牛早期妊娠诊断新技术
妊娠母牛的鉴别方法及饲养管理
妊娠母牛的鉴别方法及饲养管理妊娠母牛是养殖业中最为重要的生产性动物之一。
它们是产母牛群体的基石，影响着养殖户的收益和产业链的发展。
因此，如何科学地识别妊娠母牛，并且进行合理的饲养管理，对养殖过程中的成功至关重要。
本文将介绍妊娠母牛的鉴别方法以及饲养管理措施。
1. 初次检查初次检查是确认妊娠的第一步。
农民可以通过观察牛的行为来判断其是否妊娠。
如果牛没有受孕，那么在牧场上会表现得和平常一样，也不会呈现出特别的表现。
而如果牛怀孕了，那么在行动和食欲上会有所改变。
例如，会频繁地站立或特别安静等。
但初次检查并不是确定妊娠的最终鉴定方法。
你需要使用更加科学的方法进行确认。
2. 精液痕迹检测此方法适用于使用人工授精的情况。
用手套摸摸母牛的肛门，并通过手套来检查是否有精液残留。
如果授精成功，那么精液残留的可能性就很高。
3. 心率检测通过医用超声设备可以检测胎儿的心率。
在妊娠三个月后可以进行心率检测。
此方法存在一定的技术难度。
农民可以向兽医咨询是否有相关设备和技术。
4. 孕酮水平测试孕酮水平测试是确定妊娠最确切的检测方法之一。
可以通过母牛的牛奶、尿液或血液样本来检测孕酮水平。
但相比其他方法，孕酮水平测试更为复杂，需要专业的实验室来进行检测。
1. 维持适度的营养物供应妊娠期的母牛需要额外的营养物来支持胎儿的生长。
农民应当合理安排牛的饮食，根据妊娠的阶段适当调整饲料的种类和供应量。
在配饲时可适量混入粉状饲料，提高蛋白质和钙质含量。
2. 预防和治疗疾病妊娠母牛往往存在一定的疾病风险。
在妊娠期间，牛应该按时接种疫苗，并且定期检查身体状况，特别是检查是否感染疾病或寄生虫。
合理的健康措施可以降低疾病发生概率，从而提高产量和质量。
3. 预防压力和惊恐妊娠母牛的情绪稳定十分重要。
它们需要被保护，避免遭受过多的压力和惊恐。
在妊娠期间应尽可能减少噪音和动荡环境。
同时避免过于频繁的搬运和运输。
如果需要，可适当地改善马厩和牛舍的设计，给牛创造一个舒适的环境。
奶牛早期妊娠诊断ELISA方法的应用及PAG-1单克隆抗体的制备
奶牛早期妊娠诊断ELISA方法的应用及PAG-1单克隆抗体的制备奶牛早期妊娠诊断ELISA方法的应用及PAG-1单克隆抗体的制备导语：奶牛妊娠诊断是养殖业中的重要环节。
早期妊娠诊断有助于及时调整饲养管理措施，提高奶牛的生产性能。
本文将介绍一种常用的奶牛早期妊娠诊断方法——酶联免疫吸附法（ELISA），以及制备PAG-1单克隆抗体的工艺流程。
一、酶联免疫吸附法（ELISA）在奶牛早期妊娠诊断中的应用酶联免疫吸附法（ELISA）是一种常用的免疫学方法，可以用于检测体液中的特定蛋白质。
在奶牛早期妊娠诊断中，ELISA方法可以测定奶牛血液样本中的弗洛伊林相关蛋白（PAG），从而判断奶牛是否怀孕。
一般在妊娠的第24到28天，奶牛血液中的PAG水平会显著升高，通过ELISA方法可以快速、准确地检测出这种变化，判断奶牛是否成功受孕。
ELISA方法的步骤主要包括：1. 样品处理：收集奶牛的血液样本，离心分离，获取血清样品，保存在冰箱中备用。
