从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)
志贺氏菌检测流程
志贺氏菌属检验的标准操作程序【目的】指导检验伤寒、副伤寒沙门氏菌。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【标本的采集】由受检者将采便用已蘸有甘油盐水的棉棒自行插入肛门内，轻轻转动，然后取出，插入带有编号的塑料试管中，交给检验科人员。
【检验程序】采便→立即划线接种SS平板→培养后挑取可疑菌落接种三糖铁斜面及半固体培养基→生化学试验→血清学试验→报告检验结果。
【操作步骤】1. 分离培养采便后立即用采便棒划线接种SS琼脂平板。
36±1℃培养18-24小时，挑取无色半透明的光滑菌落分解乳糖或迟缓分解乳糖的光滑菌落，接种三糖铁斜面及半固体，36±1℃培养18-24小时。
2. 生化学试验凡是三糖铁反应符合志贺氏菌属特征者（斜面产碱或不变色，底层产酸，H2S（—），产气（—），但福氏6型产生少量气体）、无动力、革兰氏阴性杆菌、作V-P试验，苯丙氨酸，赖氨酸，柠檬酸盐，葡萄糖铵试验。
其结果全部阴性者，作血清学试验。
3. 血清学试验挑取三糖铁斜面上的培养物，按下列顺序作玻片凝集试验：四种志贺氏——→福氏————→宋内氏————→志贺氏————→志贺氏多价血清多价血清血清 2型血清 1型血清∣ + ∣ +∣ +∣ +∣—∣↓↓↓↓∣福氏菌宋内氏菌志贺氏2型志贺氏1型↓ 1-6型某型+鲍氏 7-11型某组+：组内分型血清———→鲍氏某型血清： 12-15型全部—：加热破坏K抗原，重做凝集试验16-18型福氏菌的鉴定：凡是与福氏多价血清凝集的菌株，可先用3、4，群6，群7，三种因子血清检查，根据群因子血清反应结果，再用型因子血清检查。
福氏菌抗原成分如下。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)教学文案
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。
二、适用范围：本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2 仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。
5.2 粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm 处〈儿童约2-3cm），同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过1h；如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1 分别标记一个XLD平板（或YS平板、麦康凯平板）和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）（或SF增菌液或沙门志贺培养液）。
沙门氏菌检验程序
沙门氏菌检验程序沙门氏菌是一种常见的致病微生物，能引起人类和动物的感染疾病。
因此，在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。
下面我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。
1. 样品采集对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。
例如，食品样品需要在加工、贮存和分配之前采集，以确保沙门氏菌检验的准确性。
样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。
2. 样品处理根据不同的样品类型和特性，采用不同的处理方法。
例如，对于牛奶、鸡蛋等液态食品，需要进行破坏性处理，以确保沙门氏菌的释放。
对于土壤、粪便等样品，需要进行外层细菌的去除处理。
3. 培养培养基选择含有适当氧气和营养物质的培养基，如SS（Salmonella-Shigella）培养基、XLD（Xylose-Lysine-Desoxycholate）培养基等。
将样品分别接种到不同的培养基上。
4. 培养将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。
将温度设定为37°C至42°C，进行18小时至24小时的培养。
在培养过程中观察样品的生长和变化。
5. 分离取出培养好的样品进行观察。
将预处理样品浸泡在缓冲液中，将溶液过滤。
