甜瓜病害鉴定：甜瓜根腐病
黑点根腐病菌和镰孢菌复合侵染引起的甜瓜根腐病的鉴定
黑点根腐病菌和镰孢菌复合侵染引起的甜瓜根腐病的鉴定黑点根腐病菌和镰孢菌复合侵染引起的甜瓜根腐病的鉴定
甜瓜是一种热带和亚热带地区普遍种植的果品，南亚、东南亚和东北非洲等地区是主要生产区域。
甜瓜根腐病是影响和限制其种植的重要病害，有时会发生在病毒病之前，导致植株立即死亡。
根腐病是由多种真菌组成的共生菌群引起的，其中极易发生黑点根腐病菌和真菌（Fusarium spp.）和镰孢菌（Rhizoctonia solani ）的复合侵染。
传统上，该病的发生主要是由Fusarium根腐病和Rhizoctonia根腐病菌引起的，但近些年发现黑点根腐病菌的发生率在甜瓜根腐病中占有重要地位。
为了鉴定黑点根腐病菌和镰孢菌复合侵染引起的甜瓜根腐病，我们对患病的植株进行了采样和病原鉴定，采集到的植株切割病部，以10%氯仿消毒后再用沥青水洗涤，然后放置在小型抽吸管中抽取根部液。
抽取的液涂于载体上，经37℃培养48 h后，观察扩增条件，记录菌落类型，以初步确定菌种。
然后，利用初步鉴定的菌种进行特殊染色检测，如卡氏染色、原色染色、Gram染色等，以确定出病原菌种。
根据病原鉴定的结果，发现甜瓜根腐病是由黑点根腐病菌和真菌（Fusarium spp.）和镰孢菌（Rhizoctonia solani ）的复合侵染引起的。
在卡氏染色和蛋白酶抑制检测等检测中，可以进一步确定黑点根腐病菌和镰孢菌。
同时，还可以采集患部的根据植株进行病毒检测，以排除病毒病的可能性。
本文介绍了针对黑点根腐病菌和镰孢菌复合侵染引起的甜瓜根腐病的鉴定方法，这一技术将有助于甜瓜病害的科学诊治，提高农作物产量和质量，为甜瓜根腐病的防治提供有效依据。
甜瓜疫霉根腐病及防治方法
THANKS FOR WATCHING感谢来自的观看药害或降低药效。
探索生物防治的新途径
生物防治的优势
生物防治具有环保、安全 、可持续等优点，对甜瓜 疫霉病的防治具有很好的 前景。
生物防治的研究
积极开展对甜瓜疫霉病的 生物防治研究，探索新的 生物防治途径。
微生物菌剂的应用
施用对疫霉病有拮抗作用 的微生物菌剂，如木霉菌 、芽孢杆菌等，以抑制疫 霉菌的生长和繁殖。
附着在种子表面的病菌。
土壤消毒
在定植前，用70%敌克松可湿性粉 剂或50%福美双可湿性粉剂进行土 壤消毒处理，以杀死土壤中的病菌 。
喷药防治
在甜瓜生长期间，如发现病株应及 时喷药防治，可使用72.2%普力克 水剂、90%三乙膦酸铝可湿性粉剂 等药剂进行喷雾防治。
生物防治
使用生物农药
使用生物农药如枯草芽孢杆菌、木霉菌 等微生物菌剂，可以有效地防治甜瓜疫 霉根腐病。这些生物农药能够抑制病原 菌的生长和繁殖，从而达到防治病害的 目的。
VS
增加有益菌群
通过施用有机肥、菌肥等措施，增加土壤 中有益菌群的数量，提高土壤的生物活性 ，从而降低病原菌的繁殖和传播机会。
04
防治甜瓜疫霉根腐病的 实践建议
加强植物检疫与农业防治
严格遵守植物检疫制度
加强对甜瓜种苗的检疫，防止带菌种苗的传入和扩散。
农业防治
合理轮作，避免连作，改善土壤通透性，增强土壤肥力，促进根系 发育。
目前对甜瓜疫霉根腐病的发病机制仍不完全清楚，深入研究其发病机制将有助于更好地预 防和治疗该病。
