磺基水杨酸法操作流程

磺基水杨酸显色法测铁实验思考

磺基水杨酸显色法测铁实验思考1. 实验背景和目的磺基水杨酸显色法是一种常用的测定铁离子的定性和定量分析方法。

该方法基于铁离子与磺基水杨酸反应生成带有特定色谱的络合物，通过颜色的变化来判断和测定样品中铁离子的含量。

本实验旨在通过实际操作，掌握磺基水杨酸显色法测铁的原理、方法和实验技巧，并通过数据处理和分析，验证该方法的准确性和可行性。

2. 实验材料和仪器设备•实验材料：–0.1 mol/L 铁标准溶液–磺基水杨酸-硫酸缓冲液–炭酸钠标准溶液•实验仪器设备：–分光光度计–容量瓶–称量瓶–空气开关–过滤膜3. 实验步骤第一部分：制备已知浓度的铁标准溶液1.取一定量的0.1 mol/L 铁标准溶液测量，用万能移液器分别分取1 mL、2mL、3 mL、4 mL、5 mL的标准溶液，分别转移到5个50 mL的容量瓶中。

2.使用去离子水稀释至刻度线，摇匀，得到铁的浓度分别为0.02 mol/L、0.04 mol/L、0.06 mol/L、0.08 mol/L、0.1 mol/L的标准溶液。

第二部分：测定样品中铁的含量1.取一定量的待测样品，通过合适的方法将其中的铁转化为Fe3+的形式。

2.取一个25 mL的比色管，加入1 mL样品溶液，再加入1 mL的磺基水杨酸-硫酸缓冲液，摇匀。

3.使用分光光度计，设置检测波长为510 nm，以磺基水杨酸-硫酸缓冲液作为空白参照，测量样品的吸光度。

记录吸光度的数值。

4.重复步骤2和步骤3，分别测量其他待测样品的吸光度。

第三部分：处理数据并计算结果1.绘制出吸光度与铁浓度的标准曲线，通过拟合直线的斜率和截距，得到吸光度与铁浓度的线性关系方程。

2.根据待测样品的吸光度数值和标准曲线的关系，计算出待测样品中铁的浓度。

3.分析实验结果，评估实验准确性和可靠性。

4. 实验注意事项1.实验过程中需要佩戴实验手套和眼镜，避免试剂接触皮肤和眼睛。

2.实验前要确保所有仪器设备的清洁和正常运行。

磺基水杨酸法测铁的含量

磺基水杨酸法测铁的含量
磺基水杨酸法是一种常用的测定铁含量的方法，其原理是利用磺化反应，将水杨酸中的羟基转化为磺基，形成磺基水杨酸（2-羟基苯磺酸），然后利用磺基水杨酸和铁离子反应，生成显色产物，通过比色法计算出样品中铁离子的含量。

实验步骤
1.用少量醋酸溶解待测样品，加入苯酚，使pH在3~4之间。

这样可以使铁以Fe3+的形式存在，以便后续的磺化反应。

2.加入少量磺酸（氢氧化二苯基磺酸），充分溶解。

3.加入过量的溶氧剂（过氧化氢），加速磺酸的磺化反应。

4.用氨水调整pH至9.5~10.5之间，使反应液处于碱性条件下，有利于后续显色反应的进行。

5.加入0.1%磺基水杨酸（2-羟基苯磺酸）溶液，与铁离子反应生成显色产物3-磺基-6-氨基三甲基苯并噁唑（Fe(III)-磺基水杨酸络合物），并使反应液呈现红色或紫色。