过滤的溶液留下来，转移到盘子上。
用肉眼观察菌落的形态，观察不同菌落的特点。
根据菌落的特点进行分离。
6. 鉴定在鉴定步骤中，需要进行各种化学试剂处理，如氧化氢酶测试、葡萄糖测试等。
同时需要使用专业仪器，如API试剂盒、ELISA试剂盒等。
通过这些鉴定手段，确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。
7. 结论最后，根据检测结果得出客观和准确的结论，以便针对食品、水源或环境污染等问题采取相应的措施。
总之，沙门氏菌的检验程序是一个非常复杂和严谨的过程，需要专业的实验室和技术人员进行操作。
我们应当高度重视沙门氏菌检验的重要性，以确保我们的食品质量和健康安全。
肠道沙门志贺菌检验方法探讨
191异位妊娠βHCG及孕酮检测的临床意义杜瑞芬457000河南濮阳市第三人民医院检验科doi：10．3969/j．issn．1007－614x．2011．09．1882010年1 12月收治异位妊娠患者80例和正常妊娠的50例女性血清βHCG、孕酮水平比较，探讨βHCG与孕酮联合测定对异位妊娠的诊断价值。
资料与方法一般资料：2010年1 12月收治异位妊娠患者80例（A组），均依据病史、体检、阴道超声或经手术后病理确诊，同期选取在门诊就诊的正常妊娠早孕女性50例（B组）。
两组女性停经时间≤8周，两组年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
方法：①A组患者入院次日晨未经治疗前抽取静脉血5ml，经3000转/分离心5分钟后取血清，测定前标本置于2 8ħ冰箱备检，作初次βHCG和孕酮测定。
以后每周复查1次，同时行B型超声检查以了解宫内外有无妊娠囊、附件区有无包块等。
B组采集静脉血5ml1次，同法检测βHCG、孕酮值。
②检测方法及制品来源：离心后取血清，采用安图生物公司生产的化学发光仪测定孕酮及βHCG值，试剂也由其提供，血清βHCG及孕酮试剂的批内变异和批间变异均＜15%，以上各试验测定均由专人负责完成。
统计学分析：应用SPSS17.0统计软件，计量资料以（XʃS）表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结果A组βHCG、孕酮测量值显著低于B组（P＜0.01），两组血βHCG波动幅度都比较大，但其均值差异有统计学意义（P＜0.05），但就个体而言，血βHCG值存在重叠区域。
讨论血βHCG与早期诊断异位妊娠：HCG是由胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素，有α和β两个亚单位，为妊娠的特异标志，HCG的产生直接与滋养层细胞的数量和对数生长有关，血HCG水平的高低直接关系异位妊娠的可能。
如果HCG滴度下降，说明滋养细胞活性在减退。
血清βHCG是最早应用于异位妊娠诊断的客观指标之一，其价值得到公认，测定血βHCG、超声检查、阴道后穹隆穿刺等是目前诊断EP的常规方法。
肠道沙门氏志贺氏菌检验方法探讨
肠道沙门氏志贺氏菌检验方法探讨【搞要】目的:了解本地区沙门氏菌和志贺氏菌的分布。
方法:对本地区1990年至2008年食品从业人员健康体检肠道门诊及肠道检测点患者检出的沙门氏菌、志贺氏菌进行分类统计。
结果:沙门氏菌977株,B群占57.22%;D1群占13.72%;E1群占11.88%。
志贺氏菌2522株,B群占80.53%;D群占15.82%;B群中以F2a、1a、1b为主。
结论:该区两菌分布情况与国内有关文献报道基本一致。
【关键词】沙门氏菌;志贺氏菌;分布沙门氏菌属广泛分布于自然界,通常寄居在人或动物肠道内。
本菌属中有的除引起肠道感染外,还能引起其它脏器或全身性感染,例如肠热症、败血症等。
志贺氏菌属亦称痢疾杆菌属,引起细菌性痢疾。
人对志贺氏菌易感,只需少量细菌进入肠道即可引起感染。
沙门氏菌属和志贺氏菌属也是引起食物中毒的重要病原菌。
1990～2008年本区疾控中心共检出沙门氏菌1138株、志贺氏菌2522株,分别作了鉴定。
1 对象与方法1.1 检测对象:本区食品从业人员健康体检、肠道门诊及肠道监测点患者。
1.2 检测依据:《标准操作规程》(上海市疾控中心);《卫生防疫细菌检验》;《沙门氏菌属诊断抗原表》(成都生物制成研究所);GB17012-1997感染性腹泻诊断标准及处理原则;GB16002-1995细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则。
1.3 培养基:所用培养基均由上属市疾控中心提供,均在有效期内使用。