发展新型防治技术
目前防治甜瓜疫霉根腐病的方法仍有限，且效果不甚理想。因此，发展新型防治技术将成 为未来研究的重要方向。
甜瓜果面和脐部水浸状腐烂咋回事
甜瓜果面和脐部水浸状腐烂咋回事
可能是根腐病。
瓜类根腐病在田间有四种类型，即猝倒型、萎蔫型、根腐型和果腐型。
甜瓜中后期病原菌侵染果实，形成果腐病，在果实的表皮或瓜柄处形成褐色病斑，逐渐扩大呈凹陷状，在潮湿条件下，病斑上产生白色霉状物，果肉向内腐烂，病瓜味苦，不能食用。
防治办法
一是做好生态控制，即做好轮作倒茬，清洁田园，合理施肥，适时适量浇水，选用抗病无病种子，适时整枝疏果等。
二是药剂防治。
即播后药土覆盖、土壤处理、药剂灌根喷药等。
药剂可选用恶霉灵、甲基硫菌灵(多菌灵)、铜制剂等。
甜瓜根腐病病原分离与抗源鉴定
（ ． 京 市农 林 科 学 院 蔬 菜 研 究 中 心 ， 京 １北 北 １０９ ２ 宁夏 大 学 农学 院 ． 夏 银 川 ００ ７；． 宁 ７０２ ） ５０ １
摘 要 ： 年 来 根 腐 病 在厚 皮 甜 瓜 设 施 与 露 地 栽 培 中 普 遍 发 生 ， 害 严 重 。 试 验 对 厚 皮 甜 瓜 根 腐 病 病 样 进 行 病 原 近 危 菌 分 离 和 纯 化 ， 培 养 、 定 及 致 病 性 测 定 ， 实 分 离 的 致 病 菌 是 甜 瓜 根 腐 病 菌 。 以 所 获 得 的病 原 菌 菌 株 作 为 菌 种 ， 经 鉴 证
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制 备 病 原 接 种 体 ， 用 幼 苗 离 体 接 种 法 ， ２ ７份 薄 皮 甜 瓜 种 质 资 源 进 行 根 腐 病 抗 性 评 价 ， 果 筛 选 出 １ 高 抗 和 采 对 ６ 结 ６份 ２ 抗 病 种质 资 源 ， 明 薄皮 甜 瓜 种 质 资 源 中 蕴 藏着 对 改 良厚 皮 甜 瓜 根 腐 病抗 性 有 潜 在 利 用 价 值 的 基 因 资源 。 ０份 说
甜瓜真菌、细菌病害大揭秘！教你种好甜瓜不再愁
甜瓜真菌、细菌病害大揭秘！教你种好甜瓜不再愁薄皮甜瓜主要病害诊断及防治技术1、甜瓜细菌性叶斑病、细菌性缘枯病、细菌性果腐病等细菌性病害①甜瓜细菌性果腐病甜瓜细菌性果腐病是近年从国外传入的一种危险性病害，曾在山东、湖北等地造成甜瓜大面积绝收。
甜瓜细菌性果腐病主要侵染甜瓜幼苗和果实，以果实上的症状最为明显，且易鉴别。
幼苗症状：幼苗发病后，首先在子叶背面叶脉中间出现水浸状黄色小斑点，之后沿叶脉逐渐发展为黑褐色坏死斑，有时在下胚轴也会出现，严重时幼苗会塌陷、死亡。
第1-2片真叶上的症状是在近叶脉处出现水浸状，然后变黄进而变成褐色病斑。
如果遇上长期阴雨天或管理不善，幼苗叶片水浸状病斑不断扩大，直至幼苗死亡。
相反，如幼苗受到侵染，但苗床湿度等条件不利于发病，则在子叶上形成褐色病斑，或在前几片真叶上也形成少量褐色病斑，随后植株可完全正常生长。
甜瓜细菌性果腐病主要侵染甜瓜幼苗、果实，以果实上的症状最为明显，且易鉴别，而在植株发育的其他时期少有发现。
