厌氧性细菌--第一节 厌氧芽胞杆菌(2)
2023年度卫生资格考试大纲---药学(中级)
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苯二氮
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谢途径和用途
氟哌啶醇的结构类型和用途
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解热镇痛药物的分类
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甲基多巴的稳定性和用途氯沙坦的作用和用途
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医疗机构从业人员行为规范与医学伦理学
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专业知识药理学
苯二氮
用机制㊁用途与不良反应
巴比妥类的作用和应用
反应及中毒解救
水合氯醛㊁
癫痫类型
苯妥英钠
的药理作用
良反应
其他药物特点
抗癫痫药的临床应用原则硫酸镁的药理作用
生物药剂学与药动学
专业实践能力岗位技能
续表
临床药物治疗学
专业进展。
厌氧培养方法
厌氧性细菌的分离培养法厌氧菌需有较低的氧化—还原势能才能生长 (例如破伤风梭状芽孢杆菌需氧化—还原电势降低至 0.11V 时才开始生长 )，在有氧的环境下，培养基的氧化—还原电势较高，不适于厌氧菌的生长。
为使培养基降低势，降低培养环境的氧压是十分必要的。
现有的厌氧培养法甚多，主要有生物学，化学和物理学 3 种方法，可根据各实验室的具体情况而选用。
1．生物学方法培养基中含有植物组织 (如马铃薯、燕麦、发芽谷物等 )或动物组织 (新鲜无菌的小片组织或加热杀菌的肌肉、心、脑等 ) ，由于组织的呼吸作用或组织中的可氧化物质氧化而消耗氧气(如肌肉或脑组织中不饱和脂肪酸的氧化能消耗氧气，碎肉培养基的应用，就是根据这个原理 )，组织中所含的还原性化合物如谷胱甘肽也可以使氧化—还原电势下降。
另外，将厌氧菌与需氧菌共同培养在一个平皿内，利用需氧菌的生长将氧消耗后，使厌氧菌能生长。
其方法是将培养皿的一半接种吸收氧气能力强的需氧菌(如枯草杆菌 )，另一半接种厌氧菌，接种后将平皿倒扣在一块玻璃板上，并用石蜡密封，置37恒温箱中培养2~3d 后，即可观察到需氧菌和厌氧菌均先后生长。
2．化学方法利用还原作用强的化学物质，将环境或培养基内的氧气吸收，或用还原氧化型物质，降低氧化—还原电势。
此法系用连二亚硫酸纳 (Sodium hydrosulphite) 和碳酸钠以吸收空气中的氧气，其反应式如下：Na2S204 十Na2C03十O2 一→ Na2SO4十Na2SO3 十C02取一有盖的玻璃罐，罐底垫一薄层棉花，将接种好的平皿重叠正放于罐内 (如系液体培养基，则直立于罐内 )，最上端保留可容纳 1~2 个平皿的空间 (视玻罐的体积而定 )，按玻罐的体积每1000cm3 空间用连二亚硫酸纳及碳酸钠各 30g，在纸上混匀后，盛于上面的空平皿中，加水少许使混合物潮湿，但不可过湿，以免罐内水分过多。
若用无盖玻罐，则可将平皿重叠正放在浅底容器上，以无盖玻罐罩于皿上，罐口周围用胶泥或水银封闭 (如图１－５ )。
厌氧细菌anaerobicbacteria
创伤性感染 (厌氧性伤口)破伤风杆菌繁殖 分泌痉毒素运动神经 终板吸收
