ATP酶活性检测试剂盒
ATP酶活性检测试剂盒
ATP酶活性检测试剂盒（样本无需高速离心样本无需高速离心，，可测Na+k+、Ca2+Mg2+、Ca2+、Mg2+_ATPase)说明书修订日期：2019.01.22 Cat number：KGT026Store at -20 for for 6 months℃For Research Use Only（科研专用）一、试剂盒介绍ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。
本试剂盒的测定原理是依据ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。
本试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。
二、试剂组份组份名称KGT02650tests保存条件试剂A 10mL×3试剂B 10mL×1试剂C 10mL×12-8℃试剂D 粉剂×3 -20℃试剂E 粉剂×1试剂F 粉剂×12-8℃试剂G 10mL×2 RT试剂H 粉剂×3试剂I 粉剂×12-8℃试剂J：2.5 mol/L 硫酸100mL×1 RT 试剂K：10 m mol/L 标准磷储液10mL×1 2-8℃试剂D：-20℃以下保存6个月。
用时每支加双蒸水至5ml，现用现配。
余下的-20℃以下可保存一周。
试剂E：用时每支加双蒸水至5ml，适当加热溶解，4℃保存3个月。
试剂F：用时每支加双蒸水至10ml[注1]，充分加热使其完全溶解，室温保存。
试剂H：用时每瓶加双蒸水至40ml溶解，（溶解后避光4℃可保存一周）。
试剂I：用时加水至100ml溶解，室温保存3个月。
0.5umol/ml标准磷工作液配制：用时将试剂K作20倍稀释: 取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。
定磷剂的配制：按双蒸水：2.5mol/L硫酸：试剂H：试剂I=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
atp效果测试方法
atp效果测试方法ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，主要用于测试细胞的活力和生物分子的活性。
ATP是细胞内能量的一种重要指标，因此测试ATP效果可以反映细胞的活力和生物分子的活性。
下面将介绍ATP效果测试的方法。
一、仪器和试剂ATP效果测试需要用到一些常见的仪器和试剂。
其中，ATP酶试剂盒是必不可少的试剂之一，它可以用于ATP酶的检测。
此外，还需要用到ATP标准品、反应物和缓冲液等试剂。
仪器方面，需要使用荧光光度计或发光光度计等仪器。
二、ATP酶试剂盒的使用ATP酶试剂盒是ATP效果测试的核心试剂之一。
具体使用方法如下：1.制备样品：将待测样品制备好，如细胞、生物分子等。
2.加入试剂：取一定量的ATP酶试剂盒，加入标准品和缓冲液，制备成一定浓度的反应液。
3.加入样品：将制备好的样品加入到反应液中，并混合均匀。
4.测量荧光或发光：将反应液加入到荧光光度计或发光光度计中，测量荧光或发光。
5.计算ATP含量：根据荧光或发光的测量结果，可以计算出样品中的ATP含量。
三、其他相关试验除了ATP酶试剂盒外，还有一些其他相关的试验可以用于ATP效果测试。
例如，ATP酶活性的测定、ATP水解反应的测定等。
这些试验都可以反映出ATP效果的好坏。
四、注意事项在进行ATP效果测试时，需要注意以下几点：1.样品的制备需要严格按照试剂盒的说明书进行，避免样品的影响。
2.反应液的制备需要准确，避免浓度过高或过低。
3.荧光或发光的测量需要准确，避免干扰因素的影响。
4.ATP酶试剂盒的储存需要在-20℃下，避免试剂的失效。
5.实验过程中需要注意安全，避免试剂的误食或误触。
ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，可以用于反映细胞的活力和生物分子的活性。
在实验过程中需要注意各种细节，保证实验的准确性和可靠性。
ATP检测试剂盒（ATPAssayKit）可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的
ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。
细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备，检测灵敏度高达1nmol/L，化学发光可以持续稳定达30分钟，并且获得的样品还可以同时进行Western检测。
ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变，会影响细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
样品制备非常简单。
本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液，简单裂解后即可用于ATP检测。
无需进行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提，或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。
