介绍奶牛结核病PPD反应的三种检疫判断标准
牛结核病的检疫及控制措施
2021年第01期牛肉产品及乳制品中富含多种维生素、蛋白质及钙质,是当前市场上较受欢迎的食品。
但由于牛结核病属于人畜共患病,一旦人食用了含有此病菌的牛肉产品或奶制品,将会对人体产生极大的危害。
基于此本文对牛结核病的相关知识作如下介绍,以提高安全的防控能力。
1病原特点结核病可分为三种类型,有牛型结核病、人型结核病及禽型结核病。
结核杆菌是引发此病的主要病原。
其中,牛型结核病可通过病牛传染给人。
结核杆菌的毒性较强,有平行及单独两种排列方式,部分病菌体长且纤细,部分杆菌较为短小,形态或弯或直。
此病的潜伏周期较长,通常几个月后才会发病。
结核病属于慢性疾病,治疗效果不佳,且存在可变异性,抗药性极强,会对牛体及人体产生极大的危害。
2诊断方法该病患者通常表现呼吸性障碍,伴有咳嗽症状,身体快速消瘦,常规诊断方法无法确诊,确诊可使用实验室检测。
检疫过程中常用的实验室诊断方法有三种,(1)分子生物学检验法,(2)血清检验法,(3)免疫学检验法。
检疫过程中,检疫人员首先应获取血液样本,并对其进行细菌培养,利用动物接种法而对抗原的敏感性及特异性进行检测。
3检疫方法可采用皮下注射的方法将结核菌素注入到牛体,观察2~30d ,如果其皮肤出现红晕且明显增厚或出现硬结则可判定其感染的是牛结核病。
此方法是指在免疫酶技术的基础上对抗原或抗体的免疫活性进行分析。
如果被标记的抗原或抗体出现阳性反应现象,则可判断出检测目标感染了牛结核病。
此方法主要是对抗病毒生物活性检测,需要利用Ⅱ型干扰素进行生物活性的测定,并与酶联免疫吸附测定法联合使用而对牛皮内变态反应情况进行检测,检测结果显示为阳性则可确定检测目标感染了牛结核病。
此方法的作用机理是利用致敏外周血淋巴细胞进行特异性抗原的刺激,在其出现特异性T 淋巴细胞亚群增生反应之后,再对其标记,标记时可使用5-溴脱氮尿苷,根据标记对淋巴增生数量进行判定。
如被检疫目标出现淋巴增生异常状况,则可确诊其感染了牛结核病。
奶牛结核病与布氏杆菌病的检疫要素探索
奶牛结核病与布氏杆菌病的检疫要素探索随着人民生活水平的不断提高，牛奶和牛肉的需求量也在逐年增加，而检疫也就变得越发重要，因为动物农产品的质量安全问题直接关系到人民群众的身体健康。
在奶牛的检疫中，奶牛结核病和布氏杆菌病作为常见疾病，对奶牛身体健康和乳制品质量安全都具有较大的影响，本文将对奶牛结核病和布氏杆菌病的检疫要素进行探索。
奶牛结核病，通常是由结核分支杆菌引起的一种慢性、进展性和全身性的传染病，人类和动物都可以感染。
奶牛结核病是一种持续存在的疾病，通常需要通过长期的检测、隔离和治疗来进行控制。
在奶牛结核病的检疫中，最基本的措施是对所有牛只进行定期的检测，发现疑似病例后进行独立隔离，并进行进一步诊断和治疗。
对于疑似或已经感染的牛只，需要进行拒绝被透露的处理，禁止其进入商业乳制品和肉类市场。
此外，在奶牛养殖过程中，对于防止结核病的传播，还需要加强消毒、通风等健康措施，特别是在高温和潮湿的气候条件下，这些措施的重要性更为突出。
布氏杆菌病是一种由布氏杆菌引起的神经系统疾病，可能会引起病牛的肌肉和骨骼损伤，并影响乳制品的质量。
在奶牛的检疫中，布氏杆菌病也是一种比较常见的疾病。
对于奶牛的检测，目前主要采用的是奶牛血清学测试和MPCR操纵，因为这些方法可以快速而且准确地检测出患布氏杆菌病的奶牛。
对于疑似感染的奶牛，不仅需要立刻进行独立隔离，并进行全面检查和治疗，还需要禁止其进入乳制品市场。
此外，在奶牛的养殖过程中，需要对畜舍环境进行卫生清洁，特别是注意保持空气流通，并经常清理粪便，以防止布氏杆菌的传播。
总之，奶牛结核病和布氏杆菌病是奶制品检疫中非常重要的内容，必须在养殖、检查、治疗和销售等多个环节中严格控制。
只有通过建立健全的奶牛检疫体系，加强质量控制和安全监管，才能保证人们健康安全的饮食环境。
奶牛结核病实验室诊断技术研究进展
奶牛结核病实验室诊断技术研究进展牛结核病（Bovine Tuberculosis）是由牛分枝杆菌引起的一种慢性传染病。
该病传染性强，且能通过奶制品传染给人和其他动物，危害严重，被世界动物卫生组织（OIE）列为B 类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。
