超高效液相色谱_串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留
高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药
高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药作者：卫昊来源：《现代食品》 2018年第12期摘要：目的：采用HPLC 法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药。
方法：选取乙腈溶剂对样品内氨基甲酸酯类农药超生提取，借助HPLC 法对其进行定量分析。
结果：一定浓度范围内，质量浓度与峰面积有良好线性关系，相关系数0.992 ～ 0.992，加标回收率79% ～ 91%，RSD 为0.8% ～ 4.9%，方法检出限0.002 ～ 0.005 mg/kg。
结论：高效液相色谱法在蔬菜氨基甲酸酯类农药的测定十分适用，具有灵敏度高、准确性好的显著特点。
关键词：高效液相色谱法；氨基甲酸酯类农药；含量测定Abstract： Objective: To determine carbamic acid esters in vegetables by HPLC. Methods: Acetonitrilesolvent was used for quantitative analysis by HPLC. Results: Within a certain concentration range， there wasa good linear relationship between mass concentration and peak area， with correlation coefficient between0.992 ～0.992， marking recovery rate between 79% and 91%， RSD 0.8% ～ 4.9%， anddetection limitbetween 0.002mg/kg and 0.005mg/kg. Conclusion the method is sensitive， accurate and suitable for thedetermination of vegetable carbamate pesticides.Key words：HPLC; Carbamate pesticides; Content determination中图分类号：TS255.7HPLC 法具有较高灵敏度和较好重现性，广泛应用于氨基甲酸酯类农药检测中[1]。
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法1. 介绍随着人们对食品安全的重视，对农药残留的检测也愈发关注。
其中，果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法备受关注。
本文将详细探讨果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法，包括常用的仪器设备、样品提取和分析方法等。
2. 仪器设备果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测通常涉及到一些常见的仪器设备，包括质谱仪、气相色谱仪和液相色谱仪等。
2.1 质谱仪质谱仪是一种常用的仪器设备，用于检测物质的质量和分子结构。
在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，质谱仪可用于定性和定量分析。
常见的质谱仪包括气质联用质谱仪（GC-MS）和液质联用质谱仪（LC-MS）。
2.2 气相色谱仪气相色谱仪是一种常见的分析仪器，用于分离和检测挥发性物质。
在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，气相色谱仪常与质谱仪联用，用于分离和定量目标农药的残留量。
2.3 液相色谱仪液相色谱仪是一种通过样品的溶液进行分析的仪器。
在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，液相色谱仪可用于对非挥发性农药的分离和定量。
