要知识点总结一、微生物检验的概念微生物检验是指利用现代生物学技术手段检验和鉴定食品、饮用水、药品、环境等物品中微生物的种类和数量的一种实验室检验方法。

微生物检验的主要目的是为了评估物品中微生物的数量及种类是否达到卫生标准,以保障人们的健康和安全。

二、微生物检验的重要性1. 保障公共卫生:微生物检验可以及时发现食品、饮用水、药品等物品中存在的微生物污染,有针对性地采取相应的措施,从而保障公共卫生。

2. 保障产品质量:微生物检验可以帮助企业检测产品是否受到微生物污染,保障产品的质量和安全。

3. 疾病预防:微生物检验可以检测出病原微生物,为疾病的预防和控制提供科学依据。

三、微生物检验的主要流程1. 采样:根据不同的检验对象,选择合适的采样方法和设备进行样品采集。

2. 样品处理:将采集的样品进行处理,以提取出微生物进行检测。

3. 细菌培养:将样品中的微生物分离培养,以获取单一的微生物种类。

4. 微生物鉴定:通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对微生物进行鉴定。

5. 微生物计数:对样品中的微生物进行计数或定量。

6. 结果分析:根据检验结果,评估样品是否符合相关的卫生标准。

四、微生物检验中的常用方法1. 培养法:将样品涂在含有营养物质的培养基上,利用条件恰当的培养环境,使样品中的微生物进行生长。

2. 影像法:通过显微镜观察培养好的微生物,观察其形态特征,进行鉴定。

3. 生化鉴定法:根据微生物的代谢过程,通过一系列的生化反应,鉴别微生物属种。

4. 分子生物学方法:利用PCR、DNA测序等技术,对微生物进行鉴定。

五、微生物检验中的常见问题1. 选择合适的检验方法:不同的微生物污染可能需要不同的检测方法,需根据具体情况选择合适的方法。

2. 样品的处理和保存:样品的处理和保存条件对检验结果有着重要的影响,需要严格按照标准操作。

3. 检验结果的分析和判断:检验结果可能存在假阳性、假阴性等情况,需要结合其他信息进行分析和判断。

检验师微生物检验知识点集锦

检验师微生物检验知识点集锦

检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一,主要用于检测病原微生物的存在和种类,以及对药敏试验进行评估。

作为初级检验师,你需要掌握以下几个方面的知识点:1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则:包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。

-微生物的形态和结构:掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成,如细菌的形状、胞壁和胞质等。

-微生物的生长条件:了解微生物的生长条件,包括温度、湿度、pH值和营养物质等。

2.微生物检验方法-样品采集及处理:理解不同样品(如血液、尿液、分泌物等)的采集方法和处理步骤,以确保样品的准确性和可靠性。

-培养方法:熟悉不同微生物的培养方法,包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。

-鉴定方法:了解常见微生物的鉴定方法,包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。

-药敏试验:掌握药敏试验的原理和操作步骤,用于评估微生物对不同抗生素的敏感性,并为临床治疗提供参考。

3.常见病原微生物-常见病原菌:学习常见病原菌的分类、形态和致病特点,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

-常见病毒和真菌:了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法,例如流感病毒、念珠菌等。

-传染病的检测:学习不同传染病的检测方法,包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。

4.质控和质量管理-质量控制:了解微生物检验中的质量控制措施,如内外质控、质量标准和质量评估等,确保结果的准确性和可靠性。

-安全措施:掌握微生物检验过程中的安全措施,如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。

除了以上的基础知识,你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。

微生物检验是一个综合性较强的检验项目,需要不断学习和实践,提高自己的技术水平和判断能力。

微生物检验技术知识点

微生物检验技术知识点

微生物检验技术知识点1.培养方法:培养是微生物检验的基础,通过将样品接种到培养基上,使微生物在合适的环境中繁殖生长。

培养方法包括常规培养和不同培养手段。

常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。

2.鉴定方法:微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。

传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等,而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。