牛结核病的诊断大体上可归为两类：一是临床症状诊断；二是实验室诊断，包括细菌学检测，如涂片镜检、细菌培养、动物实验等；免疫学检测；分子生物学诊断技术等。
传统的细菌学方法由于繁琐费时、检出率低、灵敏度差，已不能满足当前疫病诊断的需要。
目前世界各国都在致力于研究开发牛结核病的快速诊断方法，并已经建立了一些快速、准确、可靠的新型检测技术，有些技术已经在生产实践中得到了广泛的应用。
1 细菌学检测细菌学检查的方法有涂片镜检、细菌培养等。
临床上样品中的牛分枝杆菌可通过涂片抗酸染色、镜检并通过细菌培养做出确认。
涂片抗酸染色法所需材料、设备简单，操作方法简便，是较为普遍应用的方法。
由于此法检出的细菌只能说明有抗酸杆菌存在,而且也不能准确地鉴定出结核分枝杆菌和非典型分枝杆菌，因此,其缺乏特异性。
细菌培养需在37℃培养3～8 周才可生长。
菌落形态粗糙，中心隆起，周围大而边缘不规则，菌落颜色微白。
细菌培养法到目前为止仍被认为是确诊结核的黄金标准。
但牛结核分枝杆菌生长缓慢，有10%～20%的病例结核菌培养失败。
同时由于各种条件的影响，阳性率较难提高。
2 血清学检测2.1 传统的结核菌素皮内变态反应（OT,PPD）OT 是老式皮内变态反应，PPD 是目前公认最有效的方法，也是被世界动物卫生组织（OIE）确定的法定检疫方法，被世界各国接受和采用的方法。
它主要是用提纯的PPD 进行牛皮内接种，于72-96小时后观察有无热、痛、肿胀等反应，对可疑的牛需60d 后再次复检。
该方法检出率和准确率都比较高。
PPD 作为皮肤试验最大的缺点就是易呈现假阳性和假阴性反应。
当感染副结核分枝杆菌等环境分枝杆菌时则可能呈现假阳性反应，即PPD 中大多数蛋白质与其他分枝杆菌和一些无关细菌的相同。
牛结核病检测方法及防治要点、是由什么引起的
牛结核病检测方法及防治要点、是由什
么引起的
牛结核病是由什么引起的呢？牛结核病是由分枝杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。
下面我们了解一下牛结核病检测方法及防治要点。
一、牛结核病诊断要点
在牛群中发生进行性消瘦、咳嗽、顽固性下痢、慢性乳房炎、体表淋巴结慢性肿胀、被毛焦糙粗乱等症状，可初步诊断。
结核病患牛精神萎靡，不愿活动，易疲劳，或出虚汗。
临床主要表现为虚弱，渐进性消瘦。
其病理特征是在组织器官形成结核性肉芽肿（结核结节），继而结节中心发生干酪样坏死或钙化。
二、牛结核病的剖检
(1)肺结核，在肺脏表面有很多粟粒至豌豆大的白色结节，切面呈干酪样坏死并发生钙化，切割时有沙砾感。
有的由于机体抵抗力低、病原菌毒力强，病变部组织溶解，在表面形成糊状，边缘有增生性肉芽肿，严重的可导致空洞。
(2)胸腹膜发生结核时，浆膜密布半透明结核结节，类似于珍珠状，故称为珍珠结核。
无论任何组织器官患结核病灶，共同的特征是形成结核结节或肉芽肿。
三、牛结核病防治要点
1、防治原则
加强饲养管理，定期消毒，定期检疫，必要时免疫接种。
奶牛要每年进行2次包括结核、布氏杆病在内的健康检疫，群体内发现结核病患牛时隔离治疗，严重的要淘汰。
对阴性牛要预防接种。
2、治疗方法
治疗可肌注链霉素，口服异烟肼、对氨基水杨酸和环氨酸等。
注意结核病是一种慢性传染病，病程发展缓慢，治疗也需要漫长的过程。
治疗时除需要药费支付，还要有隔离条件，除非是优良品种考虑隔离治疗外，一般均予淘汰。
γ-干扰素释放法检测奶牛结核病的比较试验
64牛结核病（bovine tuberculosis）是由牛型分枝杆菌等所引起的一种人兽共患的慢性消耗性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为需通报的动物疫病。
目前，我国主要采用牛型提纯结核菌素（PPD）进行单纯颈部皮试变态反应（SCT）来进行牛结核病的检疫，对于阳性牛应进行隔离或扑杀，但是许多被扑杀的牛并没有区分检疫方法可能造成的假阳性，这对牛结核病的检疫，奶牛业的发展造成了巨大的阻力。
掌握我市奶牛结核病现状、检测淘汰感染奶牛意义重大，因此采用灵敏度更高、特异性更好的检测方法具有广泛应用价值。
为此，本研究旨在γ—干扰素释放试验（IGRA）的应用优势，通过比对单纯颈部皮试变态反应（SCT）、比较皮试变态反应（CCT）和γ—干扰素释放试验（IGRA）之间的效果，为临床实际应用提供依据。