本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。
当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。
这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。
本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达1nmol/L的ATP。
而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg 蛋白。
并且本试剂盒的检测浓度范围非常大，检测上限可以高达10μmol/L，并在5nmol/L-10μmol/L范围内可以形成良好的标准曲线。
本试剂盒进行了特殊的优化设计，使检测ATP时的化学发光非常稳定。
对于ATP标准曲线的检测结果显示，在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降，开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。
使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品，不仅可以用于ATP检测，还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。
索莱宝BC0300ATP含量检测试剂盒说明书
ATP 含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0300规格：50T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体8 mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×3支-20℃保存试剂五粉剂×1瓶2-8℃保存试剂六粉剂×3支-20℃保存标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1．提取液低温条件下，可能有结晶析出，放于60℃水浴加热溶解即可，不影响使用。
2．试剂二：临用前加入7 mL 蒸馏水充分溶解，可加热促进溶解；3．试剂四：临用前取1支加入0.2mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；4．试剂五：临用前加入3.2 mL 蒸馏水充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；5．试剂六：临用前取1支加入0.25 mL 蒸馏水备用，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；6．标准品：5 mg ATP 。
临用前加入0.826 mL 蒸馏水配成10 μmol /mL的ATP 标准溶液，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；7．工作液的配制：临用前请按试剂二(mL)：试剂三(mL)：试剂四(mL)：试剂五(mL)：试剂六(mL)=1：1：0.1：0.4：0.1的比例配制（2.6mL ，约10T 的量），现配现用。
产品说明：ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。
HK 催化葡萄糖和ATP 合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm 有特征吸收峰，NADPH 和ATP 含量成正比，以此反应ATP 含量。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶：可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应，产生荧光发射。
2.底物液：包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。
3.酶反应终止液：用于停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。
4.荧光标准品：已知浓度的ATP溶液，用于绘制标准曲线。
5.读取缓冲液：用于在荧光分析仪上读取荧光信号。
二、使用步骤1.试剂室温平衡：将试剂盒中的所有试剂恢复到室温，并确保所有试剂充分均匀混合。
2.样品预处理：根据实验需要，选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP，并计算样品的蛋白质含量。
3.准备标准曲线：取不同浓度的荧光标准品，并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。
每个浓度至少重复3次。
将这些标准品稀释到试管中。
4.样品处理：将不同待测样品分别加入到试管中，各样品至少重复3次。
同时加入空白对照组，只加读取缓冲液而无待测样品。
5.加入试剂：将相应体积的底物液加入到每个试管中，充分混合。
立即向每个试管中加入适量的ATP酶，同时进行混合。
6.反应：将试管密封，并在37℃下孵育一段时间，一般为10-30分钟。
