微生物解答

第一章

1.试述革兰氏染色机制：结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。乙醇脱色：G＋细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色；G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和文联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。复染: G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。

2.渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢的耐热机制的？

芽孢的耐热在于芽孢衣对多价阳离子和水分的渗透很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核欣中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽孢极强的耐热性。

3.何为“栓菌”试验？

即设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固地“栓”在载玻片上，然后在光镜下观察该菌细胞的行为，结果发现，该菌只能在载玻片上不断打转而未作伸缩“挥动”，因而肯定了“旋转论”的正确性

4.对细菌细胞一般构造和特殊构造设计表解。

一般构造：包括细胞壁、细胞质膜、拟核、细胞质。特殊构造:糖被、鞭毛芽孢

第二章

2.试对酵母菌的方式作一表解

酵母菌的繁殖方式：

（一）无性：①芽殖②裂殖③产无性孢子（节孢子、掷孢子、后垣孢子）

（二）有性（产子囊孢子）

3.试图示酿酒酵母的生活史，并对其中各主要过程作一简述

1．子囊孢子在合适的条件下发芽产生的单倍体营养细胞

2．单倍体营养细胞，不断地进行出芽繁殖

3．两个性别不同的营养细胞彼此接合，在质配后即发生核配，形成二倍体营养细胞

4．二倍体营养细胞不进行核分裂，而是不断进行出芽繁殖

5在以醋酸盐为唯一或主要碳源，同时又缺乏氮源等特定条件下

6子囊经自然或人为破壁后，可释放出其中的子囊孢子

4.试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造，并简要说明它们的功能吸取养料假根

吸器

附着：附着胞、附着枝

菌核

特化的营养菌丝休眠（或休眠及蔓延）

菌索

延伸：匍匐枝

菌环

捕食线虫

菌网

菌丝体无性分生孢子头

孢子囊

简单

有性：担子

特化的气生菌丝（子实体）无性：分生孢子器、分生孢子座

复杂有性（子囊果）：闭囊壳、子囊壳、子囊盘

简述功能：

假根：具有固着和吸取养料等功能吸器：吸取宿主细胞内的养料附着胞：用以牢固的黏附在宿主表面附着枝：将菌丝附着于宿主体上菌核：休眠菌丝组织菌索：促进菌体蔓延和抵御不良环境菌环或菌网：捕捉线虫或其他微小动物

5.试列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并提出制备相应原生质体的酶或试剂

细胞壁成分的异同：细菌分为G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+类脂质一般无，而G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为G-，其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。

原生质体制备方法：G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶。 G-菌原生质体获得：EDTA鳌合剂处理，溶菌酶?。放线菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶。霉菌原生质体获得：纤维素酶。酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶。

第三章

1.病毒粒有哪几种对称体制？每种对称又有几类特殊外形？

①螺旋对称型—TMV 呈直杆状，中空②二十面体对称—腺病毒外形呈典型的二十面体③复合对称—T 偶数噬菌体呈蝌蚪状

2.什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。

①吸附噬菌体尾丝散开，固着于特异性受点上。

②侵入尾鞘收缩，尾管推出并插入到细胞壁和膜中，头部的核酸注入到宿主细胞中，而蛋白质衣壳留在细胞壁外。

③增殖增殖过程包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构，以寄主个体及细胞降解物和培养基介质为原料，大

量复制噬菌体核酸，并合成蛋白质外壳。

④成熟（装配）寄主细胞合成噬菌体壳体(T4 噬菌体包括头部、

尾部),并组装成完整的噬菌体粒子。⑤裂解（释放）子代噬菌体成熟后，脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞裂解，从而释放出大量子代噬菌体。

3.什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？

一步生长曲线：定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线称一步生长曲线或一级生长曲线。

潜伏期从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。

裂解期从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。

平稳期指被感染的宿主已全部裂解，溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。

裂解量每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数。

4.简述用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的基本原理和主要步骤。

基本原理：培养皿底部并非十分平整，注入少量培养基铺平底部，作为下层，上层为噬菌体和细菌混合物的培养基注入，铺平，这样使得观察物在同一平面，更利于噬菌斑的观察及分离纯化。

主要步骤：

（1）倒下层琼脂，。融化下层培养基，倒平板（约10mL/皿）待用。

（2）倒上层琼脂。融化上层培养基，待融化的上层培养基冷却至50℃左右时，每管中加入敏感指示菌(大肠杆菌) 菌液0.2mL，待检样品液或上述噬菌体增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上层平板铺平。

（3）恒温培养。30℃恒温培养6～12h观察结果。

（4）观察结果。如有噬菌体，则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑——噬菌斑

5.某微生物发酵厂出现感染噬菌体的异常情况，试讨论异常现象有哪些？并设计方案证实。

异常现象：1.发酵液光密度开始上升，而后下降。但有时也不上升，当把

1%的噬菌体人为的接入罐中，光密度始终处于最低位

2.p H逐渐上升，一般升到不再下降

3.泡沫大、料液略黏

4.镜检时发现菌体减少，发胖，革兰氏染色后呈现红色碎片。严重时，可出现拉丝或网状，或呈鱼刺状，几乎看不到完整菌体。

证实：把发酵液点在平板上能看到噬菌斑

6.如何防止噬菌体对发酵工业的危害？

（1）不使用可疑菌种?认真检查斜面、摇瓶及种子罐所使用的菌种，坚决废弃任何可疑菌种。??

（2）严格保持环境卫生。??

（3）决不排放或随便丢弃活菌液?环境中存在活菌。

?（4）注意通气质量?空气过滤器要保证质量并经常进行严格灭菌，空气压缩机的取风口应设在30～40米高空。? ?（5）加强管道及发酵罐的灭菌。??

?（6）不断筛选抗性菌种，并经常轮换生产菌种。??

?（7）严格执行会客制度

第四章

1.试以能源为主，碳源为辅对微生物的营养方式进行分类，并举例说明。

答：有机物：化能异养微生物（大多原核生物，真菌和原生动物）化学物质（化能营养型）{

无机物：化能自养微生物（硝化、硫化细菌。铁、氢细菌，）

能源{

光能自养微生物（紫硫细菌、蓝细菌、绿硫细菌、藻类）

辐射能（光能营养型）{

光能异养微生物（红螺菌科的细菌）

2.试述通过基团位移运送营养物质的机制。

答：其机制分两步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖经磷酸化而进入细胞内。

3.什么是选择培养基？试举一实例并分析其中为何有选择性功能。

答：选择培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。如酵母富集培养基中的孟加拉红抑制细菌的生长而对酵母菌无影响，偏酸性的环境有利于酵母菌的生长。

4.什么叫鉴别培养基？试以EMB为例分析其具有鉴别功能的原因。

答：鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼鉴别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的伊红和美蓝可抑制革兰氏阳性菌和一些难养的革兰氏阴性菌。产酸菌由于产酸能力不同，菌体表面带质子，与伊红美蓝结合从而有不同的颜色反应，可用肉眼直接判断。

第五章

1.在化能异养微生物的生物氧化过程中，其机制的脱氢和产能的途径主要有几条？列表比较各途径的特点

答：1）EMP途径特点：基本代谢途径，产能效率低，提供多种中间代谢物作为合成代谢原料，有氧时与TCA 环连接，无氧时丙酮酸及其进一步代谢产物乙醛被还原成各种发酵产物，与发酵工业有密切关系。2）HMP途径