增强革兰氏染色液
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色是一种重要的微生物分析方法，在日常诊断检测中广泛应用。
微生物之间的形态和染色特征是鉴别它们的重要标志，而且是许多其他病原体的诊断的基础。
革兰氏染色是利用染料染色试剂，在微生物细胞实施染色，从而便于观察和辨别微生物的一种方法。
革兰氏染色所用的染料试剂分为水溶性和非水溶性两大类，其中水溶性染料试剂是革兰氏染色的主要原料，主要包括绿唑、新的修复绿和罗丹明B。
非水溶性试剂主要有硫酸、硝酸、酚酞等试剂，在革兰氏染色中都起到重要作用。
绿唑是传统的革兰氏染色试剂，性质稳定，抗酸、碱、表面活性剂等耐受性比较好，且染色效果易操控，在大多数细菌和真菌染色中有良好的效果。
另外，新的修复绿也可以用于革兰氏染色，因为它的抗老化性比绿唑好。
罗丹明B也是多用途的可溶性染料试剂，可以在植物，动物细胞和细菌中染色，并且它可以与绿唑混合使用，使细菌的染色效果更加良好。
此外，在革兰氏染色中还会适当添加一些非水溶性试剂。
例如，硫酸可以强化染色，使细菌自身的特殊特征更容易被观察到；硝酸可以促进细菌染料吸收，提高染色效率，而酚酞则是革兰氏染色常用的抗氧剂，可以有效地防止染料的褪色。
总之，革兰氏染色的成功与否与使用的试剂有着密切的关系，在选择染料试剂时，应当综合考虑染料的性质、染色效果、耐受性
和易用性等因素，以确保获得最佳的染色效果。
革兰氏染色需要的试剂
革兰氏染色需要的试剂革兰氏染色是一种临床上常用的微生物诊断方法，它是利用细菌的特异性自身的酶和体外物质的反应而使细菌表面有不同的色泽，从而对细菌进行特异性的鉴定。
革兰氏染色需要的试剂有：一、染料：1.革兰氏染色所需要的染料有紫罗兰染料（Gram’s violet）、卡拉氏染料（Kala’s dye）、罗丹明B染料（Ludwig’s B dye）、乙醚紫染料（Ethyl violet）等。
2.紫罗兰染料（Gram’s violet）是在革兰氏染色中通常采用的染料，能与细菌外膜中脂肪、糖等成分发生化学反应，使细菌保持紫色，细菌呈深蓝色。
3.卡拉氏染料（Kala’s dye）是一种无机染料，在细菌外膜中可以形成稳定的络合物，使细菌呈深蓝色。
4.罗丹明B染料（Ludwig’s B dye）是一种无机染料，具有强烈的抗氧化作用，使细菌表面呈褐色。
5.乙醚紫染料（Ethyl violet）是一种有机染料，可以与细菌外膜中的脂肪和糖等成分发生反应，使细菌呈紫色。
二、抗原：1.革兰氏染色中用到的抗原有去氧核糖核酸（DNA）、核苷酸（RNA）、多糖（polysaccharide）、蛋白质（protein）等。
2.去氧核糖核酸（DNA）是细菌表面的一种膜质抗原，可以与染料发生化学反应，使细菌表面呈现出紫色。
3.核苷酸（RNA）是细菌表面的一种膜质抗原，可以与染料发生化学反应，使细菌呈深蓝色。
4.多糖（polysaccharide）是细菌表面的一种膜质抗原，可以与染料发生化学反应，使细菌呈褐色。
5.蛋白质（protein）是细菌表面的一种抗原，可以与染料发生化学反应，使细菌呈黑色。
三、抗性：1.抗性是指细菌在染色过程中可以抗染料的作用，会导致形成的颜色异常，从而影响革兰氏染色的效果。
2.抗性可以分为细菌内抗性和细菌外抗性。
细菌内抗性是指细菌内部存在的特殊酶，如脱氧核糖核酸酶（DNAase）、磷酸核酸酶（RNAase）、多糖酶（polysaccharase）等，可以与染料结合，使其不能达到预期的染色效果。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色是一种常用的细菌分类和培养方法，它把细菌染成不同颜色，使研究人员能够更加容易地识别出每种不同的细菌。
革兰氏染色所用的试剂有多种，它们提供了这种技术所需的色素，以及提高染色的精确度的其他特性。
它们的性质和激发机制有所不同，从而使它们可以提供准确的染色结果。
为了实现革兰氏染色，首先需要使用染料试剂，它们的颜色可以有红色，黑色，紫色，蓝色，橙色，绿色或灰色。
它们的颜色都可以由一种叫做脱氧核糖核酸（DNA）的分子素材来激发。
例如，一种叫做革兰氏绿的染料试剂会在存在DNA的环境中产生一种深绿色的颜色。
其次，染料试剂可以与各种不同类型的抗原结合，这种结合能够触发另一种叫做抗体的物质分泌。
抗体会与抗原结合，形成一种特殊的结构，这种结构可以被染料试剂吸收，从而使抗原和抗体之间的结合更加牢固。
最后，可以使用离子抑制剂来控制染料试剂的作用。
离子抑制剂可以抑制不同颜色的染料试剂之间的作用，从而让细菌染料更加清晰。
例如，使用一种叫做氯仿的离子抑制剂可以防止橙色染料与紫色染料之间的作用，从而使细菌的颜色更加精确。
革兰氏染色需要使用多种试剂，以便能够更准确地染色细菌。