6.用光度计或比色计测定样品的吸光度或比色度，根据标准曲线计算出样品中铁离子的含量。

注意事项
1.磺化反应需要过氧化氢的存在，加入过量的过氧化氢会导致反应液变得过于浓稠，影响显色反应的进行。

因此，应当谨慎加入过氧化氢，适量调整反应液的浓度。

2.在调整pH值时，应当注意避免反应液的pH过高，以免铁离子发生水解反应，导致测定结果不准确。

3.在标准曲线的绘制中，应当使用含铁量相近的标准溶液，以确保所绘制的标准曲线具有一定的可靠性和准确性。

4.在测定过程中，要注意反应时间的控制，过长或过短的反应时间都会影响测定结果的准确性。

5.实验前要仔细准备试剂和设备，并进行充分的清洗和消毒，保证实验的准确性和可靠性。

实验37 磺基水杨酸法测铁的含量

实验37 磺基水杨酸法测铁的含量实验目的（1）巩固吸光光度法的基本理论，掌握吸收曲线及标准曲线的绘制及应用。

（2）了解721型分光光度计的工作原理及使用方法。

一、提问（1）溶液酸度对磺基水杨酸铁配合物的吸光度有何影响？（2）本实验中哪些试剂应准确加入？哪些不必严格准确加入？为什么？（3）使用蒸馏水和试剂空白作参比溶液有何区别？工作曲线是否都通过原点？二、讲解1、原理：Fe3+离子与磺基水杨酸能形成有色配合物，在pH＝8～11的氨性溶液中该配合物呈黄色，且其浓度服从朗伯－比尔定律。

可以固定溶液浓度和比色皿厚度，通过调节入射光的波长测定不同波长时的吸光度并绘制吸收曲线，找出最大吸收波长；固定波长为最大吸收波长，测定一系列标准溶液的吸光度，作出工作曲线。

根据相同条件下未知液的吸光度，可以在工作曲线上求出未知液的浓度。

（1）Fe3+离子与磺基水杨酸能形成逐级配合物，在不同酸度条件下，可能生成1：1、1：2和1：3三种颜色不同的配合物，故测定时应控制溶液酸度。

（2）配制标准溶液时铁离子必须准确加入，过量的磺基水杨酸和氨水对溶液的吸光度影响不是很大，不必严格准确加入。

（3）试剂空白作参比溶液可以消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线通过原点。

蒸馏水不能消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线不一定通过原点。

2、操作注意（1）为避免引起光电池疲劳现象，不测定时应打开暗室盖，特别应避免强光照射。

（2）比色皿盛取溶液时只需装至比色皿的2/3处，过满易溅出腐蚀仪器。

（3）比色皿的光学表面一定要注意保护。

（4）操作仪器要小心，不要用劲拧动，以免损坏机件。

（5）读数时眼睛应垂直于表盘，使平面镜里外的指针重合，此时读数最准确。

（6）每改变一个波长，就得重新调0和100％。

三、实验要求（1）熟悉分光光度计的构造，并掌握其使用方法。

（2）绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。

（3）绘制工作曲线，并利用工作曲线求出未知液的浓度。

磺基水杨酸法尿蛋白定性检查

磺基水杨酸法尿蛋白定性检查
原理：磺基水杨酸是一种生物碱，在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性的蛋白盐沉淀，沉淀生成的程度可反映蛋白质含量。

器材：小试管、滴管、吸管、黑色衬纸及PH广泛试纸。

试剂：200g/L磺基水杨酸溶液：20g磺基水杨酸溶于100ml蒸馏水中。

操作：1、取小试管2支，各加清晰尿液1ml
2、于第1支试管内加磺基水杨酸溶液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加
试剂作空白对照，1min内观察结果。

3、结果判断
注意事项：1、该法灵敏，极轻微反应无意义。

判断结果应及时，否则会使阳性增高。

2、尿内含尿酸或尿酸盐过多，可出现假阳性，但反应较为缓慢，15s
后出现浑浊，由弱渐强；或于加试剂1min后渐呈蛛丝状浑浊，
缓慢扩散，覆盖于尿液的表面，加热或加碱可消失。

3、含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与
蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。

