毛细管胶束电动色谱法分析PTH氨基酸

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胶束电动毛细管色谱法分离12种肾上腺皮质激素类药物的研究

胶束电动毛细管色谱法分离12种肾上腺皮质激素类药物的研究

胶束电动毛细管色谱法分离12种肾上腺皮质激素类药物的研

田勇;内仓和雄
【期刊名称】《药物分析杂志》
【年(卷),期】1998(0)S1
【总页数】3页(P6-8)
【关键词】胶束电动毛细管;肾上腺皮质;激素类药物;色谱法;改性剂;分离效果;醋酸曲安奈德;毛细管胶束电泳;醋酸氟氢可的松;醋酸地塞米松
【作者】田勇;内仓和雄
【作者单位】天津市药品检验所;日本国际协力事业团
【正文语种】中文
【中图分类】TQ463
【相关文献】
1.应用毛细管区段灌注技术对胶束电动毛细管柱色谱法分离6种二硝基甲苯异构体条件的优化 [J], 高苏亚;党高潮;李华
2.胶束电动毛细管色谱法分离测定硝基氯苯的研究 [J], 杜建中;陈瑜;刘付伟杰;杨柳峰
3.毛细管胶束电动色谱法分离和定量5种喹诺酮类药物 [J], 陈勇川;刘松青
4.三种维生素的毛细管电泳和胶束电动毛细管色谱法分离与安培电化学检测 [J], 李关宾;范春生;邢存章
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毛细管电泳分析检测氨基酸

毛细管电泳分析检测氨基酸

灵敏度高
毛细管电泳结合紫外或荧光检 测器,可实现高灵敏度的氨基 酸检测。
操作简便
毛细管电泳设备简单,操作方 便,适合于实验室和现场分析

未来研究方向与展望
新型分离模式开发
研究开发新型的毛细管电泳分离模式, 以提高氨基酸的分离效果和检测灵敏 度。
联用技术
将毛细管电泳与其他检测技术联用, 如质谱、核磁共振等,实现氨基酸的 高精度和高灵敏度分析。
毛细管电泳能够区分氨基酸的异构体,如D型和L型氨基酸。
未知物筛查
通过与标准品比对和数据库比对,可筛查未知氨基酸及其相关化 合物。
04 毛细管电泳技术的前景与挑战
CHAPTER
技术发展与改进
高效分离
微型化与便携化
通过优化毛细管电泳的条件,如电解 质浓度、pH值和分离电压等,提高氨 基酸的分离效率,缩短分析时间。
电化学检测器
开发新型电化学检测器,如安培检测器和电导检测器等,利 用电化学反应将氨基酸转化为可测信号,实现直接、快速的 氨基酸检测。
提高检测灵敏度的方法
优化进样技术
通过改进进样方式和优化进样参数,减少进样误差和背景干扰, 提高检测灵敏度。
信号放大技术
利用化学或生物放大技术,如酶放大、抗体放大等,将氨基酸信号 放大,提高检测灵敏度。
预富集技术
利用毛细管电泳的预富集技术,对氨基酸进行富集和浓缩,提高其 浓度水平,进而提高检测灵敏度。
05 结论
CHAPTER
毛细管电泳在氨基酸分析中的优势
高分离效率
毛细管电泳采用微米级别的分 离通道,能够实现高效率的分
离,缩短分析时间。
样品需求量少
毛细管电泳技术需要的样品量 较少,适用于珍贵样品的分析 。

毛细管电泳在氨基酸分析中的应用

毛细管电泳在氨基酸分析中的应用

毛细管电泳在氨基酸分析中的应用大连大学环境与化学工程学院化学112 刘纪程1.概述毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管电分离法(CESM),是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。

毛细管电泳(CE)的应用包括很多内容。

已在生命科学、生物工程、医药、环境保护、食品检验等领域获得了广泛应用。

被分析的物质有离子、小分子、生物大分子乃至高分子和粒子的分析;分析对象从无机物、有机物、生物体系乃至活体单个细胞的分析;含量测定范围可从常量到微量乃至几个分子的测定电泳技术是蛋白质分离的重要手段,而毛细管电泳技术一经发明,就在多肽、蛋白质等生物活性物质的分离分析方面显示出了巨大的优越性。