果实症状：果实初期症状为瓜面出现水浸状小点，当天气晴好、空气湿度较小时，果实表面的水浸状小点也会自然愈合，呈疮痂状或果皮崩裂，侵染部位愈合后果实还能继续生长，同时果实内部侵染部位会收缩变硬木栓化；当天气不好、空气湿度较大时，果实表面病斑并无太大变化，只是透过果皮发现果肉发暗、黑，切开果实沿果实表面向内腐烂，但不呈液化变质。
②甜瓜细菌性叶斑病症状：主要危害叶片，叶片染病，病斑圆形或多角形，水浸状，灰白色至灰褐色，后期中间变薄或脱落穿孔，叶背面没有霉状物，湿度大时，叶背面病斑上有菌液溢出，这是区别于霜霉病的主要特征。
此病为害叶、茎、瓜，以叶受害较严重，在甜瓜各生育期均可发生。
子叶受害成水渍状近圆形凹陷斑，后变为黄褐色。
真叶受害，初呈油渍状，病斑受叶脉限制，逐渐变成淡褐色多角形至近圆形斑，边缘常有一锈黄色油渍状环，最后呈半透明状，干燥时破裂。
空气潮湿时，病斑溢出白色至浅黄褐色菌脓。
无公害农产品甜瓜枯萎病白粉病霜霉三种病害防治技术
无公害农产品甜瓜枯萎病白粉病霜霉三种病害防治技术无公害农产品甜瓜是指在生产过程中，不使用农药、化肥等化学物质，严格遵循生产标准，保证甜瓜的营养价值和安全卫生。
然而甜瓜栽培过程中，可能会受到枯萎病、白粉病、霜霉三种病害的侵袭，对于这些病害的防治，我们需要掌握一些技术。
一、枯萎病的防治枯萎病又称为根腐病，是甜瓜生长过程中常见的病害之一，主要是由土壤中的病原菌侵袭甜瓜根部造成的。
以下是几种有效的枯萎病防治技术。
1.适度灌溉适度的水分是防治枯萎病的保证。
甜瓜在生长过程中需要适量的水分，但过多的水分会导致土壤温度降低，容易滋生病菌。
因此，我们需要掌握适度的灌溉技巧，保证水分的合理利用，同时避免过度浇水。
2.化学防治化学防治是一种常用的防治枯萎病的方法，但需要注意的是，化学药剂的使用需要在封闭环境下进行，避免药剂对周围环境造成污染。
同时，还需要注意选择无公害、无污染的化学药剂。
3.加强土壤管理良好的土壤管理是防治枯萎病的基础。
应当选择优质的土壤，并在土壤中加入有机肥料、灰渣等物质，提高土壤的肥力与保水能力，并加强根部周围的通风环境。
1.选用抗病品种根据甜瓜的品种特性，选用具备良好的抗病能力的品种进行栽培。
在生产过程中，还可以通过人工授粉等方法进行杂交育种，增强甜瓜的抗病能力。
2.适量喷洒药液在甜瓜生长过程中，喷洒适量的药液可以有效地抑制白粉菌的生长。
但需要注意的是，化学药剂需要在封闭环境下喷洒，避免药液对周围环境造成污染。
3.增强光照白粉病的发生和光照密切相关，因此，我们可以通过适当的调整甜瓜植株的排布位置，增强甜瓜的光照，进而提高甜瓜的抗病能力。
三、霜霉的防治1.定期通风定期通风是防治霜霉病的重要措施之一。
需要注意的是，通风时应当选择在阳光充足、气温适宜的时段进行，并确保操作的安全性和卫生性。
3.清洁卫生保持霜霉病菌的无害化处理是防治霜霉病的重要措施之一。
在甜瓜生产过程中，需要定期对甜瓜叶面进行清洁，剪除枯死、病变的叶片，有效控制霜霉病的发生。
甜瓜死棵、烂根怎么办
近日不少农户和我们说，有部分大棚甜瓜死棵严重，进棚观察是甜瓜镰刀菌枯萎病，感病植株表现为局部底部叶片出现干枯斑，植株矮小观察茎基部出现纵裂腐烂斑或茎部半面条线状腐烂并有少许白色霉状物，掰开茎杆维管束变褐并向上传导，这是典型的维管束病害。
下面我给大家详细讲解一下：
甜瓜枯萎病，是由真菌引致的植物病害，发病突然，症状包括严重的点斑、凋萎或叶、花、果、茎或整株植物的死亡。