染料试剂是基本的组成成分，它们提供了染色所需的色素，以及抗原和抗体结合到一起的形状所需的介质。
而离子抑制剂则控制着不
同颜色染料之间的作用。
这些试剂结合起来，提供了革兰氏染色所需要的色素，以及让染色更加清晰和准确的其他特性。
革兰氏染色液配制
革兰氏染色液配制文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-革兰氏染色液保质期：2-8度一年.革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，媒染剂碘液进入菌体后与结晶紫结合，革兰氏阳性菌对碘与结晶紫摄取量多且牢固，不易被酒精脱色。
革兰氏阴性菌对碘与结晶紫摄取量少，不牢固，易被酒精脱色。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
操作步骤：1、标本处理：（1）.有菌部位的标本，如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。
（2）.无菌部位的标本，如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等，应取适量标本（最高可达5-7ml）,经3000rpm?离心10min.，取沉渣涂片染色。
2、涂片制作：菌液涂片时，用接种环沾取菌液点在载玻片上，标本可直接在玻片上涂布；菌落涂片时，先取生理盐水一滴，置玻片上，用接种针挑取菌落在盐水中涂布。
制作的涂片应自然干燥，并经火焰固定，固定的温度不宜过高，以玻片背面接触手背不烫为准，否则可能使细菌形态改变。
将固定后的涂片进行染色。
3、染色方法：革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。
此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都可能会呈阴性反应。
（1）.加上结晶紫后，染色1分钟，水洗。
（2）.加上碘液后染色1分钟，水洗。
（3）.加上95%酒精,摇动玻片,根据涂片厚度,脱色约30-60秒，水洗,吸去水分。
（4）.加上蕃红后，染色1分钟，水洗。
（5）.吸干或在空气中凉干后，油镜镜检。
4．结果观察：紫色为革兰氏阳性，红色为革兰氏阴性。
注意事项：1．标本涂片不能太厚，严格按操作要求进行。
2．玻片通过火焰温度不能太高。
3．若涂片较厚，应延长脱色时间，直至不再出现紫色为止。
4．碘液变透明，则不能使用。
实验三细菌革兰氏染色法
实验三细菌革兰氏染色法【目的要求】了解革兰氏染色原理；掌握革兰氏染色的方法。
【基本原理】革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884 年由丹麦医师Gram 创立。
未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。
染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
革兰氏染色法可将细菌分成革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏染色的主要步骤包括初染、媒染、脱色和复染。
首先利用草酸铵结晶紫初染，所有细菌都会着上结晶紫的蓝紫色。
然后利用卢戈氏碘液作为媒染剂处理，由于碘与结晶紫形成碘-结晶紫复合物，增强了染料在菌体中的滞留能力。
之后用95%乙醇作为脱色剂进行处理时，两种细菌的脱色效果不同。
革兰氏阳性细菌细胞壁肽聚糖含量高，壁厚且脂质含量低，肽聚糖本身并不结合染料，但其所具有的网孔结构可以滞留碘-结晶紫复合物，现在一般认为乙醇处理可以使肽聚糖网孔收缩而使碘-结晶紫复合物滞留在细胞壁，菌体保持原有的蓝紫色。
而革兰氏阴性细菌细胞壁肽聚糖含量低，交联度低，壁薄且脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，细胞壁通透性增加，原先滞留在细胞壁中的碘-结晶紫复合物容易被洗脱下来，菌体变为无色。
而在最后用复染步骤（染色剂为番红），染色后变为复染剂颜色（红）。
【实验器材】1.革兰氏染色液：①草酸铵结晶紫甲液：结晶紫（2 g）、乙醇（95%）（20 mL）;乙液：草酸铵（0.8 g）、蒸馏水（0.8 mL）;将甲、乙两液混合，静置48h 后使用，该染液稳定，在不透气的棕色瓶中可存储数月。
②卢戈氏碘液碘（1 g）；碘化钾（2 g）；蒸馏水（300 mL）先将KI溶于少量（3-5 mL）蒸馏水中，再放入碘，待碘全溶后，加水至300 mL。
此液稳定，可在不透气的棕色瓶中保存数月。