1.2 CE 的分离模式CE 基于分离介质和分离原理的不同,常见的有以下几种分离模式[1, 2]:此外,还有毛细管矩阵电泳(CAE)、芯片式毛细管电泳(CCE)及非水毛细管电泳(CNACE)等,对于蛋白质和多肽的检测而言,应用最多的还是CZE和CIEF 这两种。

近年来,一些新型的电泳溶剂也得到了应用,如非水相的或者水相+ 有机相的电解液、等电点缓冲溶液,离子性液体也被用于电泳分离,这大大拓展了其应用范围[3]1.3 CE 的检测技术由于CE 进样量小的特性,对检测器的灵敏度要求很高,通常采用柱上检测。

在蛋白质和多肽的检测中,因为芳香类氨基酸有紫外吸收,故常用紫外检测器;在样品含量较低时,可采用荧光或者激光诱导荧光检测器;由于蛋白质溶液具有导电性,因此对毛细管进行改进以后,采用电导或安培电流也能检测出峰;另外,伴随蛋白质酶谱技术的发展,将CE 与质谱串联定性检测蛋白质水解后的多肽链的技术也得到了较快发展[4]。

2.氨基酸分析由于只有少数几种氨基酸在紫外范围内有吸收,所以对氨基酸分析的主要问题在于检测方式。

虽然也有报道用间接紫外、间接荧光、间接电化学、检测器测定未衍生化的氨基酸,但最灵敏的方法是采用荧光试剂将氨基酸衍生后再进行分离测定。

三种维生素的毛细管电泳和胶束电动毛细管色谱法分离与安培电化学检测

三种维生素的毛细管电泳和胶束电动毛细管色谱法分离与安培电化学检测
第 卷第 期 年月


三种维生素的毛细管电泳和胶束电动 毛细管色谱法分离与安培电化学检测Ξ
李关宾 范春生 邢存章
山东轻工业学院化工系 济南
提 要 以自制毛细管电泳电化学检测系统对
和 的毛细管区带电泳和胶束电动色谱的分离与
检测情况进行了初探∀结果表明 在
Ù

介质中 检测电势定于 ∗

时三
种维生素均有较好的 图 对 的分离效率达

Ù

浓度不变 将
浓度增为
Ù时
情 况 与 图 相 似∀ 如 将
浓度降为

Ù 三者分离良好 但负峰峰高降低∀ 在

Ù


Ù
介质中
的分离情况较好 但 的灵敏度显著降低∀ 由此
可见 这三种水溶性维生素的出峰与分离情况除与
它们的稳定性有关外 还受到酸度的较大影响 即与
不同酸度时的电离情况密切相关∀
综上所述 无论在
ωιτη Α ερο ετριχ Ε λεχτροχηε ιχαλ ∆ ετεχτιον
∆ ε αρτ εντ οφ Χηε ιχαλ Ε νγ ινεερινγ Σ ηανδ ονγ Ι νστιτυτε οφ Λιγ ητ Ι νδ υστρψ ϑιναν Α βστραχτ

