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《化学发光分析》课件
《化学发光分析》PPT课 件
本课程将介绍化学发光分析的工作原理、分类、常用试剂和仪器、典型实验 操作步骤以及优点和应用。让我们一起探索这一极具活力和创新性的化学分 析技术。
化学发光分析概述
什么是化学发光分析？
化学发光分析是指利用发光剂 （luminophore）与感光器 （photodetector）在光激发条件下 发生发光反应进行分析的技术。
发光机制和原理
发光反应主要包括螯合发光、化学 发光、电化学发光和生物发光，其 基本原理为激发能量从分析物传递 到发光剂。
化学发光分析的分类
化学发光分析主要分为储能法、电 化学发光法、免疫分析法、分子印 迹技术法和气相化学发光分析 （GPCA）等。
优点和应用
快速、敏感、高效
化学发光法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短和快速分析等优势，被广泛应用于临床、 食品、环境、药学、安全等领域。
数据统计和分析
4
利用计算机等工具进行数据的整理、计算与 分析，得出结果，并进行结果的验证和确认。
取样
用适当的方法取得样品，并得到有效的样品。
发光检测
激发分析样品使其产生发光，并利用仪器对 其进行检测。
案例分析和总结
CRO公司使用化学发光分析技术加 快药代动力学评估
合同研究组织（CRO）将计划100名志愿者的药代动力 学模拟研究里程碑提前了八个月，其采用了高通量类 似物筛选、高通量药代动力学测定和新一代大规模并 行化药代动力学建模等技术。这些技术包括，化学发 光法作为测定细胞器的特异性标记的方法。
电化学发光分析
电化学发光分析仪（ECL）是用于 电化学发光分析的专用设备，适用 于光谱分析和光度测定等分பைடு நூலகம்。
酶标仪
酶标仪是一种测量酶反应的光度仪 器，通常用于免疫学、生化学等领 域的分析。
本课程将介绍化学发光分析的工作原理、分类、常用试剂和仪器、典型实验 操作步骤以及优点和应用。让我们一起探索这一极具活力和创新性的化学分 析技术。
化学发光分析概述
什么是化学发光分析？
化学发光分析是指利用发光剂 （luminophore）与感光器 （photodetector）在光激发条件下 发生发光反应进行分析的技术。
发光机制和原理
发光反应主要包括螯合发光、化学 发光、电化学发光和生物发光，其 基本原理为激发能量从分析物传递 到发光剂。
化学发光分析的分类
化学发光分析主要分为储能法、电 化学发光法、免疫分析法、分子印 迹技术法和气相化学发光分析 （GPCA）等。
优点和应用
快速、敏感、高效
化学发光法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短和快速分析等优势，被广泛应用于临床、 食品、环境、药学、安全等领域。
数据统计和分析
4
利用计算机等工具进行数据的整理、计算与 分析，得出结果，并进行结果的验证和确认。
取样
用适当的方法取得样品，并得到有效的样品。
发光检测
激发分析样品使其产生发光，并利用仪器对 其进行检测。
案例分析和总结
CRO公司使用化学发光分析技术加 快药代动力学评估
合同研究组织（CRO）将计划100名志愿者的药代动力 学模拟研究里程碑提前了八个月，其采用了高通量类 似物筛选、高通量药代动力学测定和新一代大规模并 行化药代动力学建模等技术。这些技术包括，化学发 光法作为测定细胞器的特异性标记的方法。
电化学发光分析
电化学发光分析仪（ECL）是用于 电化学发光分析的专用设备，适用 于光谱分析和光度测定等分பைடு நூலகம்。
酶标仪
酶标仪是一种测量酶反应的光度仪 器，通常用于免疫学、生化学等领 域的分析。
化学发光介绍-PPT
26
肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
27
肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
27
肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
化学发光PPT课件
A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率（ ΦCL ）
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
常见化学发光技术PPT课件
02
它利用化学反应过程中释放的能 量激发发光物质，使其发出特定 波长的光，从而实现物质的检测 。
化学发光技术的原理
当某些物质被某种能量激发时，这些 物质会吸收能量并跃迁至激发态。
在化学发光反应中，通常需要加入特 殊的化学物质作为发光物质，这些物 质在反应过程中被激发并发出光辐射 。
当这些物质从激发态回到基态时，会 以光子的形式释放能量，从而产生光 辐射。