神经纤维 间隙扩散
淋巴吸收 血液
中枢神经与脊髓内抑制性中间神经元突触前体膜上GMI结合 阻断
甘氨酸能中间神经元 γ-氨基酸能神经元
释放
甘氨酸 γ-氨基酸
导致
骨骼肌痉挛
破 伤 风 毒 素 的 致 病 作 用
三、防治原则
㈠ 一般预防：正确处理伤口（伤口清创、扩创、迅速破坏厌 氧性伤口）；新法接生。
㈡ 致病因素与致病条件： 1、致病因素：破伤风痉挛毒素(tetanospasmin) 破伤风溶血毒素(tetanolysin) 2、破伤风痉挛毒素的结构与致病过程。 3、所致疾病：破伤风 表现：全身骨骼肌兴奋性增高，张口困难，
牙关紧闭，苦笑面容，颈项强直，角弓反张，呼 吸困难，最后窒息死亡。 ㈢ 免疫性：病后免疫力不牢固，可再感染、患病后 仍需接种破伤风类毒素。
1、感染的条件：
⑴ 全身免疫功能下降，如肿瘤、糖尿病、胶原 性疾病等
⑵ 局部防御屏障受到破坏，如拔牙、外科手术、 肠穿孔、开放性骨折等。
⑶ 组织缺血、缺氧及Eh降低：局部血管受损、 水肿、肿瘤压迫、包扎过紧等。
2、无芽孢厌氧菌的致病物质
毒力因子
粘附素 荚膜 菌毛 血凝素
抗有毒氧基团 超氧化物歧化酶 触酶
产毒： O2 ＋e→O2-
解毒：
超氧化物
2O2-＋2H+ 歧化酶 O2+H2O2
O2－＋H2O2→OH- +OH＋+O2
H2O2＋H2O2 过氧化物酶 2H2O + O2
O2 ＋OH→OH- + O2
H2O2＋H2R 过氧化氢酶 2H2O + R
医学微生物学习题及答案9-厌氧性细菌
医学微生物习题厌氧性细菌测试题一.名词解释1.汹涌发酵2.破伤风抗毒素（TAT）3.厌氧性细菌二.填空2.破伤风杆菌的芽胞位于菌体的部位，使菌体呈状。
3.破伤风类毒素是破伤风外毒素经处理后，消失而完整的人工主动免疫制剂。
4.破伤风的治疗应给予注射中和游离的毒素以及大剂量杀伤繁殖体的破伤风杆菌。
5.破伤风痉挛毒素作用部位是，作用机理是。
6.破伤风杆菌可产生和两种毒素。
7.注射破伤风类毒素进行预防接种，主要对象是儿童、和。
8.DPT三联疫苗是由、和三种成分组成。
9.肉毒杆菌主要通过感染，引起以为主要症状的肉毒中毒。
10.肉毒杆菌的芽胞位于菌体的部位，使菌体形成状。
11.产气荚膜杆菌在血平板上形成溶血环，在牛乳培养基中出现现象。
12.产气荚膜杆菌的芽胞位于菌体的部位，比菌体。
13.破伤风杆菌经感染 ,其感染条件是伤口要具备 .致病因素是 .14.目前已知毒性最强的生物毒素是 .15.在无芽胞厌氧菌感染中,以最常见 ,临床分离的厌氧菌70%～80%是该菌 .16.破伤风感染条件是、和。
三.A型选择题1.长期使用抗生素易引起A.无芽胞厌氧菌感染；B.厌氧芽胞杆菌感染；C.病毒感染；D.缺陷病毒感染；E.梅毒螺旋体感染2.以下关于厌氧芽胞杆菌的描述正确的是A. 厌氧芽胞杆菌属于厌氧芽胞梭菌属；B.多数为病原菌，少数为腐生菌；C.内、外毒素同时致病；D.多引起内源性感染；E.繁殖体抵抗力强于其他无芽胞细菌3.注射TAT的目的是A.对易感人群进行预防接种；B.对可疑破伤风患者治疗及紧急预防；C.杀灭伤口中繁殖体的破伤风杆菌；D.主要用于儿童的预防接种；E.中和与神经细胞结合的毒素4.血平板上形成双层溶血环的细菌是A.葡萄球菌；B.肺炎球菌；C.破伤风杆菌；D.产气荚膜杆菌；E.白喉杆菌5.引起气性坏疽的细菌是A.乙型溶血性链球菌；B.肉毒杆菌；C.炭疽杆菌；D.分枝杆菌；E. 产气荚膜杆菌6.疱肉培养基可用来培养A.