Λ


Κ εψ ωορδσ
Φιγ ΧΖ Ε σε αρατιον οφ ς Χ ς Β ανδ ς Β
ιν
ολÙΛ ΝΗ -ΝΗ Χλ
将浓度为 ≅


检测电势
Ù的

电压下电动进样


Ù的 分离电压

高效毛细管区带电泳快速测定复方氨基酸注射液中三种氨基酸的含量

高效毛细管区带电泳快速测定复方氨基酸注射液中三种氨基酸的含量

高效毛细管区带电泳快速测定复方氨基酸注射液中三种氨基酸
的含量
林红;柯丹如
【期刊名称】《福建医科大学学报》
【年(卷),期】2002(36)1
【摘要】@@ 氨基酸测定常用方法为离子色谱法和反相高效液相色谱法[1],这些方法分析成本高、费时.氨基酸的衍生化方法有很多种[2],本文采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)作为衍生化试剂[3],选择具有典型代表性的Ser(中性)、Asp(酸性)和Lys(碱性)三种氨基酸为分析对象,以区带毛细管电泳为分离模式,建立了一种氨基酸衍生化方法.该法为毛细管电泳技术在氨基酸分析中的广泛应用奠定了基础.
【总页数】2页(P105-106)
【作者】林红;柯丹如
【作者单位】福建省药品检验所,福州,350001;福建医科大学,临床药理研究所,福州,350004
【正文语种】中文
【中图分类】R446.9
【相关文献】
1.PITC柱前衍生HPLC测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量 [J], 汪媛;王海龙;金高娃;章飞芳;杨丙成;梁鑫淼
2.复方氨基酸注射液中氨基酸含量快速分离测定法 [J], 方加林;宛小林;卢琳;程云

3.AccQ-Tag法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸的含量 [J], 陈宇堃;梁蔚阳;薛巧如;王淼
4.柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量 [J], 邓红英; 张永文; 李永贵
5.柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量 [J], 邓红英; 张永文; 李永贵
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毛细管电泳法测定毛发中氨基酸

毛细管电泳法测定毛发中氨基酸

毛细管电泳电化学检测分离测定毛发中的色氨酸酪氨酸和半胱氨酸1.试验部分1.1仪器与试剂毛细管电泳-电化学检测系统(CE - ED) 为自组装, 包括±30 kV 高压电源(上海原子核研究所) ;三电极工作系统(直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极、铂丝为辅助电极、饱和甘汞电极为参比电极);三维定位调节器(上海联谊光纤激光器械厂);BAS LC- 3D 安培检测器(Bioanalytical Systems , USA) ;HW色谱工作站(上海千谱软件有限公司);熔融石英毛细管(长70cm,内径25μm,河北永年光导纤维厂);超声波清洗器;毛细管清洗器(上海医科大学仪器厂);分析天平色氨酸,酪氨酸,半胱氨酸;头发样品:志愿者提供;其它试剂为分析纯。

1.2标准溶液及样品溶液的制备标准溶液:色氨酸,半胱氨酸储备液:1.0×10- 3 g/m L,酪氨酸储备液:0.5×10- 3 g/m L,用50mmol/L硼砂-20mmol/L氢氧化钠溶液配置,再用运行缓冲液稀释至所需浓度。

样品溶液:将头发用石油醚脱脂,干燥后称取50mg置于水解管中,加入3mL6mol/L氢氧化钠(含0.5%可溶性淀粉);水解管用真空泵抽真空3min,在酒精喷灯上封管;然后,将封好的水解管置于110o C烘箱中水解20小时。

将水解液置于已加有2.9mL6mol/L盐酸溶液的25mL容量瓶中,用蒸馏水洗涤水解管3~4次,最后用蒸馏水定容。

1.3 试验方法毛细管使用前依次用0.1mol/L的NaOH、二次水、缓冲液各冲洗5min、2min、10min。

自制碳圆盘电极使用前要用细砂纸打磨,并用超声波清洗2min,使用自组装的CE-ED检测系统,通过三维定位调节器使工作电极与毛细管的出口在同一直线上,并尽可能靠近毛细管的末端,以50mmol/L的硼砂(pH =8.98)缓冲液为运行液,采用电动进样,检测池内为0.1mol/L的NaO H溶液,阴极电泳槽为检测端。

毛细管气相色谱法分析氨基酸

毛细管气相色谱法分析氨基酸

收稿日期:1997-12-25毛细管气相色谱法分析氨基酸周建华(山东师范大学生物系食品教研室,济南,250014)摘要 使用弹性石英毛细管气相色谱(固定相OV )101)法,研究了十八种蛋白质氨基酸的衍生条件,选择了较理想的酯化和酰化条件,在二十分钟内成功地分离分析了十八种蛋白质氨基酸,其中大多数氨基酸分析的相对误差<5%。