2. 酶标板涂覆：将PAG抗原溶液均匀地涂覆在96孔酶标板中，密封孔板，在4℃下储存过夜。
3. 抗体结合：将待测样本稀释后加入涂覆好的酶标板孔中，与PAG抗原结合，孵育一定时间。
4. 酶标记抗体结合：加入标记有酶的二抗，培养片刻以促使其与已结合的PAG结合。
5. 反应底物：加入底物溶液，使酶催化反应产生发色物质，反应时间一般为10-30分钟。
6. 反应终止：加入反应终止液，停止酶催化反应，防止进一步产生发色物质。
7. 读取结果：使用酶标仪，在450nm波长下测定反应孔的吸光度值。
8. 结果判定：根据标准曲线和控制孔的吸光度值，判断样本中的PAG含量，从而判断奶牛的妊娠情况。
二、PAG-1单克隆抗体的制备PAG-1是奶牛血浆中的特异性蛋白质，其表达量与奶牛妊娠的状态密切相关。
为了制备PAG-1单克隆抗体，需要先提取并纯化PAG-1抗原，然后将其用于免疫小鼠，最后通过细胞融合技术得到抗原特异性的单克隆抗体。
奶牛的妊娠诊断实验报告
一、实验目的本实验旨在掌握奶牛妊娠诊断的基本原理和方法，提高奶牛养殖户对奶牛妊娠的早期诊断能力，为奶牛养殖生产提供科学依据。
二、实验原理奶牛妊娠诊断主要依据妊娠母牛体内激素水平的变化，如孕酮、雌激素等。
通过检测这些激素水平，可以判断奶牛是否妊娠。
三、实验材料1. 实验动物：健康黑白花奶牛5头，分别编号为1、2、3、4、5。
2. 试剂与仪器：3%硫酸铜溶液、饱和氯化钠、0.1%氧化镁溶液、医用碘酒、试管、酒精灯、火柴、温度计等。
3. 实验步骤：（1）乳汁诊断法① 分别取1毫升3%硫酸铜溶液加入0.5-1毫升乳汁中，观察乳汁是否凝结。
② 取1毫升乳汁放入试管中，加入1毫升饱和氯化钠，振荡后再加入15毫升0.1%氧化镁溶液，振荡20-25秒。
③ 将试管置于开水中加热1分钟，取出静置3-5分钟后观察，如形成絮状物沉在下半部表明已怀孕，不形成絮状物或集于上部是未孕。
（2）尿液诊断法① 取母牛清晨排出的尿液20毫升放入试管中。
② 加入1毫升醋，再滴入1毫升2%-3%医用碘酒。
③ 用火缓慢加热煮沸，此时试管中从上到下呈现红色表明怀孕，如呈浅黄色、褐绿色，冷却后颜色很快消退则未孕。
四、实验结果1. 乳汁诊断法① 奶牛1、2、3号乳汁凝结，表明已怀孕。
② 奶牛4、5号乳汁不凝结，表明未怀孕。
2. 尿液诊断法① 奶牛1、2、3号尿液在加热煮沸后呈红色，表明已怀孕。
② 奶牛4、5号尿液呈浅黄色、褐绿色，冷却后颜色很快消退，表明未怀孕。
五、实验分析通过本次实验，我们掌握了奶牛妊娠诊断的基本原理和方法。
乳汁诊断法和尿液诊断法均能准确判断奶牛是否妊娠。
在实际生产中，可根据具体情况选择合适的方法进行诊断。
六、实验总结1. 奶牛妊娠诊断是奶牛养殖生产中的重要环节，准确判断奶牛是否妊娠对于提高繁殖效率、降低养殖成本具有重要意义。
2. 本次实验中，乳汁诊断法和尿液诊断法均具有较高的准确性，为奶牛养殖户提供了便捷的妊娠诊断方法。
3. 在实际生产中，应根据奶牛的具体情况选择合适的妊娠诊断方法，以确保诊断结果的准确性。
奶牛妊娠早期诊断技术介绍