③脱色液：95%乙醇④复染液：即2.5%蕃红（沙黄）水溶液。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色，也称革兰氏指示染色，是一种化学染色法，是现代微生物学上应用最广泛的分子染色技术，是当今临床检测和研究微生物最常用的方法之一。
该技术主要用于检测和鉴定微生物，根据微生物培养基中培养出来的悬浮细菌，把其固定在载体上，再结合选择性培养基，利用试剂对微生物进行染色，观察其形态、颜色、细菌的位置分布，从而用来检测、鉴定和分离微生物。
由于该技术在医学对微生物的检测上应用广泛，所以被称为医学技术，在进行检测前，必须准备一些典型的技术用品，并准备相应的染色剂和其他试剂。
执行技术需要符合相应的标准要求，以准确的微生物检测结果。
革兰氏染色所用的试剂有多种，即染料和其他特殊试剂，染料是用来染色的化学物质，染料主要有酚酞、紫胺钠、紫斑甘比林、紫头唑铵、哌甲酸等。
在检测中，染料尤其重要，因为它是检测微生物的关键，能够使细菌在可见光下出现颜色，方便通过显微镜直接观察，也可利用染料组合来鉴别出某些特定细菌。
此外，还有一些特殊的试剂，如磷酸钙和凝胶试剂，它们有助于形成茁壮的细菌生长，可以用来增强细菌的荧光，因而更加容易被检测到。
另外，罗丹明123染色剂也是经常用到的试剂，可以用来染色细菌菌胞壁和细胞质，以便可见光下观察。
在进行革兰氏染色检测前，必须对这些试剂进行详细的了解，以确保实验和检测结果准确无误。
正确使用这些试剂，不仅有助于提高
细菌的活性，而且可以有效提高检测效率，为医学技术提供可靠的依据，保证诊断准确率和治疗效果。
总之，革兰氏染色技术是一种常用的技术，在进行检测或者研究前要正确准备好并使用相应的试剂，这是保证实验的前提条件，才能有效的研究微生物并了解其生长形态、分布状况，得出准确的分析结果。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色是一种常用的微生物染色技术，可以检测微生物的存在。
该技术可以检测出某种特定细菌的存在，并通过色谱来识别不同的微生物。
它的最大优势在于不需要使用昂贵的设备，只需要几个简单的试剂，就可以完成检测。
革兰氏染色所用的试剂主要集中在以下几类，包括培养基，抗毒素，染色剂和除菌剂。
培养基是革兰氏染色的基础，其主要功能是提供细菌所需的一切条件，以及生长和繁殖所必需的营养。
一般选用的培养基有乳清培养基、拉丁牙齿培养基、卡介苗培养基和血清培养基等。
抗毒素是革兰氏染色的必备试剂，其主要功能是抑制某些有毒成分对细菌的影响，以及免疫抑制物质对细菌的影响，从而提高染色效果。
常用的抗毒素有抗原、抗毒素A和抗毒素B等。
染色剂是革兰氏染色的基础，其实质是一种高分子物质，可以通过互相作用或与细菌电荷作用，使染色的目的物的色素发生变化，从而检测出细菌的存在。
常用的染色剂有新明蓝、苯酚红、芯蓝等。
除菌剂是革兰氏染色的必备试剂，主要功能是抑制和杀灭室内污染物，降低微生物胞外污染的风险，保证染色结果的准确性。
常用的除菌剂有碳酸氢钠、肼溶液、碳酸钠溶液、铝酸溶液等。
革兰氏染色所用的试剂除了上述提到的几类外，还包括各类消毒剂、抗凝剂、抗碱剂、还原剂等。
由于染色的细菌类型和批次不同，在使用这些试剂时，应根据实际情况选择合适的试剂，并结合文献资
料掌握其使用方法，以确保染色结果准确可靠。
综上所述，革兰氏染色是一种实用性很强的微生物染色技术，它使用试剂类型多样，实验条件简单，操作简单方便，效果显著，染色结果准确可靠，值得广大科研工作者推崇及使用。
生物实验染色剂
生物实验染色剂华越洋生物过碘酸溶液(0.5%) 100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称高碘酸溶液，是一种氧化剂，常与Schiff试剂合用对糖原进行染色过碘酸溶液(1%) 100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称高碘酸溶液，是一种氧化剂，常与Schiff试剂合用对糖原进行染色Schiff试剂50ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称雪夫试剂、希夫试剂，主要用于碳水化合物染色：如糖原,粘蛋白,糖蛋白,多糖,透明质酸。
又称无色品红染色液。
为无色液体，一般变黄或粉红应弃用。
Schiff试剂100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称雪夫试剂、希夫试剂，主要用于碳水化合物染色：如糖原,粘蛋白,糖蛋白,多糖,透明质酸。
又称无色品红染色液。
为无色液体，一般变黄或粉红应弃用。