3. 样品提取方法样品提取是果蔬中氨基甲酸酯类农药残留检测的关键步骤之一。
常用的样品提取方法有溶剂萃取、固相萃取和超声萃取等。
3.1 溶剂萃取溶剂萃取是一种简单而有效的样品提取方法。
该方法通过将样品与合适的溶剂混合，使目标农药从样品中萃取出来。
常用的溶剂包括乙醇、乙酸乙酯和甲醇等。
3.2 固相萃取固相萃取是一种常用的样品提取方法，它利用了固相萃取柱上的固定相材料对目标农药进行吸附。
通过调节沿固定相材料上物质的移动速度，可以将目标物质从样品中分离出来。
3.3 超声萃取超声萃取是一种高效的样品提取方法。
该方法利用超声波的机械作用和热量效应，加速目标农药从固体样品或液体样品中释放出来。
超声萃取具有提取效率高、操作简单等优点。
4. 分析方法果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的分析方法通常采用质谱联用技术，结合气相色谱或液相色谱进行分析。
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法导言：近年来，随着人们对食品安全的关注度不断提高，农药残留成为引起公众担忧的一个重要问题。
特别是在果蔬生产和消费中，对农药残留的控制变得尤为重要。
氨基甲酸酯类农药是一类常见的农业药剂，其中包含许多广泛应用于果蔬种植的农药。
及时有效地检测果蔬中的氨基甲酸酯类农药残留成为了确保食品安全的重要环节。
本文将介绍几种常见的氨基甲酸酯类农药残留检测方法，包括色谱法、质谱法以及免疫分析法。
一、色谱法色谱法是一种常用的氨基甲酸酯类农药残留检测方法。
它基于分子在不同条件下吸附和解吸的特性，通过分离和定量目标农药。
常见的色谱法包括气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。
气相色谱法适用于气态或易挥发的样品，而液相色谱法适用于液体或固体样品。
气相色谱法的原理是通过将样品蒸发在固态柱上，通过升温程序使农药挥发到气相，并经过柱的分离与检测，从而实现目标农药残留的定量测定。
液相色谱法则是将样品溶解在合适的溶剂中，经过柱的分离与检测，即可得到农药残留的浓度值。
二、质谱法质谱法是一种高灵敏度、高选择性的农药残留检测方法。
常见的质谱法包括质谱-质谱联用技术（MS/MS）和高分辨质谱（HR-MS）。
这些方法结合了质量分析的高分辨率和质谱的高灵敏度，可用于低浓度农药残留的定量与鉴定。
质谱-质谱联用技术通过两次质谱扫描，即前体离子扫描和产品离子扫描，可提高农药残留分析的选择性和灵敏度。
高分辨质谱依赖于高能量碰撞诱导解离（HCD）的离子源，能够提供更准确的质谱数据，并用于农药残留分析中。
三、免疫分析法免疫分析法是一种快速、灵敏度高的农药残留检测方法。
它基于抗原和抗体之间的特异性结合反应，通过荧光、酶标记等检测方法来定量分析农药残留。
免疫分析法的优势在于快速高效，样品处理简便，不需要复杂的仪器设备，且具有较低的检测限。
然而，与色谱法和质谱法相比，免疫分析法对样品基质的影响较为敏感，有时可能会导致误检或漏检。
高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的方法与应用
农业资讯NONGYEZIXUN 农业信息高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的 方法与应用张亚萍（玉溪市江川区农产品质量安全检测站，云南玉溪 652600）摘 要 为探讨如何利用高效液相色谱法来测定氨基甲酸酯类农药的残留，对市场上的蔬菜进行随机抽样，使用配荧光检测器及柱后衍生系统的高效液相色谱法来测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留，并对每一种农药进行3种不同浓度的回收率试验。
结果表明：蔬菜中农药残留回收率在74.6%～107.6%，其精密度控制在10%以内，可使用高效液相色谱法来测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留，这种方法适用于大白菜、黄瓜、辣椒、芹菜等氨基甲酸酯类农药残留分析。
关键词 氨基甲酸酯；农药残留；高效液相色谱氨基甲酸酯类农药是一种良好的杀虫农药，这种农药在使用过程中，有高效、低毒、低残留的效果，经常被用在果蔬杀虫上，现已成为果蔬及粮食主要的杀虫剂。