化学发光反应通常比较简单，所需的仪器 设备相对不复杂，操作简便，检测快速。
缺点
背景光干扰
化学发光反应中可能伴随有背景光的产生 ，对检测结果造成干扰，影响检测的准确
性。
特定性不强
某些化学发光反应可能不仅仅与目标物质 发生反应，也可能与其他类似物质发生反
应，导致检测的特异性不够强。
试剂昂贵且不稳定
某些化学发光试剂比较昂贵且容易分解变 质，需要妥善保存，增加了实验成本和难 度。
03
CATALOGUE
化学发光技术的优缺点
优点
高灵敏度
宽线性范围
化学发光技术具有很高的灵敏度，能够检 测到极低浓度的物质，因此在生物医学、 环境监测和食品安全等领域有广泛应用。
该技术线性范围较宽，可以适应不同浓度 的样品检测，减少了样品稀释和浓缩的繁 琐步骤。
非放射性
简单快捷
化学发光反应产生的光子不带电荷，因此 没有放射性污染，对实验人员和环境安全 。
在生物医学研究中的应用
蛋白质组学研究
利用化学发光技术对蛋白 质进行标记和检测，有助 于蛋白质相互作用、定位 和功能研究。
基因表达分析
通过化学发光技术检测基 因表达水平，研究基因调 控和疾病发生机制。
细胞成像与定位
利用化学发光技术对细胞 内分子进行标记和成像， 研究细胞结构和功能。
它利用化学反应过程中释放的能 量激发发光物质，使其发出特定 波长的光，从而实现物质的检测 。
化学发光技术的原理
当某些物质被某种能量激发时，这些 物质会吸收能量并跃迁至激发态。
在化学发光反应中，通常需要加入特 殊的化学物质作为发光物质，这些物 质在反应过程中被激发并发出光辐射 。
当这些物质从激发态回到基态时，会 以光子的形式释放能量，从而产生光 辐射。
化学发光反应通常比较简单，所需的仪器 设备相对不复杂，操作简便，检测快速。
缺点
背景光干扰
化学发光反应中可能伴随有背景光的产生 ，对检测结果造成干扰，影响检测的准确
性。
特定性不强
某些化学发光反应可能不仅仅与目标物质 发生反应，也可能与其他类似物质发生反
应，导致检测的特异性不够强。
试剂昂贵且不稳定
某些化学发光试剂比较昂贵且容易分解变 质，需要妥善保存，增加了实验成本和难 度。
03
CATALOGUE
化学发光技术的优缺点
优点
高灵敏度
宽线性范围
化学发光技术具有很高的灵敏度，能够检 测到极低浓度的物质，因此在生物医学、 环境监测和食品安全等领域有广泛应用。
该技术线性范围较宽，可以适应不同浓度 的样品检测，减少了样品稀释和浓缩的繁 琐步骤。
非放射性
简单快捷
化学发光反应产生的光子不带电荷，因此 没有放射性污染，对实验人员和环境安全 。
在生物医学研究中的应用
蛋白质组学研究
利用化学发光技术对蛋白 质进行标记和检测，有助 于蛋白质相互作用、定位 和功能研究。
基因表达分析
通过化学发光技术检测基 因表达水平，研究基因调 控和疾病发生机制。
细胞成像与定位
利用化学发光技术对细胞 内分子进行标记和成像， 研究细胞结构和功能。
2019-2020年mp化学发光系统简介精品课件
全自动化学发光免疫分析仪
软件系统
• 中、英、西班牙文界面、 报告软件
• 真正实现人机对话
• 智能报警
全自动化学发光免疫分析仪
精美，简练的外观
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样 温育
清洗
测量
废弃物
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样
清洗
温育
测量
废弃物
新产业与同行产品对比
对比项目
发光标记 物
测量原理
MAGLUMI 2000 Plus
罗氏e-411
中国第一台 全自动化学发光免疫分析仪
深圳市新产业生物医学工程股份有限公司
临床检验常见类别
血液/体液常规检测
直接化学发光
临 床 检 验
生化 免疫
定量
放射性免疫检测
化学发光检测
金标免疫检测
电化学发光
半定量
酶促化学发光
酶联免疫检测
微生物
免疫定量检测原理
血液（尿液）中有很多含量非常低（pg/ml、 ng/ml 、 mg/ml），但非常灵敏，其浓度变 化能准确反映人体疾病的发生、发展状况。 如： T3、T4、AFP、肌钙等等
全自动化学发光免疫分析仪
采样针
• 双针，分别加试剂和样本 • 内外壁清洗，针外壁特氟龙包
被，杜绝交叉污染 • 液面探测、凝块检测功能
全自动化学发光免疫分析仪
反应杯加载存储器
• 一次可装载720个反应杯 • 检测过程中，可随时连续装载
全自动化学发光免疫分析仪
样本编辑模式
正常模式：病人ID号从条形码上读取,项目手动输入；
[优选文档]化学发光法的原理技术要点及评价应用PPT
![[优选文档]化学发光法的原理技术要点及评价应用PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/d08764dd31126edb6e1a107b.png)
