非洲猪瘟病毒快速检测技术学习总结.非洲猪瘟病毒快速检测技术学习总结
非洲猪瘟病原学检测方法
非洲猪瘟病原学检测方法介绍非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种高致病性的猪病，对于猪养殖业来说是一种严重威胁。
为了及时有效地进行疫情监测和病原学分析，科学家们发展了多种非洲猪瘟病原学检测方法。
本文将对这些检测方法进行详细的探讨。
PCR方法传统PCR1.样品收集：从患病猪只的脾脏、淋巴结或血液中收集样品。
2.DNA提取：使用DNA提取试剂盒将样品中的DNA提取出来。
3.PCR反应体系：设置PCR反应体系，其中包括引物、模板DNA、酶和缓冲液。
4.PCR扩增程序：设定PCR扩增程序，包括一系列不同温度的循环反应。
5.结果分析：利用凝胶电泳的方法，观察PCR产物的大小。
实时定量PCR1.样品收集和DNA提取：与传统PCR相同。
2.PCR反应体系：与传统PCR相同，但引入了荧光探针。
3.实时定量PCR程序：设定实时定量PCR程序，包括多个不同温度的循环反应。
4.数据分析：根据荧光信号的强度和阈值周期数，计算出病毒数量。
优点•灵敏度高：PCR方法能够检测到非洲猪瘟病原体的极低浓度。
•特异性强：引物的设计使得PCR方法能够区分非洲猪瘟病原体和其他相关病原体。
•快速性：PCR方法可以在短时间内得到结果。
缺点•对实验操作要求高：PCR方法需要精确计量样品和试剂。
•易受污染：PCR方法容易受到外部环境中目标DNA的污染。
•不适合现场应用：PCR方法的设备和试剂有一定的成本，不适合一些资源有限的地区。
ELISA方法直接ELISA1.样品准备：从患病猪只的血液中收集样品。
2.酶标板涂层：将非洲猪瘟病毒的抗原涂在酶标板上。
3.样品加入：将已稀释的血清样品加入到酶标板中。
4.洗涤步骤：用洗涤缓冲液洗涤酶标板，去除未结合的抗体。
5.反应步骤：加入与非洲猪瘟病毒抗体标记的酶联二抗。
6.洗涤步骤：洗涤酶标板，去除未结合的酶联二抗。
7.显示步骤：加入底物，使酶与底物反应产生可见的颜色。
8.终止反应：加入终止液停止酶的反应。
影响非洲猪瘟病毒核酸检测结果准确性的关键技术
2021年(第42卷)第5期影响非洲骑盧病毒柏酸检测结果准确性的共鍵技水郑梅红(舞钢市动物疫病预防控制中心，河南舞钢462500)中图分类号:S 858.28文献标识码：B非洲猪瘟（ASF )是由非洲猪瘟病毒（ASFV )感染导 致的一种急性、热性、高度接触性烈性传染病，虽不属 于人畜共患，但一旦发生，对养猪业的影响几乎是灭顶 之灾。
非洲猪瘟实验室病毒核酸检测是一种简单、快捷 的病原学检测方法，但由于病毒核酸检测对环境和操作 过程要求十分严格，所以为了提高非洲猪瘟病毒核酸检 测结果的准确性，对非洲猪瘟病毒核酸进行检测时，检 测员必须认真对待每一个操作细节。
笔者根据多年来 的实验室检测经验并结合部分参考文献，整理归纳，总 结出了影响实验室非洲猪瘟病毒核酸检测准确性的几 个要点。
1非洲猪瘟病毒核酸检测的重要性1.1非洲緒疸病毒的性质非洲猪瘟(ASF )是由非洲猪瘟病毒(ASFV )感染导致 的一种急性、热性、高度接触性烈性传染病，发病时间短 (2〜21 d )、发病率和死亡率95%以上，有时甚至可达到 100%,由此我国将此病列为一类动物疫病。
其病毒基因 型多(24个基因型、9个血清型），易突变，导致病毒存活时 间久(25~37尤存活数月，4丈存活1年以上,冷冻或者腌肉 可以达数年至数十年）、抵抗力强(耐酸碱PH 4-10时也很 稳定、反复冻融不影响病毒活力）,很多临床症状和普通猪 瘡非常相似，到目前为止还没有有效的疫苗和药物来阻止 病毒的侵袭，依靠实验室检测才能对其进行确诊。