常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验(ELISA)、脱氧核糖核酸(DNA)杂交和聚合酶链反应(PCR)等。

3.纯化和分离方法:对于复杂的微生物种群,需要进行纯化和分离,以便对特定的微生物进行进一步的研究。

纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法,以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和DNA测序技术等。

4.对微生物的抗生素敏感性检测:抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。

抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。

目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。

5.流行病学监测:微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。

通过对微生物种群的监测和分析,可以及时发现并控制传染病的传播。

流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。

6.污染控制技术:微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。

通过对环境和食品中微生物的检验,可以评估污染程度,并采取相应的控制措施。

常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。

7.微生物基因工程:微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造,以生产有用的产物或者改善微生物的特性。

微生物基因工程的应用广泛,可以用于制药、农业、环境工程等领域。

常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。

总之,微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。

通过不断地研究和创新,微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。

微生物检验基础知识点总结

微生物检验基础知识点总结

微生物检验基础知识点总结微生物检验是临床诊断中的重要技术手段,通过对患者样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验,可以确定感染性疾病的病原体及其对药物的敏感性,为临床治疗提供重要依据。

微生物检验涉及到许多基础知识点,下面将分别从微生物分类、微生物培养、微生物鉴定和药敏试验等方面来总结微生物检验的基础知识点。

一、微生物分类微生物是一种广泛分布于自然界中的生物体,包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。

而在临床微生物检验中,最常见的微生物主要是细菌和真菌。

下面将分别介绍细菌和真菌的分类。

1. 细菌的分类细菌是一类单细胞生物,其形态多样,包括球菌、杆菌、螺旋菌等。

从生物学特性上可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

(1)革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌直接在植物或培养基上形成蓝、紫色颗粒。

细胞壁是由聚糖和一种特殊的脂质组成。

革兰氏阳性菌包括葡萄球菌、链球菌等。

这类细菌能在治疗性的延续性用药下适度存活。

(2)革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌则是指革兰氏润湿的时候是红色的细菌,单层数细胞壁,比革兰氏阳性菌的致病能力更强,但是也更容易受到抗菌素或药物的影响。

这类细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌等。

2. 真菌的分类真菌是一种含有真核细胞核的微生物,包括酵母菌和菌丝菌两类。

(1)酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌,能在酵母天然的酵母营养生长,大部分为革兰氏染色阳性,不表现形成孢子的原始生长特性。

酵母菌包括念珠菌、假丝酵母等。

(2)菌丝菌菌丝菌是一类多细胞真菌,其细胞由菌丝组成,通常由菌落分离。

它们通常是真菌,因为它们在呼吸和生长条件下形成的真菌菌丝。

菌丝菌包括白色念珠菌、曲霉菌等。

二、微生物培养微生物培养是微生物检验中的重要环节,通过在适当的培养基上提供适当的温度、湿度、氧气和营养物质,使微生物在含有以上条件的环境中进行繁殖和生长。

1. 培养基的分类与特点培养基是一种含有适量营养成分的物质,用于微生物的生长和繁殖。

根据不同的需求和用途,培养基可分为富营养基、简单基、选择基和不同温度适应基等。

微生物学检验知识点第一部分

微生物学检验知识点第一部分

【微生物学检验】知识点整理(第一部分)简述致病菌引起全身感染后,常见的几种类型?答:①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症试述构成细菌侵袭力的物质基础。

答:①荚膜②黏附素③侵袭性物质简述病原菌感染机体后,机体如何发挥抗菌免疫功能?答:首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构,血脑屏障,胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。

7-10天后,机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌简述细菌耐药性产生的主要机制。

答:①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力,在这种压力的作用下,原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来,并不断扩大。

举例说明细菌命名的原则。

答:细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。

一个细菌种的学名由两个拉丁字组成,属名在前,用名词,首字母大写;种名在后,用形容词,首字母小写;两者均用斜体字。

中文译名种名在前,属名在后。

如Mycobaterium tuberculosis (结核分枝杆菌)。

属名亦可不将全文写出,只用第一个大写字母代表,如M. tuberculosis 如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。