致 （ 种 后 ３ ５ 天） 配 ０～ ０ ，孕 检 越 早 的牛 胚 胎 死亡 率 也越 佳 的检 测 时 间 是 配 种 后 ２ 天 ， 因 为这 时候 进 行 检 测 能 ４ 高 ，因此 需 要对 间接检 测 妊娠 的 方法 进行 研 究 。 消 除 长 发情 间 隔造 成 的假 阳性 ，现 场 检测 牛 奶 中的 孕酮 敏 感 性 （ 妊 娠 牛准 确 性 ） 为９ ．％ ，但是 其 特 异 性 如 约 ３１
小 ，资料 表 明在 配种 后 ２ ～２ 天 检测 ，妊 娠 的敏 感 性和 种妊娠 特异 性蛋 Ｉ（Ｓ — １ ５ ￣ Ｐ Ｐ Ａ和一 ） 发现 以来 ，Ｎ２ ｏ 年 已 ｔ Ｂ被 ｏｏ 特异性分别是４ ． ４８ ％和８ ． ２ ％；如果在配种后２ ～３ 天检 测 ， ３ ６ ３
发 现 约 ２ 种妊 娠 相 关 糖 蛋 白 （ Ａ ），并 且 已 经证 明 １ Ｐ Ｇｓ
脓 、持 久 黄体 、黄 体 囊肿 以及不 当操 作等 等 ；而 配 种后
手 检 大 多 时候 被确 定 为 诊 断妊 娠 的标 准 。因 为该 方 法成 ８ ０～１ ０ ０ 天进 行 硫 酸 雌酮 检 测 ，其结 果 也不 准 确 。 因此
本 低 ，马 上 能 得 到 结 果 ，依 据 操 作 者 的经 验 准 确 率 可 孕 酮检 测 、硫 酸雌 酮 检测 方 法应 用不 太广 泛 。 达 ９ ％ ，通 常 在 配 种 后 ３ ～６ 天 由兽 医来 进 行 首 次 孕 ５ ５ ５ 检 。 但事 实是 该动 作 对 早 期胚 胎 具有 非 常 高 的侵 害 性 ， 与胚 胎 死 亡 之 间 有 一 定 的相 关 性 ； 另外 ，子 宫 积 脓 等
法 ，并 对 其 优 缺 点 及 应 用进 行 了 比较 论 述 。
奶牛的妊娠诊断与妊娠终止
奶牛的妊娠诊断与妊娠终止1妊娠诊断1.1直肠检查法①术式：将手伸入直肠，于骨盆底握住子宫颈，并向前伸，用手指寻找子宫间沟。
继续前伸，手指顺子宫角弯曲而弯曲，并将两子宫角握在手中，分别触摸。
沿子宫角尖端仔细触摸卵巢。
触摸子宫中动脉时，可将手掌贴到骨盆顶向前滑动，经过岬部，向前可触摸到游离、颤动的子宫中动脉。
②判定：未妊娠时子宫及卵巢均在骨盆腔内，两子宫角大小、硬度和形状相同，收缩如绵羊角状，具有弹性和坚实感。
经产牛有时不呈绵羊角状，或垂入腹腔。
妊娠1个月：子宫角位于耻骨联合前端，妊角稍粗，质地稍软，绵羊角状弯曲不明显，妊角卵巢增大。
妊娠2个月：两子宫角大小不对称，妊娠角比空角粗1～2倍，变长而进入腹腔，角壁变薄而软，有波动，妊角卵巢前移至耻骨前缘。
妊娠3个月：两子宫角极不对称，角间沟消失，妊角较空角大3～4倍，子宫颈移至耻骨前缘，妊角大如人头，移入腹腔，子宫壁松软，波动明显，妊角卵巢位于耻骨前缘下方。
妊娠4～5个月：子宫颈移至耻骨前缘下，子宫完全垂入腹腔，触摸子宫时壁薄，有明显波动感，有时还能触摸到胎儿和胎盘，妊角子宫中动脉有明显颤动。
妊娠6～7个月：子宫下沉到腹腔深部，一般摸不到胎儿，子宫中动脉颤动极为明显。
妊娠8～9个月：子宫颈退至骨盆内或入口处，能摸到胎儿，胎盆如鸡蛋大，两侧子宫中动脉颤动明显。