枯草杆菌；B.炭疽杆菌；C.百日咳杆菌；D. 产气荚膜杆菌；E.流感嗜血杆菌7.肉毒毒素的特点是A.可被肠道蛋白酶水解；B.引起肌肉强直性收缩;C.引起肌肉大块坏死;D.主要经过消化道吸收;E.细菌生活状态下释放8.肉毒梭菌的芽胞特点是A.椭圆形 ,位于菌体顶端;B.椭圆形 ,位于菌体次极端;C.正圆形 ,位于菌体顶端;D. 正圆形 ,位于菌体次极端;E. 椭圆形 ,小于菌体9.肉毒毒素的作用部位是A.脊髓前脚;B.脊髓后脚;C.外周神经-肌肉接头处;D.呕吐中枢;E.血管内皮10.肉毒毒素的致病机制是A.抑制细胞蛋白质合成;B.阻碍乙酰胆碱释放;C.激活腺苷酸环化酶;D.与Ab Fc段非特异性结合;E.破坏CD4 T细胞11.高倍镜下形成＂汤勺状＂的细菌是A.白喉杆菌;B.枯草杆菌;C.炭疽杆菌;D.产气荚膜杆菌;E.肉毒梭菌12.肉毒病的感染途径是A.食用污染食物;B.污染伤口;C.节肢动物叮咬;D.吸入污染的空气;E.接触肉毒患者的用品13.人体肠道正常菌群中占绝对优势的细菌是A.大肠杆菌;B.无芽胞厌氧菌;C.链球菌;D.变形杆菌;E.白色念珠菌14.破伤风特异性治疗可应用A.抗生素;B.抗毒素;C.类毒素;D.细菌素;E.破伤风菌苗15.关于厌氧芽胞杆菌 ,下列哪项是错误的A.均为革兰阳性杆菌;B.都能形成芽胞;C.都能通过伤口感染;D.都是厌氧菌;E.主要分布于土壤16.关于产气荚膜杆菌的致病性 ,正确的是A.可引起严重的创伤感染;B.以组织气肿、水肿、坏死为主要病理表现;C.致病因素为毒素和酶；D.可致食物中毒;E.以上均对17.下列哪项不是肉毒梭菌的特点A.肉毒毒素是毒性最强的物质;B.肉毒毒素作用于胆碱能神经末梢,抑制乙酰胆碱的释放;C.食入含有肉毒毒素的食物致病;D.革兰染色阳性,形成芽胞,有荚膜;E.肉毒中毒死亡率高18.破伤风抗毒素治疗破伤风的机制是A.中和游离的外毒素; D.中和与神经细胞结合的外毒素; C.抑制破伤风杆菌生长; D.在补体参与下溶解破坏破伤风杆菌; E.减轻临床症状19.正常情况下无芽胞厌氧菌不存在的部位是A.子宫腔;B.尿道;C.肠道;D.阴道;E.上呼吸道20.下列能产生细胞毒物质的细菌是（）A.破伤风杆菌;B.结核杆菌;C.幽门螺杆菌;D.产气荚膜杆菌;E.肉毒梭菌四、问答题1.试述破伤风杆菌的感染条件、致病机制和防治原则 .2.试述无芽胞厌氧菌的致病条件 .3.无芽胞厌氧菌的感染特征包括哪些?4.简述肉毒梭菌的致病机理 .医学微生物习题厌氧性细菌测试题答案一.名词解释1.汹涌发酵:产气荚膜梭菌在牛乳培养基中生长时发酵乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲碎,并将封闭的凡士林冲至试管口的现象.2.破伤风抗毒素（TAT）:可中和破伤风痉挛毒素的抗血清.主要用于破伤风感染的治疗和紧急预防.3.厌氧性细菌:是一类必须在无氧或氧化还原电势低的环境中才能生长的细菌.主要包括:G+芽孢梭菌、G+无芽孢杆菌、G-无芽孢杆菌、G+球菌、G-球菌。
厌氧培养方法
厌氧性细菌的分离培养法厌氧菌需有较低的氧化—还原势能才能生长（例如破伤风梭状芽孢杆菌需氧化—还原电势降低至0.11V 时才开始生长），在有氧的环境下，培养基的氧化—还原电势较高，不适于厌氧菌的生长。
为使培养基降低势，降低培养环境的氧压是十分必要的。
现有的厌氧培养法甚多，主要有生物学，化学和物理学3 种方法，可根据各实验室的具体情况而选用。
