中草药中有机氯农药和拟除虫菊酯农药残留
分散固相萃取-离子阱质谱法(QuEChERS-GCMSMS)
分散固相萃取-离子阱质谱法（QuEChERS-GCMSMS ）分析中药中的农药多残留吕建霞 余翀天赛默飞世尔科技（中国）有限公司引言中药为我国的传统中医特有药物，为我国的民族文化瑰宝。
据统计，我国用于饮片和中成药的药材有1000-1200余种，其中约有20%的中药材来自人工栽培[1]。
随着人工栽培过程中农药的使用，使得中药材极可能受到农药的污染，中药材中农药残留的存在直接危害着人类的健康。
《中国药典（2015版）》[2]中提供了多种农药残留的同时检测方法，采用分散固相萃取的前处理方法，气相色谱串联质谱法的检测手段进行检测。
本文依据此方法建立了分散固相萃取-气相色谱串联质谱法对中药中60种有机氯、有机磷及拟除虫菊酯农药残留同时检测，结果表明该方法灵敏度好，回收率高，线性范围好。
仪器Trace1310-ITQ 气相色谱离子阱质谱仪，配EI 源（Thermo Scientific ）；AS1310 自动进样器（Thermo Scientific ）均质器、离心机、天平、漩涡混合器、氮吹仪（Thermo Scientific ）耗材色谱柱：TG-5MS （30 m ×0.25 mm ×0.25 μm ）（Thermo Scientific ）QuEChERS 产品：萃取管，50 mL 含6.0 g 无水硫酸镁和1.5g 醋酸钠（PN ：60105-210）；净化管，15 mL 含900 mg 无水硫酸镁、150 mgPSA 、150 mgC18（PN ：60105-227）（Thermo Scientific ）关键词分散固相萃取；离子阱质谱；TG-5 sil 色谱柱；中药；农药残留目标建立高效的气相色谱串联质谱检测方法，灵敏、快速的测定中药中的多种农药残留；样品中的农药经分散固相萃取净化，离子阱质谱采用二级质谱模式检测，灵敏度高试剂与标准品农药标准 溶液购自国家标准物质中心，浓度100 mg/L 。
中药材农残检测标准
中药材农残检测标准一、农药种类本标准所涉及的农药种类包括有机磷类、有机氯类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、有机氮类等。
二、农药残留限量根据中药材的特性和相关法规，农药残留限量应符合以下规定：有机磷类：不得检出（mg/kg）有机氯类：不得检出（mg/kg）氨基甲酸酯类：不得检出（mg/kg）拟除虫菊酯类：不得检出（mg/kg）有机氮类：不得检出（mg/kg）三、检测方法气相色谱法：适用于有机磷类、有机氯类、拟除虫菊酯类的检测。
高效液相色谱法：适用于氨基甲酸酯类、有机氮类的检测。
气相色谱-质谱联用：适用于复杂组分的定性定量分析。
四、采样方法采样点选择：根据中药材生长特点和栽培环境，选择有代表性的采样点进行采样。
采样量：每个采样点采集样品量不少于2kg。
采样时间：在中药材生长期间进行采样，一般应在采收前一个月内进行。
样品处理：将采集的样品进行粉碎、混匀、包装，并注明采样时间、地点、品种等信息。
五、判定标准若所有检测项目的残留量均低于限量值，则判定为合格。
若检测项目中有一项残留量高于限量值，则判定为不合格。
对于不合格的样品，应进行复检，若复检结果仍不合格，则判定为不合格。
六、检测周期一般情况下，中药材农残检测应每季度进行一次，以确保产品质量安全。
对于高风险品种或新种植品种，应适当增加检测频次。
七、检测报告检测机构应向委托方出具详细的检测报告，包括采样时间、地点、品种、农药残留量等信息。
对于不合格的样品，检测机构应向相关部门报告，并协助进行整改和追溯。
八、追溯体系建立完善的中药材农残追溯体系，从源头抓起，实现全过程监管。
通过建立生产档案、加强流通监管等方式，确保中药材农残问题可追溯、可查证。
同时，鼓励企业建立自律性追溯体系，提高产品质量安全管理水平。
植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的测定