答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。

②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。

脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。

金葡菌菌落周围有透明溶血环。

③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。

致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。

食品卫生标准中的微生物指标

食品卫生标准中的微生物指标
易死亡,所以难以在食品中检出。 • 基于上述原因,通常采用大肠菌群来预测食品被粪便、肠道病原菌
污染的可能性。
不适于用大肠菌群作为粪便污染指示菌的食品: 冷冻食品 经射线照射处理的食品 pH较高的食品 原因: 在上述食品中大肠菌群的细菌比其他肠道病原ห้องสมุดไป่ตู้更易死亡。
3.致病菌检验
• 食品卫生法规规定,食品中不能有致病菌。
2.大肠菌群检验
• 大肠菌群: 37℃,24h能发酵乳糖产酸产气的G-细菌。 • 大肠菌群作为食品卫生质量的指标的原因: • 大肠菌群是人和动物肠道中的正常微生物区系,并且只存在 于人
和动物肠道中。 • 大肠菌群通常与动物肠道病原菌同时存在,只是数量不同。 • 动物肠道病原菌抵抗外界不良环境的能力较差,在体外环境 中极
• 在绝大多数情况下,污染食品的致病菌数量是不会太多的,一般检验过 程 中很难检查出来。
• 检验致病菌所用到的药品价格一般较高,生产部门在常规检验中列入此 项 检验,会大大提高生产成本。
一、微生物检验项目及意义
微生物检验指标: 菌落总数检验 大 肠菌群检验 致病 菌检验
1.菌落总数检验
• 食品中微生物数量的表示方法: 1g或1ml食品中的细菌总数表示。 • 菌落总数作为食品卫生质量评定的原因: • 反映食品的新鲜程度(新鲜食品内部组织一般没有细菌) • 反映食品生产过程中有否变质 • 反映食品生产的一般卫生情况 • 不适于用菌落总数作为卫生质量指标的食品: • 发酵食品(尤其是细菌发酵食品) • 食品卫生质量综合评定的重要性: • 微生物毒素的存在,病原微生物的存在
• 目前生产企业一般不将致病菌检验列入常规检验指标,主要原因:
• 检验方法还存在一定的局限性,还不能仅借一种或少数几种检验方法即 能 将多种致病菌全部检出。因此,要检验多种致病菌时,势必要应用较多的 检验方法。

微生物检验技术知识点

微生物检验技术知识点

微⽣物检验技术知识点1微⽣物:是⼀群形体细⼩、结构简单、⼈⾁眼看不见,必须借助于光学显微镜、电⼦显微镜放⼤⼏百倍、⼏千倍甚⾄⼏万倍才能看到的⽣物。

2 微⽣物的种类:原核细胞型:细菌、放线菌、螺旋体、⽴克次⽒体、⽀原体、⾐原体;真核细胞型:酵母菌、霉菌、微藻类等;⾮细胞型:病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)。

3 病源微⽣物:感染⼈、动植物,导致疾病发⽣的有害微⽣物,称之为病原微⽣物。

4、微⽣物对产品的污染:对产品造成污染的微⽣物来源:⼟壤、空⽓、⽔、⼈和动植物、⽣产原料、⽣产器械及包装材料等5 微⽣物检验的意义:1)是衡量动植物性产品卫⽣质量的重要指标之⼀,也是判定被检产品能否⾷⽤的科学依据之⼀。

2)通过微⽣物检验,可以判断产品加⼯环境及产品卫⽣环境,能够对产品被微⽣物污染的程度作出正确的评价,为各项卫⽣管理⼯作提供科学依据,提供传染病和⼈类、动物和⾷物中毒的防治措施。