• 化学发光剂或发光底物：在化学发光反应中参 与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量 的化合物。
• 发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂
化学发光剂应符合以下几个条件
①能参与化学发光反应； ②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂； ③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力； ④应不改变或极少改变被标记物的理化特性，
2.分离技术 将复合物转移到玻璃纤维上，用缓 冲液洗涤，没结合的抗原被洗脱，酶标抗体-抗 原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
HRP
+N2 + H2O +光
对-羟基苯乙酸（HPA）
• HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体（荧光 物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长 的荧光，可用荧光光度计测量。
1.2 HPA
H2O2 HRP
HO
CH 2 COOH +荧
光
HO
CH 2 COOH
氧化二聚体
AMPPD
1.4 4-MUP
AP H3PO4 +
360nm 激发光
荧
4-MU
光
2.直接化学发光剂
特点：不需催化剂，只需改变溶液的pH等条件 就能发光的物质。反应迅速、背景低、 信比高，发光量与AE浓度呈线性关系。
常用试剂：吖啶酯（acridinium，AE）
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
R
CH 3 N
O CO O
T P A +●
电极
●
TPA
R u ( b p y )33 +
激发态
R u ( b p y )3 *
RuBiblioteka (bpy
• 发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂
化学发光剂应符合以下几个条件
①能参与化学发光反应； ②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂； ③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力； ④应不改变或极少改变被标记物的理化特性，
2.分离技术 将复合物转移到玻璃纤维上，用缓 冲液洗涤，没结合的抗原被洗脱，酶标抗体-抗 原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
HRP
+N2 + H2O +光
对-羟基苯乙酸（HPA）
• HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体（荧光 物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长 的荧光，可用荧光光度计测量。
1.2 HPA
H2O2 HRP
HO
CH 2 COOH +荧
光
HO
CH 2 COOH
氧化二聚体
AMPPD
1.4 4-MUP
AP H3PO4 +
360nm 激发光
荧
4-MU
光
2.直接化学发光剂
特点：不需催化剂，只需改变溶液的pH等条件 就能发光的物质。反应迅速、背景低、 信比高，发光量与AE浓度呈线性关系。
常用试剂：吖啶酯（acridinium，AE）
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
R
CH 3 N
O CO O
T P A +●
电极
●
TPA
R u ( b p y )33 +
激发态
R u ( b p y )3 *
RuBiblioteka (bpy
化学发光法原理及应用PPT文档共24页
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
化学发光法原理及应用
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只பைடு நூலகம்中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
化学发光法原理及应用
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只பைடு நூலகம்中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
化学发光介绍ppt课件
9
主要内容
免疫学检测方法介绍 感染性疾病检测 肿瘤标志物检测 甲状腺及甲状旁腺功能检测 肝纤维化检测 肾功能检测 激素检测 自身抗体检测 优生优育
