去除核酸方法总结
去除dna中rna的方法
去除dna中rna的方法
去除DNA中的RNA，可以采取以下几种方法：
1. 使用核糖核酸酶：这是一种比较有效的方法，核糖核酸酶能够选择性地破坏RNA，而对DNA没有影响。
然而，使用的核糖核酸酶中可能含有极微量的脱氧核糖核酸酶，因此需要事先进行加热处理以除去，然后将纯净的核糖核酸酶与样品溶液一起在37℃孵育数分钟，即可达到破坏RNA的目的。
2. 利用钙盐分步沉淀：在核酸溶液中加入一定量的氯化钙溶液，使DNA和RNA都成为钙盐。
然后利用DNA钙盐在一定浓度的乙醇中能形成沉淀析出，而RNA钙盐不形成沉淀的性质，将两者分离。
3. 使用活性炭吸附：将处理好的活性炭按一定比例加入每毫升含有～
1mgDNA的溶液中，在低温下搅拌一定时间。
然后以高速离心的方式除去RNA，回收DNA，回收率可达94%。
4. 在RNA制品中除去DNA，可以采用苯酚水溶液抽提的方法。
在没有阴
离子化合物存在下，反复用等体积的90%苯酚水溶液抽提RNA，可以除去
大部分的DNA。
5. 另外，使用被广泛研究的核酸内切酶RNase A也是一种有效的方法。
RNase A对核糖核酸有水解作用，但对脱氧核糖核酸不起作用。
因此，它
能够用来去除DNA制品中的污染RNA。
以上方法可以根据实际需求和实验条件进行选择。
请注意，这些方法可能需要特定的设备和试剂，并且操作过程中需要严格控制条件，以确保实验结果的准确性和可靠性。
核酸的提取经验及原理总结
一、核酸核苷酸单体聚合而成的生物大分子，是生物细胞最基本和最重要的成分。
一般认为，生物进化即始于核酸，因为在所有生命物质中只有核酸能够自我复制。
今天已知核酸是生物遗传信息的贮藏所和传递者。
一种生物的蓝图就编码在其核酸分子中。
核酸是1869年米歇尔(F.Miescher)在脓液的白细胞中发现的。
他当时称之为核素。
阿尔特曼(R.Altmann)于1889年认识其酸性后，定名为核酸。
二、核酸的分类和功能核酸分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两大类。
这两类核酸有某些共同的结构特点，但生物功能不同。
DNA贮存遗传信息，在细胞分裂过程中复制，使每个子细胞接受与母细胞结构和信息含量相同的DNA；RNA主要在蛋白质合成中起作用，负责将DNA的遗传信息转变成特定蛋白质的氨基酸序列。
核酸的基本结构单元是核苷酸，核苷酸含有含氮碱基、戊糖和磷酸3种组分。
碱基与戊糖构成核苷，核苷的磷酸酯为核苷酸。
DNA和RNA中的戊糖不同，RNA中的戊糖是D-核糖；DNA不含核糖而含D-2-脱氧核糖(核糖中2位碳原子上的羟基为氢所取代)。
核酸就是根据其中戊糖种类来分类的，DNA和RNA的碱基也有所不同。
三、核酸的理化性质RNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶，DNA则为白色类似石棉样的纤维状物。
除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外，核酸和核苷酸大都呈酸味。
DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离核酸易溶于水，RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L，DNA钠盐在水中为10g/L，呈黏性胶体溶液。
在酸性溶液中，DNA、RNA易水解，在中性或弱碱性溶液中较稳定。
天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。
要从细胞中提取DNA 时，先把DNP抽提出来，再把P除去，再除去细胞中的糖，RNA 及无机离子等，从中分离DNA 。
