生物除磷的化学强化处理技术

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生物化学协同除磷技术及其应用_刘帅

生物化学协同除磷技术及其应用_刘帅

第2期2008年6月生物化学协同除磷技术及其应用刘帅李晓婧赵德远(山东水利职业学院,山东日照276826)摘要:生物化学协同除磷技术是在生物处理系统中投加化学除磷剂以保证污水处理系统的除磷效果的一种技术。

本文分析了生物化学协同沉淀的机理,并通过正确地估计生物除磷的能力可计算出化学除磷所需的药剂量。

技术经济分析结果显示,在现行价格体系条件下,生物化学协同法具有比普通曝气法更优越的技术经济性能,而且地价越高,电价越高,药价越低,规模越大,该法就越经济。

关键词:生物除磷;化学除磷;生物化学协同除磷;投药量1引言在生物除磷的工艺中,由于进水中易受生物降解有机物的量、其它工艺参数及构筑物尺寸等因素的影响,常使生物除磷工艺过程不稳定;而且由于除磷和脱氮往往同时进行,所以它们之间在泥龄、碳源等方面存在着矛盾,二者不能兼顾,因而不能保证出水TP浓度达到排放标准。

由于脱氮只能靠生物法去除,而除磷既可以采用生物除磷,也可以采用化学除磷。

尤其是当碳源为限制因素时,可以在优先保证脱氮效果的前提下,辅助以化学除磷,使得出水中的TN和TP同时达到要求。

另外,由于我国城市污水中BOD值较低,采用生物除磷往往很难满足处理要求,因此需要增加化学除磷处理[1]。

生物化学协同沉淀除磷技术即是为保证污水处理系统的除磷效果,在生物处理系统中投加化学除磷剂的技术。

通过附加化学沉淀还可以改善生物除磷的工艺稳定性[2]。

2机理分析传统生物除磷技术重在利用聚磷菌对磷的特殊富集作用,通过排除富磷剩余污泥的方式从污水中对磷实施有效去除。

该系统除磷效率直接受富磷污泥排放量和污泥含磷率的影响。

生物化学协同除磷技术最显著的特点是在生物流程中投加化学混凝剂,通过投加的除磷剂与污水中的磷酸盐反应,生成不溶性的磷酸盐沉淀物以达到磷的去除,其余则与普通活性污泥法类似。

该处理技术是在初沉池出水、曝气池及二沉池前投加化学药剂。

该技术可以省去化学除磷池,生化池即为混凝池,其工艺流程如下:所加混凝剂可采用铝盐、三价铁盐、亚铁盐等,不能采用石灰。

化学强化SBR工艺生物脱氮除磷试验研究

化学强化SBR工艺生物脱氮除磷试验研究
n t g n i t de . T e d rt n o e ain,a o i tt a d s t ig d wn i a o t3 h n e p cie y Att i i o e ssu id h u a i a r t r o f o n xc sae n et n o s b u ,2 h a d 1 h rs t l. h s l e v c n i o h o d t n t e ̄mo a o u a t i emso OD,NH3N n N c n a h e e a o e 9 % ,9 % a d 6 % r s e t e y T e i v o p l t s ntr C lf n f - a d T a c iv b v 0 5 n 0 e p ci l. h v
进行 化学除磷 ,试验发 现 ,投加 量为 2 mgL时 出水 , 0 / I 能达 到 《 ’ P均 城镇 污 水处 理厂 污 染物排放 标 准》 ( B 8 1. G 19 8
2o ) 一 级标 准 的 B标 准 。 o2


词 :S R;生物脱氮 ;化学除磷 B 文献标识码 : A 文章编号 :0 1 64(07 0 -0 00 10 . 4 20 )40 1 - 3 5
42 r A crigt t xei et f h shms m vl yadn 1 1i tee un B teT ocnr o . 3m/L codn eepr n o op o oa b d i AC3n h f e t S R, h Pcn et t ni oh m p e r g l f o a i n
维普资讯
第2 6卷第 4期
20 0 7年 8月


