交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血质控品(微柱凝胶法)SOP
交叉配血质控品（微柱凝胶法）标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的抗人球蛋白检测卡（12卡/盒）交叉配血实验的室内质量控制。
二、准备工作1、将质控品从冰箱取出后平衡至室温。
2、观察检测卡外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡平衡至室温（18－25℃），再用专用离心机离心5分钟。
三、操作步骤1、取1张微柱凝胶检测卡，取四孔分别标记为组合1、组合2、组合3、组合4；2、交叉配血实验按照组合1（样本4+样本1）、组合2（样本4+样本2）、组合3（样本5+样本1）、组合4（样本5+样本3）进行加样，先加红细胞再加血浆，各1滴（50ul）;3、加样完毕后，专用孵育器孵育15min；4、孵育完毕，专用离心机离心后判读结果。
结果判读样本组合检测结果检测作用组合1 样本4+样本1 + 检测IgM类抗原抗体反应组合2 样本4+样本2 0 检测IgM类抗原抗体反应组合3 样本5+样本1 + 检测IgG类抗原抗体反应组合4 样本5+样本3 0 检测IgG类抗原抗体反应“0”代表阴性，“+”代表阳性。
质控品检测结束后，用户可将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。
失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。
特异性、抗原强度及效价：AB型RhD（+）红细胞抗原强度：与抗A、抗B、抗D抗体均发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗A抗体凝集强度≥3+，与抗B抗体凝集强度≥3+，与抗D抗体凝集强度≥3+。
O型RhD（+）红细胞：与抗A、抗B不发生凝集，与抗D发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗D抗体凝集强度≥3+。
RhD（-）红细胞：与抗D不发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象。
O血清：与A1型红细胞、B型红细胞均发生凝集，间接抗人球蛋白试验阴性，无溶血及其他不易分辨现象；O血清与A1型红细胞反应，效价≥8，与B型红细胞反应，效价≥8。
交叉配血标准操作规程
(二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵
育器（型号：DG THERM）、微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻
璃试管、生理盐水等
五、标本要求：
(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml,
在
3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。
待用。 (五)交叉配血： 主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或
血浆25uБайду номын сангаас ； 次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆
25ul。 (六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，
取出观察结果。 七、结果观察： (一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤：
(一)交叉配血前，先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机
离心9分钟左右，取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧，
撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支，分别配制患者和献血者红细胞悬液（浓度为1%）
之内
2+
80%（大部分）的红血球沉在微管的上端2/3
之内
3+
80%（大部分）的红血球沉在微管的上端1/3
之内
4+ DP（双 群）
H（溶 血）
凝集的细胞处于微管的顶部 红血球同时位于微管上部和微管底部
微管中液体出现透明红色
交叉配血微柱凝集法
交叉配血微柱凝集法
交叉配血微柱凝集法是一种用于检测血液相容性的实验方法，常用于输血前的血型鉴定和配血试验。
该方法的原理是基于红细胞表面抗原和抗体的特异性反应。
将待检者的红细胞与供血者的血清或血浆分别加入到微柱凝集卡中，通过离心使红细胞与抗体结合，形成凝集反应。
根据凝集的程度和类型，可以判断待检者和供血者之间的血型相容性。
交叉配血微柱凝集法具有操作简便、结果准确、快速等优点，已经成为输血前常规的检测方法之一。
在进行交叉配血微柱凝集法时，需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
交叉配血微柱凝集法只是一种初步的检测方法，不能完全代替其他血型鉴定和配血试验方法。
在进行输血前，还需要进行其他相关的检测和评估，以确保输血的安全性和有效性。
交叉配血卡 操作规程
抗人球蛋白交叉配血操作规程[样本要求]：血样用枸橼酸钠或EDTA等抗凝，用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。
[样本准备]：将供者红细胞和受者红细胞各配制为1%生理盐水悬液。
将受血者与献血者的红细胞血清分离；[配套试剂]：抗人球蛋白交叉配血检测卡，低离子介质溶液[实验步骤]:(1) 试剂卡室温平衡，离心一次，标记编号；(2) 将配血的标本1 500 ｇ离心5分钟；(3) 主侧加入用低离子液稀释至1%的供者红细胞50UL，受血者血浆（或血清）50 UL；次侧加入用低离子液稀释至1%的受血者的红细胞50 UL，供者血浆（或血清）50 UL ；(4)将配血卡臵37 ℃专用孵育器孵育15分钟；(5)使用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟、1500r/min，3分钟），判定结果。
[结果判定]：一.阳性（+ ）：红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中（结果大于等于1+），表示配血不成功，需进一步检测。
双相（d.p）既有阳性结果，同时也有阴性结果。
溶血（Hemo）:红细胞溶解，作为阳性结果对待。
二.阴性（－）：红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，表示配血成功。
备注：1.非特异性凝集：在配血过程中还会出现一些非特异性凝集的现象。
当血液标本中含有较多纤维蛋白原时，配血会出现阳性的结果，可用以下办法去除血清中的纤维蛋白:(1)轻轻摇动试管，弃去纤维蛋白网；(2)把血标本臵37 ℃中水浴，待血清自动析出或水浴后离心，将纤维蛋白弃去。
如果患者的血液中含有较高的冷凝集素，在春、秋、冬三季用凝聚胺配血会出现凝集的现象，但凝集在37 ℃水浴中会解离。
这种患者配血是可将红细胞用37 ℃的生理盐水洗涤红细胞3次，再在37 ℃下操作，这样就可以排除冷凝集素的影响。
2.特异性凝集：当次侧出现凝集时，要考虑为受血者的红细胞已致敏或其他血型(A，B或AB型)的受血者接受O型血，可使用洗涤红细胞。
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝胶抗人球蛋白法）1. 目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2. 适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3. 职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4. 原理红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5. 所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6. 检测环境条件室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。
7. 操作步骤7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。
7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者 0.5% 红细胞LIM 悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。
7.3将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。
7.4取出，判定结果，结果判定标准按下表：（可参照结果判定示图）检验结果的解释：阳性结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供受血者血液不相容。