7.停止反应：向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液，停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。
8.读取荧光：将每个试管置于荧光分析仪上，使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量，记录下荧光单位值。
9.绘制标准曲线：将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应，绘制标准曲线。
10.计算样品ATP含量：根据样品荧光单位值和标准曲线，计算出样品中的ATP含量。
三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行，不同品牌可能有些许差异，应严格按照相应说明进行操作。
2.手术操作时应采取无菌操作，避免对样品的污染。
3.混合试剂时需充分振荡，确保试剂均匀混合。
4.在实验过程中，所有试管、吸头等实验用具应标注清楚，避免混淆和误操作。
5.反应时间会影响结果，不同实验目的可根据需要进行时间的调整，一般30分钟内可得到稳定的信号。
Na+K+-ATP酶活性检测试剂盒说明书
Na +K +-ATP 酶活性检测试剂盒说明书微量法货号：BC0065规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体60 mL×1瓶4℃保存试剂二液体4 mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2支-20℃保存试剂四液体2 mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六粉剂×1瓶4℃保存试剂七粉剂×1瓶4℃保存试剂八液体5 mL×1瓶常温保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前用1 mL 蒸馏水溶解，现用现配。
用不完的试剂-20℃可保存一周。
2、试剂五：用时加入3 mL 双蒸水， 4℃保存。
3、试剂六：用时加入5 mL 双蒸水，溶解后4℃保存一周。
4、试剂七：用时加入5 mL 双蒸水，溶解后4℃保存一周。
5、标准品：10 μmol/m L 标准磷贮备液。
将标准品20倍稀释，即取 0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/m L 标准磷应用液。
6、定磷剂的配制：按H 2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据实验用量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：Na +K +- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
Na +K +-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
ATP发光检测试剂盒 说明书
ATP发光检测试剂盒(ATP-Lite Assay Kit)产品说明：ATP，是生命体最基本的能量分子，一种通用的能量“货币”。
ATP参与多种酶促反应，维持正常的生命活动。
通过ATP检测，可以间接定量测定细菌、细胞的数量和活性状态，了解体外ATP参与的酶促反应的进程，在生物检定和生命科学研究中有广泛的应用。
本试剂盒采用生物发光(bioluminescent)法，依据荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化，高效利用ATP的能量，发射出光子。
萤火虫荧光素酶(Fireflyluciferase)催化的发光反应，与ATP浓度具有很好的线性依赖关系和极高的敏感性，ATP的检测灵敏度达到10-13 mol。
本试剂盒采用优化的酶反应体系，使发光反应持续数十分钟，以便于手工操作多个样品。
操作简便，可快速获得结果。
产品内容与储存方法：名称数量保存条件100x Lysis Buffer (细胞裂解液) 1 ml -20℃ATP Assay Buffer (反应缓冲液) 10 ml -20℃mlLuciferin 0.5-20℃Firefly luciferase 1 ml -20℃ATP (1 mM) 0.5 ml -20℃可作200次以上ATP检测。
低温运输，-20℃或-80℃避光保存。
有效期6个月。
所需其它试剂：使用者需准备PBS 、双蒸水等。
操作方法：样品准备：对于细胞或微生物样品，应首先提取ATP。
本试剂盒提供培养哺乳细胞的ATP提取方法如下。
其它标本来源的ATP提取，一般可用三氯乙酸的提取方法，或参照文献一些有效提取方法进行。
对体外酶促反应样品，一般可直接用双蒸水稀释后进行检测。
样品中ATP含量应稀释到0.1 mM一下，以保证在测定的线性范围内。
培养哺乳细胞样品准备：1)配制裂解液：临用前，取适量100x Lysis Buffer (ULB)，用双蒸水稀释至1xLB，混匀。
1xLB可长期冻存于-20℃。
ATP酶(ATPase)说明书活性微生物
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