1.2子宫颈黏液诊断法①煮沸法：用少量子宫颈黏液，加蒸馏水4～5mL混合，煮沸1分钟，溶液呈块状沉淀者为妊娠，上浮者为未妊娠。
此法可检测出妊娠30天以上的母牛。
②苛性钠煮沸法：取少量子宫颈黏液，加1%苛性钠溶液2～3滴，混合煮沸。
分泌物完全分解后，颜色由淡褐色变为橙色或褐色者为妊娠。
此法可检测出妊娠15天以上的母牛。
③比重测定法：妊娠母牛子宫颈黏液比重为1.013～1.016，未妊娠牛比重小于1.008。
取少量子宫颈黏液，放入比重为1.002～1.010的硫酸铜溶液中，黏液呈块状沉淀者为妊娠，上浮者为未妊娠。
奶牛早期妊娠诊断技术简述
中国畜禽种业2019.03作者简介：王斐(1989.11-），女，辽宁省开原市人，兽医师，研究方向：预防兽医及动物疫苗研制。
奶牛早期妊娠诊断技术简述王斐（黑龙江省齐齐哈尔市畜牧总站161000）摘要：随着人民生活水平的提高，我国畜牧养殖业飞速发展，人们对牛奶的需求量大增，奶牛养殖业得到蓬勃发展。
在奶牛养殖中，繁殖技术是奶牛养殖业的重中之重，奶牛早孕诊断一直是奶牛养殖业亟待解决的问题，本文简述常规奶牛早孕诊断技术手段，以期为奶牛产业繁殖效率提高提供参考。
关键词：奶牛；养殖；妊娠；诊断20世纪90年代以来，中国乳牛的存栏量大增，奶牛养殖量不断增加。
高效养牛模式是目前养殖场追求的方式，早期妊娠诊断可提高奶牛繁殖率，从而提高奶牛养殖的经济效益。
近年来，奶牛早孕诊断技术出现了很多新的方法与技术。
1奶牛的早期妊娠诊断主要技术1.1早孕因子诊断法早孕因子是一种妊娠相关蛋白复合物，通过抑制雌性动物的细胞免疫，使胎儿能正常存活，从而达到避免母体免疫排斥的目的。
早孕因子的诊断方法主要是确定早孕因子的含量，以此作为早孕诊断的重要指标[1]。
1.2乳胶凝集抑制试验当精子和卵子结合形成合子时，胚胎和胎盘在母牛体内发育，绒毛膜促性腺激素是由绒毛膜滋养细胞和囊胚子叶分泌出来的，通过乳胶凝集抑制试验测定怀孕雌性动物的尿液和奶中的激素可作为早期妊娠诊断的方法[2]。
1.3超声波诊断法超声波有A 超、B 超、D 超，其中多普勒超声被广泛应用。
其原理是利用超声波对动物子宫扫描，根据信号判断动物是否怀孕[3]。
我国运用超声波在动物早孕的诊断进行大量研究。
邓甘珍等在2004年用B 超检测了137只处于不同妊娠阶段的雌性动物，在交配后第30天的诊断准确率为89%，在交配后31～35d 的诊断准确率为97%，35d 以上的诊断准确率为100%。
1.4宫颈-阴道黏液电导率测定法有研究者通过测定宫颈-阴道黏液电导率在妊娠早期和发情周期有规律的变化发现，健康奶牛发情时导电性水平较低，从发情开始逐渐上升到发情后期逐渐下降；在发情后受精过程中，孕牛的电导率变化与空牛不同。
奶牛早期妊娠诊断研究进展
一
触摸 或 使用 内窥 镜观 察 阴道 黏膜 、粘 液和 子 宫颈 的变 化 。该 法最 早可 在妊 娠 ５ 后 进 行 。 由于诊 断 时 间较 晚 ， ０ ｄ 其 应 用 受 到 了 限 制 。 １９ 年 ， 日本 ９３ 研 究 出一种 “ 殖检 测 器 ”（ ｅ ｒ－ 繁 Ｒ ｐｏ ｄ ｃｉｎ ｅｅｔｒ，用 于 测 定 阴道 粘 ｕｔ ｔｃｏ） ｏＤ