四、细胞裂解：（一）裂解原理在核酸提取过程中，细胞裂解是非常重要的。
磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理磁珠法核酸提取是一种常用的核酸提取方法，它利用磁珠表面修饰的特定功能基团与核酸特异性结合的原理，通过外加磁场将目标核酸与杂质分离，实现高效、快速、简便的核酸提取过程。
本文将详细介绍磁珠法核酸提取的原理及其应用。
一、磁珠法核酸提取原理。
1. 磁珠的表面修饰。
磁珠是一种微米级的磁性颗粒，其表面可以修饰上各种功能基团，如羧基、氨基、硅烷基等。
这些功能基团可以与核酸特异性结合，实现对核酸的选择性提取。
2. 核酸结合与分离。
将样本中的核酸与修饰好的磁珠充分混合后，核酸与磁珠表面的功能基团发生特异性结合，形成核酸-磁珠复合物。
通过外加磁场，可以将核酸-磁珠复合物快速沉积到底部，而其他杂质则可被去除，实现核酸的快速分离纯化。
3. 洗脱与回收。
经过磁场分离后，核酸-磁珠复合物被沉积于管壁，可以通过去除上清液和洗涤缓冲液的方式去除杂质。
最后，通过改变离心条件或改变缓冲液的离心条件，将洗脱后的核酸重新悬浮在适当的缓冲液中，实现核酸的回收。
二、磁珠法核酸提取的优势。
1. 高效快速。
磁珠法核酸提取不需要离心柱或硅胶膜等物质，操作简便快速，提取时间短，适用于大批量样本的处理。
2. 高纯度。
磁珠法核酸提取可以高效地去除杂质，得到高纯度的核酸，适用于后续的分子生物学实验。
3. 自动化程度高。
磁珠法核酸提取可以与自动化设备结合，实现全自动化操作，提高样本处理效率。
4. 应用广泛。
磁珠法核酸提取适用于各种类型的样本，包括血液、组织、细胞培养物等，具有广泛的应用前景。
三、磁珠法核酸提取的应用。
1. 临床诊断。
磁珠法核酸提取广泛应用于临床诊断领域，如病毒、细菌、真菌等病原体的核酸检测，基因突变的检测等。
2. 分子生物学研究。
在分子生物学研究中，磁珠法核酸提取被广泛应用于基因克隆、PCR扩增、测序等实验中，为后续实验提供高质量的核酸样品。
3. 食品安全检测。
磁珠法核酸提取也可以应用于食品安全领域，如食品中病原微生物、转基因成分等的检测。
核酸提取经验及原理总结
核酸提取经验及原理总结核酸提取是分子生物学研究中的一项重要技术，它可以从生物样品中分离和纯化出目标的核酸分子，为后续的实验操作提供基础。
本文将对核酸提取的经验和原理进行总结，以帮助读者更好地理解和应用该技术。
核酸提取的经验总结：2.样品的预处理：在核酸提取前，需要对样品进行一些预处理，如细胞裂解、组织破碎等。
这些步骤有助于释放和保护核酸分子，促进提取效果。
3.溶解和裂解：核酸提取的第一步是将样品溶解和裂解，以释放核酸分子。
溶解缓冲液常用于裂解样品，并加入蛋白酶进行蛋白质降解。
此时需要考虑样品的特性和实验要求，选择合适的裂解缓冲液和裂解方法。
4.核酸分离：核酸分离是核酸提取的关键步骤，常用的分离方法有酚-氯仿法、硅胶柱法和磁珠法等。
在选择分离方法时需考虑样品的类型和实验要求，以及各种方法的特点和优势。
5.纯化和浓缩：提取的核酸分子中常含有杂质，需要进行纯化和浓缩。
常用的纯化方法有酚-氯仿法、琼脂糖凝胶电泳法和商用纯化试剂盒等。
纯化后的核酸可以进行浓缩，以提高其浓度和纯度。
6.质量检测：核酸提取后，需要对提取的核酸分子进行质量检测。
常用的检测方法有琼脂糖凝胶电泳、比色法和荧光分析等。
通过检测可以了解核酸的浓度、纯度和完整性，为后续实验提供准确的数据。
核酸提取的原理总结：1.细胞裂解和溶解：细胞裂解是将细胞壁和细胞膜破坏，使细胞内容物暴露在溶液中。
细胞溶解液中常含有裂解缓冲液和蛋白酶等物质，以促进细胞的裂解和蛋白质的降解。
2.核酸分离和纯化：核酸在细胞溶解液中可以与其他细胞成分分离，常用的方法有酚-氯仿法。