4、要求在1min内观察并判断结果。

磺基水杨酸法测定铁

3.磺基水杨酸分光光度法
1.供试品溶液的制备取本品内容物0.25克，精密称定，置于250ml容量瓶中，加硫酸溶液（1-20）
2.5ml和水100ml,混匀，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.对照品溶液浓度:160ug/ml.。

3.新血宝处方：鸡血藤、黄芪、大枣、当归、白术、陈皮、硫酸亚铁。

4.实验仪器：分光光度计,50ml容量瓶，1l容量瓶，铁标准溶液（10ug/ml）,磺基水杨酸溶液（20%），盐酸（1mol/L），氨水（1：1）
5.实验步骤：
①10ug/ml的铁标液的配置，准确称取0.07030g硫酸亚铁铵于100ml烧杯中，加50ml 1mol/lHCL溶液，完全溶解后，移入1l容量瓶中，再加50ml 1mol/lHCL，并用蒸馏水定容，混匀。

②系列标准溶液配置，取6只50ml容量瓶编号，分别用移液管移取0.00，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50ml铁标液，依次加入容量瓶中，每份依次加入20%磺基水杨酸2.5ml，然后假如1：1氨水，使溶液由红色变为稳定的黄色，再过量1ml，稀释至刻度，摇匀。

③在分光光度计上，选取最大的吸收波长，使用2cm比色皿，以蒸馏水作参比液分别测定1~6号和样品的吸光度，重复一次，然后取平均值。

6.实验数据的记录与处理。

磺基水杨酸测铁

第一步：光度测量
第二步：设置换灯点
第三数步：设置参数
第四步：波长定位
测量结果
皿差
点电脑上的“光度测量”——仪器（设置幻灯点）360nm—— 光度测量——参数(测量方式Abc、波长 422.5-修改-确定—— 波长定位422.5——测量（拉入参比、样品拉入光路（先拉再按确定）
用玻璃棒搅拌配好盖好玻璃盖
10ug的铁标溶液配制
从已配好的1000ml的容量瓶中的铁标溶液中
用已润洗好的移液管移取10mL的溶液移
到100mL的容量。然后稀释到刻度线。
润洗移液管
移取铁标
移取铁标到容量瓶中
滴至刻度线
稀释好的铁标
将配好的10ug/mL的铁标溶液中吸取 0ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、（5ml、5ml--未知样）至8个100ml的容量瓶中
移取铁标到8个容量瓶中
移好铁标的8个容量瓶
标水的杨再容酸将量溶配瓶液制中各好吸的至个磺铁基
25% 8

移取磺基水杨酸之后变成紫色移取磺基
水杨酸
标到签刻度线，摇匀，贴上
再滴用过至胶量头个滴铁管标，将溶然液后的到稀氨黄释色水
8
1ml
1:1
滴氨水之后的颜色变化过程
二、测量
接通电源，打开电脑，打开uv-1801
的开关,连接电脑，连接成功，初始化成功，会出现5个ok，然后预热20min。
开关
连接电脑
连接成功
预热20min之后，打开暗箱盖子，先用蒸馏水把比色皿冲洗，再用铁1 和其他任意五个铁标把比色皿润洗三遍，然后放在第一格和第二格，关闭暗箱盖子

磺基水杨酸法测铁的含量

实验37 磺基水杨酸法测铁的含量实验目的（1）巩固吸光光度法的基本理论，掌握吸收曲线及标准曲线的绘制及应用。

（2）了解721型分光光度计的工作原理及使用方法。

一、提问（1）溶液酸度对磺基水杨酸铁配合物的吸光度有何影响？（2）本实验中哪些试剂应准确加入？哪些不必严格准确加入？为什么？（3）使用蒸馏水和试剂空白作参比溶液有何区别？工作曲线是否都通过原点？二、讲解1、原理：Fe3+离子与磺基水杨酸能形成有色配合物，在pH＝8～11的氨性溶液中该配合物呈黄色，且其浓度服从朗伯－比尔定律。