1 材料与方法1.1 PPD与试剂盒皮肤试验用牛型PPD和禽型γ—干扰素释放法检测奶牛结核病的比较试验倪谷音1，毛爱民2，范 锋2（1.无锡市动物园管理处，江苏无锡 214000；2.无锡市动物疫病预防控制中心，江苏无锡 214021）摘要：目的评价γ—干扰素释放试验（IGRA）牛结核病检疫过程中的效果。
方法在牛结核病检疫过程中对皮试初筛为结核病和疑似结核病的89（74/15）头奶牛同时进行r干扰素试验、单纯颈部皮试变态反应（SCT）和比较皮试变态反应（CCT）检测，结果单纯颈部皮试变态反应二次检疫中89头牛均判为阳性，单纯颈部皮试变态反应与比较皮试变态反应的阳性符合数为67头。
阳性符合率为75.3％；γ—干扰素释放试验和单纯颈部皮试变态反应检测两者的阳性符合数为64头，阳性符合率为71.9％；γ—干扰素释放试验与比较皮试变态反应的阳性符合数为58头，阳性符合率为79.5 ％。
阴性符合数为16头，阴性符合率为48.4 ％；结论γ—干扰素释放试验在保持较高灵敏度的同时，具有比变态反应更好的特异性。
关键词：牛结核；γ—干扰素试验；单纯颈部皮试变态反应；比较皮试变态反应中图分类号：S852.618；S855.2 文献标识码：B 文章编号：1005-944X（2014）01-0064-03A Comparative Study of γ—Interferon Release Assay in Bovine TuberculosisNi Guyin1，Mao Aimin2，Fan Feng2（1.Wuxi Zoo Management Offi ce， Wuxi， Jiangsu 214000；2. Wuxi Center for Animal Disease Prevention And Control， Wuxi， Jiangsu 214021）Abstract：Objective To evaluate the effect of γ—interferon release assay （IGRA） in bovine tuberculosis detection.Method 89（74 positive/15 suspicious） dairy cows preliminarily screened with skin test were tested byγ—inerfer-on release assay （IGRA）， simple cervical allergy skin test （SCT） and comparative allergy cervical test （CCT）.Result 89 cows were considered as bovine tuberculosis positive in SCT， and 67 of them were considered as posi-tive in CCT with the positive coincidence of 75.3%. 64 cows were considered as positive both in IGRA and SCT with the positive coincidence of 71.9%. 58 cows were considered as positive both in IGRA and CCT， with the positive coin-cidence of 79.5%. 16 cows were considered as negative， with the negative coincidence of 48.4%. Conclusion The γ—interferon release was of higher sensitivity and better specifi city than the other two allergy tests.Key words：bovine tuberculosis；γ—interferon release assay； simple cervical allergy skin test； comparative aller-gy skin test基金项目：江苏省2012农业三新工程《奶牛布病，结核病防治集成技术的推广应用》项目资助，SXGC[2012]0322014年第31卷第1期PPD购自中国兽医监察所；IGRA试剂盒购自瑞士Prionics公司。
牛结核病监测和诊断技术研究进展.
