实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验 PPT课件
实验八 大分子物质的水解实验及糖发酵实验
1．培养基（每组的量，由班长分发）
• 灭菌培养皿（淀粉水解）：3皿
• 明胶液化培养基： 4支
• 葡萄糖发酵培养基： 3支
• 乳糖发酵培养基： 3支
• 淀粉培养基：
1瓶/2组
2.接种用具
接种环（针），酒精灯，标签纸，试管架
3.实验菌种
枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，普通变形杆菌，
金黄色葡萄球菌
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四、实验内容
（2）将接种过和作为对照的6支试管置于37℃恒温培养箱培养 24h。
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..实ຫໍສະໝຸດ 结果糖发酵实验.五、实验结果
（1）大分子物质水解实验结果
将结果填入下表。“＋” 表示阳性，“－”表示阴性 注意：观察结果时，可打开皿盖，滴加碘液于平板上，轻轻旋转， 使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，则说明 淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力 的强弱，即产生胞外酶活力的高低。（以“+”、“—”表示有 无透明圈）
实 验八
大分子物质的水解实验 及糖发酵实验
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一、实验目的
1.证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力的 不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子水解实验的原理和方法 3.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作
用 4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法
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二、实验原理
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得 微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。人们在微生物的分类 鉴定工作中，常利用其生理生化反应作为重要依据。
的背面分别记下菌名。 （3）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。 2. 明胶液化试验 （1）取4支明胶培养基试管，用接种针分别以穿刺接种法接种枯草
实验八 大分子物质的水解及营养元素对微生物生长的影响
实验八大分子物质的水解及营养元素对微生物生长的影响杨明轩生物111 1102040128一、实验目的1、通过了解不同细菌对不同的生物大分子及含氮化合物的分解利用情况，认识微生物代谢类型多样性。
2、了解营养元素对微生物生长的影响。
3、学习平板接种法（点接）及穿刺接种法。
二、实验原理某些微生物能产生胞外酶，将大分子的淀粉、蛋自质和脂肪等分解为小分子物质，然后再被微生物吸收利用。
不同的微生物因具有不同的代谢酶系而表现出不同的代谢类型，即当它们作用于相同的底物时可以产生不同的终产物。
这些可以作为微生物鉴定和分类的依据。
本实验通过微生物对碳水化合物（如淀粉）、含氮化合物（蛋白质）和含磷有机物（卵磷脂）的水解，证明微生物对于这些大分子有机化合物的水解作用。
淀粉的水解是由于微生物分泌淀粉酶作用的结果，可用碘液来检测；微生物产生并分泌磷酸酯酶，可水解卵磷脂为脂肪和甘油；蛋白质中的含硫氨基酸被分解产生硫化氢，遇到培养基中的铁盐或铅盐，就形成黑色的硫化铁或硫化铅。
微生物的生长发育需要一定的营养物质和环境条件，只有全面满足以上要求时，微生物才能进行正常的生命活动。
影响微生物生长、繁殖的主要营养元素主要包括碳、氢、氧、氮、磷、硫等，个别微生物还需要某些维生素和微量元素。
本实验通过将黑曲霉接种于缺乏不同营养元素的培养基中，观察它的生长情况，确知几种营养元素对微生物生长的作用。
三、实验材料1、菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、黑曲霉（Aspergillusniger）；2、培养基：淀粉培养基、LB培养基；3、试剂：20%蔗糖溶液、1.5%硝酸铵溶液、0.5%KH2PO4、混合液（1.2%MgSO4、0.05%NaCl、0.005%FeSO4等量混合）、蒸馏水、生理盐水，以上试剂灭菌备用；5、仪器：无菌培养皿、100ml无菌三角瓶、无菌吸管（5ml、10ml）、移液器、接种用具。