植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的测定1．原理样品中有机氯和拟除虫菊酯类农药用有机溶剂提取，经液一液分配及色谱分别净化除去干扰物质，用电子捕捉检测器检测，按照色谱峰的保留时光定性，外标法定量。
2．试剂和材料石油醚(沸程30～60℃，重蒸)、丙酮(重蒸)、苯(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、无水硫酸钠、弗罗里硅土(色谱用，620~(：灼烧4h后备用，用前140℃烘烤1h，加5％水脱活)、色谱用活性炭(550℃灼烧4h后备用)、脱脂棉(经正己烷洗涤后，干燥备用)。
农药标准品：六六六(a—HCH、卜HCH、pHCH、萨HcH)纯度不低于99％，滴滴涕(p，p’一DDE、0，p’一DDT、声，pLDDD、声，p，_DDT)纯度不低于99％，七氯、艾氏剂、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的纯度不低于99％。
标准溶液：分离精确称取上述农药标准品，用苯溶解并配成1mg／mL的储备溶液。
用法时用石油醚稀释配成单品种的标准用法液。
再按照各农药品种在仪器上的响应状况，吸取不同量的标准储备溶液，用石油醚稀释成混合标准用法液。
3．仪器气相色谱仪附电子捕捉检测器(ECD)、电动振荡器、组织捣碎机、旋转蒸发仪、过滤器具[布氏漏斗(直径80mm)，抽滤瓶(20()mI。
)]、具塞三角瓶(100mI。
)、分液漏斗(250mL)、色谱柱。
4．样品制备取粮食样品经粮食粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样。
5．分析步骤 (1)提取称取10g粮食试样，置于lOOmL具塞三角瓶中，加入20mI。
石油醚，于振荡器上振摇O．5h。
(2)净化色谱柱的制备：玻璃色谱柱中先加入1cm高无水硫酸钠，再加入5％水脱活弗罗里硅土5g，最后加人1cm高无水硫酸钠，轻小扣实，用20mL石油醚淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。
净化与浓缩：精确吸取样品提取液2mI。
，加入已淋洗过的净化柱中，用100mL石油醚一乙酸乙酯(95+5)洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近于，用少量石油醚多次溶解残渣于刻度离心管中，终于定容至1．0mI。
中药材中7种拟除虫菊酯类农药残留的检测方法研究
中药材中7种拟除虫菊酯类农药残留的检测方法研究何睿;张春玲;常育【摘要】Objective To establish an analytical method for the detection of 7 pyrethroid pesticides residue in Chinese herbal medi-cines and supply an evidence for the standard of safety to use traditional Chineseherbs .Methods The sample was extracted with acetone and the extractwas cleaned by using GPC and Graphite carbon columns .Based onGC/MS ,the pesticides were separated on a DB-17MS column using a temperature program and were detected with a mass selective detector in selective ion monitoring (SIM) mode .Results 7 pesticides were separated within 13 minutes .Linearities of the 7 kinds pesticides were good(r=0 .9991-0 .999 9) in ranges of 10-1 000 μg · L -1 .The limit of detection was 0 .9-2 .3μg · kg -1 .The average spiked recoveries in three lev-els were 70%-112% with relative standard deviation (RSD) less than 10% (n=9) .Conclusion The method is sensitive for the res-idue analysis of 7 pesticides in traditional Chinese herbs .%目的：建立中药材中7种拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，为中药材安全使用标准的建立提供科学依据。
中草药中有机氯及拟除虫菊酯类农药残留的同时测定
ＷＡ Ｇ Ｌ ｌ ｇ ， Ａ ｎ ， Ｉ ｉ ｈ ａ ，Ｉ ｅ ｃ ｕ Ｊ Ｎ ｈ — ｕ Ｎ ｕ— ｉ Ｄ Ｉ ｕ Ｘ Ｕ Ｌ — ｕ ＬＵ Ｒ ｎ— ｈ ｎ ， Ａ Ｇ Ｓ ｉ ｊａ ｎ Ｊ Ｉ ｎ
（ ．ｃｏｌｆＢｏｏｙａｄ Ｆ ｏ ｎｉ ｅ ｎ ， ｉ ｅｃ ｅ ｎｔｕｅｏ １Ｓｈｏ ｏ ｉ ｇ ｎ ０ｄＥ ｇｎ ｒ ｇ ｎＴａｈｒ Ｉｓｔｔ复杂 ， 药残 留量低 ， 超痕 量范 畴 。 农 属 其 中农 药 的提取 、 分离 、 净化 与富集难 度较 大 ， 重 干 严 扰农药残 留量 的测 定 。随着 工业 化 的大规 模发 展 。 环 境污染 日益严 重 ， 化肥 与农 药 的不 规 范 使用 ， 可 能 都 造 成 中草药 中农 药残 留超 过允许水 平 ， 极大地 影 响中 药材质量 ， 影响广大人 民群众 的用 药安全 。 有 机氯农 药作 为一类重 要 的持 久 性有 机 污染 物 （ Ｃ ｓ虽早 已被禁 用 ， 由于其 大 多具 有 ” Ｏ Ｐ） 但 三致 ” 效
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第２ ４卷 第 ２期
２０ ０ ８年 ２月
吉 林 工 程 技 术 师 范 学 院 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｉ ｎ Ｔ ａ ｈ ｍ ｎ ｔ ｕ ｅ ｏ ｇｎ ｅ ｉ ｇ ａ ｄ Ｔ ｃ ｎ ｌ￣ ｏ ｒ ａ ｆＪｌ ｅ ｃ ｅ Ｉ ｓｉ ｔ ｆＥｎ ｉｅ ｒｎ ｎ ｅ ｈ ｏ ｏ ｉ ｔ
［ 摘 要］ 以人参和桔梗为研究对象 ， 采用超声 波提取 、 固相萃取 、 ｏ ｓ 柱 串联活性 碳 吸附柱净化 等手 ｌｉ ｌ ｆ ｆｉ
段对样 品进行处理 ， 利用气相色谱电子捕获检测器 同时测定 样 品中有 机氯和拟 除虫菊酯类 农药残 留的
含量 。
［ 关键词 ］ 中草药 ； 有机氯 ； 菊酯 ； 农药残 留
分析中药中的农药多残留
定量离子 94 109 136 156 127 260 183 284 87 183 237 183 304 246 183 265 127 286 263 272 290 277 296 173 97 278 263 291 136 323 146 145 375 318 263 263 231 235 235 161 157 235 341 182 160 183
于 Carb/NH2 SPE 小柱上层添加 1cm 高无水 Na2SO4；先用 8 mL 乙腈 / 乙酸乙酯 (3/1) 淋洗层析柱，再将萃取浓缩液转 移至 SPE 柱内，取适量乙腈 / 乙酸乙酯 (3/1) 清洗浓缩瓶， 转入 SPE 柱内，然后用 20mL 乙腈 / 乙酸乙酯 (3/1) 洗脱， 洗脱液氮吹浓缩近干，精确量取 1mL 丙酮复溶，供 GC/MS 分析。 色谱条件 色谱柱：TG-5MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm) 柱温：80℃ (1 min)，20℃ /min 到 180℃ (0 min)，