再与 HRP 标记的 ATP 酶（ATPase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底 洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最 终的黄色。颜色的深浅和样品中的 ATP 酶（ATPase）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下
测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中 ATP 酶（ATPase）活性浓度。
计算 以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
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ATP酶活性检测试剂盒（样本无需高速离心样本无需高速离心，，可测Na+k+、Ca2+Mg2+、Ca2+、Mg2+_ATPase)说明书修订日期：2019.01.22 Cat number：KGT026Store at -20 for for 6 months℃For Research Use Only（科研专用）一、试剂盒介绍ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。
本试剂盒的测定原理是依据ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。
本试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。
二、试剂组份组份名称KGT02650tests保存条件试剂A 10mL×3试剂B 10mL×1试剂C 10mL×12-8℃试剂D 粉剂×3 -20℃试剂E 粉剂×1试剂F 粉剂×12-8℃试剂G 10mL×2 RT试剂H 粉剂×3试剂I 粉剂×12-8℃试剂J：2.5 mol/L 硫酸100mL×1 RT 试剂K：10 m mol/L 标准磷储液10mL×1 2-8℃试剂D：-20℃以下保存6个月。
用时每支加双蒸水至5ml，现用现配。
余下的-20℃以下可保存一周。
试剂E：用时每支加双蒸水至5ml，适当加热溶解，4℃保存3个月。
试剂F：用时每支加双蒸水至10ml[注1]，充分加热使其完全溶解，室温保存。
试剂H：用时每瓶加双蒸水至40ml溶解，（溶解后避光4℃可保存一周）。
试剂I：用时加水至100ml溶解，室温保存3个月。
0.5umol/ml标准磷工作液配制：用时将试剂K作20倍稀释: 取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。
定磷剂的配制：按双蒸水：2.5mol/L硫酸：试剂H：试剂I=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
[注1]：试剂F为过饱和溶液，所以在配制时最好用90℃-100℃的热蒸馏水10.3ml(热胀冷缩)边隔水加热边用玻璃棒搅拌，以使其充分溶解。
一次实验用不完再用时可能有结晶，用之前可以再次边隔水加热边用玻璃棒搅拌使其溶解。
[注2]：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
三、操作步骤 1.酶促反应酶促反应：：管号 A 管 B 管 C 管 D 管 E 管 试剂A （ul ） 130 130 90 13090 试剂B （ul ） 40404040 试剂C （ul ） 40 40 试剂D （ul ） 404040 40 40 试剂E （ul ） 40 40 40试剂F （ul ） 4040 40 样本样本（（ul ）200200200200混匀，37℃水浴准确反应10分钟。
试剂G （ul ） 50 50505050样本样本（（ul ） 200混匀，3000--4000转/分离心10分钟，取上清200ul 定磷。
2.定磷定磷：：标准管A 管B 管C 管D 管E 管0.5umol/ml 磷标准磷标准（（ul ）200上清液上清液（（ul ） 200 200 200 200 200 定磷剂定磷剂（（ul ）2000 20002000200020002000混匀，37℃水浴30分钟，冷却至室温，在660nm 处，1cm 光径，蒸馏水调零比色。
[注 1]：A 管为对照管；B 管为 Na +K +_ATP 酶管；D 管为 Ca 2+_ATP 酶管；E 管为 Ca 2+Mg 2+_ATP 酶管。
（客户可根据需要选用相应的管号进行实验操作）[注 2]：本试剂盒保证做 100 份 A 、B 、C 、D 管。
因目前学术界对钙镁 ATPase 能否分开有争议，如不需要分开，即 E 管可以代表 Ca 2+Mg 2+_ATP 酶；如果认为可以分开，即可测 C 、D 管来代表 Mg 2+_ATP 酶和 Ca 2+-ATP 酶。
四、如果您的样本很多可以采用简便操作法：1、测试前 A 、B 、C 、D 、E 五种混合试剂的配制：根椐规范操作表中 A 、B 、C 、D 、E 各管的试剂量乘以您所需要测试的样本（n)再放宽 1--2 只的量（避免吸到最后试剂量不够），然后纵向混合。