尖孢镰刀菌真菌感染，土传病害， 种子带菌，土壤PH4.5~5.8酸化，重茬种植，病菌基数大，地势低洼黏重，定值过早出现寒根或根系受损，根结线虫危害可加重病情，病菌可从侧根或主根表皮或伤口侵染，上下传导导致维管束堵塞产生毒素都会导致植株枯萎死亡。
防治方法：
1.种子消毒，培育壮苗，定值前用精甲.咯菌腈+嘧菌酯蘸根预防。
2.土壌高温消毒杀灭病原菌，用氰氨化钙或威百亩在6 ~ 7
月份换茬期间高
温闷棚处理半月左右，可杀灭土壤大部分病原菌，注意补充微生物菌肥（剂）。
3.定值后可以用枯草芽孢杆菌+恶霉灵，络氨锏，氨基酸铜.多菌灵等药剂提前预防，发病后可以用腐霉多菌灵500倍+异菌脲500倍+噻森锏800倍+强力生根剂灌根，每株灌100〜250毫升可有效治疗。
腾丰农业科技是一家以技术为先导的产品创新型企业，公司集研发、生产、销售于一体的国际贸易公司，主要从事植物营养研究与开发，有机、无机水溶肥料的研究与销售、生态农业发展与研究，生物防治，农业器械及皮具进出口贸易等多个领域。
甜瓜根霉果腐病防治
甜瓜根霉果腐病防治
发病症状:此病只为害果实，多侵染成熟或带伤的近成熟瓜，靠近地面的瓜更易受害。
初期病斑不明显，染病后就表现较大面积软化，以后在病部密生白色霉层，随病害发展在白色霉层上产生带黑色小颗粒的丝状物，最后病瓜腐烂。
发病病因病菌为弱寄生菌，腐生性很强，广泛分布于田间，菌丝可在多汁蔬菜残体上腐生存活，孢囊孢子可在保护地内越冬。
条件适宜时病菌由伤口或生活力极度衰弱的部位侵入，分泌果胶酶，分解细胞间质，使组织软化腐烂。
发病后产生大量孢子，随气流传播，引起重复侵染。
温度潮湿有利于发病，生长最适宜温度为23～28℃，相对湿度80%以上。
甜瓜采收期多雨、田间积水、保护地内空气湿度高，病害发生较重。
肥水管理不当，使果实出现生理裂口多而不均匀，病害相对严重。
防治方法1.合理水肥管理，防止机械损伤和生理大裂口，减少病菌侵染机会。
23、加强田间管理，雨后及时排水，避免田间积水。
保护地增加通风，降低空气湿度，抑制发病。
3、未发病前噴施新高脂膜600倍夜，能自动形成一层肉眼看不见的高分子保护膜，优化植物吸水、透气、透光质量。
屏蔽病虫扑食信号和削弱传播媒介，抵抗和防御自然环境灾害。
4、适时采收瓜果，防止过度成熟开裂，减少发病。
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甜瓜病害鉴定：甜瓜根腐病Melon Fusarium root rot（注：原内容本来自，在其管理员的要求下，已删除）洋香瓜黑点根腐病菌的生态与防治蔡竹固童伯开陈瑞祥国立嘉义技术学院植物保护系前言引起洋香瓜黑点根腐病(Monosprascus root rot/vine decline)的病原是一种子囊菌，学名为Monosporascus cannonballus Pollack & Uecker。
在1970年，Troutman和Matejka从美国亚利桑那州的洋香瓜病株分离到一种未鉴定真菌，能够造成侧根的腐败，病根散生许多黑色圆形小点。
到了1974年，Pollack和Uecker报告从亚利桑那州Troutman和Matejka所提供分离自洋香瓜的病原菌被鉴定为M. cannonballus，且报告这是一个子囊菌新种，此后文献乃采用本学名。