μg/L)，考察 49 种农残的加标回收情况。实验结果表明各 组分的加标回收率均在 70-120% 之间 ( 其中甲胺磷、乙酰 甲胺磷和氧乐果除外，可能由于萃取过程热降解导致 )， 符合日常分析检测的要求。对 100 μg/L 加标水平平行测定 3 次，RSD 值在 0.7-8.1%，符合稳定性要求。同时以三倍 信噪比计算各组分检出限，各组分检出限在 0.3-2.0 μg/L 之 间 ( 见表 3 )。
25 毒死蜱
Y=203007+28449.8*X 0.9997
26 倍硫磷
Y=52879.9+20094.2*X 0.9999
27 艾氏剂
Y=28786.6+4718.6*X 0.9995
进出口根茎类中药材中多种有机氯拟除虫菊酯类农药残留量的测定编制说明
《进出口根茎类中药材中多种有机氯、拟除虫菊酯类农药残留量的测定》编制说明一、标准制定的任务来源及意义1、任务来源本标准的制定工作，是按照国家认证认可监督管理委员会国认科[2012]36号文件《关于下达2012年第一批出入境检验检疫行业标准制（修）订计划项目的通知》下达的任务而进行的，项目编号为2012B132，项目名称为《进出口根茎类中药材中多种有机氯、拟除虫菊酯类农药残留量的测定》，由重庆出入境检验检疫局负责起草。
技术归口单位为全国进出口食品安全检测标准化技术委员会（SAC/TC445）。
2、制定标准的意义中药材疗效温和有效，毒副作用小，是我国人民防治疾病的主要材料，在国内有较大市场，并且迅速走向国际市场[1]。
目前大部分中药材都依赖于人工栽培，为了提高产量，防治病虫害，频繁地使用各种农药，造成中药材农药残留污染[2]，中药材的农药达到一定的残留量后，如果人类长期服用这类中药材，农药就会在体内累积起来，从而引起慢性中毒。
许多国家不仅严格限制使用高毒，高残留的农药，还制定了农药的最高残留限量（Maximum residues limits ,MRLs），中药材的进出口都要求农药残留量要低于各国的MRLs（各国对各种农药的添加限量见表1~表3）。
表1 山药中各国对27种农药的残留限量注：六六六：α、β、γ以及δ-BHC总量硫丹：α-硫丹和β-硫丹总量氯氰菊酯：包括氯氰菊酯的四种同分异构体滴滴涕：pp’-DDT、op’-DDT、pp’-DDE、pp’-DDD总量“/”表示未有残留限量。
我国现行标准还没有同时对中药材中多种有机氯、拟除虫菊酯农药同时进行检测的方法。
在当前的国际贸易中，一些发达国家以农药残留限量问题作为是否符合WTO/SPS协议的正当理由，设置技术型贸易壁垒，严重影响了我国中药材的出口，对国家及药材产区造成重大经济损失[3]。
为了满足进出口中药材质量检验监管需要，保障人民生活安全，维护国家的利益，提高中药材农药的检测技术水平，打破国外技术性贸易壁垒并促进对外贸易的发展，制定适用于中药材中多种有机氯、拟除虫菊酯同时检测的标准非常必要和紧迫。
中草药中有机氯农药和拟除虫菊酯农药残留量的测定
中草药中有机氯农药和拟除虫菊酯农药残留量的测定万益群31,2 鄢爱平2 谢明勇11(南昌大学食品科学教育部重点实验室,南昌330047) 2(南昌大学分析测试中心,南昌330047)摘 要 建立了中草药中11种有机氯农药和8种拟除虫菊酯农药的残留气相色谱分析方法。
样品用含30%丙酮的乙腈提取,用正己烷进行液液分配,提取液用弗罗里硅土柱净化,采用兰州化物所的农残Ⅱ号毛细管柱分离,用GC 2ECD 同时检测。
在两个水平添加时的回收率(n =5)分别为78.6%～119.7%和86.5%～114.0%,相对标准偏差分别为3.6%～8.7%和4.4%～10.2%。
该方法的检出限为:有机氯农药01005mg/kg,拟除虫菊酯农药0.01mg/kg 。