3)微⽣物检验是以贯彻“预防为主”的卫⽣⽅针,可以有效地防⽌或者减少⾷物中毒、⼈畜共患病的发⽣,保障⼈民的⾝体健康;同时,它对提⾼产品质量,避免经济损失,保证出⼝等⽅⾯具有政治上和经济上的重要意义。

6微⽣物检验的范围与对象:微⽣物检验<>范围1.⽣产环境的检验:车间⽤⽔、空⽓、地⾯、墙壁等。

2.各种产品的原、辅料检验:包括⾷⽤动物、⾕物、添加剂等⼀切原辅材料。

3.各类产品加⼯、储藏、销售诸环节的检验:包括⾷品从业⼈员的卫⽣状况检验、加⼯⼯具、运输车辆、包装材料的检验等。

4.产品的检验:重要的是对出⼚产品、可疑产品及⾷物中有毒⾷品的检验.微⽣物检验<>对象7类(1)⾷品(2)化妆品(3)药品(4)⼀次性⽤品及其他⽣活⽤品(5)应施检疫的出⼝动物产品(6)环境(7)有关国际条约或其他法律、法规规定的强制性卫⽣检验的进出⼝商品我国卫⽣部颁布的⾷品微⽣物指标有菌落总数、⼤肠菌群和致病菌三项⼤肠菌群是指⽰⽔质受粪便污染的指⽰菌,细菌总数指⽰⽔体受污染物污染的情况。

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识:了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征,包括形态、生长要求、代谢特性等。

2.微生物的分离和培养:熟悉常规培养基的选择和制备,掌握不同微生物的适宜培养条件,如温度、pH值、氧气需求等。

3.微生物鉴定:根据微生物的形态和特性进行初步鉴定,如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。

此外,还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。

4.耐药性检测:对微生物进行药敏试验,了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。

这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。

6.检验流程和规范:了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求,掌握各类检验方法的操作步骤,遵守无菌操作规范,以保证检验结果的准确性和可靠性。

7.抗生素治疗和微生物学监测:了解抗生素的分类、作用机制和临床应用,以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。

合理应用抗生素,避免滥用和不当使用,是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制:了解医院感染控制的基本原则和措施,包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。

临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用,通过对患者、环境和医务人员的监测,提供科学依据进行感染防控。

9.病原微生物的定量检测:对一些病原微生物,如HIV、肺结核菌等,需要进行定量检测。

这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。

10.新技术和新方法的应用:随着科技的进步,临床微生物检验也不断发展,新的方法和技术被广泛应用,如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。

了解这些新技术的原理和应用,可以提高检验的灵敏度和特异性。

总结起来,临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。

掌握这些知识,可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性,为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。