1.2 非洲猪瘟病毒核酸检测技术的发展及其重要性非洲猪瘟实验室检测方法虽然理论上有多种，但由 于影响因素太多，有些操作起来非常困难，常常导致试 验失败；有些反应时间太长，满足不了急需。
这两年随 着先进仪器的生产，检测技术的提升，对非洲猪瘟的检 测无论从结果的精准度和检测时间的缩短上都提高了 很多。
目前非洲猪瘟病毒核酸检测是诊断非洲猪瘟的 重要措施之一，其准确率几乎达到100%,方法简单快 捷。
非洲猪瘟防控工作总结
非洲猪瘟防控工作总结
非洲猪瘟是一种高传染性、致死率高的猪病，对猪产业造成重大威胁。
近年来，非洲猪瘟在中国多个省份爆发，给猪农带来了巨大损失。
为了有效防控非洲猪瘟的传播，我们采取了一系列措施，以下是对工作的总结：
一、加强监测和报告体系。
建立非洲猪瘟的监测网络，及时收集猪场、屠宰场等相关信息，并建立快速报告机制，确保发现疫情能够及时上报，以便采取相应措施。
二、严格的动物交易和运输管理。
通过制定严格的动物交易和运输管理措施，加强对猪的来源和去向的管控，减少非洲猪瘟的传播风险。
三、加强宣传和教育。
通过各种渠道广泛宣传非洲猪瘟的预防知识，提高养殖户和屠宰场工作人员的防疫意识，增强他们对非洲猪瘟防控工作的重视程度。
四、加强养殖场的生物安全措施。
采取一系列的生物安全措施，包括加强养殖场的卫生消毒工作，改善猪栏的环境和通风条件，确保猪的健康和安全。
五、严格控制病死猪的处理。
对于出现死亡猪只，必须严格按照规定的程序进行处理，包括进行无害化处理和安全处理，以防止非洲猪瘟的进一步传播。
总的来说，非洲猪瘟的防控工作需要全社会的共同努力，我们
将继续加强各项防控措施的实施，并持续进行监测和报告工作，以确保非洲猪瘟不再对猪产业造成威胁。
非洲猪瘟净化总结汇报
非洲猪瘟净化总结汇报非洲猪瘟（African Swine Fever，简称ASF）是一种高传染性的猪类疾病，可以导致猪只的严重生病甚至死亡。
自2018年以来，ASF在全球范围内蔓延，严重威胁了全球猪肉产业的发展。
为了应对ASF的蔓延，各国纷纷采取了一系列的措施来净化ASF。
本文将从各国的防控措施、应对措施和经验教训三个方面对非洲猪瘟的净化进行总结汇报。
首先，各国在防控ASF方面采取了多种措施。
各国政府加强了对养猪场、交易市场和屠宰场的管控，加强了猪群的监测和检测。
同时，强化了国际合作，共同交流经验和信息，共同应对ASF的蔓延。
此外，各国还加强了宣传教育，提高了养殖户和民众的防控意识。
其次，各国在应对ASF方面采取了一系列的措施。
对于受感染的猪群，各国采取了快速处置和淘汰的措施，以减少疫情的传播风险。
在养殖环节中，加强了卫生检查和消毒措施，确保猪只的健康和生存环境的卫生。
此外，一些国家还制定了紧急预案和应急措施，以及加强了执法和处罚力度，以阻止非法交易和运输。
最后，各国在净化ASF方面也积累了宝贵的经验教训。
首先是加强监测与检测的重要性，及时发现和隔离受感染的猪只。
其次是宣传教育的重要性，提高养殖户和消费者的防控意识和知识水平。
此外，国际合作也是非常关键的，各国应加强信息共享和经验交流，共同应对ASF的威胁。
总之，净化非洲猪瘟是一项艰巨的任务，需要各国政府、养殖户和消费者的共同努力。
通过加强防控措施、应对措施和经验教训的总结汇报，可以更加有效地应对ASF的蔓延，最大限度地减少疫情造成的损失。
希望各国共同合作，共同努力，最终成功净化非洲猪瘟。
猪瘟工作总结
猪瘟工作总结
猪瘟，又称非洲猪瘟，是一种严重危害猪类动物的传染病，给养猪业造成了巨大的损失。