心后加入防腐剂，冷冻保存 ２ ， ４ ｈ后
二，阴道检查法
传 统 的 阴 道 检 查 法 主 要 是 用 手
便 可 以 进 行 测 定 。确 定 妊 娠 阳 性 的 血 浆 Ｐ 含 量标 准 随 畜 种 、采 样 、处 ４ 理 样 品 的 方 法 等 不 同 ，一 般 地 ，牛
≥ １ ｇ ｍｌ 羊 ≥ ０ ５ｎ ／ ， 猪 ／ ， ｎ ． ｇ ｍｌ
并做 好记 录 。 直 肠 触 诊 法 通 常 在 配 种 后 ４ ０ ｄ
并首次证 明了乳 中 Ｐ 浓 度所 反映 的 ４
发 情 周期 阶 段 与 直 接 卵 巢 的 评 估 结 果 相 一 致 。而 后 又 有 资 料 表 明 ，乳
≥ ３ｍｏ Ｌ １ｍｏ Ｌ 鸳 ０３ ｎ／ ． ｎ Ｕ （ ｎ ｌ ／ ． ｇ ￣） １
湿 润 光 滑 ，有 黄 色 分 泌 物 ，此 种 变 化 对 已 配种 ２ ０～ ４ 妊 娠 符 合 ０ｄ的
原子 能 机 构 （ Ｅ 正在 向发 展 中 Ｉ Ａ） Ａ
三 ．孕酮测定诊断法
主要 包 括放 射 免疫 测定 法 （ Ｉ ） Ｒ Ａ 和 酶免 疫 测定 法 （Ｉ ＥＡ） （ ） 放 射 免 疫 测 定 法 （Ｉ） 一 ＲＡ １５ 年 Ｙ ｌ 首 次 创 立 了 Ｒ Ａ， 由 ９９ ａｗ ｏ Ｉ 于 Ｒ Ａ 灵敏 度和精确度高 ， Ｉ 重复性好 ， 其 应 用 日益 广泛 。１７ 年 Ｌ ｇ等首 ９１ 痂 次将 ＲＡ用于牛乳 中孕酮 （４的测定 ， Ｉ Ｐ）
母牛早期妊娠的诊断方法
2023年第11期母牛的早期妊娠诊断一直以来都是养殖人员关注的重点问题之一,这对减少空怀、不怀、少怀,提升畜牧兽医等相关产业经济效益和经营利润具有十分重要的意义。
本文简要介绍了几种常见的母牛早期妊娠诊断方法,供参考。
1实验室诊断法实验室诊断法指在实验室可以进行的诊断方法,主要有酒精法、碘酊法、硫酸铜诊治法、血清电脉冲法、免疫力诊治法、孕酮诊治法等众多方法。
取被检母牛血液样本5m L 左右,加入95%的酒精1m L ,充分融合,如果发生聚集的则为怀孕母牛,不聚集的则为未怀孕母牛。
这种诊治方法对空怀、少怀、不怀的检测成功率为80%~90%。
取被检母牛的尿液样本10m L ,加入7%的碘酊2m L ,摇晃使其充分融合,静置一会等待观察,如果呈现青紫色则为怀孕母牛,其他种类颜色则为未怀孕母牛。
使用这种检测方法的成功率较低,只有70%左右,兽医和配种技术人员一般不采用此法。
取被检母牛所挤出的牛奶1m L ,加入3%的硫酸铜1~3m L ,稍微摇晃使其充分融合,静置一段时间观察效果,如果出现云雾状,并且瓶底具有沉淀物或颗粒物的则为已怀孕母牛,如果没有出现上述情形,并且也没有相关沉淀物或颗粒物则为未怀孕母牛。
该法对空怀、不怀、少怀的检测成功率分别为70%~60%,该检测方法的检测成功率较低,不利于医疗推广与宣传使用,兽医和配种人员很少使用此法。
该法主要用于检测怀孕20d左右母牛的情况。
取被检母牛的血液或血清样本,检测其中的球蛋白含量,如果球蛋白含量大于13%以上的则为怀孕,如果小于或等于13%的则表明未怀孕。