唐氏筛查 心血管及心肌标志物 高血压辅助诊断 糖代谢 骨代谢 贫血类 炎症 药物浓度
10
感染性疾病检测
甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测 HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属 HAV-IgM 人感染HAV后，血液中首先出现anti-HAV-IgM,于发病
优点：特异性好
缺点：灵敏度较差，结果判断主观，只能定性检测
6
免疫学检测方法介绍
时间分辨荧光分析法：用3价稀土离子及螯合物为示踪物代替荧 光物质、酶、同位素化学发光物质，标记抗体、抗原、激素、多 肽、蛋白质、核酸及生物细胞，待反应体系发生后，用时间分辨 检测仪测定反应产物中的荧光强度。根据产物荧光强度和相对荧 光强度的比值，判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分 析。
14
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
优点：灵敏度高、特异性好、可实现自动化 缺点：成本较高
7
免疫学检测方法介绍
化学发光检测技术：免疫反应系统和化学发光分析系统。 化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和 氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态 中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用 发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发 光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在 抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
主要内容
免疫学检测方法介绍 感染性疾病检测 肿瘤标志物检测 甲状腺及甲状旁腺功能检测 肝纤维化检测 肾功能检测 激素检测 自身抗体检测 优生优育
唐氏筛查 心血管及心肌标志物 高血压辅助诊断 糖代谢 骨代谢 贫血类 炎症 药物浓度
10
感染性疾病检测
甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测 HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属 HAV-IgM 人感染HAV后，血液中首先出现anti-HAV-IgM,于发病
优点：特异性好
缺点：灵敏度较差，结果判断主观，只能定性检测
6
免疫学检测方法介绍
时间分辨荧光分析法：用3价稀土离子及螯合物为示踪物代替荧 光物质、酶、同位素化学发光物质，标记抗体、抗原、激素、多 肽、蛋白质、核酸及生物细胞，待反应体系发生后，用时间分辨 检测仪测定反应产物中的荧光强度。根据产物荧光强度和相对荧 光强度的比值，判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分 析。
14
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
优点：灵敏度高、特异性好、可实现自动化 缺点：成本较高
7
免疫学检测方法介绍
化学发光检测技术：免疫反应系统和化学发光分析系统。 化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和 氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态 中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用 发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发 光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在 抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
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试剂盒
• 试剂盒自带标准品，两点定标修正主曲线 • 集成试剂盒设计，无需试剂预处理，即开即用 • 射频识别技术，试剂的所有信息储存在高频电子标签上 • 更新、增加新项目无需对软件升级，方便快捷
31
全自动化学发光免疫分析仪
软件系统
• 中、英、西班牙文界面、 报告软件
• 真正实现人机对话 • 智能报警
中国第一台 全自动化学发光免疫分析仪
深圳市新产业生物医学工程股份有限公司
1
临床检验常见类别
血液/体液常规检测