发酵现象实验说课课件2021-2022学年八年级人教版上册
发酵现象演示实验 的创新设计
英山县雷店中学 江桂喜
说 课
说课流程
教材分析 实验原型与不足之处 实验创新与改进之处 实验效果 小结
一、教材分析（地位与作用）
“发酵现象”是人教版《生物学》八年级上册 P84“第五节 人类对细菌和真菌的利用”一节中的 一个演示实验。设计该实验的目的： 1、让学生通过观察发酵现象，获得对发酵的感性认 识。 2、理解细菌真菌在食品制作中的发酵原理。 3、让学生更真切的体会到科学技术、生物学知识与 人们生产生活之间的紧密联系，从而激发学生进行 科上的气球慢慢鼓起来了，表明瓶中
生成了气体。将产生的气体通入澄清的石灰水
中，可看到澄清的石灰水变浑浊，这表明有二 氧化碳产生。实验过程中闻到了芳香的米酒味 ，说明发酵产生了酒精。
发酵前
气球慢慢膨胀起来
气球继续变大直至竖立
澄清的石灰水变浑浊
四、实验效果
1、原理科学 利用二氧化碳可使澄清石灰水变浑浊的原 理验证产生的气体是二氧化碳，使实验更具说服力。 2 、设计合理 实验设计严谨科学，让学生在体验到实验 的乐趣的同时，培养科学探究精神，激发学生学习兴趣。 3 、现象明显 改善发酵条件后，短时间内可明显地观察 到发酵现象，节省时间。
二、实验原型与不足之处
不足之处：
（一）反应条件不明确，反应时间难以控制 发酵需要控制一定的条件，如：温度、酵母的用量等。不
同的条件对实验速率的影响非常大，而原实验对这些条件均 未明确提出。反应时间难以控制，甚至要1-2天才可以观察 到明显的实验现象。 （二）教材所用的实验装置使得实验现象见效慢
气球要鼓起来，那么必须产生足够多的气体，因此要让学 生看到明显的实验现象的话，时间长。 （三）未探究发酵产物
实验八_大分子物质水解试验
实验八_大分子物质水解试验一、实验目的1. 了解大分子物质的水解2. 掌握大分子物质水解的实验原理和操作方法3. 比较不同大分子物质的水解速率二、实验原理大分子物质是由许多重复单元组成的生物高分子或合成高分子，如蛋白质、淀粉、纤维素、聚合物等。
由于其大分子结构，容易难以被生物体吸收直接利用，因此需要经过水解反应，使其分解为一个个低分子化合物，方便生物体吸收利用。
在本实验中，我们将研究3种大分子物质的水解反应，分别为淀粉、聚乳酸和聚酯。
淀粉的水解需要使用酶类，因为淀粉的分子结构中包含α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键，这些糖苷键需要在酶的作用下被分解。
聚乳酸和聚酯的水解则需要使用酸，因为它们的分子结构中包含酯键，酸可以在水的存在下水解酯键。
在水解过程中，大分子物质被分解为低分子量的化合物，如单糖、乳酸、酒精、苯甲酸等，这些化合物可以被生物体吸收利用。
三、实验步骤1. 淀粉水解试验步骤一：准备淀粉溶液将2克淀粉粉末加入100毫升蒸馏水中，搅拌至淀粉完全溶解，得到10mg/mL的淀粉溶液。
步骤二：加入淀粉酶将0.1毫升淀粉酶加入淀粉溶液中，搅拌均匀。
步骤三：加热反应将淀粉溶液加热至80℃，反应10分钟。
加入10毫升0.1mol/L NaOH，中和反应。
步骤五：检测还原糖取1毫升反应液，加入1毫升Benedict试液，加热10分钟，观察是否产生红色沉淀。
将2克聚乳酸粉末加入50毫升四氢呋喃中，搅拌至聚乳酸完全溶解。
四、实验结果加入Benedict试液后，反应液产生红色沉淀，说明淀粉水解后生成了还原糖。
聚乳酸水解试验：五、实验分析通过本实验，我们研究了3种大分子物质的水解反应。
淀粉是由多个葡萄糖单元组成的多糖，需要酶的作用才能进行水解，反应生成的还原糖可以被生物体吸收利用。
聚乳酸和聚酯含有酯键结构，在酸的作用下容易进行水解反应，生成的乳酸和苯甲酸也可以被生物体吸收利用。
本实验中，聚乳酸水解后未生成酒精的结果可能是因为聚乳酸的链长和结构不同，导致酯键的水解速率与其他酯键不同。
微生物实验 08.大分子物质的水解试验
2、掌握微生物大分子水解实验的原理和方法。
（二）实验原理
微生物对生物大分子（如：淀粉；蛋白质； 脂肪）不能直接吸收利用，只有那些能够 产生并分泌胞外酶的微生物才能利用大分 子有机物。
胞外酶主要为水解酶。
淀粉
淀粉酶 水解糊精（蓝红 ） Nhomakorabea双糖、单糖
（无色）
加碘（蓝色）
脂肪
脂肪酶 水解
甘油+脂肪酸
2、明胶水解试验 做标记------穿刺接种------培养（20℃ 2-5d） ------------观察液化情况
（五）注意事项
1 、淀粉水解试验中加碘液时碘液要铺 满整个平板； 2、倒平板时无菌操作
3、接种时防止菌种交叉污染。
（六）实验作业