《2024年城市污水处理新型生物脱氮除磷技术研究进展》范文

《2024年城市污水处理新型生物脱氮除磷技术研究进展》范文

《城市污水处理新型生物脱氮除磷技术研究进展》篇一一、引言随着城市化进程的加速,城市污水处理问题日益突出。

在众多的污水处理技术中,生物脱氮除磷技术因其高效、经济、环保等优点而备受关注。

本文旨在探讨城市污水处理中新型生物脱氮除磷技术的研究进展,分析其技术特点、应用现状及未来发展趋势。

二、生物脱氮除磷技术概述生物脱氮除磷技术是一种利用微生物的新陈代谢活动,通过生物膜法或活性污泥法等工艺,将污水中的氮、磷等营养物质去除的技术。

该技术具有处理效率高、运行成本低、污泥产量少等优点,是当前城市污水处理领域的研究热点。

三、新型生物脱氮技术研究进展(一)A2/O工艺及其改进型技术A2/O(厌氧-缺氧-好氧)工艺是一种典型的生物脱氮技术。

近年来,研究者们针对A2/O工艺的不足,开发了多种改进型技术,如MBBR(移动床生物膜反应器)、SBR(序批式活性污泥法)等。

这些技术通过优化反应器结构、调整运行参数等手段,提高了脱氮效率,降低了能耗。

(二)新型厌氧氨氧化技术厌氧氨氧化技术是一种利用厌氧氨氧化菌将氨氮转化为氮气的生物脱氮技术。

近年来,研究者们通过优化反应条件、提高菌种活性等手段,推动了厌氧氨氧化技术的发展。

该技术具有脱氮效率高、能耗低等优点,是未来生物脱氮技术的重要发展方向。

四、新型生物除磷技术研究进展(一)PAOs(聚磷菌)强化除磷技术PAOs强化除磷技术是一种利用聚磷菌在厌氧-好氧条件下实现高效除磷的技术。

近年来,研究者们通过优化反应条件、提高聚磷菌活性等手段,提高了PAOs强化除磷技术的除磷效率。

该技术具有除磷效果好、污泥产量少等优点。

(二)化学与生物联合除磷技术化学与生物联合除磷技术是一种结合化学沉淀与生物吸附的除磷技术。

该技术通过投加化学药剂与生物反应相结合的方式,实现高效除磷。

近年来,研究者们针对不同水质条件,优化了药剂种类和投加量,提高了除磷效果。

五、新型生物脱氮除磷技术应用及发展趋势(一)应用现状新型生物脱氮除磷技术在城市污水处理中已得到广泛应用。

用化学法强化生物除磷的优化控制

用化学法强化生物除磷的优化控制

脱氮 的反 硝化 过程需 要 易生 物 降解 的有机 碳作 为碳
源, 而生物 除磷 中磷 的厌 氧 释放 过 程 也 需要 易生 物
图 1 用化 学 法 强 化 的 生 物 脱 氮 除 磷 工 艺 流 程

缺 氧 区 : 脱氮 提供反 硝化 条件 , 除磷提 为 为
供 微生 物释 磷 条 件 。此 外 , 氧 区微 生物 的选择 作 缺 用 可 以抑制 丝状 菌 生 长 , 因此 与一 般 只起 脱 氮 作用
降解 的有 机碳 作 为碳 源 , 此 当废 水 中易 生 物降 解 因
的有 机碳 不 足时需 要采 用化 学方 法来 强化 除磷 。 生 物脱 氮和 除磷所 要求 的工 艺 条件在 某些 方面 是相 反 的 , 除磷 需 要 较 短 的污 泥 龄 和 较 高 的污 泥 负 荷 , 是 硝化 则需 要 较 长 的 污 泥龄 和 较 低 的 污 泥负 但 荷, 因此 同步 脱氮 除 磷 工 艺 的运 行 条 件 必 须 满 足 除

好 氧 区
化 学 除 磷 剂
mgL , / )一般 的生 物处 理工 艺 较 难 达 到要 求 。 因此 , 将化 学 除磷作 为生 物 除磷 的补充 并使 两者 结合 起来 就形 成 了一种 运行 简便 、 济有 效 的除磷工 艺 、 经 。
对 于 脱氮 除 磷 同步 进 行 的废 水 处 理 工艺 , 由于
关键 词 : 生物 除磷 ; 化 学强化 ; 优 化控 制 ; 模 型预测
中图分 类号 :X 0 55 文献 标识码 :B 文章 编号 :10 —4 0 ( 0 2 0 0 0 6 2 2 0 )7—0 3 —0 05 4
1 化 学强化的生物除磷
生物 除磷 作 为一种 经济 有效 的除磷 技 术被 广泛 采用 , 在 对 出 水 总 磷 控 制 严 格 的地 区 ( <0 5 但 磷 .