直接化学发光
临 床 检 验
生化 免疫
定量
放射性免疫检测
化学发光检测
金标免疫检测电化学发光 Nhomakorabea半定量
酶促化学发光
酶联免疫检测
微生物
2
免疫定量检测原理
血液（尿液）中有很多含量非常低 （pg/ml、ng/ml 、 mg/ml），但非常灵敏， 其浓度变化能准确反映人体疾病的发生、发 展状况。如： T3、T4、AFP、肌钙等等
• 外部磁场消失后恢复到初始状态，没有剩磁， 可以重新分散开,利于清洗。
22
纳米免疫磁性微珠
性能优点
• 磁珠扩增了抗原抗体反应面积，从而提高反应效率，缩短 了反应时间
• 更快更充分的捕获抗原抗体从而提高了灵敏度 • 作为液相分离平台，与试剂充分混合后显著的减少批内和
批间差异 • 通过化学键作用标记抗原或抗体增强了准确性。
32
全自动化学发光免疫分析仪
精美，简练的外观
33
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样 温育
清洗
测量
废弃物
34
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样
清洗
温育
测量
优点：准确、定量，项目齐全 缺点：放射性污染
试剂有效期短（一个月） 操作繁琐、时间2小时左右
11
免疫标记技术发展历程
磁酶免 半自动化学发光 时间分辨
优点：没有放射性污染，试剂有效期长（6个月以上） 缺点：操作繁琐，2小时有结果，准确性差
12
免疫标记技术发展历程
全自动化学发光
优点： 没有放射性污染 试剂有效期长（6个月以上） 操作全自动 速度快，半小时出结果 结果最准确
反应杯加载存储器
• 一次可装载720个反应杯 • 检测过程中，可随时连续装载
29
全自动化学发光免疫分析仪
样本编辑模式
正常模式：病人ID号从条形码上读取,项目手动输入； 快速模式：软件自动生成病人ID号，项目手动输入； 联网模式：病人ID号条形码读取，项目从Lis系统获取。
30
全自动化学发光免疫分析仪
【生化：检测含量比较高的物质】
准确、定量 【酶标法、金标法：定性、半定量】
3
免疫定量检测原理
夹心法
样本,ABEI标记物,FITC标记物和磁珠加入到反应杯中，温浴 15分钟*,形成“夹心三明治”免疫复合物，并被磁珠俘获。
4
免疫定量检测原理
夹心法
经过清洗和分离后，在反应杯中先后加入激发底物1和激发 底物2，引发化学发光反应，产生光信号。
酶促化学发光
标记物在酶催化下，缓慢发光
由于酶不稳定，每次都必须用6个点做标准曲线， 浪费试剂
15
化学发光主要技术
*两点定标原理
C01 主曲线
Cal1
Cal2
Δ1%=
Rf|C1-C01| Rf C1 *100%
定标曲线 C02
线性补偿曲线
16
全自动化学发光主要品牌
17
新产业生物
进入市场一年多以来，已装机近2000多台，其中 三甲医院400多台，出口300多台
1.25个试剂位，可随时连续装载、调换试剂盒 2.采用射频识别技术读取试剂盒信息，读取速度 3.试剂区冷藏（8-12℃），独立供电 4.带磁球自动悬浮系统
27
全自动化学发光免疫分析仪
采样针
• 双针，分别加试剂和样本 • 内外壁清洗，针外壁特氟龙包
被，杜绝交叉污染 • 液面探测、凝块检测功能
28
全自动化学发光免疫分析仪
18
发光标志物 ABEI
独家专利 ABEI
在酸碱溶液里都非常稳定
• 化学品名称: N-(4-氨基丁基)-N-乙烷基异鲁米诺
N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol
• 分子式: • 分子量：
C14H20N4O2 276.33
19
发光标志物 ABEI
ABEI直接化学发光
发光信号产生及测量
23
全自动化学发光免疫分析仪
MAGLUMI2000Plus
24
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P机器分解图
25
全自动化学发光免疫分析仪
样本仓
144个标本位，可随时添加，急诊优先 条形码识别，抽血管、放免管等都可 样本稀释比例任意设定，自动稀释高滴度样本
26
全自动化学发光免疫分析仪
试剂区
？ 缺点： 试剂价格贵
13
化学发光主要技术
包被技术：
板式化学发光 ： 反应
(时间分辨) 量不准）
固液相 5%参加
（定性 定
磁颗粒化学发光 ： 准均相 95%参加反应 14
化学发光主要技术
发光原理：
直接化学发光
标记物在碱性（酸性）条件下，加强氧化剂，瞬间发光
厂家由10个点做成标准曲线，用户只要高低两 点定标修正曲线即可，节省试剂，结果稳定、准确
仪器测定后显示相对光强度(RLU)值，最后根据工作曲线计 算待测物浓度。
5
免疫定量检测原理
在夹心法中，待测物浓度和样本RLU值成正相关 此时主曲线单调递增
6
免疫定量检测原理
主曲线的绘制：十点定标
RLU
J I
H
G
A
B
CD
E
F
0
50
500
Con.