1 ．生物学方法培养基中含有植物组织（如马铃薯、燕麦、发芽谷物等）或动物组织（新鲜无菌的小片组织或加热杀菌的肌肉、心、脑等），由于组织的呼吸作用或组织中的可氧化物质氧化而消耗氧气（如肌肉或脑组织中不饱和脂肪酸的氧化能消耗氧气，碎肉培养基的应用，就是根据这个原理），组织中所含的还原性化合物如谷胱甘肽也可以使氧化—还原电势下降。
另外，将厌氧菌与需氧菌共同培养在一个平皿内，利用需氧菌的生长将氧消耗后，使厌氧菌能生长。
其方法是将培养皿的一半接种吸收氧气能力强的需氧菌（如枯草杆菌），另一半接种厌氧菌，接种后将平皿倒扣在一块玻璃板上，并用石蜡密封，置37 恒温箱中培养2~3d 后，即可观察到需氧菌和厌氧菌均先后生长。
2 ．化学方法利用还原作用强的化学物质，将环境或培养基内的氧气吸收，或用还原氧化型物质，降低氧化—还原电势。
（1）李伏夫（B • M Jibbob）法此法系用连二亚硫酸纳（Sodium hydrosulphite）和碳酸钠以吸收空气中的氧气，其反应式如下：Na2S204 十Na2C03十02—Na2SO4十Na2SO3十C02 取一有盖的玻璃罐，罐底垫一薄层棉花，将接种好的平皿重叠正放于罐内（如系液体培养基，则直立于罐内），最上端保留可容纳1~2 个平皿的空间（视玻罐的体积而定），按玻罐的体积每1000cm3空间用连二亚硫酸纳及碳酸钠各30g，在纸上混匀后，盛于上面的空平皿中，加水少许使混合物潮湿，但不可过湿，以免罐内水分过多。
若用无盖玻罐，则可将平皿重叠正放在浅底容器上，以无盖玻罐罩于皿上，罐口周围用胶泥或水银封闭（如图1-5 ）。
第13章 厌氧性细菌
29．关于无芽孢厌氧菌所致疾病特点，错的是？
A. 无特定疾病类型 B. 多为化脓性感染 C. 感染部位遍及全身 D. 为局部或全身性感染
E. 因为正常菌群，故病情较轻，预后好
30．产气荚膜梭菌产生的具有溶血和卵磷脂酶活性的毒素是：
A. α毒素 B. β毒素 C. γ毒素 D. δ毒素 E. ε毒素
E. 需氧或兼性厌氧菌混合污染伤口
10. 气性坏疽标本涂片,染色镜检的特征是: A.有革兰阳性粗大杆菌 B.有革兰阳性有夹膜粗大杆菌 C.有革兰阳性粗大芽胞杆菌并有夹膜 D. 白细胞甚少且形态不典型 E.常伴有其他杂菌
二 填空题 1． 可致人类疾病的厌氧芽孢梭菌主要有，，，和。 2 ． 厌 氧 芽孢 梭 菌对 ， 和 有 强大 的抵 抗 力； 主要 分 布于
7. 产生嗜神经毒素的细菌是:
A.破伤风梭菌 B.ETEC C.霍乱弧菌
D.肉毒梭菌
E.白喉杆菌
8. 引起菌群失调症的厌氧菌是:
A.破伤风梭菌 B.肉毒梭菌 C.产气夹膜梭菌 D.艰难梭菌 E.无芽孢厌氧菌
9. 什么情况下的伤口长处于厌氧状态:
A.伤口深而窄 B.伤口有泥土异物污染 C. 大面积浅表受伤 D. 伤口坏死组织多局部缺血
E. 结构与功能与破伤风痉挛毒素相似
21．肉毒毒素作用的主要部位：
A. 胃黏膜细胞 B. 小肠黏膜上皮细胞 C. 前角细胞 D. 脑神经细胞 E. 运动神经末梢
22．应用类毒素预防的疾病：
厌氧菌
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。
要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。
通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。