Phostrip除磷工艺

Phostrip除磷工艺

投加药剂
向废水中投加化学药剂,如石灰、硫酸亚铁等,使废水中的磷与 药剂反应生成沉淀物。
混合反应
通过搅拌、混合等方式,使废水中的磷与药剂充分反应,提高除 磷效果。
沉淀分离
使废水中的沉淀物与上清液分离,将沉淀物去除,上清液继续进 行后续处理。
固液分离
பைடு நூலகம்
01
02
03
过滤分离
通过过滤设备将废水中的 悬浮物和沉淀物分离出来, 得到澄清的出水。
化学药剂
常用的化学药剂包括铝盐、铁盐和钙盐等,这些药剂能够与磷元素发生反应,生成不溶性的磷酸盐。
技术优势与局限性
技术优势
PHostrip工艺具有较高的磷去除效率,一般情况下,磷的去除率可以达到90%以上。此外,该工艺还具有操作简 便、运行稳定、成本较低等优点。
局限性
虽然PHostrip工艺具有许多优点,但也存在一些局限性。例如,对于某些高浓度磷的废水,可能需要增加化学药 剂的投加量,这会增加运行成本。此外,对于某些特殊性质的废水,PHostrip工艺可能不是最合适的选择。
生物材料
利用生物材料,如微生物、酶等,通过生物转化或生物吸附的方式去除水中的 磷。
新技术的研发
电化学法
研究电化学法去除磷的新技术,利用 电化学反应将水中的磷转化为无害或 易于处理的形态。
光催化技术
开发利用光催化技术去除磷的方法, 利用光催化材料在光照条件下将磷转 化为不易溶于水的物质。
智能化与自动化
04
PHostrip除磷工艺的优化与 改进
改进沉淀效果
优化沉淀池设计
通过改进沉淀池的构造,如增加斜板、改变水流方向等,提高沉 淀效果。
增加沉淀时间
适当延长沉淀时间,使悬浮物有足够的时间下沉,提高出水水质。

污水二级处理

污水二级处理

污水二级处理是污水经一级处理后,再经过具有活性污泥的曝气池及沉淀池的处理,使污水进一步净化的工艺过程。

常用生物法和絮凝法。

生物法是利用微生物处理污水,主要除去一级处理后污水中的有机物;絮凝法是通过加絮凝剂破坏胶体的稳定性,使胶体粒子发生凝絮,产生絮凝物而发生吸附作用,主要是去除一级处理后污水中无机的悬浮物和胶体颗粒物或低浓度的有机物。

经过二级处理后的污水一般可以达到农灌水的要求和废水排放标准。

但在一定条件下仍可能造成天然水体的污染。

城市污水处理的三个级别中的第二级。

污水经过一级处理后,进行二级处理,以除去污水中大量有机污染物,使污水得到进一步净化。

相当长时间以来,把生物处理作为污水二级处理的主体工艺,因此,在城市污水处理中,二级处理通常作为生物处理的同义语使用。

城市污水经过筛滤、沉砂、沉淀等一级处理(预处理),虽然已去除部分悬浮物和25~40%的生化需氧量(BOD),但一般不能去除污水中呈溶解状态的和呈胶体状态的有机物和氧化物、硫化物等有毒物质,不能达到污水排放标准,需要进行二级处理。