在美国、利比亚、以色列、日本、韩国、西班牙等国家，都已报导发生本病害，本病已是全球瓜类产区之新兴重要病害。
1994年, 蔡及童报告本病在台湾的洋香瓜田发生，且鉴定病原为M. cannonballus。
1994-1995年，在台湾南部瓜田调查萎凋病发生情形, 盐埔、鹿草、佳里、东山及澎湖等洋香瓜产区，都可采集到黑点根腐病株。
观察其根系呈水浸状褐变枯死，细根脱落，在枯死的根上散生着许多小黑点(病原菌的子囊壳)。
发病率在27.5-58%之间，0-66%的病根上，可观察到形成子囊壳。
在台湾，其它零星发生而能够造成萎凋病征的病原有蔓割病(Fusarium oxysporum f. sp. melonis)、炭腐病(Macrophomina phaseolina)、黑腐病(Lasiodiplodia theobromae)、细菌性软腐病(Erwinia carotovora subsp. carotovora)、蔓枯病(Didymella bryoniae)。
一些病毒种类也能够造成洋香瓜的萎凋问题。
根据美国植物病理学会最近出版的「瓜类作物病害概要」一书，土壤传播性病原真菌引起的瓜类病害即多达9种。
可见洋香瓜之萎凋或败藤，是一种多病因的病害。
国内学者专家在行政院农委会的经费补助下，已就此问题做一系列的研究工作，希望能够找出有效的解决方法。
本文仅就洋香瓜黑点根腐病菌的生态与防治简要叙述，供瓜类作物产业之参考。
病征及田间诊断本病的地上部病征, 在果实肥大期从下位叶开始黄化，中午时呈现萎凋。
收获前或收获期间，病势进展加剧，严重者表现立枯，或急性萎凋(图一)。
在瓜园内的病株分布是连续的，为块状发生。
以高浓度接种源进行人工接种，本菌也会为害瓜类幼苗阶段，但在田间尚未发现幼苗发病的情形。
洋香瓜黑点根腐病病株所表现的病征，在根部主要包括主根和侧根的褐化和坏疽、维管束褐化，坏疽斑散生(图二)，常出现于根分支处(junctions)或幼根尖端，将植株自土壤中拔起时，罹病根系大都脱落；在枯死的根上散生着许多小黑点之子囊壳(图三)；但地上部的维管束只于近地面几公分内出现褐化和皮层上散生褐至红色病斑。
地上部表现藤枯(vine decline)病征，主要乃植株逐渐黄化，基部老叶焦枯、而当植株接近成熟时，会在新叶出现焦枯。
在洋香瓜开始黄化，基部老叶焦枯，中午时呈现萎凋，病势进展加剧而表现急性萎凋时，将植株自土壤中拔起时，罹病根系往往只出现坏疽斑散生情形，尚未产生小黑点之子囊壳。
可将病根用塑料待装着保湿，促进形成子囊壳，有助于病害之正确诊断。
本病与其它洋香瓜败藤病害(vine decline diseases)的区别乃在于病根上存在有黑色子囊壳，且在地上部的维管束不出现褐色，病蔓上没有病斑(lesions)。
其子囊壳埋生于病根，所以不大会和M. phaseolina的小而不规则形菌核或其它病害种类混肴。
病原菌的分离方法维管束褐变的病根，以0.5%次氯酸钠浸渍1-2分钟，无菌水漂洗后，放在灭菌的滤纸上吸干，再切取细片放在W.A.(Water agar)平板，放在25℃，待菌丝长出时，切取菌丝尖端，移入PDA斜面。