为了有效防控猪瘟，各级政府和相关部门开展了一系列的工作。
在这篇文章中，我们将对猪瘟工作进行总结，以期为未来的防控工作提供经验和借鉴。
首先，针对猪瘟的防控工作主要包括以下几个方面，加强监测和检测、加强宣传和教育、加强疫苗接种和治疗、加强国际合作和信息交流等。
在过去的工作中，我们采取了一系列有效的措施，取得了一定的成效。
其次，加强监测和检测是猪瘟防控工作的重中之重。
通过建立健全的监测网络和检测体系，及时发现疫情，采取相应的措施，可以有效遏制疫情的蔓延。
同时，加强宣传和教育，提高养殖户和相关人员的疫情防控意识，也是非常重要的。
此外，加强疫苗接种和治疗也是猪瘟防控工作的关键。
疫苗接种可以有效提高猪的免疫力，减少疫情的发生。
而对于已经感染的猪，及时采取治疗措施，也可以减少疫情造成的损失。
最后，加强国际合作和信息交流，也是猪瘟防控工作的重要组成部分。
猪瘟是一种跨国传播的疫情，各国之间需要加强合作，及时分享信息和经验，共同应对疫情的挑战。
总的来说，猪瘟工作虽然取得了一定的成效，但仍然面临着许多挑战。
我们需要进一步加强监测和检测，加强宣传和教育，加强疫苗接种和治疗，加强国际合作和信息交流，共同努力，为猪瘟的防控工作做出更大的贡献。
相信在各级政府和相关部门的共同努力下，猪瘟这一严重的传染病终将被有效控制。
增强非洲猪瘟防控工作总结7篇
增强非洲猪瘟防控工作总结7篇篇1一、背景非洲猪瘟是一种对全球畜牧业造成重大威胁的疫病，为切实保障畜牧业健康发展，我单位积极响应国家政策，加强防控措施，全力开展非洲猪瘟防控工作。
本报告旨在总结近期非洲猪瘟防控工作的成果和经验教训，并提出今后的工作方向。
二、防控工作回顾过去一年中，我们严格按照上级部门的要求和部署，全面落实非洲猪瘟防控措施。
具体工作如下：1. 加强疫情监测与报告我们通过建立监测点、加大巡查力度等方式，实时掌握疫情动态，确保一旦发现疫情能迅速反应。
同时，规范疫情报告流程，确保信息畅通，及时上报。
2. 强化养殖场生物安全管理指导养殖场完善生物安全管理体系，严格消毒和防疫制度，加强人员培训，提高防疫意识和技能。
对饲料、水源等进行严格检测，阻断病毒传播路径。
3. 开展应急演练与培训我们组织多次应急演练，模拟疫情暴发情景，检验应急响应能力。
同时，加强对防疫人员的专业技能培训，提高其快速应对疫情的能力。
4. 加强部门协作与沟通我们与相关部门保持紧密沟通，形成联动机制，共同应对疫情。
建立跨部门的信息共享平台，确保防控工作的协同性和高效性。
三、成果展示通过一系列防控措施的实施，我们取得了显著的成果：1. 全年未发生非洲猪瘟疫情，保障了畜牧业的稳定发展。
2. 建立了完善的疫情监测和报告体系，提高了预警和反应能力。
3. 养殖场的生物安全水平得到显著提升，防疫意识和技能得到加强。
4. 应急响应能力和防疫人员的专业技能水平得到提高。
5. 加强了部门间的沟通与协作，形成了防控工作的合力。
四、经验总结与教训反思在防控工作中，我们获得了以下经验：1. 高效的应急响应机制是防控工作的关键。
2. 养殖场的生物安全管理是防控工作的基础。
3. 部门间的协同合作是防控工作的重要保障。
同时，我们也认识到以下几点需要改进：1. 部分养殖场主的防疫意识仍需加强。
2. 应急演练的频次和范围可进一步扩大。
3. 需要进一步提高防疫人员的专业技能水平。
非洲猪瘟诊断与检测技术要点