关键词 氨基酸,毛细管气相色谱法,酯化,酰化中图法分类号 O657气相色谱分析是一种高效能、选择性好、灵敏度高、操作简单、应用广泛的分析、分离方法。

气相色谱法分析氨基酸成本低,并且便于与质谱联用,确定氨基酸的结构,从而有可能发现新的氨基酸或测定非蛋白质氨基酸,这是自动化氨基酸分析仪所不及的。

我们采用毛细管气相色谱法分析氨基酸,把氨基酸制备成N )三氟乙酰基正丁酯的衍生物,对氨基酸衍生条件及氨基酸的定性定量做了大量实验,最终取得了令人满意的结果,达到在二十分钟内可以定性、定量分析十八种氨基酸。

1 仪器和试剂111 仪器及实验装置日本岛津GC )9A 气相色谱仪、日本岛津C )R6A 数据处理机、上海分析仪器厂LM 14)264型平衡自动记录仪、西德sartorius 4503MP6电子微量天平、D )M S )I 直流磁力搅拌器、电热板、2ml 、10ml 安瓶112 试剂十八种标准氨基酸:l )leu 、l )Ile 、l )Val 、l )Thr 、l )Ser 、l )Met 、l )His 、l )Ala 、l )T yr 、l )Pro 、l )Lys 、l )Phe 、l )Arg 、Gly 、l )Glu 、l )H yp 、l )T rp 、l )Asp(购自中国科学院东方仪器设备公司);三氟醋酸酐(产自德国MERCK 公司);对羟基苯甲酸乙酯(化学纯);正丁醇3mol ÞL-3.5mol ÞL 盐酸溶液;二氯甲烷(分析纯);乙酸乙酯(分析纯);高纯氮。