可以固定溶液浓度和比色皿厚度，通过调节入射光的波长测定不同波长时的吸光度并绘制吸收曲线，找出最大吸收波长；固定波长为最大吸收波长，测定一系列标准溶液的吸光度，作出工作曲线。

根据相同条件下未知液的吸光度，可以在工作曲线上求出未知液的浓度。

（1）Fe3+离子与磺基水杨酸能形成逐级配合物，在不同酸度条件下，可能生成1：1、1：2和1：3三种颜色不同的配合物，故测定时应控制溶液酸度。

（2）配制标准溶液时铁离子必须准确加入，过量的磺基水杨酸和氨水对溶液的吸光度影响不是很大，不必严格准确加入。

（3）试剂空白作参比溶液可以消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线通过原点。

蒸馏水不能消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线不一定通过原点。

2、操作注意（1）为避免引起光电池疲劳现象，不测定时应打开暗室盖，特别应避免强光照射。

（2）比色皿盛取溶液时只需装至比色皿的2/3处，过满易溅出腐蚀仪器。

（3）比色皿的光学表面一定要注意保护。

（4）操作仪器要小心，不要用劲拧动，以免损坏机件。

（5）读数时眼睛应垂直于表盘，使平面镜里外的指针重合，此时读数最准确。

（6）每改变一个波长，就得重新调0和100％。

三、实验要求（1）熟悉分光光度计的构造，并掌握其使用方法。

（2）绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。

（3）绘制工作曲线，并利用工作曲线求出未知液的浓度。

磺基水杨酸法测铁的含量

实验37 磺基水杨酸法测铁的含量实验目的（1）巩固吸光光度法的基本理论，掌握吸收曲线及标准曲线的绘制及应用。

（2）了解721型分光光度计的工作原理及使用方法。

一、提问（1）溶液酸度对磺基水杨酸铁配合物的吸光度有何影响？（2）本实验中哪些试剂应准确加入？哪些不必严格准确加入？为什么？（3）使用蒸馏水和试剂空白作参比溶液有何区别？工作曲线是否都通过原点？二、讲解1、原理：Fe3+离子与磺基水杨酸能形成有色配合物，在pH＝8～11的氨性溶液中该配合物呈黄色，且其浓度服从朗伯－比尔定律。

可以固定溶液浓度和比色皿厚度，通过调节入射光的波长测定不同波长时的吸光度并绘制吸收曲线，找出最大吸收波长；固定波长为最大吸收波长，测定一系列标准溶液的吸光度，作出工作曲线。

根据相同条件下未知液的吸光度，可以在工作曲线上求出未知液的浓度。

（1）Fe3+离子与磺基水杨酸能形成逐级配合物，在不同酸度条件下，可能生成1：1、1：2和1：3三种颜色不同的配合物，故测定时应控制溶液酸度。

（2）配制标准溶液时铁离子必须准确加入，过量的磺基水杨酸和氨水对溶液的吸光度影响不是很大，不必严格准确加入。

（3）试剂空白作参比溶液可以消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线通过原点。

蒸馏水不能消除溶液中其它有色物质的影响，所得工作曲线不一定通过原点。

2、操作注意（1）为避免引起光电池疲劳现象，不测定时应打开暗室盖，特别应避免强光照射。

（2）比色皿盛取溶液时只需装至比色皿的2/3处，过满易溅出腐蚀仪器。

（3）比色皿的光学表面一定要注意保护。

（4）操作仪器要小心，不要用劲拧动，以免损坏机件。

（5）读数时眼睛应垂直于表盘，使平面镜里外的指针重合，此时读数最准确。

（6）每改变一个波长，就得重新调0和100％。

三、实验要求（1）熟悉分光光度计的构造，并掌握其使用方法。

（2）绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。

（3）绘制工作曲线，并利用工作曲线求出未知液的浓度。