二级处理的工艺按BOD的去除率可分为两类:一类是不完全的二级处理。

这种工艺可以去除BOD75%左右(包括一级处理),出水的BOD可在60ppm以下,主要采用高负荷生物滤池等设施。

另一类是完全的二级处理。

这种工艺可以去除BOD85~95%(包括一级处理),出水的BOD可在20ppm以下,主要采用活性污泥法。

采用活性污泥法工艺处理,效果较好时,出水的BOD可在10ppm以下,悬浮物可在15ppm以下,能够达到排放标准。

近年来,有的国家在研究和采用化学或物理化学处理法作为二级处理主体工艺,预期这些方法将随化学药剂品种的不断增加,处理设备和工艺的不断改进而得到推广。

污水二级处理对保护环境起到了一定作用。

随着污水量的不断增加,水资源的日益紧张,需要获取更高质量的处理水,以供重复使用或补充水源。

为此,有时要在二级处理基础上,再进行污水三级处理。

污水处理氨氮去除剂成份

污水处理氨氮去除剂成份

污水处理氨氮去除剂成份污水处理过程中,我国的主要河流和湖泊由于受磷污染,富营养化严重,国家环保局为控制磷污染,对磷排放制定了比较严格的标准。

化学强化生物除磷污水处理工艺以除去污水中有机污染物和各种形态的磷为主,此污水处理工艺将化学除磷和生物除磷一体化,通过厌氧消化生物系统中活性污泥产生挥发性有机酸,作为聚磷菌生长的基质或称之为营养物,使聚磷菌在活性污泥中选择性增殖,并将其回流到生物系统中,使生物污水处理系统工作在高效除磷状态;同时污泥在厌氧条件下产生的磷释放,通过化学除磷消除。

这是一种高效市政污水处理工艺技术,满足了我国现阶段,为解决水体富营养化,需要在常规二级污水处理基础上进一步除磷的要求。

【氨氮去除剂的价格及用量】氨氮的控制方法:1、清淤、干塘COD剂氨氮去除剂去磷剂除臭剂管道清洗除臭剂控制氨氮的第一种方法是定期清淤、干塘。

每年养殖结束后,进行清淤、干塘,暴晒池底,使用生石灰、漂白粉和氯制剂类鱼用药物等对池底彻底消毒,可去除氨氮,增加水体对pH值的平衡能力,保持水体的微碱性。

2、定期加换新水控制氨氮的第二种方法是定期加换新水。

换水是较快速、有效的途径,要求加入的新水水质良好,新水的温度要尽可能与原来的池水相近。

3、加强投饲管理控制氨氮的第四种方法是在日常养殖中加强投饲管理。

选用优质蛋白饲料,使用具有更高氨基酸消化率的饲料,避免过量投喂,提高饲料的能量、蛋白比。

通过改善养殖鱼类对饲料的利用率,而间接降低水中氨氮等有害化学物质的含量。

也可使用通用名为’硫代硫酸钠粉‘的鱼用药物,全池均匀泼洒,降低氨氮浓度,还可以使用芽孢杆菌复合微生物制剂,按每亩水深1米首次施用量为500克,15天后再施用250克,来降低水中氨氮浓度,改善水质。