如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。
常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。
塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。
放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。
先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。
如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。
它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。
箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。
欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。
箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。
该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。
金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物，消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。
我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。
厌氧性杆菌题库2-2-10
厌氧性杆菌题库2-2-10问题：[单选,A1型题]破伤风特异性治疗可应用（）。
A.抗生素B.抗毒素C.类毒素D.细菌素E.破伤风菌苗问题：[单选,A1型题]关于厌氧芽孢杆菌，下列哪项是错误的（）。
A.均为革兰阳性杆菌B.都能形成芽胞C.都能通过伤口感染D.都是厌氧菌E.主要分布于土壤问题：[单选,A1型题]关于产气荚膜杆菌的致病性，正确的是（）。
A.可引起严重的创伤感染B.以组织气肿、水肿、坏死为主要病理表现C.致病因素为毒素和酶D.可致食物中毒E.以上均对出处：森林舞会游戏 https://;问题：[单选,A1型题]下列哪项不是肉毒梭菌的特点（）。
A.肉毒毒素是毒性最强的物质B.肉毒毒素作用于胆碱能神经末梢，抑制乙酰胆碱的释放C.食入含有肉毒毒素的食物致病D.革兰染色阳性，形成芽胞，有荚膜E.肉毒中毒死亡率高问题：[单选,A1型题]破伤风抗毒素治疗破伤风的机制是（）。
A.中和游离的外毒素B.中和与神经细胞结合的外毒素C.抑制破伤风杆菌生长D.在补体参与下溶解破坏破伤风杆菌E.减轻临床症状问题：[单选,A1型题]正常情况下无芽胞厌氧菌不存在的部位是（）。
A.子宫腔B.尿道C.肠道D.阴道E.上呼吸道问题：[单选,A1型题]下列能产生细胞毒物质的细菌是（）。
A.破伤风杆菌B.结核杆菌C.幽门螺杆菌D.产气荚膜杆菌E.肉毒梭菌问题：[单选,A1型题]不是产气荚膜梭菌致病物质的是（）。
A.卵磷脂酶B.胶原酶C.透明质酸酶D.肠毒素E.内毒素。
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厌氧性细菌--第一节厌氧芽胞杆菌（2）