1.4 诊断血清:沙门氏菌属诊断血清和志贺氏菌属诊断血清均由成都生物制品研究所提供,均在有效期内使用。
2 病原学检验2.1 采样:调查中采集粪便(肛拭)标本,粪便标本保存于亚硒酸盐胱氨酸增菌液(每份10mL)内,血液标本分离血清后备用。
2.2 标本处理:粪便标本先转种SS、HE琼脂后,放(37±1)℃恒温箱21h,直接进行一次分离培养;同时再将增菌管继续放置于(37±1)℃恒温箱,增菌培养18h后再次转种上述鉴别培养基。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)
从业人员健康体检沙门氏菌.志贺氏菌检测操纵程序【1 】一.目标本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌.志贺氏菌检测等致病菌检测的办法,以规范操纵程序,包管检测数据的有用性.二.实用规模：本办法实用于从人体粪便中沙沙门氏菌.志贺氏菌的分别.判定及保管的梯相干操纵.三.生物安然请求标本及响应的致病菌操纵必须在BSL-2生物安然实验室的生物安然柜中进行.四.试剂及仪器装备采便盒.Cary-Blair输送造就基.亚硒酸增菌液（SF）.改进亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）.沙门志贺造就液.木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）.麦康凯琼脂.沙门显色造就基.结晶紫沙门造就基（YS）.三糖铁（TSI）.动力-吲哚-尿素造就基（MIU）.沙门氏菌属诊断血清.志贺氏菌属诊断血清.API20E生化试剂条.磁珠菌种保管管4.2 仪器装备恒温造就箱.微生物判定仪五.采样办法5.1 标本应为新颖的或转移至Cary-Blair输送造就基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair输送造就基的粪便拭子.肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采取.5.2 粪便标本：应收集天然排出的新颖粪便,取稀水样.粘血样.脓血样,黏液样部分.盛于干净.湿润.无吸水性的无菌容器,防止混入尿液.水和其他物资.标本：若无法获得粪便（如排便艰苦或婴幼儿）,也可以采取肛拭子,即无菌棉拭子用心理盐水潮湿后,拔出肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm）,统一偏向轻轻扭转2-3周.以目测能见到粪便为准.拔出Cary-Blair输送造就基.5.4 标本收集后立刻送至实验室进行检测,若室温保管,不克不及超出1h;如不克不及立刻送检,应放入Cary-Blair输送造就基中冷藏前提下24小时内送检.六.磨练程序七.操纵步调7.1 分别标识表记标帜一个XLD平板（或YS平板.麦康凯平板）和1管9ml改进亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）（或SF增菌液或沙门志贺造就液）.7.2 用1个无菌拭子取少量标本（不要使拭子粘得太多,尽量从可见血或黏液的部位收集）接种在XLD平板的第一区,接着把拭子放入SBG增菌液.再灭菌接种环在XLD平板的其余区进行划线接种.假如是Cary-Blair输送造就基的粪便拭子,则轻搅混杂标本后接种增菌液与平板.7.3 所有造就基均放入36℃±1℃造就,SBG的最佳增菌时光是16～18h（建议天世界午4~5时接种标本,第二天早上8~10时用增菌液划平板）.7.4 不雅察平板：取造就后的平板,不雅察有无可疑菌落.XLD平板可疑菌落不雅察：志贺菌在XLD平板上为粉红或无色.透明.滑腻.潮湿.边沿整洁.圆形菌落,直径1-2mm,而大部分的大肠杆菌类的菌落为黄色.混浊.凸起.潮湿.边沿整洁或不规矩,直径2-3mm.大多半沙门菌在XLD平板上中间黑色的透明.滑腻.潮湿.边沿整洁.圆形的菌落.（图2）7.4.２YS平板可疑菌落不雅察：7.4.３麦康凯平板可疑菌落不雅察：志贺菌在麦康凯平板上为无色至浅粉色.半透明.滑腻.潮湿.边沿整洁或不规矩.圆形菌落,直径2-3mm;大多半沙门菌为无色菌落,粉红色,带或不带黑心,伤寒沙门菌为无色菌落;而大部分的大肠杆菌类的菌落为粉红或红色.混浊.凸起.潮湿.边沿整洁或不规矩,直径3-4mm.7.4.４SBG肉汤增菌：SBG增菌16~18小时后,划线接种XLE平板或沙门显色平板,放入36℃±1℃造就18～24h.沙门显色平板可疑菌落不雅察：典范的沙门菌在沙门显色平板上为紫色的菌落,直径2-3mm.