COD剂氨氮去除剂去磷剂除臭剂管道清洗除臭剂4、增加池塘中的溶氧控制氨氮的第三种方法是增加池塘中的溶氧。

在池塘中使用长效粒粒氧、富氧或固粒氧等池塘底部增氧剂,可保持池塘中的溶氧充足,加快硝化反应,降低氨氮的毒性。

吸附-生物降解工艺化学强化除磷的试验研究

吸附-生物降解工艺化学强化除磷的试验研究

( trl cec dt n Na a i eE io ) u S n i
De e e 2 o c mb r 0 8
文 章编 号 :10 —6 X(0 8 1 —0 10 0 05 5 20 )20 6 —5
吸 附 一生物 降 解 工 艺 化 学 强 化 除 磷 的试 验 研 究 水
华 南 理 工 大 学 学Fra bibliotek报 (自 然 科 学 版 )
第3卷 第 1 6 2期
20 0 8年 l 2月
J u n lo o t i a U n v r i fTe h l g o r a f S u h Ch n i e st o c no o y y
Vo136 N O. 2 . 1
胡勇有 罗 肖肖 程建 华 罗刚
(. 1华南理工大学 环境科 学与工程学院 , 广东 广 州 5 00 ; . 10 6 2 广州市市政 污水处理总厂 , 广东 广 州 5 0 5 ) 16 5
摘 要: 取吸 附 一 生物降解( B 工艺 B段曝 气池的进水 , A ) 投加硫 酸铝 ( S 和聚 丙烯 酰 A) 胺 ( A 进行 化 学除磷 小试研 究 , 察 了不 同絮凝 剂投 加 量对 总磷 ( P 、 O 氨 氮 和 浊 P M) 考 T ) C D、 度 去 除率 的影 响 , 定 了最佳 絮凝 剂投加 量 以及 化 学法和 生 物法在 去 除 T 、 氮、 O 确 P氨 C D和 浊度 等方 面 的相 互 关 系. 结果表 明 : S和 P M 复 配对 B段 污水 的 T A A P有 很好 的 去除 效果 , 投 加 A ( A2 3 ) . m / 、 A 0 0 m S 以 l 计 9 5 g L P M . 5 #L时 , P C D、 氮和 浊度 的平均 去除 率分 O T 、O 氨
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生物除磷的化学强化处理技术作者:黄卫东, 张鹏, 冯生华作者单位:深圳中兴环境工程技术有限公司1.期刊论文江田民.杨海光.陈筛林.丁富新污水成分的变化对生物除磷效果的影响-环境保护2003,""(7)在气升式环流反应器中,采用模拟污水,通过厌氧-好氧交替过程研究了活性污泥生物除磷过程.在实验过程中,通过改变模拟污水中碳源的种类和浓度,以及硝酸盐的浓度,观察活性污泥的生物除磷和COD降解过程的变化,研究了模拟污水中不同成分对生物除磷过程的影响.2.学位论文赵永志A<'2>/O工艺强化生物除磷优化研究2007随着水体“富营养化"问题的日渐突出,污水排放标准的不断紧缩,以控制富营养化为目的的脱氮除磷已成为当今污水处理领域的研究热点之一。

A<'2>/O是最基本的生物脱氮除磷工艺。

但是,传统A<'2>/O工艺出水水质不高,尤其难以同时实现高效的脱氮和除磷。

为了解决该问题,本课题以生活污水为处理对象,以5F-A<'2>/O中试设备为基础,首次设计并应用竖流式初沉污泥发酵工艺强化生物除磷,系统的考察了各运行工况和进水条件下,通过优化系统,强化生物除磷情况。

首先通过小试试验探讨了BOD<,5>/TP对除磷的影响,并对低碳源生活污水如何提高进水BOD<,5>/TP,提出了有效的解决方法。

通过中试试验证实,初沉污泥水解能有效的提高进水BOD<,5>/TP,有利于强化生物除磷。

试验发现,初沉污泥水解提高了BOD<,5>/TP和BOD<,5>/TKN比,尤其能显著提高进入生化系统VFA含量,为后续强化生物处理创造了理想的条件。

并对竖流式初沉污泥发酵工艺经初沉污泥水解后水质指标进行了系统的分析,试验发现经污泥水解后进水的BOD<,5> CODcr、TP、SP、SS、BOD<,5>/TP、BOD<,5>/TKN分别:61.1%、36.5%、36.1%、17.36%、52.0%、21.2%、68.2%。

其次研究了SRT对A<'2>/O生物除磷的影响,通过对比间歇排泥和连续排泥试验,发现在保持污泥浓度恒定的情况下,连续排泥能够有效的增加系统的排泥量,最大限度的提高除磷效果,产泥系数由间歇排泥的0.4~0.6kg DS/kg BOD<,5>,增加到连续排泥的0.5~0.85 kg DS/kg BOD<,5>。

