核酸检测试剂盒原理
乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)操作说明
心数秒，按 43μl/管分装到反应管中。 2. 内参配制 将 n×3μl 内参（单通道仪器不加内参）及 n×50μl 核酸提取液 B 至于一新离心管中混匀备用（混合后避免反复冻融 使用，使用前混匀 5 秒钟） 。 3. 样本、对照品的处理 样本处理：取 100μl 待检血清样本（冻存血清使用前在室温融解，振荡混匀 10 秒钟）分别加入 100μl 核酸提取液 A， 振荡混匀 10 秒种，12000rpm 离心 10 分钟，弃上清；分别加入 50μl 核酸提取液 B 与内参的混合液至沉淀中（使用前一定 要充分混匀， 将颗粒和液体一起加入沉淀中， 其中颗粒量应在 15％以内） ， 振荡混匀 10 秒钟， 100℃保温 10 分钟， 12000rpm 离心 2 分钟。处理后的样品应在 1 小时内使用，或在-20℃～-80℃最长保存 1 个月（不宜反复冻融）。 血清对照品处理：按照血清标本处理方法处理试剂盒内阳性血清对照、弱阳性血清对照、阴性对照。（冻存血清对照品 使用前在室温融解，振荡混匀 10 秒钟）。 定量校准品处理：定量校准品无需处理，在样本加样前直接将定量校准品 1 号至 5 号振荡混匀 10 秒钟，低速离心数秒 后加样。 4. 样本加样 将样品处理上清液（冻存样品使用前室温充分融化，振荡混匀数秒，12,000rpm 离心 2 分钟）、阳性血清对照、弱阳性 血清对照、阴性对照以及定量校准品各 7μl 分别加入反应管中，低速离心数秒，取出置定量 PCR 仪上。 5. 仪器扩增程序 1、ABI7300/7500/Mx3000P/SLAN 双通道仪器：反应管先在 50℃反应 2 分钟，然后 94℃保温 5 分钟，再按 94℃10 秒→60℃45 秒 循环 40 次。60℃采集 FAM、JOE 荧光通道的信号。 2、LightCycler 480 仪器：反应管先在 50℃反应 2 分钟，然后 94℃保温 5 分钟，再按 94℃10 秒→60℃45 秒 循环 40 次。 60℃采集 FAM、RED 610 荧光通道的信号。 3、单通道仪器：反应管先在 50℃反应 2 分钟，然后 94℃保温 5 分钟，再按 94℃10 秒→60℃45 秒 循环 40 次，60℃采集 FAM 荧光通道信号。 6. 质量控制 试剂盒中提供定量校准品五个，阴性对照，阳性血清对照和弱阳性血清对照各一个。如试剂质量完好并操作正确，阳性 血清对照、弱阳性血清对照、定量校准品应表现为阳性结果，阴性对照应表现为阴性结果，阳性血清对照定量值为 5.0±2.5 ×10 IU/ml，弱阳性血清定量值为 5.0±2.5×10 IU/ml。如超过范围则实验无效，应检查仪器、试剂、扩增条件等方面的 误差。在每次检测中都应设置阴阳性对照品。 7. 结果判断 仪器程序运行完成后，按软件要求进行结果保存，输入HBV 定量校准品的量值，选择自动分析模式，软件将自动给出标 准曲线并计算各样本的HBV DNA 含量Q(IU/ml）。
肠道病毒(CA16) 核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）说明书
肠道病毒（CA16）核酸测定试剂盒（荧光PCR 法）说明书【产品名称】通用名称：肠道病毒(CA16) 核酸测定试剂盒（荧光PCR 法）说明书英文名称：CA16 Real Time RT-PCR Kit【包装规格】48人份/盒【用途】本试剂由国家疾病预防控制中心病毒病预防控制所脊灰实验室、浙江省疾病预防控制中心病毒所共同研发，杭州博日科技有限公司生产。
试剂通过对样本中肠道病毒（CA16）的特异性RNA 核酸片段进行定性检测，可用于临床对可疑感染患者的病原学鉴别的辅助诊断。
【检验原理】本试剂盒采用Thermus thermophilus HB8 株来源的rTth DNA 聚合酶，该酶在二价锰离子（Mn2+）存在下具有很强的逆转录活性，利用该特性，结合荧光探针技术，一步法逆转录扩增样本中肠道病毒（CA16）的特异性RNA 。
可用于临床及科研对CA16的辅助诊断和抗病毒药物的疗效观察。