建议的初步筛查计划（初步生化特点见表1）：表１沙门菌.伤寒沙门菌.志贺菌及罕有肠道菌的初步生化特点A：粪便（或肛拭子）SBG或SF增菌XLD分别接种TSI和MIUB：粪便（或肛拭子）SBG或SF增菌YS分别接种TSI和MIUC：粪便（或肛拭子）SBG或SF增菌XLD和麦康凯分别接种TSI和MIUD：粪便（或肛拭子）SBG或SF增菌 YS和沙门显色分别接种TSI和MIUE：粪便（或肛拭子）SBG或SF增菌 XLD和沙门显色分别接种TSI和MIU7.5 生化初步判定每个平板挑取3~5个分别较好的单个可疑菌落,分别接种到三糖铁（TSI）和动力-吲哚-尿素造就基（MIU）,36℃±1℃造就18～24h.沙门菌和志贺菌的生化特点见表2.7.6 体系生化实验沙门菌和志贺菌初步判定阳性菌经转种养分琼脂单,取单个菌落进行体系生化判定（可以应用APE20E或全主动生化判定体系进行）.志贺菌血清学实验.1挑取生化反响实筛相符志贺菌的养分琼脂斜面,起首用四种多价血清做玻片凝聚反响(4种多价包含：A群1.2型;B群和D群).凝聚者则用B群多价.D群和A1.A2.血清分别凝聚..2若多价血清不凝聚,可能为C群或A群的3～12型,应进行C群的四种多价和A群另三种多价血清做玻片凝聚.沙门菌血清学实验.1挑取生化反响实筛相符沙门菌的养分琼脂斜面,起首用A-F群O多价血清做玻片凝聚反响..2若凝聚可按罕有O因子检出频率,按照O4→O10→O9→O7→O8→O19→O2→O11次序凝聚..3 H抗原凝聚所有凝聚阳性的菌落,都要同时用心理盐水做凝聚实验,只有不消失自凝时,才可以陈述阳性成果.8 成果陈述8.1 在初步生化判定相符后,可以先将可疑菌落进行革兰氏染色,最后分解生化及血清学成果,可以陈述检出（或未检出）沙门菌（或志贺菌）.对于从业人员体检成果已经纳入磨练软件治理的单位,可以直接在磨练软件中录入响应成果.8.3 其他单位可以设计专门的陈述格局反馈给送检单位或送检科室,磨练陈述中应至少包含姓名,性别,年纪,体检编号,检测成果.8.4 检测成果为阴性,可以陈述为未检出肠道沙门菌和志贺菌;检测成果为阳性,依据检测情形陈述具体的型别.8.5 磨练部分应当保存所有受检样品的根本信息,检测到阳性标本,应当保管具体的检测记载,依据须要供给应送检单位或科室,以及上级营业单位.9 菌株的保管对于生化及血清学成果相符沙门菌或志贺菌的菌株用磁珠保管管保管菌种,放入-２０℃或-７０℃保管,按拍照干请求上送菌株.。
沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验(二)
沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验（二）5.1 前增菌、增菌和分别 5.1.1 的前增菌、增菌和分别按GB4789.4举行。
在食品格业从业人员的肠道沙门氏菌带菌检验时，采集的标本应增菌，不应前增菌。
食物中毒标本不应前增菌，所采集的标本同时做增菌和不增菌步骤。
5.1.2 志贺氏菌的增菌和分别按GB4789.5举行。
没有厌氧培养条件的试验室可以采纳BCT增菌液。
食物中毒患者的粪便标本同时做增菌和不增菌步骤。
5.1.3 的增菌和分别按GB4789.6和GB4789.36举行。
食物中毒标本同时做增菌和不增菌步骤。
5.2 噬菌体实验 5.2.1 培养基的预备养分琼脂平板(含琼脂1%～1.5%,为防止变形杆菌的扩散生长，可按0.02%量加入)，养分琼脂加热融化后，加入每个9cm平皿中20mL～25mL,放在水平台面上待其凝固。
翻转平板，在36℃±1℃培养箱内半开皿倒置约1h,或50℃±1℃培养箱内半开皿倒置约30min,以烘干培养基表面水分。
5.2.2 实验菌液的预备5.2.2.1 自挑选性琼脂平板上分离挑取2个以上典型或可疑菌落，检验时，挑取乳糖阴性产H2S或不产H2S的菌落，和乳糖阳性产H2S的菌落。
检验大肠埃希氏菌时挑取乳糖阳性或乳糖阴性的菌落。
检验志贺氏菌时挑取典型或可疑菌落分离接种TSL半固体和养分琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养20h～24h后选取三糖铁底层产酸、斜面产碱，不产H2S,不产气无动力的菌落。
下述两种办法可供制备实验菌液时选用。
5.2.2.2 办法一：将待检菌落接种于养分肉汤管内，于36℃±1℃培养14h～24h。
挑取此肉汤培养物1满环(约5uL),稀释于盛有1mL～2mL的养分肉汤管内，使成为1:200～1:400稀释菌液，含菌量约为1×106CFU∕mL。
5.2.2.3 办法二：用接种针在鉴别平板上挑取可疑菌落，稀释于盛有1mL～2mL养分肉汤管内，含菌量约为1×106CFU/mL。