方法用于江西中草药样品中农药残留测定,结果满意。
关键词 有机氯农药,拟除虫菊酯农药,残留测定,中草药 2004201215收稿;2004211229接受本文系江西省自然科学资助项目(No .0420039)1 引 言我国约有80%的中药材来自人工栽培,因此,就很有可能使中药材受到农药的污染。
所以,加强中药中有机农药残留量检测方法研究十分必要。
近年来,国内虽有这方面的研究工作报道[1～4],但多集中在六六六、滴滴涕等有机氯农药的检测,而其它类型农药检测方法研究较少。
而对于拟除虫菊酯类农药残留量检测的研究,主要集中在茶叶等食品中[5,6],对中药材中的残留研究的不多。
本实验根据日本、东南亚、欧盟等国的食品中有关农药残留检测项目[7],建立了同时测定中药中多种农药残留量的方法,取得了较好的效果。
相对传统的分析方法[8,9],提高了分析速度,简化了操作步骤,节约了试剂。
由于中草药的基体都有一定的颜色,因此对农药残留量分析,净化尤为重要,可根据颜色的深浅,调节净化柱中中性氧化铝的用量,必要时可加少量活性炭。
由于中草药成分较为复杂,有可能对农药残留检测产生一定影响。
2 实验部分2.1 仪器与试剂Agilent 6890N 气相色谱仪(美国Agilent 公司),配63N i 2ECD 检测器;DS 21高速组织捣碎机(上海标本模型厂);DSY 2Ⅱ型自动快速浓缩仪(北京金科精华苑技术研究所);RE 252A 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);T DL 252A 低速大容量离心机(上海安亭科学仪器厂);XK962A 快速混匀器(姜堰市新康医疗器械有限公司);AS20500A U ltras onic Cleaner 。
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结果与分析
• 色谱柱的选择 • DΒ—1701柱的分离效果较好,但所需时间 较长;而兰州化物所的农残Ⅱ号柱的分离效 果比较满意(见图1) ,并且所需时间较短。因 此,选择兰州化物所的农残Ⅱ号毛细管柱进 行色谱分离。
农药标准品色谱图
提取方法的选择
• 索氏提取回收率为80. 8% ～112. 3%,但索 氏提取用时较长,消耗溶剂也较多。 • 均质提取 ,所得回收率为87. 6% ～120. 7% , 回收率较为稳定,但对于均质提取,清洗较为 麻烦,且易造成交叉污染。 • 超声波提取所得回收率为78. 6% ～119. 7% ,回收比较稳定,操作强度小,且试剂用量 小,无交叉污染,故本文采用超声波提取。
• 高氰戊菊酯(德国RDH公司) ;乙腈、正己烷、 丙酮、乙醚、石油醚、氯化钠均为分析纯; 正己烷、石油醚、乙醚均须重蒸,其中石油 醚收集67～69℃馏分;无水硫酸钠(分析纯, 使用前650℃灼烧4 h) ; Florisil (农残级,使 用前650℃灼烧4 h后转到130℃烘箱保持5 h) ;中性氧化铝(农残级,使用前650℃灼烧4 h) 。
样品检测
• 将江西产的栀子、白术、丹参和板兰根进 行检测，准确称取一定量样品,按选定实验 方法进行测定。根据峰面积外标法定量,计 算样品中农药残留量,结果见表3。由于有机 氯农药的稳定性好,半衰期长,虽然在我国禁 用已有近20年,但在上述4种中药中仍有一定 量的残留,而拟除虫菊酯类农药在上述4种中 药种植过程中未发现有大量使用。
中草药中有机氯农药和拟除虫 菊酯农药残留量的测定
杜淼 临床兽医 1309064014
引
言
• 我国约有80%的中药材来自人工栽培,因此, 就很有可能使中药材受到农药的污染。 • 国内虽有有机农药残留量检测工作报道 ,但 多集中在六六六、滴滴涕等有机氯农药的 检测,而其它类型农药检测方法研究较少。 • 本实验建立了同时测定中药中多种农药残 留量的方法,取得了较好的效果 。
提取液净化