【主要组成成份】 试剂盒组成数量 组份 A 液600ul×1 含有rTth DNA 聚合酶和dNTP 等的溶液 CA16引物探针 72ul×1 含有引物、探针的溶合液 核酸扩增试剂 B 液60ul×1 阴性对照200ul×1 CA16 RNA 阴性的ddH 2O 临界阳性对照 200ul×1 CA16 RNA 阳性的低浓度灭活病毒 对照品 强阳性对照200ul×1 CA16 RNA 阳性的高浓度灭活病毒 其他DEPC 水 1.0ml×1【储存条件及有效期】1） 试剂盒必须在冷冻条件下运输。
2） 试剂盒保存：请在-20℃保存，融解后须上下颠倒混匀方可使用。
使用后重新-20℃保存，通常冻融10 以内不会影响实验，但也请尽量避免反复冻融。
如果一次使用量较少，可以在融解后分装成几管，每次取一管使用。
如果短期内需多次使用，可在4℃保存，但须在2 个月内用完。
注意必须避光保存。
核酸检测试剂盒原理
核酸检测试剂盒原理首先是核酸提取试剂。
核酸通常嵌入在细胞或病毒颗粒中，因此需要使用核酸提取试剂将核酸从样本中提取出来。
核酸提取试剂通常包含一个蛋白酶，它能够分解蛋白质，使得核酸从蛋白质的包裹中释放出来。
此外，核酸提取试剂还包含一些溶剂，如盐和酒精，用于使细胞或病毒颗粒破裂和沉淀，从而获得含有核酸的上清液。
接下来是核酸扩增试剂。
核酸检测通常需要扩增核酸的数量，以达到检测的灵敏度。
核酸扩增试剂通常包含一个DNA聚合酶，它能够在一定的温度下，将核酸模板作为引物，合成新的DNA链。
核酸扩增试剂还包含了核酸模板的引物和适当的缓冲液，以调节反应的条件。
在核酸扩增的过程中，还需要考虑PCR（聚合酶链式反应）或RT-PCR （逆转录聚合酶链式反应）的选择。
PCR是一种将DNA扩增到指数级别的技术，它利用DNA聚合酶在高温下对DNA模板进行连续扩增。
而RT-PCR则是先将RNA逆转录成DNA，再进行扩增。
RT-PCR广泛应用于病毒检测和基因表达分析等领域。
最后是核酸标记试剂。
核酸检测通常需要通过标记物来检测核酸的存在和数量。
核酸标记试剂通常包含了一种标记物，如荧光染料或放射性同位素。
对于荧光染料标记，核酸标记试剂中通常含有可与核酸结合的一对引物，其中一对引物上带有荧光染料，另一对引物标记有Quencher。
引物与核酸结合后，荧光染料和Quencher之间的距离很近，因此无荧光信号。
在核酸扩增的过程中，当核酸扩增到引物位点时，荧光染料和Quencher被分离，发出荧光信号。
对于放射性同位素标记，核酸标记试剂中通常含有一种放射性同位素，如32P或35S，它能够与核酸结合。
标记的核酸通过放射性示踪仪来检测。
最后，核酸检测的结果可以通过聚合酶链式反应仪（PCR仪）或放射性示踪仪来记录和测量。
PCR仪可以记录PCR反应的温度变化和荧光信号，从而得到核酸的扩增曲线和定量结果。
放射性示踪仪可以测量核酸标记物的辐射量，从而得到核酸的数量。
爱德基游离DNA提取试剂盒使用说明书
游离DNA提取试剂盒使用说明书【产品名称】通用名称：游离DNA提取试剂盒英文名称：Cell Free DNA Extraction Kit【包装规格】24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。
其处理后的产物用于临床体外检测使用。
【实验原理】本试剂盒采用具有分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，在特定的盐离子浓度和pH值条件下，磁珠特异的吸附小片段的游离DNA，不吸附基因组DNA。
能够更好的适用于产前无创诊断和癌症基因分析诊断。
【主要组成成分】另需要准备的试剂及注意事项无水乙醇（分析纯）、超纯水或去离子水。
【储存条件及有效期】试剂盒储存在常温，有效期12个月。
【适用仪器】高速冷冻离心机、真空负压装置及真空泵【样品要求】1用装有EDTA抗凝剂的采血管取病人或孕妇（孕12-24周）5 mL全血，上下颠倒混匀，4℃运输。
2 在离心机中3000 rpm 的转速下，离心10min 分离血清。
按2mL/支收集血清,直接进入下一步实验或-20℃储存。