非洲猪瘟检测与诊断技术要点中国农业科学院上海兽医研究所牵头编制2019年9月前言非洲猪瘟（African Swine Fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine Fever Virus，ASFV）引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，发病率和死亡率可达100%。
世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。
1921年，ASF最初发现于肯尼亚，上世纪五、六十年代在非洲、欧洲、南美洲流行。
2018年8月初我国爆发非洲猪瘟首起疫情以来，该疫病已蔓延全国23个省，给我国生猪养殖业和国民经济带来巨大损失。
由于ASFV感染机制复杂，目前世界范围内至今尚无有效预防用非洲猪瘟疫苗，因此早期发现、精准检测是控制该病传播和发生的关键。
本文参考了OIE关于非洲猪瘟防控的文件、农业农村部发布相关文件和中国动物卫生与流行病学中心、中国动物疫病预防控制中心的相关技术手册，结合我们的研究成果，从非洲猪瘟早期发现、现场排查、精准检测三个方面的技术要点编写而成，主要面向从事非洲猪瘟现场排查和检测的一线防疫人员，提供了简明实用的相关操作技术与方法，为非洲猪瘟现场排查与检测等相关工作提供参考。
编者牵头团队：上海兽医研究所猪呼吸道传染病团队负责人：马志永参加人：魏建超等参加团队：哈尔滨兽医研究所猪烈性传染病创新团队负责人：仇华吉参加人：罗玉子等兰州兽医研究所外寄生虫与虫媒疫病团队负责人：刘志杰参加人：林密等兰牧药研究所中兽医与临床团队负责人：李建喜参加人：崔东安目录一、概述 (1)二、早期发现 (4)三、现场排查 (5)（一）准备工作 (6)1.人员准备 (6)2.车辆准备 (6)3.物品准备 (6)（二）进出养殖场要求 (7)1.抵达养殖场 (7)2.穿戴个人防护设备（在清洁区） (8)3.离场前准备 (8)4.离场后 (9)5.消毒剂的选择 (9)（三）临床诊断 (9)1.临床症状 (10)2.剖检病变 (11)3.鉴别诊断 (12)4.发现疑似病例的情况下应立即采取的行动 (13)（四）样品采集、包装与运输 (14)1.采样方法 (14)2.样品的记录、保存、包装和运送 (15)3.废弃物处理 (18)四、实验室诊断与确诊 (19)1.快速精准检测 (19)2.疫情确诊 (19)附件一：非洲猪瘟防治技术规范 (20)附件二：国家非洲猪瘟参考实验室、专业实验室和区域实验室名单 (24)一、概述非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种有囊膜的DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员。
非洲猪瘟防控工作小结与体会
68广西畜牧兽医2021年Vol.37(2)售价2000元/头，一度被哄抢。
只要是雌性猪就留作后备母猪，造成母猪繁殖性能低下。
从2019年7月复养至2020年8月，本人初步统计，我镇10%的母猪因配种失败而淘汰,50%-60%的母猪窝产仔10头抱下，有的母猪窝产仔仅2头~3头。
后备母猪配种过早,母猪容易流产、死胎，产弱胎。
2.6生猪养殖从业者年龄老化、文化水平低，专业技术不足，思想保守，防疫意识不高，生物安全知识缺乏,疫情的发生将极大增加养殖难度和风险。
出现养猪难、赚钱更难的现象。
少数养殖户依靠村级防治员搞防疫、医疗，没有专职的驻场兽医技术员，一些兽医防治员一天兼顾2个场~3个场,消毒不严格,从而带来了生物安全隐患。
3建议3.1影响生猪养殖的因素很多，给养猪发展带来很多困难。
要促进生猪养殖规模发展，必须加强科学技术学习、培训,提高生猪养殖从业者的专业技术水平，才能提高养猪场的经济效益。