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平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂在平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
菌落形成单位cfu,colony-forming unit。
I类危害:老人和婴幼儿食品及在食用前可能会增加危害的食品;
Ⅱ类危害:立即食用的食品,在食用前危害基本不变;
Ⅲ类危害:食用前经加热处理,危害减小的食品。
将检验指标对食品卫生的重要程度分成一般、中等和严重3档。
根据以上危害度的分类,又将取样方案分成二级法和三级法。
二级法:设定取样数n,指标值m,超过指标值m的样品数为C,只要C>0,就判定整批产品不合格。
2、样品送检时:必须认真填写送检申请单,以供检验人员参考。
3、送检过程:要注意防污染、防散漏、防变质。
4、检验人员接到送检单后应立即登记,填写序号,并按检验要求,立即将样品放入冰箱或冰盒中,并积极准备条件进行检验。
5、食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品一般阳性样品发出报告后3d(特殊情况可适当延长)方能处理样品;进口食品的阳性样品,需保存6个月方能处理;阴性样品可及时处理。
(3)车间空气采样。直接降尘法。将5个直径90mm的普通营养琼脂平板分别置于车间的四角和中部,打开平皿盖5min,然后盖盖送检。
样品的送检要求
1、采集好的样品应及时送到食品微生物检验室:要快速运送,不要超过3小时;易变质的样品要冷藏,若路途遥远,无需冷冻样品可保持在1~5℃低温下运送;需保持冷冻状态的样品,可保存在泡沫塑料隔热箱,维持0℃。
一般采用100克或100毫升食品中的大肠菌群最可能数(MPN)来表示。
国标测定方法:乳糖九管发酵法。不仅表明样品中有无粪便污染,另方面还可根据数量的多少,判定样品受污染的程度
三级法:设定取样数n,指标值m,附加指标值M,介于m与M之间的样品数C。只要有一个样品值超过M或C规定的数就判整批产品不合格。
②美国FDA的取样方案
食品药品管理局(FDA)的取样方案与ICMSF的取样方案基本一致,所不同的是严重指标所取的15、30、60个样可以分别混合,混合的样品量最大不超过375g。也就是说所取的样品每个为100g,从中取出25g,然后将15个25g混合成一个375g样品,混匀后再取25g作为试样检验,剩余样品妥善保存备用。
第二章
第一节微生物检验的基本程序
1检验前的准备2样品的采集3样品的送检4样品的处理方法
5致病菌检验参考菌群的选择6样品的检验7检验结果的报告
检验前的准备
1.准备好所需的各种仪器:如冰箱、恒温培养箱、显微镜等
2.按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌,冷却后送无菌室备用。
3.准备好实验所需的各种试剂、药品,制备好普通营养琼脂或其他选择性培养基。根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。
3.固体食品:大块整体食品应用无菌刀具和镊子从不同部位割取,割取时应兼顾表面与深部,注意样品的代表性;小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品,放入无菌容器。若为检验食品的污染情况,可取表层样品;若为检验食品品质的情况,应从深部取样。
4.冷冻食品:大包装小块冷冻食品按小块个体采取;大块冷冻食品可以用无菌刀从不同部位削取样品或用无菌小手锯从冻块上举取样品,也可以用无菌钻头钻取碎屑状样品,放入容器。固体食品和冷冻食品的取样还应注意检验目的,若需检验食品污染情况,可取表层样品;若需检验其品质情况,应取深部样品。
3)微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针,可以有效地防止或者减少食物中毒、人畜共患病的发生,保障人民的身体健康;同时,它对提高产品质量,避免经济损失,保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。
6微生物检验的范围与对象:
•微生物检验<>范围
1.生产环境的检验:车间用水、空气、地面、墙壁等。
2.各种产品的原、辅料检验:包括食用动物、谷物、添加剂等一切原辅材料。
1.菌落总数:菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数。
2.大肠菌群:大肠菌群是寄居于人及温血动物肠道内的肠居菌,它随着的大便排出体外。食品中如果大肠菌群数越多,说明食品受粪便污染的程度越大。
3.致病菌:致病菌既能够引起人们发病的细菌。对不同的食品和不同的场
(1)车间用水。自来水样从车间各水龙头上采取冷却水;汤料等从车间容器不同部位用100mL无菌注射器抽取。
(2)车间台面、用具及加工人员手的卫生监测。用5cm2孔无菌采样板及5支无菌棉签擦拭25cm2面积。若所采表面干燥,则用无菌稀释液润湿棉签后擦拭;若表面有水,则用干棉签擦拭,擦拭后立即将棉签头用无菌剪刀剪入盛样容器。
5胃蠕动均质法:这是国外使用的一种新型的均质样品的方法。
将一定量的样品和稀释液放入无菌均质袋中,开机均质。均质器有一个长方形金属盒,其旁安有金属叶板,可打击均质袋,金属叶板由一恒速马达带动,作前后移动而撞碎样品
(三)冷冻样品
冷冻样品,先将中样在0~4℃下解冻,时间不能超过18h,或在45℃下解冻,时间不能超过15min。再取检样25g做稀释处理。