●使用前用无水乙醇稀释漂洗液，做好标记√。
●现配制80%乙醇：取20mL超纯水，加入80mL的无水乙醇，上下颠倒混匀。
【实验步骤】1. 血清/血浆样本预处理取1mL血清/血浆12000rpm 离心10 min，收集上清，用于游离核酸的提取。
注意:也可将血清/血浆样本在6000×g下离心30min以去除剩余的血细胞和细胞碎片。
2.蛋白酶K处理2.1 按照下表指示顺序，添加试剂到15mL离心管：试剂体积血浆/血清体积1mL 2mL 4mL 10ml蛋白酶K(20mg/mL) 20μL 40μL 80μL 200µL20%SDS 130μL 260μL 520μL 1040µLtotal 1.15mL 2.30mL 4.60mL 11.24 ml注意：不要将SDS直接加到蛋白酶K中，以避免蛋白酶K失去活性。
核酸检验试纸的原理和方法
核酸检验试纸的原理和方法核酸检验试纸是一种常用的快速、便捷的检测方法，用于检测核酸的存在和浓度。
它的原理是通过特定的化学反应，将核酸的存在转化为可见的颜色变化或其他信号。
以下将详细介绍核酸检验试纸的原理和方法。
一、核酸检验试纸的原理核酸是由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成的线性生物大分子。
核酸检验试纸主要依据核酸和染料间的相互作用原理进行检测。
核酸可与染料发生特异性的结合，当细胞核酸检测试纸中染料与核酸结合后，会发生颜色变化。
具体来说，核酸检验试纸的原理包括以下两个方面：1. 染料与DNA结合：核酸检验试纸中的染料分子通常具有亲核性，可以特异性地与核酸的碱基结合，形成染色复合物。
染色复合物的形成会导致试纸颜色发生变化。
2. 阻断作用：核酸检验试纸还可以通过阻断作用实现核酸的检测。
某些试纸上的试剂能够与核酸结合，以阻断其与其他试剂的反应。
二、核酸检验试纸的方法核酸检验试纸通常分为几个步骤，包括样品处理、试纸处理以及结果读取。
下面将详细介绍核酸检验试纸的方法。
1. 样品处理核酸检验试纸适用于各种来源和类型的核酸样品，如细胞提取物、血清、尿液等。
在进行检测之前，需要对样品进行初步处理，以获得纯度较高的核酸。
具体方法包括细胞裂解、酸性醇提取、蛋白酶处理等。
一般而言，核酸提取试剂盒可以提供一站式的样品处理方案。
2. 试纸处理将样品与试纸反应，通常有两种方法：- 带吸管的净化柱法：将样品吸入吸管中，然后通过离心等方式使样品与试纸反应，最后将试纸与核酸样品接触，充分混合。
待染料与核酸结合后，将试纸离心收集染料上清液。
- 直接滴加法：将样品直接滴加到试纸上，使样本与试纸中的试剂发生反应。
3. 结果读取待试纸染料上清液脱色后，通过目测或特定设备进行颜色定量分析或其他信号的测量。
结果的解读通常通过对比样品与对照进行，观察颜色的变化。
三、核酸检验试纸的应用核酸检验试纸可以广泛应用于临床诊断、食品安全、环境监测等领域。
丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法)(北京纳捷诊断说明书2018年)
丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书【产品名称】通用名称：丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR–荧光探针法）【包装规格】 48人份/盒【预期用途】本试剂盒用于体外定量测定血清样本中的丙型肝炎病毒（HCV）核酸（RNA），适用于需要进行HCV感染检测的患者和接受抗病毒治疗的丙型肝炎患者。
本试剂盒可以检测HCV 1~6型临床常见型别，主要通过对丙型肝炎患者血液中HCV RNA含量及变化情况的监测，用于评估抗病毒治疗的应答和治疗效果。
该检测不得作为患者病情评价的唯一指标，必须结合临床表现和其他实验室检测指标对患者病情进行综合评价。
本试剂盒不得用于HCV的血源筛查。
【检验原理】本试剂盒在PCR扩增管内用含磁珠的裂解液提取血清样本中HCV RNA，并在同一管中进行扩增，HCV RNA在逆转录酶作用下反转录成HCV cDNA，然后在DNA聚合酶的作用下，应用TaqMan探针技术扩增HCV cDNA并进行实时荧光定量检测。