酚可溶于水，而氯仿可溶于有机溶剂，通过两相溶剂的分层，可以将核酸沉淀到有机相中，从而实现核酸的分离。
3.杂质去除和浓缩：通过纯化方法，可以将核酸与其他杂质分离。
如硅胶柱和磁珠法通过静电吸附和洗脱来除去杂质，商用纯化试剂盒则通过离心柱等固相材料来实现。
纯化后的核酸可以进行浓缩，以提高其浓度和纯度。
4.质量检测：核酸提取后，需要对提取的核酸进行质量检测。
核酸实验报告小结
一、实验目的本次实验旨在学习核酸提取和检测的基本原理和方法，掌握从细胞或组织中提取核酸的操作步骤，并利用相关技术检测核酸的纯度和浓度。
二、实验原理核酸是生物体内的重要遗传物质，包括DNA和RNA。
DNA主要存在于细胞核中，而RNA则主要存在于细胞质中。
核酸提取是将细胞或组织中的核酸分离出来，以便进行后续的检测和分析。
常用的核酸提取方法有苯酚-氯仿法、CTAB法等。
核酸检测主要包括定量检测和定性检测，常用的定量检测方法有比色法、荧光定量PCR等。
三、实验材料1. 细胞或组织样本2. 无菌操作工具（镊子、剪刀、吸管等）3. 提取试剂（苯酚、氯仿、异丙醇、NaCl溶液等）4. 试剂盒（如核酸提取试剂盒、PCR试剂盒等）5. 仪器（离心机、电泳仪、凝胶成像系统等）四、实验步骤1. 样本处理：取适量细胞或组织样本，加入适量缓冲液，用匀浆器充分匀浆。
2. 核酸提取：将匀浆后的样本加入苯酚-氯仿混合液，剧烈振荡混匀，静置分层。
取上层水相，加入氯仿再次混匀，静置分层。
取上层水相，加入等体积的异丙醇，混匀，静置，待核酸沉淀。
3. 核酸纯化：将沉淀的核酸用70%乙醇洗涤，弃去上清液，将核酸沉淀干燥后溶解于适量缓冲液中。
4. 核酸定量：取适量核酸溶液，加入比色试剂，在特定波长下测定吸光度，计算核酸浓度。
5. 核酸检测：取适量核酸溶液，加入PCR试剂盒，进行PCR扩增。
将扩增产物进行电泳，观察结果。
五、实验结果与分析1. 核酸提取：通过观察苯酚-氯仿分层情况，判断核酸提取效果。
若分层明显，则表明核酸提取成功。
2. 核酸纯化：通过观察沉淀情况，判断核酸纯化效果。
若沉淀物呈白色絮状，则表明核酸纯化效果较好。
3. 核酸定量：通过比色法测定核酸浓度，计算结果。
若吸光度值在标准曲线范围内，则表明核酸浓度测定准确。
4. 核酸检测：通过PCR扩增和电泳检测，观察结果。
若出现特异性条带，则表明核酸检测成功。
六、实验结论本次实验成功从细胞或组织中提取了核酸，并通过比色法和PCR技术对核酸进行了定量和检测。
核酸原理实践心得体会
一、引言核酸是生物体内重要的遗传物质，包括DNA和RNA两种。
在生物学领域，核酸的研究具有极其重要的意义。
近年来，随着分子生物学技术的飞速发展，核酸研究在疾病诊断、基因治疗、基因工程等领域取得了显著的成果。
为了深入了解核酸的原理和应用，我参加了学校组织的核酸原理实验课程。
通过实践，我对核酸有了更深刻的认识，现将心得体会分享如下。
二、实践过程1. 实验准备在实验前，我们首先了解了核酸的基本概念、结构、功能以及与生物体的关系。
接着，我们学习了DNA和RNA的提取、分离、鉴定等实验方法。
在实验过程中，我们严格按照实验步骤进行操作，力求做到精确、规范。
2. DNA提取DNA提取是实验的第一步。
我们采用了酚-氯仿法提取细胞内的DNA。
在实验过程中，我们学会了如何使用酚-氯仿混合液，如何分离蛋白质和DNA，如何用乙醇沉淀DNA 等。
通过实验，我们成功提取了细胞内的DNA。
3. DNA分离与鉴定在DNA分离与鉴定实验中，我们使用了琼脂糖凝胶电泳技术。
首先，我们制备了琼脂糖凝胶，然后加入DNA样品和电泳缓冲液。
在电泳过程中，DNA根据其分子量大小在凝胶中分离。
通过观察电泳图谱，我们可以鉴定DNA的存在。
4. RNA提取与鉴定RNA提取与鉴定实验是核酸原理实践的重要环节。
我们采用了酸酚法提取细胞内的RNA，并使用琼脂糖凝胶电泳技术对其进行鉴定。