但由于农户环保意识以及相关部门的管理意识不够，这类农药仍存在一些不合理使用情况，且这些不合理的使用也给当地的生态跟食品安全造成了一定影响，因此对蔬菜中的氨基甲酸酯类农药进行检测十分必要。
现如今可以完成氨基甲酸酯类农药残留检测的方法主要包括高效液相色谱法、质谱法以及液相柱后衍生法等，其中酶抑制法存在着局限性，但可以将其作为仪器分析法进行补充[1]。
高效液相色谱法在检测过程中，比较常用的检测器是紫外检测器，该检测器的灵敏度不够高，而荧光检测器的灵敏度较高，操作起来也较为简便，在众多分析方法中比较突出。
基于此，主要以我国农业行业标准——蔬菜和水果中有机磷、有机氮、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定作为参考，使用配荧光检测器以及柱后衍生系统的高效液相色谱仪测定随机抽取的蔬菜中的7种氨基甲酸酯类农药残留量，对蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留测定技术进行探讨。
１ 材料与方法１．１ 材料与试剂 主要的材料为市面上销售的白菜、黄瓜以及芹菜；主要的试剂包括甲酯、色谱纯、二氯甲烷、醋酸氨、氨基甲酸酯类标准储备液。
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法摘要由于氨基甲酸酯类农药的诸多优点，使其在农业生产过程中得到广泛地应用。
但其若进入人体可生成具有致癌作用的亚硝基化合物。
所以在果蔬中其残留量的检测有非常重要的意义。
只有测定其残留量在允许的范围内，我们的饮食安全才能得到保证。
本文简单介绍了几种最常见的检测氨基甲酸酯类农药残留量的方法。
氨基甲酸酯类农药因其杀虫谱广、用药量少但药效快、持效期长、选择性高、低残留、低毒等优点在农业生产中得到广泛大量地应用。
但若其进入人体，可生成具有致癌作用的亚硝基化合物，可抑制人体内胆碱酯酶，从而影响人体内神经冲动的传递。
所以用正确的方法检测果蔬中氨基甲酸酯类农药的残留量非常重要。
下面就分别论述几种最常用最高效的检测氨基甲酸酯类农药残留量的分析方法。
简单介绍其原理和优缺点等内容。
高效液相色谱法高效液相色谱法又称作高压液相色谱法，是近年来迅速发展起来的一项分离技术，应用于食品安全指标快速检测取得了良好效果。
高效液相色谱法是在高压条件下溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换的过程。
它借溶质在两相间分配系数“亲和力”吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差别使不同溶质得以分离。
它可以分离检测极性强、分子量大及离子型农药，尤其对不易气化或受热易分解的化合物更能显示出它的突出优点。
较常用的色谱柱有C8柱、c18柱、氨基柱、硅胶柱等，检测器有紫外检测器、荧光检测器等。
一般来说，高效液相色谱法的检出限比气相色谱的要高。
高效液相色谱法对于气相色谱法不能分析的高沸点或热不稳定的农药可以进行有效的分离检测⑤。
气相色谱法氨基甲酸酯类农药在高温条件容易分解，这给用GC对氨基甲酸酯类农药残留量进行测定带来了不便。
在实际工作中，常常考虑将氨基甲酸酯类农药水解，生成稳定的氨基甲酸酯类农药的水解产物一甲胺或酚，或通过衍生化反应提高氨基甲酸酯类农药的热稳定性，从而实现用GC对氨基甲酸酯类农药的测定。
若希望将GC应用于氨基甲酸酯类农药残留量的测定，采用冷柱头进样(OCI)也是较好的选择，这样可以较大限度地保证样品在进样过程中不分解。
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定地表水中20种氨基甲酸酯类农药残留
之间 ， 方法 的 检 出 限 为 ０ ０ ～ Ｏ ０ ｇ Ｉ； 、 、 ３ 添加 水平 的 回 收 率 为 ７ ． ～ １ ７ ， 对 标 准 偏 差 ． １ ． ５ｔ ／ 高 中 低 个 ｔ ２２ １ 相 在 １ ８ ～１ ． 之 问 。结 果 表 明 ， 方 法 灵 敏 、 确 且 检 测 范 围 广 、 析 速 度 快 。 ．２ ４２ 该 准 分
Ａｂｓｒ ｃ ：Ａ ｅ ｈｏ ｔ ｔａ ｔ ｍ ｔ ｄ ｗｉｈｏｕ ｎｙ ｐ ｅ ｔ ｅ ｔ ｎｔｓ ｅ ｓ ｕｓｎ ｌｒ ｒ ｏ ｍａ ｅ Ｌｉ ｕｉ ｔａ ｒ — ｒ ａ ｍｅ ｔ ｐ ｉ ｇ Ｕ ｔ ａ Ｐｅ ｆ ｒ ｎｃ ｑ ｄ Ｃｈｒ — ｏ