并且可在病原菌分离培养基中多加1μg( a.i.)／ml的免赖得(benomyl)。
土栖性真菌如镰孢属(Fusarium)、疫霉属(Phytophthora)、腐霉属(Pythium)、丝核菌属(Rhizoctonia)等菌类在分离过程中常会出现。
将黑点根腐病株之根系做真菌分离时, 黑点根腐病菌的分离率为9.5-85.5%。
同时可分离到Fusarium oxysporum、Fusarium solani、Rizoctonia solani、Phytophthora sp.、Pythium sp.、Alternaria sp.等菌类(图四)。
而Lovic等人(1993)报告在Monosporasus的ITS序列，可用来发展成为属专一性探针(genus-specific probes)。
病原菌本菌在病根组织上形成的子囊壳大小300-400μm(图五)，子囊初呈棍棒状，后呈卵形，60-80 X 40-50μm，子囊内有1个子囊孢子(图六)，子囊孢子球形，未成熟时无色或褐色，成熟时呈黑色，直径30-50μm，而本菌不产生无性孢子。
在本省分离之MC-E3菌株，每个子囊壳内，含有11-61个子囊孢子。
在PDA平板上，菌落的气生菌丝少。
初呈白色，后转灰色、暗灰色，一个月后可形成黑色子囊壳，每平方公分培养基上，可形成19-25个子囊壳，在20-35℃都有子囊壳形成。
从本省分离的五株菌株在PDA平板上经过三天培养之后，都显示30℃最适合菌丝生长，25和35℃次之。
Martyn等人指出本菌子囊孢子含有一有色的外壁〔孢子周壁(epispore)〕及一厚而透明的内壁，后者约占直径的15-20％，其比重为1.23-1.28。
本省五株菌株的子囊孢子之发芽率均在0.3%之下(图七)；此与Martyn et al.将6月龄子囊孢子经45℃处理10分钟，但其发芽率仍少于0.05％的结果相同。
关于子囊孢子发芽的机制，有待深入研究。
寄主范围本菌是一种蚀根菌(root-pruning fungi)，能够感染洋香瓜、香瓜外，也感染西瓜、冬瓜、胡瓜。
植松及赤山(1987)在7－9月种植44种甜瓜品种、8种非瓜类作物的19品种，测定对黑点根腐病菌的感受性，结果甜瓜品种都根部褐变，形成子囊壳，80％品种萎凋。
西瓜、瓠、冬瓜、胡瓜都是根部褐化而萎凋。
苦瓜、南瓜则一部分品种会出现根部褐化及形成子囊壳，所以本菌可以广泛感染葫芦科作物。
本病原除为害瓜类之外，对辣椒、甜椒、茄子、西红柿等作物的幼苗亦有病原性，可抑制茎、根生长，且降低出土率(2)。
此外，亦可感染菜豆、玉米、高梁和甜菜，且有33-70％的分离率。
Monosporascus spp.也被发现或分离自非瓜类作物，包括土牛膝(Achyranthes aspera L.)、紫花苜蓿(Medicago sativa L.)、红三叶草(Trifolium pratense L.)、小麦(Triticum sp.)和胡麻(Sesamum indicum L.)。
接种方法1.接种源的制作：直径9 cm培养皿内PDA培养25日菌落, 已形成了子囊壳，连同培养基将菌落细细切碎。
或将病原菌培养在砂/燕麦麸培养基(sand/oat hull medium), 这培养基含有3L砂、275g干燕麦麸和450ml蒸馏水。