为革兰氏阳性粗大梭菌，3～4×1～1.5um。
单独或成双排列，有时
也可成短链排列。
芽胞呈卵圆形，芽胞宽度不比菌体大，位于中央或
末次端。
培养时芽胞少见，须在无糖培养基中才能生成芽胞。
在脓汁、坏死组织或感染动物脏器的涂片上，可见有明显的荚膜，无鞭毛，不
能运动。
厌氧程度不如破伤风梭菌要求高。
在血液琼脂平板上菌落较大、
灰白色、不透明，边缘呈锯齿状，多数菌株有双层溶血环，内环是θ
毒素的作用，而外环不完全溶血是a毒素所致。
在疱肉培养基中肉渣不
被消化，有时呈肉红色。
在牛乳培养基中能分解乳糖产酸，使酪蛋白
凝固，同时生成大量气体，将凝固的酪蛋白冲成海棉状碎块。
管内气
体常将覆盖在液体上的凡士林层向上推挤，这种现象称为“汹涌发酵”，是本菌的特点之一。
能分解多种糖类，如葡萄糖、麦芽糖、蔗
糖和乳糖，产酸产气，不发酵甘露糖或水杨苷，能液化明胶，产生硫
化氢，不能消化已凝固的蛋白质和血清。
（二）致病物质和所致疾病
致病条件与破全国各地风梭菌相似。
产气荚膜梭菌既能产生强烈
的外毒素，又有多种侵袭性酶，并有荚膜，构成其强大的侵袭力，引
起感染致病。
毒素的毒性虽不如肉毒毒素和破伤风毒素强，但种类多，外毒素有α、β、γ、δ、ε、η、θ、ι、κ、λ、μ、ν等12种，和具有毒性作用的多种酶，如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明质酸酶、
胶原酶和DNA酶等，构成强大的侵袭力。
根据细菌产生外毒素的种类差别，可将产气荚膜梭菌分成A、B、C、D、E5个型。
对人致病的主要是A 型，引起气性坏疽和食物中毒。
C型则引起坏死性肠炎。
在各种毒素和
酶中，以α毒素最为重要，α毒素是一种卵磷脂酶，能分解卵磷脂，
人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物，可被卵磷脂酶所破坏，
故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜，引起溶血、组织坏死，血管内皮
细胞损伤，使血管通透性增高，造成水肿。
此外，θ毒素有溶血和破
坏白血球的作用，胶原酶能分解肌肉和皮下的胶原组织，使组织崩解，透明质酸酶能分解细胞间质透明质酸，有利于病变扩散。
本菌能引起人类多种疾病，其中最重要的是气性坏疽。
1．气性坏疽
以局部剧痛、水肿、胀气、组织迅速坏死、分泌物恶臭，以伴有
全身毒血症为特征的急性感染。
潜伏期较短，一般只有8～48小时。
芽
胞出芽大量繁殖，形成荚膜能抵抗吞噬，产生多种毒素及侵袭酶，损
害肌肉组织引起厌氧性肌炎。
由于本菌分解组织中的肌糖，产生大量
气体充塞组织间隙，造成气肿，挤压软组织，阻碍血液循环，进一步
促使肌肉坏死。
同时毒素还可引起血管壁通透性增高，浆液渗出，形
成扩散性水肿，以手触压肿胀组织可发生“捻发音”。
疼痛剧烈，蔓
延迅速，最后形成大块组织坏死。
细菌一般不侵入血流，局部细菌繁
殖产生的各种毒素以及组织坏死产生的毒性物质被吸收入血，引起毒
血症而死。
2．食物中毒
某些A型菌株能产生肠毒素，食其污染的食物后，可引起食物中毒。
潜伏期短，约8～22小时，发生腹痛、腹泻、便血等症状，较少呕吐，
一般不发热，1～2日内可自愈。
中毒机理类似霍乱肠毒素，激活小肠
粘膜细胞的腺苷酸环化酶，导致cAMP浓度增高，使肠粘膜分泌增加，
肠腔大量积液，引起腹泻。
3．急性坏死性肠炎
由C型产气荚膜梭菌引起，致病物质可能为β毒素。