• 层析柱自上而下装填1 cm无水硫酸钠, 1 g 中性氧化铝, 5 g弗罗里硅土和1 cm无水硫 酸钠,用橡胶棒轻轻振击,装填均匀,用20 mL 正己烷预淋洗层析柱后,倒入浓缩液,用含 20%乙醚的正己烷洗脱,每min 1～2 mL,共 收集30 mL洗脱液,于旋转蒸发仪减压浓缩 至干,用正己烷定容到1. 00 mL,取1. 0μL按2. 2. 2 色谱条件进行测定。
色谱条件
• 兰州农残Ⅱ号毛细管柱, 25. 0 m ×530 mm ×1. 00 mm (膜厚) 。色谱柱温度:60℃(2 min)15℃/min270℃ ( 8 min ) ; 检测器温度: 300℃; 进样口温度: 250℃。载气为高纯 N2 :3 mL /min (恒流) ;尾吹气(高纯N2 ) : 60 mL /min。进样量1. 0 mL;定量方法:峰面积 外标法定量,其中氯氰菊酯、氟胺氰菊酯的 峰面积以各异构体的峰面积之和计。
样品提取
• 取市面上中药材样品自然阴干,用组织捣碎机捣碎 后过0. 45 mm粒径筛,称取粉碎样品1. 0 g于20 mL 离心试管中,加2 mL 含30%丙酮的乙腈溶液, 于快速混匀器上混匀,超声提取15 min,加入2 mL 5%的氯化钠溶液,混匀,再加入2 mL 正己烷提取液, 于快速混匀器混匀,超声提取15 min,于3600 r /min 离心5 min,小心移取上层有机相于10 mL刻度离心 管中,水相分别用2 mL正己烷重复提取一次,合并 有机相,在快速浓缩仪上浓缩至2 mL左右。
实验方法
• 标准工作储备液配制 • 称取高氰戊菊酯标准品0. 0100 g于100 mL容量瓶 内,用石油醚溶解并稀释至刻度,此溶液高氰戊菊酯 浓度为100 mg/L,将100 mg/L 的α—六六六、β— 六六六、γ—六六六、δ—六六六、p, p′— 滴滴伊、 p, p′— 滴滴涕、o, p′— 滴滴涕、p, p′— 滴滴滴、 艾氏剂、狄氏剂、七氯、联苯菊酯、甲氰菊酯、 三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊 酯、溴氰菊酯和高氰戊菊酯用石油醚配制成0. 5 ×10- 6有机氯农药和1. 0 ×10- 6拟除虫菊酯的混 合标准工作储备液。
标准曲线绘制
• 按选定的色谱条件进样,以吸收峰面积对浓 度作标准曲线,得19种农药的线性方程及相 关系数。有机氯农药在0. 005～0. 5 mg/L之 间,拟除虫菊酯类农药在0. 01～1. 0 mg/L 之 间线性关系良好
19种农药线性方程及相关系数
方法回收品中分别加入1. 00 mL和100μL混合标准工作储备液,按选定方法提取、 净化和检测,以峰面积计算各种农药在2种添加水 平的回收率。重复实验5次,计算各种农药的平均 回收率及相对标准偏差 。逐渐降低添加农药混合 标准工作储备液的体积,测定其回收率,有机氯农药 添加在0. 005 mg/kg水平回收率为89. 1% ～125. 4%;拟除虫菊酯农药在0101 mg/kg水平的回收率 为67. 3%～87. 5%。由此得方法实际检出限有机 氯农药均可达到0.005mg/kg,菊酯类农药均可达到 0. 01 mg/kg,基本满足中草药中有机氯农药和拟除 虫菊酯类农药残留量的检测要求。
实验材料
• • • • • • • • 仪器 Agilent 6890N气相色谱仪 配63Ni—ECD检测器 仪器 DS—1高速组织捣碎机(上海标本模型厂) DSY—Ⅱ型自动快速浓缩仪 RE—52A旋转蒸发器 TDL—5—A低速大容量离心机 XK96—A快速混匀器
试剂
• α—六六六、β—六六六、γ—六六六、δ— 六六六、p, p′— 滴滴伊、p, p′— 滴滴涕、o, p′— 滴滴涕、p, p′— 滴滴滴、艾氏剂、狄 氏剂、七氯、联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟 氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰 菊酯、溴氰菊酯等农药标准品
回收率实验结果( n = 5)
中药中农药残留量测定结果(mg/kg)