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张 明 唐 访 良 ， ， 徐建 芬 陈 峰 范 晓开 吴 志旭 ， ， ，
杭 （．杭 州 市 环 境 监 测 中心 站 ， 江 州 １ 浙 ３ ０ ０ ；．淳 安 县 环 境 保 护 监 测 站 ， 江 杭 州 １０ ７ ２ 浙 ３１０） １ ７ ０
摘 要 ： 了 更 准 确 的 检 测 氨 基 甲酸 酯 类 农 药 在地 表 水 中 的 残 留水 平 ， 立 了 无 需 前 处 理 ， 接 进 样 快 速 测 定 为 建 直
ｗｉ ． ｍ ｙ ｉｇ ｉ ｅ ｏ ａ ｔｃｅｒ ｍｏ ａ ｎ ｎ ｔｄ ｄｒ ｃｌ ｔ ＬＣ，ａ ｄ ｓ ｐ ｒ — ｔ ０２ ｈ ｓ ｒｎ ｅｆｌ ｒｆ ｒｐ ｒｉｌ ｅ ｖ ｌ ｄｉｊｃ ｅ ｉｅ ｔｙｉ ｏＵＰ ｔ ａ ｅ ｎ ｎ ｅ ａ ａ
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法
果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法一、前言随着人们对食品安全的关注度不断提高，果蔬中农药残留问题也逐渐成为了人们关注的焦点。
其中，氨基甲酸酯类农药被广泛应用于果蔬生产中，但其残留会对人体健康造成潜在威胁。
因此，为了保障食品安全，需要对果蔬中氨基甲酸酯类农药残留进行检测。
二、仪器设备1. 高效液相色谱仪（HPLC）2. 质谱仪（MS）3. 气相色谱仪（GC）4. 气相色谱质谱联用仪（GC-MS）5. 液相色谱质谱联用仪（LC-MS）6. 紫外分光光度计7. 电化学检测器三、样品处理1. 样品采集：在采集样品前，应先了解该地区的农药使用情况和种植历史。
在采集样品时应尽量避开使用过农药的地区，并选择新鲜的、未经过处理的果蔬进行采集。
2. 样品制备：将采集好的果蔬样品进行洗涤、去皮、去籽等处理，然后将样品切碎或磨碎成细粉末，再进行提取。
3. 提取方法：常用的提取方法有超声波法、加热提取法、溶剂萃取法等。
其中，超声波法是一种简便易行的方法。
具体操作步骤为：将制备好的果蔬样品加入适量的萃取液中，放入超声波清洗器中进行超声波处理，待样品完全提取后离心沉淀即可。
四、检测方法1. 气相色谱法（GC）气相色谱法是一种常用的检测氨基甲酸酯类农药残留的方法。
具体操作步骤如下：（1）样品准备：将提取好的样品进行稀释，并加入内标溶液。
（2）进样：将稀释好的样品注入气相色谱仪中。
（3）分离：通过调节柱温和流动相组成，使各种农药在柱上得到有效分离。
（4）检测：通过检测器对分离出来的各种农药进行检测，并计算出其含量。
2. 液相色谱法（LC）液相色谱法是一种高效、准确的检测氨基甲酸酯类农药残留的方法。
具体操作步骤如下：（1）样品准备：将提取好的样品进行稀释，并加入内标溶液。
（2）进样：将稀释好的样品注入液相色谱仪中。
（3）分离：通过调节流动相组成和柱温，使各种农药在柱上得到有效分离。
（4）检测：通过检测器对分离出来的各种农药进行检测，并计算出其含量。
超高效液相色谱——串联质谱法测定蔬菜农药残留
河南农业2020年第3期（中）农药的发明和使用,对提升农产品产量作用显著,被认为是农业生产安全的关键保证。
但是大量及长时间使用农药,将影响到生态环境和人体健康。
针对常见蔬菜和水果的农药残留,在我国多个城市中,国际绿色和平组织曾经检测出50种农药残留。
所以有效、及时地检测农药残留极其关键。
因农民喷洒农药的不规范以及使用农药的种类繁多,造成农药定量及定性分析有很大不确定性。
而样品前处理和仪器检测,是农药残留分析包含的两部分。
样品前处理过程,直接关系着分析结果的准确性,是整个农药残留分析的关键步骤。
基质固相分散、超临界、液液、固相萃取等,是常用的农残样品前处理方法,不利于农药事件的应急处理以及农残样品的大批量处理,后续仍需繁琐净化步骤,溶剂消耗量大。
选择QuEChERS 方法仍需花费大量时间实施样品净化,简化了样品前处理过程,多选择N-丙基乙二胺做净化材料,会造成酸性农药的回收率偏低,对酸性农药有吸附作用。
当前主要有高效液相色谱(HPLC )法、毛细管电泳(CE )法、高效液相色谱—质谱联用(HPLC -MS )法等,是农药残留的检测方式。