在本试验进水水质条件下,A<'2>/O工艺SRT为7~10d,出水稳定达到一级B标准。

在总氮达标的前提下,本课题提出通过初沉污泥发酵和及时控制排泥两方面强化生物除磷,经试验验证可以取得较好的处理效果。

3.期刊论文于晓洁.陈银广.顾国维.YU Xiao-jie.CHEN Yin-guang.GU Guo-wei城市污水除磷技术研究——化学强化一级除磷与生物除磷-环境科学与技术2008,31(11)文章分析了使用化学强化一级除磷技术存在的主要问题,特别指出了化学絮凝剂在生产过程中存在的消耗人类有限资源及环境污染大等缺点,认为该种除磷方法不符合可持续发展的理念.生物除磷技术因操作方便及二次污染小等特点成为近年来国内外研究的热点.文章通过介绍生物除磷技术的微生物学、除磷效率等领域的研究进展,结合本课题组取得的部分结果,认为科研工作者应重视该技术的应用基础研究并在实际生产中加以推广应用.4.学位论文袁春华低温条件下生物除磷系统的强化启动和运行试验研究2004在生物除磷脱氮系统中,聚磷菌被认为是一种噬冷性细菌,在低温的条件下仍能获得良好的生物除磷效果,Sell等人的研究表明5℃时聚磷菌的生物除磷量比15℃时高40%.然而在实际工程或实验室研究过程中却常常发现低温条件下生物除磷效果明显下降,甚至消失;在低温条件下要启动生物除磷系统也非常困难.为此,本文利用ERP-SBR系统就此现象进行研究,旨在探索影响低温条件下生物除磷系统启动和除磷效果的主要因素,为低温条件下获得良好且稳定的生物除磷效果提供帮助.5.期刊论文王荣斌.李军.张宁.宋玮华.何恒海污水生物除磷技术研究进展-环境工程2007,25(1)本文介绍污水生物除磷工艺的发展,对生物脱氮除磷特别是反硝化脱氮除磷原理和新工艺进行讨论,分析反硝化除磷技术的影响因素和反硝化脱氮除磷工艺的优缺点,指出反硝化除磷工艺适合低碳磷比、碳氮比污水的处理以及实际应用中有待进一步研究和解决的问题.6.会议论文汪慧贞.张国照A/O生物除磷工艺的改进措施2000本文论述了A/O生物除磷工艺的改进措施,指出最基本的生物除磷工艺是厌氧—好氧活性污泥法,简称为A/O法.这种工艺是使污水和活性污泥混合后依次经过厌氧和好氧区.7.学位论文管莉菠Pseudomonas putida GM6聚磷相关基因的克隆和特性研究2007水体富营养化是全球十大环境问题之一。

氮磷尤其是磷的输入是引起水体富营养化的关键因素。

城镇生活污水的排放是水体磷污染的主要来源之一。

为解决磷污染所带来的危害,在污水进入水体前进行有效处理,降低排放污水的磷浓度十分必要。

目前世界各地大规模污水处理厂主要采用强化生物除磷工艺(Enhanced bidlogical phosphorusremoval,EBPR),EBPR工艺具有污泥产生量少、不使用化学物质和运行经济等特征。

在EBPR系统中聚磷菌在磷的去除中起着至关重要的作用。

为此,加大对聚磷菌的聚磷特性、聚磷相关基因及聚磷菌的工程化应用进行研究十分必要。

本文以高效聚磷菌聚磷机理研究为主线,以高效聚磷菌GM6为研究材料,系统研究了高效聚磷菌的几个与聚磷相关的ppk基因、ppx基因、phoU基因和phaZ基因等。

通过对这些基因进行克隆、表达和敲除失活来研究菌株在强化废水生物除磷工艺中的作用,取得了大量关于污水强化生物除磷菌基因调控过程的基础研究成果。

一.Pseudomonas putida GM6的ppk基因的克隆和敲除以及除磷特性研究运用SEFA-PCR的方法,从GM6中扩增出多聚磷酸盐激酶基因(ppk),预测其全长为2 220 bps,氨基酸水平比对发现与Pseudomonas putida KT2440的同源性为89%,Pseudomonas aeruginosa PAO1为80%,Acinetobacter sp. ADP158%,Escherichia coliK12-MG1655为33%。