本试剂盒校准品和质控品为含有丙型肝炎病毒的临床血清样本（已灭活）。
本试剂盒通过检测内标来监测样本中是否有PCR抑制物，避免假阴性。
【主要组成成分】丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR–荧光探针法）序号产品组成主要成分规格与装量RLB 核酸提取试剂HCV裂解液（含磁珠）氢氧化钠、氯化钾、Tris碱、构象磁珠7.5ml×1瓶RWB HCV漂洗液氯化钾、乙酸钠25.0ml×1瓶1 PCR扩增试剂HCV RT-PCR 反应液引物、探针、脱氧核糖核苷三磷酸、镁离子0.95ml×2管2 HCV酶混合液M-MLV逆转录酶、DNA聚合酶100μl×1管3校准品HCV校准品①（1.0～3.0）×106IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管4 HCV校准品②（1.0～3.0）×105IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管5 HCV校准品③（1.0～3.0）×104IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管6 HCV校准品④（1.0～3.0）×103IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管7质控品HCV强阳性质控品（0.5～5.0）×104IU/ml HCV阳性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管8 HCV弱阳性质控品（100～700）IU/ml HCV阳性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管9 HCV 阴性质控品HCV阴性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管10 内标HCV内标内标核酸模板60μl×1管备注：a.校准品①～④的参数和强阳、弱阳性质控品的定值存在批间差异（均在以上范围内）。
核酸抗原检测试剂盒测试原理
核酸抗原检测试剂盒测试原理一、前言核酸抗原检测试剂盒是一种新型的检测方法，可以快速、准确地检测出人体内是否存在新冠病毒。
本文将详细介绍核酸抗原检测试剂盒的测试原理。
二、核酸抗原检测试剂盒简介核酸抗原检测试剂盒是一种基于免疫学和生物技术的快速诊断试剂，主要用于检测人体内是否存在SARS-CoV-2病毒。
该试剂盒采用夹心ELISA法（Enzyme-linked Immunosorbent Assay）进行检测。
三、夹心ELISA法夹心ELISA法是一种常见的免疫学实验方法，其基本原理是利用特异性抗体与相应抗原之间的结合作用来实现对目标物质的定量分析。
该方法主要包括以下步骤：1. 将特异性抗体涂覆在固定在微孔板上的固相载体上，并形成一个单层蛋白质薄膜。
2. 加入待测样品，待样品中的目标物质与固相载体上的特异性抗体结合。
3. 加入另一种标记有特异性抗体的检测试剂，该抗体与目标物质上不同的表位结合。
4. 加入底物，使标记物质发生颜色变化，从而实现对目标物质的定量分析。
四、核酸抗原检测试剂盒测试原理核酸抗原检测试剂盒主要包括样品处理板、检测板和读板器三部分。
其测试原理如下：1. 样品处理将待测样品加入样品处理板中，加入试剂后离心沉淀。
然后将上清液加入检测板中进行检测。
2. 夹心ELISA法将特异性抗体涂覆在固定在微孔板上的固相载体上，并形成一个单层蛋白质薄膜。
加入待测样品后，目标物质与载体上的特异性抗体结合。
然后加入另一种标记有特异性抗体的检测试剂，该抗体与目标物质上不同的表位结合。
最后加入底物，使标记物质发生颜色变化。
3. 读板器分析将检测板放入读板器中进行分析。
通过比较待测样品与阴性对照和阳性对照的光密度值，可以判断样品中是否存在SARS-CoV-2病毒。
五、总结核酸抗原检测试剂盒是一种快速、准确的新型检测方法，其测试原理主要基于夹心ELISA法。