7
免疫定量检测原理
竞争法
磁珠
样本，ABEI标记物,FITC标记物和磁珠加入到反应杯 中，温浴15分钟*,ABEI标记抗原，和样本待测抗原竞 争结合FITC标记的抗体，2种产物同时被磁珠俘获。8
H2O2
ABEI
delay 2.5s
delay 0.1s
+ NaOH
+
激发底物1
激发底物2
(持续测量3秒)
发光
20
ABEI直接化学发光
21
纳米免疫磁性微珠
(独家技术)
纳米磁珠：由聚合物交联构成骨架，包裹 纳米级铁氧化物形成的微米级的小球
纳米级铁氧化物赋予磁性微球超顺磁性
• 在磁场中迅速被磁化并增强磁场，从而可以 快速聚集而从液相中分离。
免疫定量检测原理
竞争法
经过清洗和分离后，在反应杯中先后加入激发底 物1和激发底物2，引发化学发光反应，产生光信号。
仪器测定后显示相对光强度(RLU)值，最后根据工 作曲线计算待测物浓度。
9
免疫定量检测原理
在竞争法中，待测物浓度和样本RLU值成负相关 此时主曲线单调递减
10
免疫标记技术发展历程
放射免疫
• 试剂盒自带标准品，两点定标修正主曲线 • 集成试剂盒设计，无需试剂预处理，即开即用 • 射频识别技术，试剂的所有信息储存在高频电子标签上 • 更新、增加新项目无需对软件升级，方便快捷
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全自动化学发光免疫分析仪
软件系统
• 中、英、西班牙文界面、 报告软件
• 真正实现人机对话 • 智能报警
中国第一台 全自动化学发光免疫分析仪
深圳市新产业生物医学工程股份有限公司
1
临床检验常见类别
血液/体液常规检测
直接化学发光
临 床 检 验
生化 免疫
定量
放射性免疫检测
化学发光检测
金标免疫检测电化学发光 Nhomakorabea半定量
酶促化学发光
酶联免疫检测
微生物
2
免疫定量检测原理
血液（尿液）中有很多含量非常低 （pg/ml、ng/ml 、 mg/ml），但非常灵敏， 其浓度变化能准确反映人体疾病的发生、发 展状况。如： T3、T4、AFP、肌钙等等
• 外部磁场消失后恢复到初始状态，没有剩磁， 可以重新分散开,利于清洗。
22
纳米免疫磁性微珠
性能优点
• 磁珠扩增了抗原抗体反应面积，从而提高反应效率，缩短 了反应时间
• 更快更充分的捕获抗原抗体从而提高了灵敏度 • 作为液相分离平台，与试剂充分混合后显著的减少批内和
批间差异 • 通过化学键作用标记抗原或抗体增强了准确性。
32
全自动化学发光免疫分析仪
精美，简练的外观
33
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样 温育
清洗
测量
废弃物
34
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P硬件介绍
反应杯
加样
清洗
温育
测量
优点：准确、定量，项目齐全 缺点：放射性污染
试剂有效期短（一个月） 操作繁琐、时间2小时左右
11
免疫标记技术发展历程
磁酶免 半自动化学发光 时间分辨
优点：没有放射性污染，试剂有效期长（6个月以上） 缺点：操作繁琐，2小时有结果，准确性差
12
免疫标记技术发展历程
全自动化学发光
优点： 没有放射性污染 试剂有效期长（6个月以上） 操作全自动 速度快，半小时出结果 结果最准确
反应杯加载存储器
• 一次可装载720个反应杯 • 检测过程中，可随时连续装载
29
全自动化学发光免疫分析仪
样本编辑模式
正常模式：病人ID号从条形码上读取,项目手动输入； 快速模式：软件自动生成病人ID号，项目手动输入； 联网模式：病人ID号条形码读取，项目从Lis系统获取。
30
全自动化学发光免疫分析仪
【生化：检测含量比较高的物质】
准确、定量 【酶标法、金标法：定性、半定量】