通过构建同源重组载体,经两次同源重组获得了失去中间约1000bps的ppk突变株。

将突变株和原始菌株分别接入低磷培养基和合成废水中进行好氧培养。

发现在同等初始OD值下,单位干重菌株所吸收的磷在重量上并无显著差异;而当初始OD值不相等时,OD值越大每毫克细胞干重所吸收的磷反而越少。

用poly-P染色法对处于好氧培养状态的突变株和原始菌株分别染色,结果发现在同等的条件下,用染色方法无法观察到突变株菌体内有poly-P的存在,而却能在原始菌株中观察到。

由于ppk基因参与催化合成长链多聚磷酸盐的,由第二个ppk基因(ppk2)来催化合成的短链多聚磷酸盐在胞内磷酸盐积累过程中可能也发挥着重要的作用。

二.Pseudomonas putida GM6的ppx基因的克隆和敲除以及除磷特性研究根据克隆ppk基因的方法从GM6中克隆到它的下游基因序列多聚磷酸酯酶基因(ppx),该基因与ppk基因的转录方向相反。

ppx长为1500 bps,编码500个氨基酸,以ATG作为起始密码子,UGA作为终止密码子。

发现其氨基酸与Pseudomonas fluorescensPfO-1的同源性为88%,P. putida KT2440为84%,Pseudomonas syringae pv. syringaeB728a为83%。

根据敲除ppk基因的方法设计两同源臂,最后获得失去中间约500 bps的ppx<'->突变株。

将突变株和原始菌株分别接入低磷培养基和合成废水中进行好氧培养。

结果发现,初始OD值相等时每毫克细胞干重所吸收的磷含量基本无差别,除磷效率并无明显差异,生长幅度也基本相同;但是,当初始OD值不相等时,每毫克细胞干重所吸收的磷含量与初始OD值的大小成反比。

通过poly-P染色后发现,原始菌株和突变株均能观察到poly-P的存在,而用染色方法观察到的poly-P应该是长链的。

我们从厌氧释磷实验中发现两种菌做成切片后也能在细胞中观察到较大的PHA颗粒,突变株中的颗粒少于原始菌株,且两菌株在单位时间内的释磷量和PHAs/MLSS值均成正比,但突变株的释磷量明显少于原始菌株,菌体合成的PHAs量占菌体干重的比例也低于原始菌株。

这些结果表明,菌株GM6中可能还存在第二个ppx基因(ppx2),它同样能催化poly-P降解成正磷酸盐,而且ppx2可能是一个水解短链poly-P的功能性基因。

三.GM6 phoU基因的克隆、KT2440 phoU基因的表达和敲除以及碱性磷酸酯酶的反应动力学特性研究根据ppk基因敲除方法,获得了KT2440的phoU突变菌株。

将突变株和原始菌株分别点接于低磷和高磷MOPS(X-Pi)的平板上,结果发现突变株在高磷平板上由原来的白斑变成了蓝斑。

这表明菌株KT2440在失去phoU基因功能后,碱性磷酸酯酶能在高磷平板上表达了,这一结果证明了PhoU在磷转运系统中是一个负调控蛋白。

通过测定原始菌株和突变株的生长值和碱性磷酸酯酶活力,发现突变株在LB培养基上的长势没有原始菌株好;根据磷酸苯二钠测定方法,突变株在这两种培养基上的酶活均高于原始菌株。

然后从KT2440中扩增基因簇pstSCAB-phoU,构建表达载体,转入GM6中得到表达菌株。

但表达菌株仍于高磷的MOPS(X-Pi)平板上显蓝斑,表明KT2440中的phoU堪至phoU-pstSCAB基因簇并不能抑制GM6中碱性磷酸酯酶的表达。

根据已报道的假单胞菌属的phoU基因的保守序列从GM6中获得了磷转运调控系统的基因簇pstSCA-phoU片段序列,其中phoU基因与KT2440的此蛋白同源性为92%。

四.Pseudomonas putida GM6的phaZ基因的克隆和敲除以及除磷特性研究从GM6中扩增出与PHA有关的基因簇(phaC1-phaZ-phaC2),其中phaC1和phaC2均是PHA合成酶基因,phaZ基因是PHA解聚酶基因。

预测phaZ基因全长为852 bps,发现与P.putida的同源性为84%,Pseudomonas sp.PC17为87%,P.fluorescens PfO-1为88%。

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