从业人员预防性健康体检沙门_志贺氏菌检验PCR方法快速筛查的应用_李欣
1. 1 对象 随机抽取 2012 ～ 2013 年沈阳地区从业人员健康体检 96 752 份肛拭子标本．
1. 2 试剂 使用深圳市生科源技术有限公司生产的一次性多功能采样器（ 内含有专门针对沙门氏菌和志贺
氏菌的增菌液） ，及其生产的沙门氏菌和志贺氏菌双色实时荧光 PCＲ 试剂盒． 科玛嘉沙门氏菌显色 培养基、XLD 培养基、TSI 琼脂、API20E 生化鉴定卡． 1. 3 仪器设备
Abstract： Purpose： Detection rapidly on pathogenic bacterial in food and some other things by
real-time PCＲ for employees，and compare w ith plating method to know the application value of real-time PCＲ． M ethod： Pick at random 96 752 pieces of anal sw ab sample from employees，and detect Salmonella and Shigella by real-time PCＲ and plating method respectively，so as to compare the detectable rate by both methods． Ｒesult： among 96 752 pieces of sample，91 pieces of sample are detected as Salmonella by real-time PCＲ，83 pieces of sample are detected as positive isolation． 41 pieces of sample show positive of Shigella，30 pieces of sample are detected as positive isolation． But detect nothing by traditional plating method． Conclusion： Ｒeal-timePCＲ is able to use w ell for screening pathogenic bacterial for employees，and also increase detectable rate and
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从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序
一、目的
本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病
菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。
二、适用范围：
本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保
存的梯相关操作。
三、生物安全要求
标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全
柜中进行。
四、试剂及仪器设备
4.1试剂
采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD ）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基
（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU ）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管 4.2仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪
五、采样方法
5.1标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标
本，仅在病人无粪便标本时采用。
5.2粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm）,同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过1h; 如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序