该法对空怀、不怀、少怀的检测成功率较低,基本与直肠诊断法相同或类似,也不利于医疗推广与宣传使用,此法很少使用。
通常,母牛怀孕后自身的免疫力和抵抗力下降,出现这种现象的原因是动物怀孕后会分泌出一种免疫抑制早孕因子(I SEPF )。
研究人员曾用小白鼠做过准确检测实验,在小白鼠交配后的8h 左右,其体内可检出这种早孕因子。
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Heilongjiang Xumu Shouyi
2009年10月（下）
1
超声波诊断法
主要有A 型超声波诊断仪、多普勒（Doppler ）超
声诊断仪（D 型仪
）和B 型超声波诊断仪。
用A 型超声波诊断仪对奶牛妊娠60天以后才能做出诊断。
在20世纪70年代A 超技术曾备受青睐，目前已很少应用。
D 型超声波诊断仪可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期的诊断。
将A 型和D 型仪联合使用，可得到既早又准确的结果。
B 型超声波诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。
对牛可在配种后24天探测到胚胎。
2乳胶珠凝集抑制试验
乳胶珠凝集抑制试验（LAIT ）是—种免疫测定法，可用来快速定性测定奶牛乳中或尿中类绒毛膜促性腺激素（hCG-like ）。
此法是根据奶牛胚泡的绒毛膜滋养层细胞和胎盘子叶都能分泌hCG-like 来进行早期妊娠诊断的。
其原理是将hCG 吸附于聚苯乙烯乳胶珠上作为抗原，与hCG 免疫血清配套作为试
剂，供早期妊娠诊断使用。
优点是诊断时间早、
准确率高、反应快速（10分钟可检出结果）、设备简单、操作简便，便于在生产中推广应用。
3外源性生殖激素探试法
（1）雌激素探试法。
奶牛妊娠后在体内起主导作用的是孕酮，它可以对抗适量的外源性雌激素，使奶牛不表现发情反应。
可在奶牛配种后18～20天，肌肉注射合成雌激素（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）2～3毫克，注射后5天不出现发情者为妊娠。
（2）三合激素探试法。
对配种后30～40天的奶牛肌肉注射三合激素制剂5毫升，如果一周内不出现发情征状，即可诊断为妊娠阳性。
（3）促性腺素释放激素-A （LRH-A ）探试法。
在奶牛配种后第21～27天后注射LRH-A 200～500微
克，然后观察配种后35天内奶牛的返情情况，
不返情母牛为妊娠。
准确率可达91.9%。
4血清酸滴定法
奶牛在妊娠后胚胎快速生长的过程中，机体产生产一种特有的免疫球蛋白，这种球蛋白具有在酸性环境中与其他蛋白质形成低溶性复合物（絮状物）的特性，据此可对奶牛做出早期妊娠诊断。
具体方法是在室温（18～25℃）环境下，取配种后16～45天的
受检母牛血清0.5毫升加入小烧杯中，再加入0.2摩
尔/升盐酸7.5毫升，