健康发展农村中、小规模猪场才能全面保证生猪的可持续性发展。
3.2近年来，政府对生猪养殖的扶持力度不断加大，猪场应该利用政策扶持，新建、扩建、改建猪场,提高生物安全设施、购置生产设备，如产床、漏缝地板、料塔、刮粪机等,积极申请贴息贷款。
3.3积极参加生猪政策性保险,以降低因疾病、疫病、自然灾害等造成的风险。
能繁母猪养殖户保费15元/头,财政补60元/头，保额1500/头。
育肥猪养殖户保费12元/头，财政补48元/头，保额1200元/头。
3-4做好病死猪的无害化处理工作。
不要随意丢弃病死猪，应及时进行深埋、化尸池等无害化处理,可以减少病原的传播。
对病死猪进行无害化处理,财政补贴80元/头,养殖户只需在手机上安装APP “广西畜禽无害化处理监管平台”,即可操作。
3.5提高养猪生产的科技含量。
尽量使用现代的信息技术，比如安装监控设备，方便观察猪的发情、分娩、发病等异常情况，减少人员频繁走动，既可数减少人员成本，又可以减少病毒进入猪场。
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移动电源 供电 130瓦时 可使用4小时 支持两轮实验
手持研磨器 固体样品处理 耗材：研磨头 双电单充
迷你离心机 样品前处理 配制反应液 TS：5000rpm
快速检测非洲猪瘟仪器的简介
Mini8
Mini8 Cube系统 小巧，机动 供电方式灵活 免校准，免维护 软件友好，操作简单 人医标准：CFDA三类医疗器械注册证
非洲猪瘟的特点
生命力顽强的对手----传播力慢但感染力强 FMDV、PEDV、PRRS 传播如一阵风（快、急）
ASFV扩散步步为营（慢、稳）
“雾” 与 “霾”的关系
两个误区： 1、猪群中传播慢，误以为病原感染力不强 2、消毒药较容易灭活，误以为病原抵抗力不强
非洲猪瘟的特点
ASFV短板 1、宿主相对单一为软蜱和猪 2、杀气太重，不够“温和”（与宿主“水火不容”）导致猪的急性亡 3、转染性相对较慢 4、传染效率较低 5、怕热、怕强酸强碱 6、在56 ℃需要70分钟（有最新研究表明该条件在某些情况下可能不能 完全灭活病毒，应采用更高温度灭活），60 ℃需要20分钟才能将病毒 灭活 7在无血清的培养基中，PH ﹤3.9或﹥11.5能灭活病毒
栏舍熏蒸 环境消毒
水泥地面
安全性高、无毒无味、起效速度快、 价格较贵
适用于病毒和细菌
某些碘制剂具有毒性
预防病毒性疫病
适用水线消毒、细菌消毒效果好、 有机物存在失效、对真菌和芽孢 洗手、水线消毒
安全性高
效果不佳、不能和清洁剂混用
对病毒和细菌均有效
可能具有毒性
水泥地面、车轮浸泡
起效速度快、对病毒和细菌均有效 可能具有毒性 价格低廉
二、非洲猪瘟的特点
非洲猪瘟的特点
1、急性、烈性、高度接触性传染病 2、发病率、致死率高达100% 3、家猪、野猪均可传染 4、感染性严重程度超乎想象 5、野猪和软蜱是病毒的储存宿主和传播媒介 6、危害严重，对养殖业可造成毁灭性打击，引起巨大的经济损 失和社会影响
非洲猪瘟的特点
抵抗力强 1、在污染的猪圈中，可保持感染性1个月 2、带血木板中可存活70天 3、腐败的血、冷冻的肉可存活15周 4、4 ℃条件下，感染猪血液中病毒感染力可以稳定保持18个月以上 5、骨髓和未煮熟的香肠、肉片和干火腿中存活3-6个月 6、冷冻病死猪尸体中15年保持存活 7、熏肉和腊肉存活5-7个月 8、低温下存活时间5-6年 9、泥土等环境中存活时间是205天 10、水中存活时间70天 11、粪便中存活时间160天 12、蜱虫中代代相传，永久存活
三、非洲猪瘟临床特点
非洲猪瘟临床特点