牛结核病监测和诊断技术研究进展结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacteriu m引起的人、畜、禽共患的一种慢性传染病,由人结核分枝杆菌(MTB、牛分枝杆菌(MB、禽型分枝杆菌(M, avium、非洲分枝杆菌以及田鼠分枝杆菌(M,mi croti所引起,统称这些病原为结核分枝杆菌复合物(或群。
目前已知,结核病除感染人外还能使50多种哺乳动物和25种禽类感染,牛是最敏感的动物。
牛结核主要由牛分枝杆菌引起,人结核的10%以上由牛分枝杆菌引起。
每年,世界上大约有3百万人感染牛结核杆菌造成结核病。
中国是世界上感染结核病较高的22个国家之一。
由于牛和人类的关系(牛奶、牛肉及耕牛等较其他动物更为密切,因此,牛结核又是任何其他动物结核病最大的传染源。
其传染和流行严重地影响到畜牧业的持续健康发展,不仅可以造成奶牛乳房炎、结核性胸膜炎等疾病,还能造成牛奶产乳率和乳质下降,更严重威胁着人类的身心健康。
牛结核病被国际兽疫局定为B类传染病,我国将其列入二类动物疫病。
结核分枝杆菌按其致病力可分为3种型,即人型、牛型和禽型,三者有交*感染现象。
牛型主要侵害牛,其次侵害人、猪、马、绵羊和山羊等,在所有牛种中奶牛最为易感。
牛分枝杆菌共可感染50多种哺乳动物。
本病无季节流行性,一年四季均可发生,在农村主要以散发为主,规模化养牛场主要以区域性流行为主。
牛结核病的潜伏期一般为16~45 d,或者更长,通常为慢性。
在感染初期几乎不表现出特有的临床症状。
感染一段时间后,一般日渐消瘦,精神不振,频频咳嗽,毛粗无光,皮肤失去弹性,食欲不振,产奶量下降等临床症状。
由于牛感染结核病的经过往往比较缓慢,根据动物患病器官的不同,表现出的临床症状也各不一致。
牛结核病的临床症状主要分为以下几种类型:肺结核、乳房结核、肠道结核、淋巴结核和生殖结核等。
目前,在结核病的监测和诊断中,普遍采用结核菌素皮内实验(TT、细菌痰涂片、细菌的分离培养等传统的技术。
随着科学技术的进步免疫学和分子生物学技术有了很大的发展,出现了很多适合结核病检测的先进技术,本文就对这些新老技术进行简要的概述。
动物检验检疫：牛、羊疫病的检疫-牛结核病
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牛、羊疫病的防疫-牛结核病
1.临诊检疫
（1）流行特点 牛及其他动物和人均有易感性。 乳牛最易感，羊极少发病。 新疫区多呈地方性流行；
老疫区多呈散发性、隐性感染或慢性病程34。
犊牛结核病—鼻孔干酪样鼻液
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牛、羊疫病的检疫-牛结核病
1.临诊检疫
（2）临床症状：病牛不明原因的全身进行性消瘦和贫血，先干咳后湿咳。长期不愈的咳 嗽伴肺部异常，体表淋巴结肿大，顽固性腹泻和慢性乳房炎。 ①乳房结核： 乳房表面出现大小不等凹凸不平的硬结，泌乳量减少，乳液稀薄或呈深黄浓厚絮片状凝乳 ，最后停乳。 ②肠结核：
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④乳房结核：乳房可见大小不等的病灶内含豆腐渣状的干酪样物质。
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肺干酪样结节，肺结核空洞
牛髂淋巴结肿大，结核结节
牛胸膜珍珠状结节—珍珠病
乳房上淋巴结肿大，内含干酪样物质
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牛、羊疫病的检疫-牛结核病
2.主要检疫方法
（1）初检：根据流行病学、临床症状和剖检变化作出初检。 （2)采集病料做病理切片染色发现菌体或直接涂片，抗酸染色，高倍镜检查结核杆菌 呈红色，其他菌及背景为蓝色，即可确诊。
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牛、羊疫病的检疫-牛结核病
2.主要检疫方法
（3）变态反应诊断 主要采用牛型提纯结核菌素（PPD）皮内 注射和点眼反应。 （4）鉴别检疫 在剖检变化检验中，各器官组织的结核病
变应注意与放线菌病、寄生虫结节、伪结34
核病以及真菌性肉芽肿相区别。
牛 结 核 菌 素 颈 部 皮 内 注 射 游 标 卡 尺 测 量 皮 差 厚 度
多发生犊牛空肠和回肠，消化不良，顽固性3腹4泻，粪便混有黏液或脓液，迅速消瘦。