用磁力搅拌器充分混合1～2分钟，而后用13%的硝酸滴定到pH 值0.68（滴定时间不少于5分钟），最后将溶液倒入试管中静置20分钟，在透射阳光下观察反应。
如溶液呈白色或红黄色絮状物者为阳性（妊娠），妊娠确诊率为96%，呈乳白色（红色）或无色透明者为阴性（未妊娠）。
5繁殖检测器法
日本的松浦优之（1993）开发出一种繁殖检测器，用于测定阴道黏液钠离子浓度，既可用于确定配种适期，又可以进行早期妊娠诊断。
对配种后15天的奶牛妊娠诊断、未妊娠诊断准确率均达100％。
6乳汁3%硫酸铜检测法
在乳样中加入3％的硫酸铜溶液，硫酸根可使乳样中的早孕因子（EPF ）发生凝集，从而能定性地分析出乳中是否含有EPF ，以达到妊娠诊断的目的。
具体方法是：取配种后20～30天母牛中午的常乳和末把
乳的混合乳样1毫升放入平皿中，
加入3%硫酸铜溶液1～3滴混匀，观察反应。
如混合液呈现云雾状者，可判断为妊娠；如混合液无变化可判断为空怀，此方法的妊娠诊断准确率可达90%。
7电子探针法
用电子探针检测阴道内部两个不同部位的电阻值，可判断奶牛所处的生理状态，进行适时输精和早期妊娠诊断。
电子探针有多种类型，其中2009型电子探针最为常用，其柄上有一个开关可以控制两个探头间的夹角，将探头插入阴道内距子宫颈2厘米处，根据其显示的电阻值来判断奶牛是否妊娠。
8经穴皮温测定法
母牛特定穴位温度的变化在一定程度上能反映
其生殖生理信息。
研究发现妊娠牛肾俞穴和气门穴皮温发生明显变化，且肾俞穴皮温发生明显变化的时间
比气门穴温变化的早。
故初步证明肾俞穴皮温、
气门穴温变化可作为奶牛早期妊娠诊断的客观指标。
9子宫颈-阴道黏液检查法
（1）子宫颈-阴道黏液纯化水煮沸法。
在奶牛配种后1～2个月时，取子宫颈-阴道部周围的黏液（玉米粒大小）放入清洁的试管中，再加入5毫升纯
牛早期妊娠诊断新技术
饲·养·技·术
74
《黑龙江畜牧兽医》综合指导版
2009年10月（下）
1育雏准备
1.1加强育雏前准备
雏鹅的生理特点是：绒毛稀少，体小娇嫩，体温高且调节能力差，呼吸快，新陈代谢旺盛，消化道容积小，消化机能不健全，对外界环境的适应能力和抗
病力差。
据此，新建育雏舍地面要抹上水泥并打扫干净，已有雏舍要及时清除舍内粪便，补好裂缝，堵死鼠洞，擦净门窗，墙壁用20%石灰乳刷白消毒，用2%热火碱水反复消毒3～5次。
将水槽、饲槽、用具洗刷干净后搬入舍内，封闭门窗，将室温升到20~22℃，相对湿度65%~75%，然后用甲醛溶液加20克高锰酸钾（40～45毫升/立方米）熏蒸消毒24小时。
进雏前1～2天对育雏舍进行预温，若平养应准备新鲜的未发霉垫料。
1.2雏鹅选购
选购原则：①查清种蛋来源、种群健康状态，从无疫病、无污染场进雏；②选择绒毛干净、个头大、眼
睛明亮有神有光泽、反应灵敏、腹部大小适中柔软、
脐部收缩良好、无血斑、无水肿和脐炎、挣扎有力、叫
声响亮的雏鹅。
同时根据雏鹅大小强弱分群饲养，以免弱、
病雏因挤、压、饿而致死。
2加强管理
2.1控制适宜的温度、
湿度和密度育雏温度要求：3日龄内舍温28～30℃，4~10日龄25～28℃，湿度60%～65%，密度为由20～25只/平方米减少到15～20只/平方米；11～20日龄舍温要求20～25℃，湿度65%～70%，密度为12～15只/平方米；21～30日龄舍温18～20℃，并逐渐过渡到自然温度，湿度65%～70%，密度为8～12只/平方