4、微生物对产品的污染:对产品造成污染的微生物来源:土壤、空气、水、人和动植物、生产原料、生产器械及包装材料等
5微生物检验的意义:
1)是衡量动植物性产品卫生质量的重要指标之一,也是判定被检产品能否食用的科学依据之一。
2)通过微生物检验,可以判断产品加工环境及产品卫生环境,能够对产品被微生物污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物和食物中毒的防治措施。
样品的预处理方法
(一)液体样品的处理
1瓶装液体样品的处理
用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌,接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好,再用无菌开瓶器将盖启开;含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内,口勿盖紧,覆盖一灭菌纱布,轻轻摇荡,待气体全部逸出后,取样25mL检验。
2盒装或软塑料包装样品的处理
将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒,用无菌剪子剪开包装,覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分,直接吸取样品25mL,或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。
1微生物:是一群形体细小、结构简单、人肉眼看不见,必须借助于光学显微镜、电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能看到的生物。
2微生物的种类:原核细胞型:细菌、放线菌、螺旋体、立克次氏体、支原体、衣原体;
•真核细胞型:酵母菌、霉菌、微藻类等;
•非细胞型:病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)。
3病源微生物:感染人、动植物,导致疾病发生的有害微生物,称之为病原微生物。
3研磨法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后,再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中,盖紧盖后充分摇匀。
4整粒振摇法:完整自然保护膜的颗粒状样品(如蒜瓣、青豆等)
直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和适量直径5mm左右玻璃珠的无菌稀释瓶中,盖紧瓶盖,用力快速振摇50次,振幅要大于40cm。
(二)固体样品的处理
1.捣碎均质法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中,8000~10000r/min均质1~2min即可。是对大部分食品样品都适用的办法。
2剪碎振摇法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g检样进一步剪碎,放入带225mL稀释液和适量直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中,盖紧瓶盖,用力快速振摇50次,振幅要大于40cm。
致病微生物项目:沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等。致病微生物在食品中是绝对不允许存在的,所以快速检测食品中是否存在有致病微生物,是食品安全检验的重中之重。
食品微生物检验<>指标
我国卫生部颁布的食品微生物<>指标有菌落总数,大肠菌群和致病菌三项。
检验样品:
食品生产环境如水、空气、土壤样品;生产各工序样品如设备、管道;
各类食品发生食物中毒时的样品
微生物检验的取样方案
1ICMSF取样方案;2美国FDA的取样方案;
3世界粮农组织(FAO)取样方案;4我国的食品取样方案。
①ICMSF取样方案
国际食品微生物规范委员会(简称ICMSF)的取样方案是依据事先给食品进行的危害程度划分来确定的。将所有食品分成3种危害度:
微生物检验常规技术包括显微技术染色技术灭菌和消毒技术培养基制备技术接种分离纯化和培养技术无菌取样技术微生物的计数技术菌种保藏技术微生物常规鉴定技术等平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后其中的微生物充分分散成单个细胞取一定量的稀释样液涂在平板上经过培养由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞
疏水网膜法(HGMF):采用疏水网膜过滤样品,将捕获了被检微生物的疏水网膜上倾入适当的琼脂,经一定时间培养后即可计数
直接荧光过滤膜技术(DEFT):将样品经特殊滤膜过滤后,经吖啶橙染色,利用紫外线显微镜来快速测定活菌数。
葡萄糖苷酶荧光法:通过在培养基中加入指示剂、色素、荧光物质,成为快速检验大肠菌群的常用方法。
菌落总数:
因微生物的生活特性各异,不可能在一种培养条件下全部生长,故检出的菌落数小于细菌总数,但仍可评定食品的污染程度,是常用方法。
菌落总数的食品卫生学意义:
作为食品被污染程度的指标,反映食品的新鲜程度;
预测食品的存放期限程度:食品生产过程中变质与否、食品生产过程中食品的一般卫生状况。
大肠菌群
食品中大肠菌群的数量测定:
3.小样,又称检样,做分析用的,一般为25g
采样的步骤:
采样前调查→现场观察→确定采样方案→采样→样品封存→开具采样证明
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