奶牛结核病不同检疫方法比较
牛结核病主要是由牛型结核分支杆菌引起的一种人畜共患、慢性、消耗性传染病，病原菌可通过空气、接触或牛奶感染人畜，严重威胁着动物和人类健康[1]。
牛结核病的监测和净化在活畜上需要依赖快速、敏感、特异性强的诊断方法。
目前广泛应用的诊断方法主要包括结核菌素皮内变态反应（TST）、欧盟皮内比较变态反应试验（SICTT）和牛γ干扰素酶联免疫吸附试验（IFN-γ-ELISA）。
TST作为OIE指定法定检疫方法，优点是敏感性高，但操作费时费力，特异性差，容易出现假阳性或早期感染易漏检[2-3]。
SICTT是TST方法的改进，可排除检疫中禽结核干扰导致的非特异性变态反应的影响，以避免不必要的淘汰和损失，目前欧盟等国普遍作为活畜检疫确认试验[4]。
IFN-γ-ELISA检测试剂盒是外周血γ-干扰素体外释放检测法在实际中的应用，操作简单、敏感性和特异性高，目前已经得到全世界的广泛认可[5]。
本研究同时采用以上3种方法对河北省石家庄市栾城县某奶牛场进行平行检测，比较不同检疫方法对奶牛结核病阳性率的影响，为今后检疫和奶牛结核病的净化提供技术支撑。
1材料与方法1.1材料1）试验奶牛。
中国荷斯坦奶牛300头，试验奶牛外观健康，无任何结核病临床症状，统一TMR饲喂，自由饮水。
2）主要试剂。
牛型提纯结核菌素（牛PPD，青岛瑞尔生物技术有限公司，批号：P201906-001）；禽型结核菌素（禽PPD，青岛瑞尔生物技术有限公司，批号：P201906-001）；牛结核分枝杆菌IFN-γ检测试剂盒（青岛瑞尔生物技术有限公司，批号：P201906-001）。
3）器材。
剃毛刀、注射器、游标卡尺、酶标仪，CO2培养箱、细胞培养板、肝素钠采血管、移液器、枪奶牛结核病不同检疫方法比较路广计1王晓芳2*马宏伟1张涛3范京慧4刘天驹1轩秋燕1范葶莉5邵丽玮2程丽华6边青岩61.河北省动物疫病预防控制中心，石家庄050000；2.河北省畜牧兽医研究所，河北保定071000；3.河北省石家庄市动物疫病预防控制中心，石家庄050000；4.河北农业大学，河北保定071000；5.沧州职业技术学院，河北沧州061000；6.河北省饶阳县农业农村局，河北饶阳053900摘要采用牛结核菌素皮内变态反应试验（TST）、欧盟比较变态反应试验（SICTT）和牛结核γ干扰素酶联免疫吸附试验（IFN-γ-ELISA）对河北省石家庄市栾城县某奶牛场300头奶牛进行结核病平行检测，比较不同检疫方法对奶牛结核病诊断结果的影响，并分析对比检测结果。
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牛结核病是由牛结核分枝杆菌引起的人、畜和禽共患的一种慢性传染病，人结核的10％以上由牛分枝杆菌引起。
世界各国对结核病大多采取检疫净化的方法进行控制，皮内变态反应是世界动物卫生组织（OIE）唯一指定的检疫方法，其判断标准有三种：
1、我国的国家标准
注射方法：不论牛只大小，一律皮内注射0.1mL（20000 IU/ mL）的牛型提纯结核菌素，72h 后观察结果。
阳性反应：局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于4.0 mm 。
疑似反应：局部炎性反应不明显，皮厚差大于或等于2.0 mm，同时小于4.0 mm ；阴性反应：无炎性反应，皮厚差在2.0 mm以下。
2、欧盟的对比PPD试验
在注射牛型提纯结核菌素（注射方法、剂量同我国的标准）的同时，在牛的颈部另一侧对应部位（或在颈部同一侧，但两次注射的位置间隔大约为12～15cm），皮内注射禽型PPD（20000 IU/ mL） 0.1 mL，72h后观察结果。
阳性反应：牛型PPD反应阳性，且比禽型PPD反应大4mm以上；疑似反应：牛型PPD反应是阳性，并且牛型PPD反应仅比禽型PPD反应多1～4mm；阴性：牛型PPD反应是阳性或阴性，但其反应等于或小于禽反应。
3、世界动物卫生组织（OIE）判断标准
仅用牛性结核菌素进行检疫，方法同中国国标，但判断标准较严：局部出现炎性反应，皮厚差≥2.0mm，判断为阳性；皮厚差<2.0mm判断为阴性。
综合来看，世界动物卫生组织（OIE）在牛结核变态反应判定标准较为严格。
欧盟比较法皮内变态反应是对传统的牛型PPD法的改进，能够区别被检动物是由牛型分枝杆菌感染还是由其它非典型分枝杆菌感染，可避免由于禽结核分支杆菌引起的非特异性反应，减少无害化处理损失，对于我国的奶牛结核病检疫净化具有一定的借鉴作用。