氨基酸的分析方法

氨基酸的分析方法

氨基酸的分析方法
氨基酸的分析方法主要包括色谱分析、电泳分析和光谱分析。

1. 色谱分析:氨基酸的色谱分析主要包括气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)。

气相色谱通常使用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)来鉴定和定量氨基酸。

高效液相色谱可以应用于复杂样品的分离和定量分析。

2. 电泳分析:氨基酸的电泳分析包括毛细管电泳(CE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。

毛细管电泳是一种高效、快速的氨基酸分析方法,常用于药物、食品等领域的检测。

聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分析氨基酸的线性序列。

3. 光谱分析:氨基酸的光谱分析主要包括紫外-可见光谱(UV-Vis)、红外光谱(IR)和核磁共振光谱(NMR)。

紫外-可见光谱用于测定氨基酸的吸收特性,红外光谱可用于检测氨基酸的官能团,核磁共振光谱可提供氨基酸的结构信息。

这些方法可以单独应用或联合使用,以提供对氨基酸的定性和定量分析。

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度 :5 , 测波长 :0n 进样方式 : 3 检 20m, 压力进样 。
() 2缓冲液p H值对氮基酸迁移时间的影响 缓冲液的p H值直接影响氨基酸的带电性, 选择4 种 不同p H值的缓冲液进行实验( 见图2:H7 5 )p 时,种 氨基酸的迁移时间最小, 且能完全分离; H值增 随p 加, 迁移时间增加, 而且有的氨基酸不能分开;H值 p 降低, 迁移时间增加。 由于氨基酸为两性化合物,H p
渐变弱, 导致迁移时间减小。 另一方面, H值再 当p 增加时, 两性的氨基酸即带上了负电荷, 迁移时间反 而增大了。 所以p 为最佳p H7 H值。
33 线性、 . 精密度及最低检测浓度 将标准混合P H氨基酸稀释成5μ o/ , T 0m l 以 L
不同进 样体 积为横 坐标、 峰面积为纵坐 标 , 绘制标准
50 rsete . h dt tn i w r 0102p o. .% pci l T e e i l t e ...5m l e vy e co i s e m
K y rs clr c o i t cp l y o a gah , T a i ai e w d mi l e t k ec ia crm t r y P H n c s o ea l r n i a l r h e o p m o d
的影 响。 果 表 明 , 度 升高 使缓 冲液 粘 度 系数 减 结 温 小, 氨基酸迁移速度 加快 , 时间减少 。 迁移
苯、 乙酸乙酯、 硼酸、 盐酸均为国产分析纯, 异硫氰酸
苯酯 (I C PT )和光纯药工业 株式 会社 ) 。
22 测定条件 . 毛细管:0m×5c 有效长5c ( 5μ 7m( 0m)河北永年 光导纤维厂)缓冲液:0 m l S S 5m l ; 5m o/ D , 0 mo L L / 磷酸- 硼酸盐,H70操作电压:4V, p .; 1k 毛细管温
的进样 时间连续进 样5 , 次 各氨基酸迁移时 间的变异 系数均 小于10 ィ峰面积的变异 系数 小于50 方 . %, . %。
S S浓度增加时形成更多的胶束, D 缩短了胶束间的
距离 , 加了溶质在胶束相 中的分配 比值 , 移 也增 使迁 时 间增加 。 S S浓度过 高时 , 粘度发 生改变 , 但 D 溶液 同 时毛细管 中的焦 尔热 使溶 液温 度上 升 , 基酸迁 氨 移 时间反而 随 S S浓度 的增 加而减 小 , D 不能完全分 离 。D S S浓度 过低 时 , 不能形 成胶 束 , 氨基酸 迁移 时
分类号 O 5/ 5 68Q 1
1 前言
氨基酸是 蛋 白质 、 多肽的基本成分 , 对其分析 在
- 乙酸乙酯混合离心, 吸取上层乙酸乙酯相, 用氮气
吹干 。 加入 1 o/ C ,0 ml LH I6 ℃保 温反 应 1mn 然 后 0 i。
加入乙酸乙酯混合离心, 吸取有机相, 用氮气吹干待
用。
医药、 生化、 食品等领域有十分重要的意义, 一直是
Z o J nhn , i J , i Xahn ad n F nt g hu zog La i Qa i og D g gi i a o e n o n o a n
( a oa C n r Bo ei l a s , cdm o Mit y dcl ecs B in , 080 N tnl t o i dc A l i A a ey la Mei S i e, ei 105) i e e f m a n y s f i r a cn jg A s at ue l to fr a t n 1 P H i ai b mi l r crk ec iay o bt c A f m hd spr i o 9 a n c s c l e t i t cpl cr- r su e o e a o f T m o d y ea l o n i a lr h e
间短, 分离度差。 最佳S S D 浓度为5m l 。 0 mo L / () 压对氨基酸分离的影响 电压升高时, 4电 氨 基酸迁移速度变快, 分离度下降。 电压过低时, 迁移 速度变慢, 分析时间变长。 最佳电压为1k 4V。
3 徐秀璋. 质序列分析技术. 蛋白 北京: 学出版社, 8: 科 18 9
毛细管胶束电动色谱法分析 P H氨基酸 T
周建 忠 廖 杰 钱小红
北京
董芳霆