在实验过程中，我们学会了如何使用酸酚混合液，如何分离蛋白质和RNA，如何观察电泳图谱等。
5. DNA复制与转录在DNA复制与转录实验中，我们学习了DNA聚合酶和RNA聚合酶的作用，以及DNA复制和转录的基本过程。
通过实验，我们成功观察到了DNA复制的现象，并利用DNA模板合成了cDNA。
三、心得体会1. 理论与实践相结合通过核酸原理实践，我深刻体会到理论与实践相结合的重要性。
在实验过程中，我们不仅学习了核酸的基本原理，还亲自动手操作，将理论知识应用于实践。
这种学习方法使我更加牢固地掌握了核酸知识。
核酸提取方法三种
核酸提取方法三种核酸（DNA或RNA）的提取是生物学和分子生物学研究中的一项重要技术。
这些提取方法可分为化学法、机械法和磁珠法三种。
1. 化学法：化学法是最常用的核酸提取方法之一，其基本原理是通过化学试剂破坏细胞膜和核膜，使得核酸被释放出来。
常用的化学试剂包括胰蛋白酶、SDS、EDTA、蛋白酶K等。
首先，组织样品需经过细胞破碎，方法可以是机械破碎或液氮冲击。
接下来，将样品中的蛋白质通过蛋白酶处理，以去除干扰。
然后，加入一定的试剂将DNA 或RNA稳定起来，并用氯仿醇萃取法或硅胶柱纯化法来分离核酸。
最后，用适当的缓冲液溶解核酸，使其适合后续实验使用。
2. 机械法：机械法适用于提取植物细胞原生质体中的DNA或RNA。
它的基本原理是通过物理力量破碎细胞壁和细胞膜，释放细胞质中的核酸。
机械法提取核酸的方法有刀切法、研磨法和玻璃珠破碎法等。
在刀切法中，样品被切成细小片段，然后用块状试剂研磨，最后用缓冲液洗净，使核酸溶解。
研磨法和玻璃珠破碎法则通过高速旋转或震荡的方法，利用玻璃珠等硬质物体对样品进行破碎。
3. 磁珠法：磁珠法是一种快速高效的核酸提取方法。
它利用表面修饰的磁性珠，通过磁场的作用来实现核酸的捕获、纯化和洗脱。
这种方法常用于自动化的核酸提取设备中，并通过磁力分离技术简化了传统柱层析法的操作步骤。
在磁珠法中，首先制备表面修饰的磁性珠，以使其能够选择性结合DNA或RNA。
然后，将样品与磁珠混合，使核酸与磁珠结合。
通过磁场的引导和离心沉降，磁珠与被结合的核酸被分离出来。
最后，通过洗脱步骤，将核酸从磁珠上解离，使其溶解在适当的缓冲液中。
总结：核酸提取是分子生物学研究中至关重要的一步，能够从组织样品中提取出纯度较高的DNA或RNA。
化学法、机械法和磁珠法是常用的核酸提取方法。
化学法利用试剂破坏细胞和核膜，使核酸被释放出来；机械法通过物理力量破碎细胞壁和细胞膜，释放细胞质中的核酸；磁珠法则利用表面修饰的磁性珠来捕获、纯化和洗脱核酸。
高三核酸知识点归纳总结
高三核酸知识点归纳总结核酸是生物体内重要的生物大分子，是遗传信息的载体。
在高中生物教学中，核酸的知识是重点内容之一，尤其是在高三阶段，对于准备参加高考的学生来说，掌握核酸的相关知识点对于理解生物学的基本概念和解决生物学问题至关重要。
本文将对高三阶段需要掌握的核酸知识点进行归纳总结。
一、核酸的基本结构核酸由核苷酸单元组成，每个核苷酸由一个磷酸基团、一个糖分子和一个含氮碱基组成。
根据糖分子的不同，核酸可以分为两种类型：脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA通常以双螺旋的形式存在，由两条互补的链组成，而RNA通常是单链结构。
二、核酸的功能1. 遗传信息的存储与传递：DNA携带了生物体的遗传信息，通过复制过程将遗传信息传递给后代。
2. 蛋白质合成：RNA在蛋白质的合成过程中起到关键作用，包括信使RNA（mRNA）、核糖体RNA（rRNA）和转运RNA（tRNA）等多种形式。
3. 调控基因表达：某些小RNA（如miRNA）能够调控基因的表达，影响生物体的发育和生理过程。