潜伏期不到24小时，发病急，有剧烈痛、腹泻、肠粘膜出血性坏死，粪便带血；可并发周围循环衰竭、肠梗阻、腹膜炎等，病死率达40%。
（三）检验诊断
气性坏疽发病急剧，后果严重，及早诊断甚为重要。
由于本菌分布广泛，所以单凭创口发现此菌还不足以诊断。
尚需结合临床表现，才能确诊。
1．直接涂片镜检从伤口深部取材涂片，革兰氏染色镜检，可见革兰氏阳性大杆菌，并有荚膜，常伴有其他杂菌，白细胞甚少，形态不规则，这是气性坏疽标本涂片的特点。
2．分离培养与鉴定取坏死组织制成悬液，接种于血球脂平板上或疱肉培养基中，厌氧培养，观察生长情况。
取细菌培养物涂片镜检，并进一步用生化反应鉴定。
3．动物实验取培养液0.5～1ml给小鼠或家兔静脉内注射，10分钟后杀死动物，置37℃5～8小时。
如动物躯体膨胀，即行解剖，可见脏器和肌肉内有大量气泡，尤以肝脏最为明显，称“泡沫肝”。
取内脏或心血涂片镜检或分离培养，可发现有革兰氏阳性大杆菌，并有明显荚膜。
（四）防治原则
气性坏疽病原菌种类多，大多是数种细菌混合感染，所产生毒素型别多，抗原复杂，目前尚缺乏有将效的预防制剂。
预防的办法主要是早期扩创，清洁伤口，局部用双氧水冲洗，以破坏厌氧环境。
除早期应用多价抗毒素外，应配合手术、抗生素及支持疗法等。
近年来，临床用高压氧治疗气性坏疽，可使血液和组织中氧含量大于
正常15倍左右，不利于厌氧细菌生长，有一定的疗效。
三、肉毒梭菌
肉毒棱菌（Cl.botulinum）为腐物寄生菌，广泛分布于土壤和动
物粪便中。
革兰氏阳性粗大杆菌。
单独或成双排列，有时可见短链状。
有周身鞭毛，无荚膜。
芽胞椭圆形，大于菌体，位于次极端，使菌体
似网球拍状，芽胞抵抗力甚强。
严格厌氧，在普通琼脂培养基上形成
直径3～5mm不规则的菌落，血液琼脂平板上有β溶血。
能消化肉渣，
使之变黑，有腐败恶臭。
分解葡萄糖、麦芽糖及果糖，产酸产气。
液
化明胶，产生HzS，不形成吲哚。
肉毒梭菌的外毒素是已知毒素中最强的一种，它比氰化钾毒力还
大一万倍，人服0.1微克即可致命，纯化的肉毒毒素1mg能杀死2亿只小鼠。
与典型的外毒素不同，并非由生活的细菌释放，而是在细菌细胞
内产生无毒的前体毒素，待细菌死亡自溶后游离出来，经肠道中的胰
蛋白酶或细菌产生的蛋白激酶作用后方具有毒性，且能抵抗胃酸和消
化酶的破坏。
根据毒素抗原性不同，可分为A～G个型。
其中主要引起
人类食物中毒的为A、B、E型。
各型之间抗原性不同，其毒性只能被相
应的抗毒素所中和。
内毒毒素是一种嗜神经毒素，经肠道吸收后进入
血液，作用于脑神经核、神经接头处以及植物神经末梢，阻止乙酰胆
碱的释放。
妨碍神经冲动的传导而引起肌肉松驰性麻痹。
肉毒中毒的
发生，主要由于豆类、肉类、腊肠及罐头食品等被肉毒梭菌或芽胞污染，在厌氧条件下繁殖产生外毒素，被人食入所引起。
表现为全身无力、视力模糊不清、吞咽及呼吸困难，严重者可因呼吸衰竭或心力衰
竭而死亡。
因毒素不直接刺激肠粘膜，故无明显的消化道症状。
婴儿肉毒病是由于婴儿肠道内缺乏能拮抗肉毒梭菌的正常菌群，食用被肉毒梭菌污染的食品后，芽胞在这情况下定居于盲肠，繁殖产生毒素引起的感染性中毒。
表现为便秘、吮乳无力、吞咽困难，眼睑下垂，全身矶张力减退。
严重者因呼吸肌麻痹而造成婴儿猝死。
主要见于一岁以下儿童。
诊断的依据主要是检测毒素，标本为食品、病人粪便或血清，用已知抗肉毒血清在小白鼠体内作中和试验，或用反向间接血凝试验。
预防的原则是加强食品卫生的管理，多价抗毒素血清可作紧急预防和治疗。