105) 080
( 军事医学科学院
国家生物医学分析 中心
提 要 建立了用毛细管胶束电动色谱法( E C 分离1种 P H氨基酸的 MK) 9 T 方法 , 并探讨了电 p 压、 H值、 温度、 胶束浓度对氨基酸迁移时间的 影响。 方法具有速度快、 灵敏度高、 样品用量少的 优点。 关键词 胶束电 动毛细管色谱法,T P H氨基酸
值低时 , 质子化 的氨基酸正离子 易与 S S负离子胶 D
23 T . P H氨基酸衍生化步骤( 3 )
氨 基酸溶 于 p 95 H .左右 的吡啶- ( =, / 水 3 2 V V)
束形成离子对, 因而迁移时间变长; 随着 p H值增
加 , 酸正离子 与 S S胶束形成 离子对 的能力逐 氨基 D
中, 加入PT 5 反应3mn然后用苯将过剩试 IC, 0 0 i。 剂抽提去除, 将下层水相在5℃下通氮气吹干。 0 加入 T A,0 F 5℃反应1~1mi,0 0 5 n5℃通氮气吹干。 加入水
本文收稿 日 19 1 2, 期: 5 1 5修回日 19 0- 9 -- 期: 6 2 0 9- 2
()D 3S S浓度对氨基酸迁移时间的影响 选择
不同S S D 浓度 的缓 冲液 , 察 S S浓度对分离 的影 考 D 响 。 冲液 中 S S 度达 到 一定 值时 形成 胶 束 , 缓 D 浓 使 氨 基酸分子 在胶 束与溶 液 间进行 分配而 得 以分离 。
曲线的线性关系良好, 相关系数均大于09。 .5以相同
m t rpy be dvl e. xei ns e fre a3 wt 1k pw r 5μ a gah hs n e pd E pr tw rpr m d 5 i 4V e, 0m×5c fs - o a e e o me e e o t h o 7m e ud
si cp l y l n d asrt n tc r ah w p l y s se wt 01 o/ N O i a i r c u a U bopi d et .E c n c i r w w hd h m l l al c a o m n V o e o e al a a a i . L H a ad o i d tr ec fr i, e r ue a p s r iet i o cpl y ap ig s n di z w e, ah 1mn bf e .Sm l w e c d te ia b pl n pe- ene a o 5 o s e e n e n h a lr y y j t r sr(42 a fr bopi dt t n s 20m h rni bf r s d u o 5m o/ ue30P ) o 5.A srt n e i w a 0n .T e nn u e w m e f m l s o e c o a t u g f a a p 0 L sd m dcl f eS S , 0 o L d m p op a ad rt(H 70.T e uec o oe - oi d ey sl t(D ) 5mm l s i o hsht n b aep .) h i l e pr u o ua / o u f e o n n f a f t n lg , H b f r tm eaue S S net t n te io d m ga o hs n d i v t e p o uf , e prtr ad c cnr i o h a n ai i t n be s - o oa f e n D o a o n m c s r i a e t u i . h ce iet o vr tn mgao t e pa ae o 1 P H n ai w r bl 10 ad e T e fc ns a a o i t n ad k a 9 a o d e e w % n d o fi f i o f r i i n e r f T mi c s e o . m
法的最低检测限为01 .5m l .~02p o。
4 结论
本方法速度快、 灵敏度高、 样品用量少( ~ 1 1n ) 适合于蛋白质、 0L , 多肽氨基酸含量的分析。
参 考
33 : 1 2 29
文 献
1 t k K,Trb S A d T C rm tg , 95 O s a eae no u , .J o a r 18 ; h o 2 夏其 昌. 生物化学与生物物理进 展 ,911()33 19 ;84 :0
序, 标准氨基酸的分离图谱见图1条件见22 , .。
32 分 离条件的选择 .
司)单个氨基酸标准( , 国产生化试剂)十二烷基硫 ,
酸 钠 (D )磷酸 氢 二 钠 、 啶、 氟 醋酸 ( F 、 S S、 吡 三 T A)
选择5 种氨基酸进行分离条件的优化, 衍生条件 同前所述, 考察各种因素对氨基酸迁移时间的影响。 () 1温度对氨基酸迁移时间的影响 选择4 个温 度点2 ,0 ,5 5 3 3℃和4℃研究毛细管温度对分离 0
11 1
4 齐
莉 第 一 届 全 国毛 细 管 电泳 报 告 会文 集 , 京 , 北
1 9 10 9 3: 5
A ayi o P H mio is Mielr n ls f A n A d b s T c y cl a E eto iei C pl r C r mao rp y lcrkn t a iay o tg a h c l h
P H氨基酸进行了分离, T 并探讨了电压、H值、 p 温 度、 胶束浓度对氨基酸迁移时间的影响( ,。 14 ,) 2 实验部分 21 仪器与试剂 . 主要仪器为Bcm n A B s m 0毛细 ek a P C S t 5 0 / ye 0
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