弧菌

分 类
WHO腹泻控制中心将该菌属为四类
O-1群霍乱弧菌
不典型O-1群霍乱弧菌
非O-1群霍乱弧菌
其他弧菌
致病性
致病物质
定居因子：菌毛（acf、tcpA基因）、鞭 毛、溶血溶细胞蛋白（hlyA基因）、血 凝素（hap基因）、荚膜等 霍乱肠毒素（c为强烈的致泻毒素。
鉴定
根据霍或乱弧菌在各种选择培养基上的特点， 挑选可疑菌落进行鉴定。鉴定以血清学（玻 片凝集）为主，结合形态学、生化反应作出 判断。
鉴定
1） 玻片凝集试验：从分离培养基上挑取可疑菌落于霍乱弧菌 多价诊断血清作玻片凝集试验。诊断血清应稀释成1:321:64的效价使用，立即出现凝集者为阳性，同时设生理盐水
和阳性细菌株对照。
2） 形态学检查：取纯培养物涂片革兰氏染色，观察菌体形态 及染色性。用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。
鉴定
3） 生化反应：霍乱弧菌氧化酶试验、靛基质试验、粘丝试验 和霍乱红试验均阳性。 ①粘丝试验：用于测定霍乱弧菌形成粘丝的特性。将0.5％去氧 胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液，1min内悬液由 混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来。霍乱 弧菌古典生物型和El Tor生物型均呈阳性。
鉴定
② 霍乱红试验：出现蔷薇色，为霍乱红试验阳性。由
于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，故无特异性。 霍乱弧菌含有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，霍 乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐，因此当霍乱弧菌 培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中，所产生的亚硝 酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚，滴加浓硫酸即可出 现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性）
免 疫 力
病后免疫力不强，可重复感染。
生物学性状
1、形态：弧状、杆状、丝状等多形性，G-，单端单鞭毛
2、培养特性：营养要求不高，嗜盐，在含3.5% Nacl的培养基 中生长良好，超过8%不生长，PH7.0-9.5，最适PH7.7-8.0在 TCBS平板上形成2~3mm的绿色菌落,嗜盐选择平板上，菌落较 大圆形隆起，半透明或不透明的菌落。SS上蜡滴状，有辛辣味。 3.生化反应：氧化酶阳性；发酵葡萄糖、麦芽糖，不发酵乳糖、 蔗糖；吲哚、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验 均阳性；耐高盐培养基；神奈川（+）。
鉴定
⒊
理盐水一滴，取被检菌18-24h培养物少许在盐 水中制成浓厚菌悬液，然后加一滴2.5％鸡红 细胞悬液，充分混匀，
鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生
1min内出现 凝集者为阳 性，红细胞 呈均匀分散 者为阴性。 El Tor生物 型为阳性， 古典型为阴 性。
鉴定要点：
确诊O1群霍乱弧菌必须具备的条件：





可疑菌落纯培养
KP或毒素测定 KP： 神奈川现象 菌种鉴定（生化、血清学）

微生物检验
2.标本采集：及时接种或用碱性胨水或卡-布培养基运送。 3.分离培养与鉴定： （1）增菌培养： （2）分离培养： （3）鉴定：
诊断与防治

标本：粪便、肛拭、剩余食物或创面材 治疗：庆大霉素、SMZ等
②生物型别的鉴定：目前，两型主要依靠第Ⅳ组霍
乱噬菌体裂解试验进行鉴别，并辅以多粘菌素敏感试 验、鸡红细胞凝集试验、V－P试验和溶血试验。
鉴定
⒈ 第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验：
第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液（106/ml）一般仅裂 解古典型，而不裂解El Tor型。
⒉ 多粘菌素B敏感试验：
取被检菌2-3h肉汤培养物点种到含药营养琼脂平板 上（多粘菌素B50U／ml）,37℃培养24h，El Tor生物 型生长，而古典型敏感。
所致疾病：霍乱（2号病）
传染源：病人和带菌者、 污染的水源或食物 传播途径：粪—口
血容量减少性休克
酸中毒
呕吐 剧烈腹泻：米泔水样便 肌肉痉挛
致病性
免 疫 性
病后产生牢固免疫，肠道分泌型IgA为主要的中和抗体。
生物学性状
形态与染色
形状：弧形或逗点状
排列：“鱼群状”
染色性：G 单端单鞭毛 有些菌株有荚膜 活菌悬滴观察，运动极为活泼， 呈流星穿梭运动。
郭庆合
概述