米。
在实际生产中可据雏鹅的动态、叫声和吃食状况来判定温度的高低，并作相应调整。
另外，在温度较低的地区，应在冬季或温度变化较大的阶段注意在舍内挂上布帘保温，但应注意室内的CO 和CO 2浓度，防上中毒现象发生。
控制雏鹅死亡率的关键技术措施
化水，置于酒精灯上加热煮沸1分钟。
如果试管中黏液不溶解，呈白色棉絮状漂浮在透明的溶液中，即可确诊为妊娠阳性；如果试管中黏液全部溶解，溶液呈无色透明状态，则为空怀或发情；如果黏液和纯化水混合液呈混浊状态或凝结成块状，是生殖道有炎症的表现。
确诊率可达80%～95%。
（2）子宫颈-阴道黏液苛性钠煮沸法。
在母牛配
种后1～2个月时，
取子宫颈-阴道部周围的黏液放入清洁的试管中，再加入10%或25%苛性钠溶液5毫升，置于酒精灯上加热煮沸1分钟。
如果试管中黏液完全溶解，呈橙黄色或褐色，即可确诊为妊娠阳性；如果试管中黏液全部溶解，溶液呈淡黄色，则为空怀。
确诊率可达85%～90%。
（3）子宫颈-阴道黏液比重测定法。
母牛妊娠1～9个月的子宫颈-阴道分泌物的比重为1.016～1.013，而空怀牛的子宫颈-阴道分泌物的比重小于1.008。
将比重为1.008的硫酸铜溶液装入试管中，然后将子宫颈-阴道部周围的黏液（玉米粒大小）投入硫酸铜溶液中，如果黏液呈块状沉淀可判断为妊娠，如果黏液呈块状漂浮物可判断为空怀。
（4）子宫颈-阴道黏液抹片检查法。
取少量的母牛子宫颈-阴道黏液，置于清洁的载玻片上，用另一块载玻片的边缘将黏液均匀的推涂成抹片，自然风
干后，加几滴10%硝酸银，
停留1分钟后用纯化水漂洗，再加姬姆萨染色液3～5滴染色30分钟，用纯化
水漂洗并晾干，然后放于200～400倍显微镜下观
察。
如抹片上有短而细的毛发状纹路，且呈紫红色或淡红色者判断为妊娠；如抹片上的纹路较粗，为发情周期的黄体期或妊娠6个月以上的征状；如抹片上出现羊齿植物状纹路者为发情征状；如抹片上出现上皮细胞团者是炎症表现。
这种方法对妊娠23～60天的母牛妊娠诊断准确率可达90%以上。
10尿液7%碘酊测定法
取配种后23天以上母牛早晨的尿液10毫升放入试管中，加入7%碘酊1～2毫升混合，反应5～6分钟，观察颜色变化。
如混合液呈棕褐色或青紫色，可判断为妊娠；如混合液颜色无变化，可判断为空怀。
此方法的妊娠诊断准确率可达93%左右。
11眼巩膜血管观察法
经检查，母牛配种妊娠后25～90天，其一侧眼球瞳孔正上方的巩膜表面上，表现有显露突起的1～3条纵向血管（简称“生殖血管”），颜色深红或紫红，直径1厘米左右，呈直线状，有的稍有倾斜弯曲，或下端有小而细的分支。
配种后未妊娠的母牛则不出现这种血管。
因此，应用此法，可对母牛进行早期妊娠诊断，其确诊率可达95%。
梁书文，郭洪丽（辽宁医学院畜牧兽医学院，辽宁锦州121001）（013）
饲·养·技·术
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