分别将淀粉水解试验（“+”表示发生水解，“-”表示 不发生水解）和明胶水解试验（“+”表示发生水解，“-” 表示不发生水解）结果填入下表，并分析原因。 菌名 淀粉水解能力 明胶水解能力 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4 注：最后加溴甲酚紫。 115℃灭菌20min
实验八 大分子物质的水解试 验
（一）实验目的
1 、证明不同微生物对各种大分子的水解能力不 同，从而说明不同微生物具有不同的酶系统。
(四）实验方法
1、淀粉水解试验
注意无菌操 作
（1）制固体淀粉培养基平板；冷却凝固。 （2）标记后将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌接种。
大肠杆菌
枯草杆菌
（3）36℃恒温倒置培养1-2d；
（4）观察生长情况，将平板打开盖子，滴入少 量碘液于平皿中，轻轻旋转平板，使碘液 均匀铺满整个平板；
大分子物质水解实验
⼤分⼦物质⽔解实验实验⼋⼤分⼦物质（淀粉）⽔解实验郑州⼤学⽣物⼯程系微⽣物实验⼀、⽬的要求1、了解不同细菌对含碳及含氮化合物的分解和利⽤情况，认识微⽣物代谢类型的多样性2、掌握进⾏微⽣物⼤分⼦⽔解实验的原理和⽅法。
⼆、基本原理微⽣物代谢与其他⽣物代谢有着许多相似之处，也有不同之处。
微⽣物代谢重要特征之⼀，就是代谢类型的多样性，表现在对⽣物⼤分⼦糖类和蛋⽩质分解能⼒以及最终代谢产物的不同，反映出它们具有不同的酶系。
微⽣物在⾃然界的物质循环中起着重要的作⽤，同时也为⼈类开发利⽤微⽣物资源提供更多的机会与途径。
⼈们在微⽣物的分类鉴定⼯作中，常利⽤其⽣理⽣化反应作⽤作为重要依据。
有些细菌具有合成淀粉酶的能⼒，可以分泌胞外淀粉酶。
淀粉酶可以使淀粉⽔解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉⽔解后遇碘不再变蓝⾊。
本实验安排微⽣物对⽣物⼤分⼦的分解利⽤（淀粉⽔解实验），让同学们对微⽣物的代谢类型多样性有⼀个初步和感性的了解，同时学习利⽤微⽣物形态、结构以及⽣化反应的特征对某些细菌进⾏初步的分类。
三、实验材料1、菌种⾦黄⾊葡萄球菌、⼤肠杆菌、苏云⾦芽孢杆菌。
2、培养基淀粉⽔解培养基：蛋⽩胨10 g，氯化钠5 g，⽜⾁膏5 g，可溶性淀粉2 g，⽔1000mL，琼脂15-20 g,121 ℃灭菌20 min3、接种⽤具平⽫，试管，移液管，接种环，酒精灯，打⽕机，废物杯，油性笔。
4、试剂卢哥⽒碘液四、实验步骤（1）配制固体淀粉培养基，灭菌冷却⾄50℃左右，⽆菌操作制备平板（2）翻转平板使底⽫背⾯向上，⽤油性笔在其背⾯玻璃上划线均分为三个部分。
（3）在平板底部三个区域分别标注三种供试菌株名称，并⽤接种环以划线⽅式在三个区域分别接上菌种。
（4）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。
（5）观察结果时，可打开⽫盖，滴加少量的碘液于平板上，轻轻旋转，是碘液均匀铺满整个平板。
如菌苔周围出现⽆⾊透明圈，则说明淀粉已被⽔解，为阳性。
透明圈的⼤⼩，说明该菌⽔解淀粉能⼒的强弱，即产⽣胞外酶活⼒的⾼低。
实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验PPT教学课件
乳糖发酵
2020/12/10
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PPT教学课件
谢谢观看
Thank You For Watching
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2020/12/10
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图 糖类发酵试验
2020/12/10
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三、实验器材
1、菌种：枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌
2、培养基： 淀粉培养基
2块培养血/每组(6人）
明胶半固体培养基 5支试管/每组(6人）
乳糖发酵培养液
3支试管/每组(6人）
葡萄糖发酵培养液 3支试管/每组(6人）
2、试剂：碘液
3、仪器或其他用具：培养箱、水浴锅、接种环、接种针、酒
精灯、无菌培养血等。
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四、操作步骤
1、淀粉水解试验
溶化三角瓶内的淀粉培养基 → 趁热倒入二块无菌培养皿各内 约15ml → 冷凝后点植法接入大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄 色葡萄球菌 → 贴好标签 →平板倒置，370C培养24小时 → 滴 加碘液鉴别有无淀粉水解圈
实验八 大分子物质的水解和糖发酵试验