3
免疫定量检测原理
夹心法
样本,ABEI标记物,FITC标记物和磁珠加入到反应杯中，温浴 15分钟*,形成“夹心三明治”免疫复合物，并被磁珠俘获。
4
免疫定量检测原理
夹心法
经过清洗和分离后，在反应杯中先后加入激发底物1和激发 底物2，引发化学发光反应，产生光信号。
酶促化学发光
标记物在酶催化下，缓慢发光
由于酶不稳定，每次都必须用6个点做标准曲线， 浪费试剂
15
化学发光主要技术
*两点定标原理
C01 主曲线
Cal1
Cal2
Δ1%=
Rf|C1-C01| Rf C1 *100%
定标曲线 C02
线性补偿曲线
16
全自动化学发光主要品牌
17
新产业生物
进入市场一年多以来，已装机近2000多台，其中 三甲医院400多台，出口300多台
1.25个试剂位，可随时连续装载、调换试剂盒 2.采用射频识别技术读取试剂盒信息，读取速度 3.试剂区冷藏（8-12℃），独立供电 4.带磁球自动悬浮系统
27
全自动化学发光免疫分析仪
采样针
• 双针，分别加试剂和样本 • 内外壁清洗，针外壁特氟龙包
被，杜绝交叉污染 • 液面探测、凝块检测功能
28
全自动化学发光免疫分析仪
18
发光标志物 ABEI
独家专利 ABEI
在酸碱溶液里都非常稳定
• 化学品名称: N-(4-氨基丁基)-N-乙烷基异鲁米诺
N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol
• 分子式: • 分子量：
C14H20N4O2 276.33
19
发光标志物 ABEI
ABEI直接化学发光
发光信号产生及测量
23
全自动化学发光免疫分析仪
MAGLUMI2000Plus
24
全自动化学发光免疫分析仪
M2000P机器分解图
25
全自动化学发光免疫分析仪
样本仓
144个标本位，可随时添加，急诊优先 条形码识别，抽血管、放免管等都可 样本稀释比例任意设定，自动稀释高滴度样本
26
全自动化学发光免疫分析仪
试剂区
？ 缺点： 试剂价格贵
13
化学发光主要技术
包被技术：
板式化学发光 ： 反应
(时间分辨) 量不准）
固液相 5%参加
（定性 定
磁颗粒化学发光 ： 准均相 95%参加反应 14
化学发光主要技术
发光原理：
直接化学发光
标记物在碱性（酸性）条件下，加强氧化剂，瞬间发光
厂家由10个点做成标准曲线，用户只要高低两 点定标修正曲线即可，节省试剂，结果稳定、准确
仪器测定后显示相对光强度(RLU)值，最后根据工作曲线计 算待测物浓度。
5
免疫定量检测原理
在夹心法中，待测物浓度和样本RLU值成正相关 此时主曲线单调递增
6
免疫定量检测原理
主曲线的绘制：十点定标
RLU
J I
H
G
A
B
CD
E
F
0
50
500
Con.
7
免疫定量检测原理
竞争法
磁珠
样本，ABEI标记物,FITC标记物和磁珠加入到反应杯 中，温浴15分钟*,ABEI标记抗原，和样本待测抗原竞 争结合FITC标记的抗体，2种产物同时被磁珠俘获。8
H2O2
ABEI
delay 2.5s
delay 0.1s
+ NaOH
+
激发底物1
激发底物2
(持续测量3秒)
发光
20
ABEI直接化学发光
21
纳米免疫磁性微珠
(独家技术)
纳米磁珠：由聚合物交联构成骨架，包裹 纳米级铁氧化物形成的微米级的小球
纳米级铁氧化物赋予磁性微球超顺磁性
• 在磁场中迅速被磁化并增强磁场，从而可以 快速聚集而从液相中分离。
免疫定量检测原理
竞争法
经过清洗和分离后，在反应杯中先后加入激发底 物1和激发底物2，引发化学发光反应，产生光信号。
仪器测定后显示相对光强度(RLU)值，最后根据工 作曲线计算待测物浓度。
9
免疫定量检测原理
在竞争法中，待测物浓度和样本RLU值成负相关 此时主曲线单调递减
10
免疫标记技术发展历程
放射免疫