弧菌科（Vibrionaseae）包括一群氧化酶阳 性、具有端极鞭毛、动力阳性的细菌，有4个 菌属，其中，弧菌属是一群氧化酶阳性，发 酵葡萄糖，对弧菌抑制剂O/129（二氨基二异 丙基喋啶）敏感的细菌。
弧菌属与类似菌属的鉴别要点
试验 弧菌属 O/129敏感 S 肌醇 － 明胶液化 + 甘露醇 + 精氨酸双水解酶 － 赖氨酸脱羧酶 + 气单胞菌属 R － + + + + 邻单胞菌属 S + － － + +
1、涂片为革兰氏阴性弧菌或杆菌； 2、TCBS等选择培养基上典型的菌落特征； 3、动力阳性； 4、O1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验阳性。
防 治 原 则


保护水源、做好粪便的管理、食品卫生工作。
接种疫苗：霍乱弧菌死菌苗、类毒素、新疫苗
（减毒重组活疫苗、菌苗加类毒素混合苗、霍乱
-伤寒杂交菌苗等）。

及时和适当的补充液体和电解质，应用抗菌药物 （链霉素、氯霉素、强力霉素、磺胺类药物等）
③ O/129敏感试验：将O/129（2，4二氨基－6，7－二
异丙基喋啶）药敏纸片（10－150μ g）贴在接种有待 测菌的琼脂平板上作纸片扩散试验，凡药物纸片周围 出现抑菌环者为敏感。
鉴定
4） 霍乱弧菌的分型鉴别试验：
①血清分型：用小川型和稻叶型单价诊断血清作玻片
凝集。与小川型血清凝集而与稻叶型血清不凝集者为 小川型，反之为稻叶型。在两个单价血清中均有明显 凝集者为彦岛型。
V.parahemolyticus

嗜盐性细菌 分布于近海岸的海水、海底沉积物和鱼类、 贝类等海产品中 海产品食物中毒

致
致病物质
病
性
耐热性溶血毒素：与动物红细胞膜表面的神经节脂受体 结合而致溶血。 不耐热溶血毒素
所致疾病：食物中毒、创伤感染、败血症
传染源：海产品或盐腌渍品
传播途径：经口
临床症状：腹痛、腹泻、呕吐与发热、水样便

掌握：霍乱弧菌的生物学性状、微生物 学检验 了解：弧菌的种类。

概述

弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界，尤以水中 为多，有100多种。主要致病菌为霍乱弧菌和 副溶血弧菌（致病性嗜盐菌）。前者引起霍 乱；后者引起食物中毒。
是一大群菌体短小、弯曲成弧形的革兰 氏阴性细菌。 分布广泛，以水中为最多。 特点：（1）在碱性培养基中生长良好 （2）单端单鞭毛，运动活泼 （3）氧化酶（+）
生物学性状
神奈川（kanagawa)试验：对人、兔等动物 红细胞溶解，对马红细胞不溶血为（+）。是 鉴定致病性与非致病性菌株的一项重要指标。 4、抵抗力：嗜盐，不耐酸



微生物检验
副溶血弧菌检验程序 标本 直接接种TCBS 嗜盐菌选择性平板 4%NaCl胨水培养基 TCBS 嗜盐菌选择性平板
抗原结构分型、变异性
O抗原：具群特异性，155个血清群 O-1群 稻叶型 小川型
生物学 性状
彦岛型 非O-1群 霍乱弧菌（O2—138）亦称不凝集弧菌 O139群 霍乱弧菌 H抗原：不耐热，无特异性 变异性：形状变异、毒力变异
培养特性与生化反应
生物学 性状
营养要求不高：普通琼脂生长良好，16-44℃均可生长 耐硷不耐酸，在pH8.8～9.0的碱性培养基（硷性蛋白胨水 或平板）中生长良好。 典型菌落：选择培养基TCBS上菌落黄色，4号琼脂平板菌 落中心为褐色，血平板有的菌株可形成溶血环 生化反应：氧化酶（+）蔗糖（+）动力（+），赖氨酸、 鸟氨酸脱羧酶（+）精双（-），无盐生长，高盐不长
霍乱弧菌在TCBS平板上的菌落
抵 抗 力
较强，水中较长的存活时间。 耐硷不耐酸。 对漂白粉敏感，对热敏感。
生物学 性状
检验程序
微生物学检查法
霍乱是烈性传染病，对首例病人的确诊应快速、准 确，并及时作疫情报告。 标本采集：尽早、及时接种用碱性蛋白胨水 或卡-布培养基运送（专人） 直接镜检：有无鱼群样排列的弧菌 分离培养：碱性培养基、TCBS、4号琼脂平板 快速诊断 荧光球试验 PCR