主 讲:
2020/12/10
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一、目的与要求
• 证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，
从而说明不同微生物有着不同的酶系。
• 掌握微生物大分子水解试验的原理和方法。
• 了解糖发酵的原理及在肠道细菌鉴定中的重要作用。
• 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
• 学习微生物接菌技术。
4、葡萄糖发酵试验
取三支葡萄糖蛋白胨培养基 → 分别接入大肠杆菌、普通变形杆
菌，另一支不接菌为空白对照管→ 贴好标签 → 370C培养24小时
3实验八 大分子物质的水解实验及糖发酵实验
菌名 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌
淀粉水解试验
明胶液化试验
（2）糖发酵实验结果 ）
将结果填入下表。 表示产酸或产气， 将结果填入下表。“＋” 表示产酸或产气，“－” 表示不产酸或不产气。
糖类发酵
葡萄糖发酵 乳糖发酵
大肠杆菌 产酸 产气
变形杆菌 产酸 产气
对照 产酸 产气
二、实验原理
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性， 微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得微 生物在自然界的物质循环中起着重要的作用， 生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开发 利用微生物资源提供更多的机会与途径。 利用微生物资源提供更多的机会与途径。人们在微生物的分类鉴 定工作中，常利用其生理生化反应作用作为重要依据。 定工作中，常利用其生理生化反应作用作为重要依据。 微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用， 微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产 生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。 生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主 要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物， 要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被 运输至细胞内。淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域， 运输至细胞内。淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域， 用碘测定不再产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。 用碘测定不再产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。明胶是由胶原蛋 白经水解产生的蛋白质， 25℃以下可维持凝胶状态 以下可维持凝胶状态， 白经水解产生的蛋白质，在25℃以下可维持凝胶状态，以固体形 式存在，有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶， 式存在，有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶，水解这种 蛋白质，而使明胶液化。 蛋白质，而使明胶液化。 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应， 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定 上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源， 上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是 它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。 它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。不同的细菌含有发 酵不同糖( 的酶，因而发酵糖( 的能力各不相同， 酵不同糖(醇)的酶，因而发酵糖(醇)的能力各不相同，其产生的 代谢产物亦不相同，如有的产酸产气，有的产酸不产气。 代谢产物亦不相同，如有的产酸产气，有的产酸不产气。