将其充分混合后装入灭菌袋中，连续灭菌3次。
每袋中接种10ml 的本菌菌丝悬浮液, 此悬浮液乃以在PDA培养5－10天的菌丝体加入75ml无菌水研磨。
经过在30℃培养35－40天之后，定量其中的子囊孢子和营养菌丝体cfu(colony-forming unit)数量。
在本省，以砂/米糠培养基(sand/rice bran medium)或稻壳/米糠培养基(rice chaff/rice bran medium)培养本菌，也很适合。
2.温室试验: 采3-L黑色塑料盆，蒸气灭菌(steam-pasteurized)砂和介质perlite(4:1, V/V)事先混合，每盆加入25或50cc的接种源，在盆顶下5-6cm加入接种源，然后再填入4-5 cm的介质。
对照组和接种组的差别在，加入等量的灭菌燕麦麸。
试验植株每盆加入250 ml的营养液，营养液配方为Peters 20:20:20 2g／L，MgSO4‧7H2O 0.25g／L和Micronutrients (Stem) 0.01g／L 。
虫害的防治，每5-7天喷药一次。
8-9周之后洗去盆土，调查根系的主根和侧根的罹病度区分为0(健康)-4(严重病斑或坏疽)间共有9个等级。
接种和对照组的根系，以10-20倍解剖显微镜调查子囊壳数目，调查每株主蔓长度和根系及顶部(tops)的干重量。
3.微区试验: 微区(0.6×1.0×0.6m)事先熏蒸处理。
每区接种源的加入，先移去3-5cm表土，撒入300g接种源(=280g 干重)和240c.c.的Osmocote 14:14:14缓效性肥料，充分混合后，再放回表土。
每区播入5-10种子，10-20天后，留下3株。
表面滴灌，按需要喷洒农药。
9周后调查藤枯程度(无、轻微、中度和严重)。
病害环尚未有针对本菌的选择性培养基。
所以对于本病害的管理，有待发展出侦测和定量土壤中接种源的方法。
以蔗糖梯度离心分离土壤线虫的方法，可以用诸于本菌子囊孢子的定量。
在实验室内，每一土壤样品先经过4-mm筛子，取20g 土壤混合200 ml的自来水，以磁石旋转搅拌8-10min，再以75和38μm的冶金用筛(metallurgical sieves)过滤，滤在38μm筛子的物质将之洗入50ml离心管，且以2,000g离心4 min。
上层液慢慢倒出，将沈降物再悬浮于50％蔗糖溶液，在2,000g下离心2min。
将悬浮或漂浮的子囊孢子或其它物质倒入一小筛子(直径8cm，38μm)，且洗入一干净的离心管。
将沈降物再第二次蔗糖萃取去收回第一次萃取时漏失的子囊孢子。
第二次萃取得到的悬浮液倒入第一次萃取液中，且存放于5℃。
以一长方形塑料皿，在解剖显微镜25-30倍，侧光及底光下计量。
笔者将田间洋香瓜黑点根腐病株之根系放置阳台上，定期采样做真菌分离时，1.5个月后，无法再分离到黑点根腐病菌。
将人工培养病土放置阳台上，定期采土样种植洋香瓜香兰品种之幼苗，再从其根系做真菌分离时，10个月后，无法再分离到黑点根腐病菌。
Mertely等人以蔗糖梯度离心分离法定量土壤中接种源，发现M. cannonballus的子囊孢子主要存在于畦内，土壤深度10－20cm处；子囊孢子在连作、塑料布畦面覆盖、点滴灌溉的瓜田之数量，较轮作、未覆盖、沟灌的瓜田为少。