三、核酸的分类与特点1. DNA的特点：稳定性较高，主要存在于细胞核中，是遗传信息的主要存储形式。
2. RNA的特点：结构多样性，主要存在于细胞质中，参与蛋白质合成和基因表达调控。
四、核酸的变性与复性核酸的变性是指在某些物理或化学因素作用下，核酸双螺旋结构解开成单链的现象。
常见的变性因素包括高温、酸碱度改变、尿素等。
复性是指变性后的核酸在适宜的条件下重新形成双螺旋结构的过程。
五、核酸的提取与检测1. 核酸提取：通过物理和化学方法从细胞中提取核酸，常用的方法有酚氯仿提取法、硅胶柱纯化法等。
2. 核酸检测：通过染色、电泳等方法检测核酸的存在和纯度，如使用EB染色观察DNA在紫外光下的荧光。
六、核酸技术的应用1. PCR技术：通过特定的引物和DNA聚合酶，对特定的DNA片段进行快速扩增。
2. DNA测序：确定DNA分子中碱基的精确顺序。
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去除核酸(DNA/RNA) 常用方法
FDA、SFDA对重组蛋白、vero细胞疫苗等生物制品的DNA残留均有严格要求，近年来包括大牌进口产品在内的狂犬疫苗DNA残留超标问题，引起了社会和业界的广泛关注。
为什么一个看似简单的问题，却给众多专业人员带来如此大的困扰？一方面是由于DNA超强的化学稳定性，另一方面是由于DNA其带有大量的电荷易与其他生物大分子结合从而产生聚集（吸附）、包裹作用而难以完全除去。
DNA的去除方法主要有层析、膜过滤、离心、沉淀、酶解等方法。
这里对工业上应该最广泛和有效的离子交换层析、鱼精蛋白沉淀、酶解三类方法进行比较。
1.离子交换层析
DNA带有大量的负电荷，可以被阴离子交换剂吸附而除去（或用阳离子交换剂负吸附）。
离子交换层析在生物制品的生产中广泛使用，负载量大、成本低廉，尤其工艺中本身具有这些步骤的情况，不需单独增加去除DNA的步骤，通过控制吸附、洗脱条件，就能取得良好的去除DNA的效果。
其缺点是在DNA残留要求较高的情况下难以达到。
原因在于，当目标产物与DNA带有同种电荷时，分离较为困难；而当目标产物与DNA带相反电荷时，两者会发生聚集和包裹现象，影响去除效果。
2.鱼精蛋白沉淀
鱼精蛋白为碱性蛋白，带有大量的正电荷，能够与DNA结合生产沉淀，从而将DNA去除。
该方法操作简便、迅速，能有效降低DNA 残留量。
其缺点主要有两个方面：一方面是与离子交换层析具有相同的缺点，在DNA 残留要求较高的情况下难以达到；另一方面是需要使用大量的鱼精蛋白，容易造成鱼精蛋白残留。
3.酶解
①DNase Ⅰ
DNase Ⅰ具有DNA酶活性而不具有RNA酶活性，主要用于RNA去除DNA，用于重组蛋白等去除DNA活性偏低，效果不理想。
②非限制性核酸内切酶
直到非限制性核酸内切的出现，DNA残留这一问题才得到很好的解决。
非限制性核酸内切酶的典型代表有默克公司的Benzonase和国产Biolonase核酸酶。
该类核酸内切酶能够降解各种形式DNA和RNA，对单链、双链、线状、环状和超螺旋形式的DNA和RNA的磷酸二酯键均具有很高的活性，产生5’-磷酸核苷酸或5’-磷酸寡核苷酸，且对核酸没有序列要求。
是目前最有效的核酸去除方法。
Biolonase核酸酶是经蛋白质工程技术改造的源于Anabaena sp.非特异性核酸内切酶，产品质量达到同类进口产品水平，价格远低于进口产品，是去除DNA 最有效、经济的方法。
Biolonase具有多种规格的产品，除满足于常规去除核酸的Biolonase（纯度≥90％）外，还有满足于特殊要求的超纯Biolonase（纯度≥99％），此外高活力Biolonase更是达到500U/μl以上，相当于同类进口产品的两倍以上。
我个人认为国产的Biolonase核酸酶用于去除核酸较为理想,主要是价格较低,加上去除核酸彻底.比较适合我们这样的学校或者研发机构.。