其中作为首选的,就是具有抗干扰能力强、选择性好、分离效果好、灵敏度高等优点的液相色谱—三重四极杆串联质谱(HPLC -MS /MS )技术。
本研究选择减少进样体积减小基质效应,抗干扰能力强、灵敏度高的优点,在检测蔬菜农药残留中,通过建立超高效液相色谱—串联质谱(UHPLC-MS/MS )进行检测。
一、实验部分(一)仪器及设备上海安谱仪器公司的氮吹仪;天津药典标准仪器厂的自动漩涡混合器;广州智真生物科技有限公司的SC-8L-150数控固相萃取仪;R-210,BUCHI 公司的旋转蒸发仪;上海卢湘仪离心机仪器有限公司的TG16-WS 高速离心机;Waters 公司的Quattro Premier XE 质谱仪、ACQUTTYTM 超高效液相色谱仪。
(二)试剂及材料250种农药标准品:无水乙酸钠、乙酸(CH 3COONa )、色谱纯,Merck 公司的甲醇、乙腈;无水硫酸钠、甲酸铵、硫酸钠(Na 2SO 4)、Sigma 公司的纯度≥95%;无水硫酸镁(MgSO 4);天津光复精细化工研究院的甲酸,均为分析纯。
高效液相色谱法检测大白菜中7种氨基甲酸酯类农药残留
高效液相色谱法检测大白菜中7种氨基甲酸酯类农药残留黄利英
【期刊名称】《西藏农业科技》
【年(卷),期】2013(035)004
【摘要】采用高效液相色谱法检测大白菜中7种氨基甲酸酯类农药残留(涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、克百威、甲萘威).结果表明,在萃取过程中,甲醇+二氯甲烷的比例对涕灭威砜回收率的影响很大,分别用(1+99)、(2+98)、(3+97)、(4+96)、(5+95)比例的萃取液对样品进行处理,当甲醇+二氯甲烷的比例为(3+97)时涕灭威砜回收率最大,达到96.5％,当萃取液比例为(1+99)时,回收率最小,不到40％,而对其它6种农药回收率的影响不大.
【总页数】4页(P23-26)
【作者】黄利英
【作者单位】农业部农产品质量监督西藏检验测试中心西藏拉萨·850032
【正文语种】中文
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3.多壁碳纳米管基质固相分散萃取-高效液相色谱法测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留量 [J], 方树桔;杨敏;王红斌;谭伟;张艳丽;屈林悦;杨志娥;李桂镇
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5.高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留分析 [J], 李婷婷;李玲;朱璐因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超高效液相色谱-串联质谱检测蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留
药逐 渐被限制使用 ， 以及对有机磷 农药产 生耐受性 的昆
虫 品种逐渐 增多 ， 氨 基 甲酸酯类 农药 的用 量逐 年增 加 ，
这就使得蔬菜 中氨 基 甲酸酯类农 药残 留情 况越 来越受
到关 注¨ １ ］ 。人们 对其在蔬菜 、 水果 的残 留及 环境 的危 害
越来越重视 ， 在 对果 蔬进 行例 行监测 时 ， 常 检 出氨基 甲
织匀 质 机 （ Ｉ Ｋ Ａ） ； 高 速 离心 机 （ Ｓ ｉ ｇ ｍａ ） ； 涡 旋 振 荡 器 （ Ｉ ＫＡ ） ； 氮 吹仪 （ 美国 Ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｏ ｍ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ） ； 电子天平 （ 感 量 ０ ． ０ ０ ０ １ ｇ ） ； 震荡器（ 上海一 恒科技 有限公 司） ； Ａ ｌ ｕ ｎ ｔ 氨
进行检测 ， 以期为检测蔬菜 中氨基 甲酸酯类农药 提供新 技术 。
供试 农 药 分 别 为 涕灭 威 （ Ａ １ ｄ ｉ ｃ ａ ｒ ｂ ） 、 涕 灭 威 砜
（ Ｍｄ ｉ ｃ ａ ｒ ｄ － ｓ ｕ ｌ ｆ ｏ ｎ ｅ ） 、 涕 灭 威 亚砜 （ Ａ ｌ ｄ ｉ ｃ ａ ｒ ｄ — ｓ ｕ ｌ ｆ ｏ ｘ ｉ ｄ ｅ ） 、 克
５ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ ￥ ￣ 心 ５ ｍｉ ｎ ， 取 １ ０ ｍＩ 乙腈 层于 ６ ０ ℃下 氮
供试蔬菜分别为番茄 、 茄子 、 西葫芦 、 大 白菜 、 甘蓝 。
摘 要 ： 以番 茄 、 茄子 、 西 葫芦、 大白菜、 甘 蓝 为试 材 ， 采 用 超 高 效 液 相 色谱 一 串联 质 谱 （ Ｕ Ｐ ＭＳ ／ ＭＳ ） 技术 建立了蔬 菜中 １ ２ 种 氨基 甲酸酯类农 药残 留的检测方法 。结果表 明： 样品 经 乙腈提取 ， 氨基 固相 萃取 小柱净化 ， 以ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ｂ Ｅ Ｈ Ｔ ３色谱 柱分 离， 采 用 多反应检 测模式 对试材 进行检测 ， 外标 法定量 ； 在质量浓度 １ ～ｌ Ｏ Ｏ Ｌ范 围内呈 良好 线性 ， 相关 系数 均 大于 ０ ． ９ ９ 。在
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超高效液相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留孙涛X,刘河疆,胡开峰,乔昆云,周俊(新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐830091)摘要:采用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS P MS)技术建立了同时检测蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药多残留量的快速检测方法。
样品经乙腈提取,氨基固相萃取柱净化,Waters C18超高效液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。
结果表明7种氨基甲酸酯类农药在2~500L g P L范围内线性良好(r\019986)。
在01005~0101mg P kg范围内,平均加标回收率在7214%~ 11211%之间;相对标准偏差小于13%。
该方法检出限范围为1131~3172L g P L,测定结果满足多残留农残的检测要求。
关键词:多残留量检测;氨基甲酸酯类;固相萃取;蔬菜;超高效液相色谱-串联质谱中图分类号:O657.63文献标识码:A文章编号:1000-0720(2010)04-087-05氨基甲酸酯类农药是一类广谱杀虫剂,其在蔬菜中的残留以及对人类健康和环境造成的毒害也越来越为人们所关注[1]。
目前报道的检测氨基甲酸酯类农药的方法主要有酶联免疫法和快速酶法[2],气相色谱法(GC)[3,4],气相色谱-质谱法(GC-MS)[5],液相色谱法(HPLC)[6,7],液相色谱-质谱法(HPLC-MS)[1,9~14]等法。
超高效液相色谱-串联质谱法由于使用了电喷雾离子源和超惯压液相色谱柱Acquity BE H C18,不仅大大提高了检测灵敏度,同时缩短了样品分析时间。
本实验研究了蔬菜中克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等7种氨基甲酸酯类农药残留分析的样品前处理方法和UPLC-MS P MS 检测条件,715min完成一次分析。
结果表明,本方法简便、灵敏度高,大大提高了蔬菜中多种氨基甲酸酯类农药残留检测工作效率。
1实验部分1.1仪器与试剂AC QUI TY UPLC超高效液相色谱仪、Micromass Quattro Premier XE三重四极杆串联质谱仪(美国Waters公司),配有电喷雾离子源(ESI)。
高速组织捣碎机(德国IKA公司);旋转浓缩仪(日本EYELA 公司);Mill-i Q超纯水设备(美国Millipore公司);漩涡混合器;固相萃取装置(美国Supelco公司); Waters NH2固相萃取柱(60mg P3mL)。
NaCl(AR,用前120e烘4h);乙酸铵、乙腈、C H2Cl2、甲醇等均为色谱纯;其他试剂均为分析纯,水为超纯水。