糖原PAS染色液4×50ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜糖原染色中华越洋生物推荐采用该染色液，是最常用的经典糖原染色法,高碘酸和schiff试剂应低温保存。
染色结果为：PAS反应阳性物质(糖原或多糖)均呈红色或紫红色；细胞核呈蓝色。
糖原PAS染色液4×100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜糖原染色中华越洋生物推荐采用该染色液，是最常用的经典糖原染色法,高碘酸和schiff试剂应低温保存。
染色结果为：PAS反应阳性物质(糖原或多糖)均呈红色或紫红色；细胞核呈蓝色。
糖原PAS染色液(细胞专用) 4×20ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,特别适用于细胞、极其薄的切片。
细胞的糖原染色中华越洋生物公司推荐采用该染色液，是经典糖原染色法,高碘酸和schiff 试剂应低温保存。
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增强革兰氏染色液
简介：
在革兰阴性细胞染色中，乙醇或丙酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层和细胞质膜，结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来，当再用其他染色液复染时，显现红色。
红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，所以红色显示不出来。
在革兰阳性细胞染色中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘复合物分子太大，不能通过细胞壁，不易脱色，所以保持着紫色。
Leagene Enhanced Gram ˊs stain 采用最经典的革兰染色配方进一步改进，使用复红复染液替代沙黄染色液，增强了染色效率，用于极难染色的细菌。
临床标本直接涂片，背景干净，胞核胞质对比强烈，胞内吞噬体清晰易辨认，细菌染色特征典型。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水，取菌与
的水混合均匀，涂成一薄层。
2、 干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥。
3、 固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次，每
次1s ，温度不宜过高，防止菌体蛋白变性，放置待凉后染色。
也可以用甲醇或乙醇固定。
4、 初染：滴加结晶紫染色液染色，清水冲洗去染色液。
5、 媒染：滴加Gram 碘液，并覆盖载玻片，室温放置，水洗。
6、 脱色：滴加脱色液，摇动，直至流下的脱色液不出现紫色时为止，立即用水冲去脱色液，
终止反应。
7、 复染：滴加复红复染液染色，水洗。
8、 干燥。
镜检：置油镜观察。
编号 名称
DM0016 4×10ml DM0016 4×100ml DM0016 4×250ml Storage 试剂(A): 结晶紫染色液 10ml 100ml 250ml RT 避光 试剂(B): Gram 碘液 10ml 100ml 250ml RT 避光 试剂(C): 脱色液 10ml 100ml 250ml RT 试剂(D): 复红复染液 10ml
100ml
250ml
RT 避光
使用说明书 1份
染色结果：
革兰氏阳性菌蓝色至紫色
革兰氏阴性菌红色
注意事项：
1、涂片之前，应事先在背面做好圆圈标记，以便判断后续试验的位置。
2、取细菌时，应注意自我防护，拔或塞试管塞时，应将试管口通过火焰略加烧灼，最后将
接种环在火焰上烧灼灭菌。
3、加热固定涂片时，应注意玻片勿太靠近火焰，一般要求玻片温度不超过60℃，以玻片
背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
4、革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度，脱色时间应根据经验判断。
脱色过度，阳性
菌可被误染为阴性菌；脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。
5、待检细菌培养时间会影响染色，阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解，常呈阴性。
有效期：12个月有效。
相关：
编号名称
DC0032Masson三色染色液
DG0005糖原PAS染色液
TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。