七、操作步骤
7.1分别标记一个XLD平板（或YS平板、麦康凯平板）和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）（或SF增菌液或沙门志贺培养液）。
7.2用1个无菌拭子取少量标本（不要使拭子粘得太多，尽量从
可见血或黏液的部位收集）接种在XLD平板的第一区，接着把拭子放入SBG增菌液。
再灭菌接种环在XLD平板的其余区进行划线接种。
如果是Cary-Blair运送培养基的粪便拭子，则轻搅混合标本后接种增菌液与平板。
7.3所有培养基均放入36C士1C培养，SBG的最佳增菌时间是16〜18h（建议每天下午4~5时接种标本，第二天早上8~10时用增菌液划平板）。
7.4观察平板：取培养后的平板，观察有无可疑菌落。
7.4.1 XLD平板可疑菌落观察：志贺菌在XLD平板上为粉红或无
色、透明、光滑、湿润、边缘整齐、圆形菌落，直径1-2mm，而大部分的大肠杆菌类的菌落为黄色、混浊、凸起、湿润、边缘整齐或不规则，直径2-3mm。
大多数沙门菌在XLD平板上中心黑色的透明、光滑、湿润、边缘整齐、圆形的菌落。
（图2）
7.4. 2 YS平板可疑菌落观察：
74 3麦康凯平板可疑菌落观察：志贺菌在麦康凯平板上为无色至浅粉色、半透明、光滑、湿润、边缘整齐或不规则、圆形菌落，直径2-3mm;大多数沙门菌为无色菌落，粉红色，带或不带黑心，伤寒沙门菌为无色菌落；而大部分的大肠杆菌类的菌落为粉红或红色、混浊、凸起、湿润、边缘整齐或不规则，直径3-4mm。
7.4.4 SBG肉汤增菌：SBG增菌16~18小时后，划线接种XLE 平板或沙门显色平板，放入36C士1C培养18〜24h。
沙门显色平板可疑菌落观察：典型的沙门菌在沙门显色平板上为紫色的菌落，直径2-3mm。
7.4.4建议的初步筛查方案（初步生化特征见表1）:
表
沙门菌、伤寒沙门菌、志贺菌及常见肠道菌的初步生化特征
A :粪便（或肛拭子）—SBG或SF增菌—XLD分离
一接种TSI和MIU
B :粪便（或肛拭子）-^SBG或SF增菌一"YS分离
—接种TSI和MIU
C:粪便（或肛拭子）—SBG或SF增菌一-XLD和麦康凯
分离—接种TSI和MIU
D :粪便（或肛拭子）一SBG或SF增菌一YS和沙门显色
分离一接种TSI和MIU
E:粪便（或肛拭子）—SBG或SF增菌—XLD和沙门显色
分离—接种TSI和MIU
7.5生化初步鉴定
每个平板挑取3~5个分离较好的单个可疑菌落，分别接种到三糖铁（TSI）和动力-吲哚-尿素培养基（MIU ）, 36C 士1C培养18〜24h。
沙门菌和志贺菌的生化特征见表2。
7.6系统生化试验
沙门菌和志贺菌初步鉴定阳性菌经转种营养琼脂单，取单个菌落进行系统生化鉴定（可以使用APE20E或全自动生化鉴定系统进行）。
7.7血清学试验
7.7.1志贺菌血清学试验
7.7.1.1挑取生化反应实筛符合志贺菌的营养琼脂斜面，首先用四
种多价血清做玻片凝集反应（4种多价包括：A群1、2型；B群和D 群）。
凝集者则用B群多价、D群和A1、A2、血清分别凝集。
7.7.1.2若多价血清不凝集，可能为C群或A群的3〜12型，应进行C 群的四种多价和A群另三种多价血清做玻片凝集。
7.7.2沙门菌血清学试验
7.7.2.1挑取生化反应实筛符合沙门菌的营养琼脂斜面，首先用
A-F群O多价血清做玻片凝集反应。
7.7.2.2若凝集可按常见O因子检出频率，按照04-010-09- 07—08—019—02—O11 顺序凝集。
7.723 H抗原凝集
7.7.3所有凝集阳性的菌落，都要同时用生理盐水做凝集试验，只有不出现自凝时，才可以报告阳性结果。
8结果报告
8.1在初步生化鉴定符合后，可以先将可疑菌落进行革兰氏染色，最后综合生化及血清学结果，可以报告检出（或未检出）沙门菌（或志贺菌）。
8.2对于从业人员体检结果已经纳入检验软件管理的单位，可以直接在检验软件中录入相应结果。
8.3其他单位可以设计专门的报告格式反馈给送检单位或送检科
室，检验报告中应至少包括姓名，性别，年龄，体检编号，检测结果。
8.4检测结果为阴性，可以报告为未检出肠道沙门菌和志贺菌；检测结果为阳性，根据检测情况报告具体的型别。
8.5检验部门应该保留所有受检样品的基本信息，检测到阳性标本，应该保存详细的检测记录，根据需要提供给送检单位或科室，以及上级业务单位。
9菌株的保存
对于生化及血清学结果符合沙门菌或志贺菌的菌株用磁珠保存管保存菌种，放入-2 0C或-70C保存，按照相关要求上送菌株。