临床特点1： 1、特征-突然死亡 2、以特急性和急性为主 3、所有年龄和性别都可能受到影响 4、传染性相当低-发病率不定 5、耳、四肢和腹部发红至发绀 6、血腥腹泻 7、经常性流产 8、高热、出血为主要表现症状
非洲猪瘟临床特点
临床特点2： 1、脾脏异常肿大、呈紫黑色、质地变脆、易碎 2、胃、肝脏、肾脏、肠系膜等淋巴结出血、水肿、质地柔软、 包膜紧张
目录
一、非洲猪瘟的主要来源 二、非洲猪瘟的特点 三、非洲猪瘟临床特点 四、消毒试剂 五、快速检测非洲猪瘟仪器的简介
一、非洲猪瘟的主要来源
非洲猪瘟的主要来源
1、走私产品（主要有猪肉、猪肉制品、猪下水） 2、旅客携带物 3、野猪迁移 4、运输车辆（出猪台-内外部车辆-市场-屠宰厂） 5、餐厅剩余物喂猪（2018.9.18-全国范围内禁止 餐厅剩余物喂猪） 6、屠宰场 7、三员机器性传播（贩运人员+保险理赔员+动物防疫人员） 8、苍蝇/老鼠（带毒）小范围传播. 9猪饲料（主要是猪血等饲料，注意猪饲料的加工要采用喷雾干燥工艺， 60摄氏度20分钟，才可以使用.）
四、消毒试剂
消毒试剂
消毒剂种类
优点
缺点
适用范围
过氧化物 氯化物
苯酚 碘制剂 季铵盐类 醛类 碱类
作用速度快 适用于病毒和细菌
具有刺激性
预防病毒性疫病、水线消毒、 栏舍熏蒸
起效速度快 对病毒和细菌均有效 价格低廉
具有腐蚀性、遇有机物和硬水失 活、持续效果短、具有刺激性
活性胶塑料、 对病毒和细菌效果好、价格低廉 可能环境污染
• 灵敏度高，特异性强，对生物学样本有极强的分辨能力 • 医疗、疾控等多个领域用于确诊传染病的方法
快速检测非洲猪瘟仪器的简介
快速检测非洲猪瘟仪器的简介
主机
配件
微量移液器 配制反应液 耗材：枪头
金属浴 暂时保存反应液 样品前处理 温控：0-100℃
Mini8 Cube及电脑 8样品孔 两通道：FAM/ROX 无需预热 免校准、免维护 220V/12V(车载供电）
快速检测非洲猪瘟仪器的简介
试剂盒特点：免核酸提取
1. 操作简单 2. 快速 3. 无需专门实
验室 4. 结果更准确 5. 试剂开放
快速检测非洲猪瘟仪器的简介-用法
【用法】 1. 适用样本类型 本试剂盒适用于猪口鼻眼拭子、组织和血液 或血清等样本中非洲猪瘟病毒的核酸检 测。 2. 样本采集 2.1 口鼻眼 拭子样本的采集： 采集患病猪口鼻眼拭子样本，用专用采样棉签，适度 拭抹口腔分泌物和鼻腔分泌物， 眼分泌物要用拭子在眼睑下充分擦拭， 迅速将棉签放入装有400μL样本稀释液的采 样管中，在靠近顶端处折断 棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥。拭子采样以溶解 到样本稀释液中 可以看到组织悬浮物为最佳。 2.2 组织样本的采集： 无菌采集病猪组 织样本约0.1g，置于1.5mL 无菌离心管中。 2.3 全血样本的采集： 抽 取猪静脉血1mL，置于含有适量抗凝剂的采血管中（抗凝剂建议采用EDTA 或柠 檬酸三钠，不应采用肝素）； 2.4 血清样本的采集： 抽取猪静脉 血1mL, 注入无菌收集管中，室温不超过4小时（约30-60分钟），待样 本自行析出血清，或直接1600rpm离心5分钟分离出血清，转移至新的灭 菌离心管
水泥地面 车轮浸泡
五、快速检测非洲猪瘟仪器的简介
快速检测非洲猪瘟仪器的简介
检测方法
免疫学方 法
胶体金 ELISA
显微镜检验
核酸检测(qPCR)
病原体培养
灵敏度(cfu/mL) 100,000 10,000 10,000 1-100 1-10
检测时间 <15分钟 90-180分钟 5-120分钟 小于60分钟 8-20小时