该方法通过特异性抗体与相应抗原之间的结合作用实现对目标物质的定量分析，可广泛应用于临床诊断和疫情监测等领域。
MP核酸检测试剂盒说明书
肺炎支原体（MP）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）说明书【产品名称】通用名称：肺炎支原体（MP）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）英文名称：PCR-Fluorescence Detection Kit for Mycoplasma Pneumonia【包装规格】32人份/盒【预期用途】本产品用于定性检测痰液或咽拭子中的肺炎支原体核酸。
肺炎支原体（）是人类支原体肺炎的病原体，主要经飞沫传染，潜伏期2～3周，支原体肺炎的临床表现和胸部X线检查并不具特征性，单凭临床表现和胸部X线检查无法做出诊断。
若要明确诊断，需要进行病原体的检测。
而病原体核酸检测是目前最为直接的检测手段。
适应症：由肺炎支原体感染引起的肺炎等疾病。
【检验原理】本试剂盒选用肺炎支原体（MP）保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对肺炎支原体核酸的自动化检测。
【主要组成成份】注: 不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月。
【适用仪器】ABI7300、ABI7500荧光PCR扩增仪。
【样本要求】1. 标本：痰液及咽拭子。
2. 采集器：应当选用国家批准生产的一次性使用的咽拭子，拭子应当包括洁净海绵头、PP杆、PP杆与海绵头应连接牢固，经无尘清洗包装。
3. 采集：样本采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。
a. 自然咳痰法以晨痰为佳，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，标本量应大于等于1ml。
b. 咽拭子取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，转动拭子取出粘液。
4.存放：2-8℃保存，不超过24小时；-20℃下保存，不超过3个月；-70℃下长期保存，但应避免反复冻融。
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核酸检测试剂盒原理
核酸检测试剂盒是建立在核酸的特性的一种生物分子检测技术，它既可以用于检测和诊断疾病，也可以用于研究生物，分析复杂的分子信号通路，甚至探讨环境，人类健康和农业等问题。
它们可以提供有关病原体和疾病机制的信息，并且可以快速、灵敏、准确地检测到病毒、细菌、真菌等微生物的痕量，帮助诊断者掌握疾病的早期信息，有效地控制疾病的发展。
核酸检测试剂盒的原理可以分为两个主要部分：抗原检测和快速增强技术。
1.抗原检测：抗原检测建立在核酸特性的基础上，可以对细菌、病毒和真菌的基因片段进行检测。
核酸抗原检测分为抗原识别（PCR）和抗原斑点（ELISA）两大类。
PCR技术是一种用于扩增受检物染色体或基因片段的一种技术，它可以从样品中快速、准确地检测出有关病毒、细菌或真菌的特异性抗原。
ELISA是利用化学反应技术检测抗原的另一种技术，它可以检测出抗原的特异性，使用ELISA试剂盒可以检测出抗体的存在，从而准确获得病毒、细菌或真菌的诊断信息。
2.快速增强技术：快速增强技术是一种有效的基因检测技术，它的原理是使用抗原技术（PCR和ELISA），增加抗原特异性的检测灵敏度，从而提高核酸抗原检测的选择性、灵敏度和效率。
快速增强技术可以提高核酸检测试剂盒的选择性，使抗原检测试剂盒更加适用。
总之，核酸检测试剂盒是一种用于分析核酸识别的技术，它的原理是利用抗原识别和快速增强技术，以病毒、细菌、真菌等病原体为
对象，对病毒、细菌或真菌的特异性抗原进行检测，并可以快速、灵敏、准确地检测到病毒、细菌、真菌等微生物的痕量，帮助诊断者掌握疾病的早期信息，有效地控制疾病的发展。
综上所述，核酸检测试剂盒技术可以应用于检测病原体和疾病机制，对分析某一生物学活动具有重要意义，发挥了重要作用。