1.2标准工作液的配制将克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等标准品(1000mg P L,农业部农业环境监测总站)用甲醇配制成质量浓度为20mg P L的标准储备液,依据需要稀释成适当质量浓度的标准工作液,于4e下保存。
1.3色谱条件色谱柱:Acquity BE H C18(211mm@50mm, 117L m)。
柱温:40e,样品室温度:10e;进样)87)X收稿日期:2009-06-17;修订日期:2009-08-20作者简介:孙涛(1978-),男,实验师;E-mail:suntaotxy@量:10L L流动相:溶剂A为甲醇,溶剂B为5mmol P L乙酸胺溶液。
梯度洗脱程序如表1。
表1流动相梯度洗脱程序Tab.1Gradient elution program时间t P min流速P(mL P min)甲醇U P%乙酸铵(5mmol P L)<P%梯度变化曲线ini tial0.2020806 2.000.2020806 2.010.2020806 6.500.20604066.510.20208077.500.20208061.4质谱条件离子源:电喷雾离子源(ESI);毛细管电压: 3.00kV;离子源温度:110e;锥孔反吹气流量: 50L P h;脱溶剂气温度:350e;脱溶剂气流量: 650L P h。
碰撞气:氩气,流量:0.22mL P min,驻留时间50ms,多反应监测扫描模式(MRM)。
溶剂延迟时间(0~ 1.00min, 6.80~7.50min)其他质谱参数见表2。
1.5样品采集由蔬菜批发市场购买茄子、黄瓜、油白菜、芹菜、辣椒、豇豆、甘蓝、大白菜等各2kg,采用四分法均匀取样,匀浆处理。
做添加回收试验时,样品需用水清洗后再处理,做实际样品测定时,样品不经水洗,直接处理。
表2多反应监测扫描模式(MRM)的部分质谱参数Tab.2MRM conditions for the determ ination of seven carbamate pesticides农药分子量定性离子对m P z定量离子对m P z锥孔电压ECPP V碰撞气能量ECEP V保留时间tRTP min涕灭威亚砜206.27207.0>88.7207.0>131.7207.0>88.7171716181.22涕灭威砜222.26240.1>85.7240.1>147.8240.1>85.7141420141.42灭多威162.21162.9>105.7162.9>87.7162.9>87.7121210104.24三羟基克百威237.26220.0>134.8220.0>162.9220.0>162.9282813104.25涕灭威190.27208.0>88.8208.0>88.8920 5.25克百威221.26222.1>164.9222.1>122.7222.1>164.922229226.15甲萘威201.23202.0>144.8202.0>126.8202.0>144.8191913286.431.6样品处理提取:称取25g(精确到0.01g)匀浆后的样品,置于100mL烧杯中,加50mL乙腈,高速组织捣碎机中高速捣碎1min。
将捣碎后的样品过滤到100mL具塞量筒(量筒内已放入5g NaCl)内,收集滤液后具塞,剧烈振摇2min,静置30min(若大白菜、甘蓝等含水量少的样品出现乳化现象,两相分层不明显,可加入适量水,轻轻转摇量筒即可),待乙腈相与水相分层完全。
浓缩:准确吸取10mL上层乙腈相溶液于150mL平底浓缩瓶中,于40e水浴缓慢浓缩蒸发至近干。
净化:用2mL V(甲醇)B V(CH2Cl2)=5B95溶解样品,将其加到固相萃取柱(使用前先用4mL 上述甲醇:C H2Cl2液平衡该固相萃取柱)中。
用100mL浓缩瓶收集洗脱液,用5mL V(甲醇)B)88 )V(C H2Cl2)=5B95洗涤浓缩瓶,并将其注入固相萃取柱(重复2次),合并洗脱液,旋转浓缩仪40e 蒸发至近干,用V(甲醇)B V(水)=20B80准确定容至215mL,过0122L m滤膜,待测。
2结果与讨论2.1UPLC-MS P MS分离条件氨基甲酸酯类农药的分离多采用常规10~ 25cm C18或C8液相色谱柱,本实验采用Waters公司的超高压液相色谱柱Acquity B EH C18(2.1mm@ 50mm,1.7L m)。