阴性结果，表示供受血者血液相容。
8. 质量控制8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
8.1试剂质量控制方法8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程
（抗人球蛋白法）
一、目的：
为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围
适用于输血科进行交叉配血试验。
(一)
(二)）、
(一)
(二)
(三)
(一)
(二)
(三)
(四)
(五)
主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul+患者血清或血浆25ul；
次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul+献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DGTHERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，取出观察结果。
七、结果观察：
(一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可以输血
(二)主侧或次侧出现凝集，细胞悬挂于卡的中间或上部，配血不相合，不可以输血
(三)若输注血液为红细胞，则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)
交叉配血操作规范（微柱凝胶法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】BYZ型血库血清学多用离心机，2002-2型血库专用离心机,FYQ免疫微柱孵育器。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血微柱凝胶法检测的操作。
【原理、方法、用途】本品采用抗人球蛋白微柱凝胶免疫检测技术，用于交叉配血试验。
在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应的不完全抗体结合后（致敏红细胞），凝胶中抗人球蛋白形成凝集块，离心后仍滞留在胶上或胶中，而未和抗体结合的红细胞则完全沉于凝胶底部。
该方法使试验更简单，更规范，结果更易判定。
本品系由聚丙烯塑料透明卡片的六支微柱型管中充满葡聚糖凝胶和抗人球蛋白，制成抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前2天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于2002-2型血库专用离心机内，放置保证平衡，以1500转/min 离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【试剂】抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【操作步骤】1．取出抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡，应注明病人姓名、科室和床号。
血液交叉配血试验标准操作规程
血液交叉配血试验标准操作规程血液交叉配血试验标准操作程序交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体，故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”;供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”，两者合称交叉配血。
交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，完整的操作规程应包括:?查阅受血者以前的血型检查记录，如与这次检查结果有所不同，应及时分析原因;?对收到的受血者血样应作ABO正反定型，Rh血型和其他血型检查以及血型抗体检测和鉴定;?选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。
一、配血要求1( 受血者配血试验的血样(血型复查)必须是输血前三天之内的;2(核对病人资料:核对输血申请单、受血者血样、病历三者，其内容包括:患者姓名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型(原始血常规血型和血型复查中血型)、用血品种、用血量等，必须正确无误;3(核对血液:血液完整性、血液标签、血液质量;4(核对取血凭证:按临床(取血凭证)实际用血品种、量进行配发血;5(配血前，先复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和抗筛，并报告其结果;6(在电子病历或急诊医生工作站中，检查临床输血五项的执行情况;7(输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验，其方法:采用盐水配血试验、凝聚胺法。
二、盐水配血试验标准操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法，可以发现临床上最重要的ABO不配合性。
当受血者血清(浆)和供血者红细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来。
【标本采集和处理】1(标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。
2(标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h(抗筛是48h)内采集，血样必须是新近的，无溶血现象。
【试剂】1(抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2(Anti-D (IgM) Biotest。
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交叉配血试验标准操作规程
（微柱凝胶抗人球蛋白法）
1.目的
为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2.适用范围
适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3.职责
医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4.原理
红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5.所需设备和试剂
普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡
6.检测环境条件
室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。
7.操作步骤
先将供（受）血标本制备%红细胞低离子介质（LIM）悬液。
撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者 % 红细胞LIM悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。
将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min 离心1min。
结果，表示受（供）血者血
浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不
完全抗体IgG或完全抗体IgM），供受血者血液不相容。
阴性结果，表示供受血者血液相容。
8.质量控制
微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
试剂质量控制方法
即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。
将检测卡于离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。
取出，结果判定同
9.注意事项
检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室平衡至室温。
检测卡试验前，应3000r/min离心1min，正立放置待用。
如因运输过程产生的气泡，可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡，使气泡漂移至胶面为止，3000r/min离心2min。
细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血，可产生假阳性。
离心速度过快，时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。
10.相关文件
中山市生科试剂仪器有限公司《抗人球蛋白检测卡说明书》。