具体配制见下表：管号A 管液体量B 管液体量C 管液体量D 管液体量E 管液体量 试剂A （ul ） 130×（n+2） 130×（n+2） 90×（n+2） 130×（n+2）90×（n+2） 试剂B （ul ） 40×（n+2）40×（n+2）40×（n+2）40×（n+2） 试剂C （ul ） 40×（n+2）40×（n+2） 试剂D （ul ） 40×（n+2）40×（n+2）40×（n+2） 40×（n+2） 40×（n+2） 试剂E （ul ） 40×（n+2）40×（n+2） 40×（n+2）试剂F （ul ）40×（n+2）40×（n+2）40×（n+2）混合试剂总量混合试剂总量（（ul ） 250×（n+2） 250×（n+2） 250×（n+2） 250×（n+2）250×（n+2）每管应吸液量每管应吸液量（（ul ） 2502502502502502、简化操作步骤简化操作步骤：：[]71065.2A ***÷÷×××−=个数每毫升溶血液中）（反应液中样品稀释倍数标准品浓度值标准值对照值测定活力RBC OD OD OD TPase )hour /10/i (7RBC umolP 个)m /5.0l umol （hourRBC umolPi TPase /10/0036.0]10108.45.10.1[65.25.0475.0402.0475.0A -K Na 779=÷××÷×××−=++活力hourRBC umolPi TPase /10/0035.0]10108.45.10.1[65.25.0475.0402.0473.0A -Mg779=÷××÷×××−=2+活力hourRBC umolPi TPase a /10/0052.0]10108.45.10.1[65.25.0475.0402.0507.0A -C 779=÷××÷×××−=2+活力(1)、酶促反应酶促反应：：管号 A 管 B 管C 管D 管E 管A 液（ul ） 250B 液（ul ） 250C 液（ul ） 250D 液（ul ） 250E 液（ul ） 250 样本样本（（ul ）200200200200200混匀，37℃水浴准确反应10分钟。
试剂G （ul ） 50 50505050样本样本（（ul ）200混匀，3000--4000转/分离心10分钟，取上清200ul 定磷。
（2）、定磷定磷：：标准管A 管B 管C 管D 管E 管0.5umol/ml 磷标准磷标准（（ul ）200上清液上清液（（ul ） 200 200 200 200 200 定磷剂定磷剂（（ul ）2000 20002000200020002000混匀，37℃水浴30分钟，冷却至室温，在660nm 处，1cm 光径，蒸馏水调零比色。
五、计算与举例计算与举例：：（一）、全血中ATPase 的计算： 1、按红细胞数计算： 定义：规定每小时每107个个红细胞的ATP 酶分解ATP 产生1umol 无机磷的量一个ATP 酶活力单位。
即微摩尔分子磷/107个红细胞/小时（umolPi/107个RBC/hour)。
公式：*稀释倍数=（130+40+40+40+50+200）/200=2.5**水浴时间为10分钟，酶活力定义为1小时，故乘以6。
计算举例：取1ml 抗凝全血，测得红细胞数为4.8×106/mm 3(4.8×106/ul)，即4.8×109/ml 。
然后2000转/分离心5-10分钟，弃上层血清，留红细胞沉淀。
在沉淀的红细胞中加双蒸水1.5ml 进行溶血，反复混匀，充分溶血；（也可放冰箱上层冻室内10分钟，促其溶血。
如果是糖尿病的老鼠，千万不可以将红细胞冷冻。
）取0.2ml 溶血液按操作表测ATPase 活力。
测得各管吸光度值：A 管为0.402，B 管为0.475，C 管为0.473，D 管为0.507，E 管为0.515，标准管为0.475。
则计算如下：9774.8×10÷10]=0.0057umolPi /10RBC /hourTPase a 1.51.0[62.50.50.4750.4020.515-A Mg C ××÷××−=2+2+活力[A 6*（gHb / ml )OD OD OD TPase 溶血液血红蛋白浓度值标准值对照值测定活力÷标准品浓度 ×反应液中样品稀释倍数（2.5）××−=)hour /gHb /i mol (P μ)m /5.0l umol （hourgHb umolPi ml gHb TPase //815.7]/10791.79[65.25.0433.0426.0462.0A -K Na 3=×÷×××−=−++活力hourgHb umolPi TPase //342.4]10791.79[65.25.0433.0426.0446.0A -Mg3=×÷×××−=−2+活力hourgHb umolPi TPase a //947.6]10791.79[65.25.0426.0458.0A -C 3=×÷×××−=−2+活力[])/mgprot (A 6*ml OD OD OD TPase 匀浆蛋白浓度值标准值对照值测定活力组织中÷标准品浓度×反应体系中样品稀释倍数（2.5）××−=425.0263.0351.00.5umol/ml×2.5×6÷1.72m gprot / ml = 0.903umolPi / mgprot / hour×−=1.5ml*：1.5ml 的溶血液 2、按血红蛋白量计算：定义：规定每小时每克血红蛋白的红细胞中ATP 酶分解ATP 产生1umol 无机磷的量为一个ATP 酶活力单位。