试验了不同的梯度程序,灭多威和三羟基克百威(分别为4.24和4.25min出峰)未能得到有效分离,但由于采用了多反应监测(MRM)模式,避免了灭多威和三羟基克百威相互干扰。
对各项质谱条件进行了优化(见表2),使各被测物的响应值达到最佳。
2.2样品前处理条件蔬菜样本中含有叶绿素、叶黄素、花青素等植物色素,样本经乙腈提取后,提取液颜色较深,尤其是油白菜等叶菜类更加明显。
目测发现,采取弗罗里硅土小柱、C18固相萃取小柱和加入PSA 的方法都不能有效祛除提取液中色素。
本方法使用Waters NH2固相萃取柱,通过目测对比,祛除提取液色素效果较以上几种方法好;结合Waters UPLC-MS P MS仪器阀切换功能,使样品提取液在1min之前和6.8min之后切入废液池,能尽量减少色素等内源性杂质进入质谱系统造成的污染。
2.3线性关系、回收率、检出限2.3.1线性关系选取空白样本提取液配制系列基质标准工作溶液,绘制标准曲线进行定量,线性关系和相关系数见表3。
结果表明,7种氨基甲酸酯类农药在浓度范围2~500L g P L线性良好。
表3线性关系、相关系数Tab.3Linear equations,correlation coefficients农药线性范围Q P(L g P L)线性方程相关系数涕灭威亚砜2~500y=1.32@107Q+2.30@1040.9994涕灭威砜2~500y=1.38@107Q-9.38@1030.9996灭多威2~500y=1.45@107Q-9.65@1040.9991三羟基克百威2~500y=7.18@106Q-1.97@1030.9986涕灭威2~500y=8.77@106Q+4.56@1030.9992克百威2~500y=5.09@106Q+4.95@1030.9987甲萘威2~500y=7.71@106Q-5.29@1020.99912.3.2回收率对7种氨基甲酸酯杀虫剂分别用黄瓜、芹菜、豇豆、甘蓝等4种蔬菜按01005、0101mg P kg添加水平进行了加标回收试验,黄瓜、芹菜、豇豆、甘蓝的回收率及其相对标准偏差(RSD)见表4。
由表4可以看出:在两个添加水平上,7种氨基甲酸酯杀虫剂的平均回收率在7214%~11211%之间,RSD[13%,符合农药多残留检测的要求。
表4氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物添加回收率Tab.4The spiked recoveries of carbamate pesticides and metabolites(n=3)农药添加水平w P(mg P kg)黄瓜回收率P%RSD P%芹菜回收率P%RSD P%豇豆回收率P%RSD P%甘蓝回收率P%RSD P%涕灭威亚砜0.0050.1073.495.05.33.682.094.6133.289.092.32.53.589.493.44.85.5涕灭威砜0.0050.1096.695.31.22.490.192.50.91.597.898.15.84.195.085.47.81.7)89)续表4(Conti nued Tab.4)农药添加水平w P(mg P kg)黄瓜回收率P%RSD P%芹菜回收率P%RSD P%豇豆回收率P%RSD P%甘蓝回收率P%RSD P%灭多威0.0050.1098.690.66.84.296.195.93.52.172.482.1123.794.896.23.31.3三羟基克百威0.0050.10101.2102.18.33.286.790.90.60.383.595.16.13.086.694.34.05.0涕灭威0.0050.1092.8109.99.76.594.995.12.98.187.190.28.60.989.891.61.33.5克百威0.0050.10112.1110.46.69.8101.986.53.80.898.281.44.72.978.290.85.79.8甲萘威0.0050.1097.198.57.23.194.389.02.26.796.8104.36.81.985.790.84.88.72.3.3检出限按S P N=3计算,7种氨基甲酸酯杀虫剂的最低检出限分别为涕灭威亚砜1143L g P L,涕灭威砜1138L g P L,灭多威1131L g P L,3-羟基克百威2164L g P L,涕灭威2116L g P L,克百威3172L g P L,甲萘威2146L g P L。