临床检验基础学知识点

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临床基础检验学重点

临床基础检验学重点

1、血浆:于血液中加入抗凝剂,阻止血液凝固,经离心后分离出的上层液体即为血浆。

血清:是血液离体凝固后分离出来的液体。

血浆与血清的区别:离体血液凝固后的血清纤维蛋白原与一些凝血因子失去活性。

2、常用添加剂的主要用途与特点3、良好血涂片的“标准”①血膜至少长25mm,至玻片两侧边缘的距离约为5mm。

②血膜边缘要比玻片边缘窄,且边缘光滑,适用于油镜检查。

③血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布,末端呈方形或羽毛状。

④血膜末端无粒状、划线或裂隙。

⑤在镜检区域内,白细胞形态应无人为异常改变。

⑥无人为污染。

4、瑞氏染色法细胞受色原理:1物理吸附与化学亲和作用2PH的影响3甲醇的作用4甘油的作用5、技术误差:由于操作不规范或使用器材不准确造成的误差称为技术误差。

这类误差通过主观努力可以避免或显著减小,属系统误差。

固有误差(inherent error):包括计数域误差、计数室误差和吸管误差。

6、7、生理性变化红细胞数量受到许多生理因素影响,但与相同年龄、性别人群的参考区间相比,一般在±20%以内。

红细胞生理性变化与临床意义8、病理性变化:病理性减少:按病因不同可将贫血分为3大类。

此外,药物也可引起贫血。

1)红细胞生成减少:①骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血、急性造血功能停滞等。

②造血物质缺乏或利用障碍,如肾性贫血、缺铁性贫血(铁缺乏)、铁粒幼细胞贫血(铁利用障碍)、巨幼细胞贫血(叶酸、维生素B12缺乏性DNA合成障碍)等。

2)红细胞破坏过多3)红细胞丢失(失血):如急性、慢性失血性贫血。

9、原理HiCN法检测原理:血红蛋白(硫化血红蛋白除外)中的亚铁离子(Fe2+)被高铁氰化钾氧化为高铁离子(Fe3+),血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi)。

Hi与氰化钾(KCN)中的氰离子反应生成HiCN。

HiCN最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。

在特定条件下,HiCN 毫摩尔消光系数为44L/(mmol•cm)。

HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比,根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。

临床基础检验知识点总结

临床基础检验知识点总结

临床基础检验知识点总结一、临床基础检验的概念和作用1、概念:临床基础检验是临床医学的一个重要分支,是通过对患者生理和病理状态进行定量或半定量的检测、分析与评估,以辅助临床诊断和治疗的过程。

2、作用:临床基础检验可以为临床医生提供病情诊断、预后评估、治疗监控等方面的重要信息,为患者的健康提供科学依据。

二、临床基础检验的类型和常规项目1、类型:临床基础检验包括临床血液学、临床生化学、临床免疫学、临床微生物学、临床生物化学、临床分子生物学等多个学科,根据检测的生物样本不同有不同的分支。

2、常规项目:临床基础检验的常规项目包括血常规、尿常规、生化指标(肝肾功能、电解质、血糖等)、免疫学指标(免疫球蛋白、淋巴细胞计数等)、微生物培养和药敏试验、血气分析等。

三、临床基础检验的标本采集、保存和运输1、标本采集:不同类型的临床基础检验需要不同的生物标本,如血液、尿液、脑脊液、组织、分泌物等,采集时需要注意无菌操作、采样时间、采样部位等。

2、保存:标本采集后需要进行适当的保存,避免血液凝固、细菌繁殖、脱水等情况发生。

3、运输:标本在采集后需要及时送往实验室进行检测,运输过程中需要避免温度变化、振动、污染等情况。

四、临床基础检验的质量控制1、质量控制:临床基础检验的质量控制是保证检验结果准确、可靠的重要环节,包括实验室内外质量控制、内部质量控制、外部质量评价等。

2、标准化:临床基础检验需要依据相关标准和规范进行操作,包括标本采集、检测方法、报告标准等。

3、技术培训:实验室人员需要定期接受相关专业培训,更新技术知识,提高操作技能。

五、临床基础检验的结果解读与临床应用1、结果解读:临床基础检验的结果需要依据参考范围进行解读,同时考虑患者的临床情况和病史,进行综合评估。

2、临床应用:临床基础检验的结果可以用于疾病的早期筛查、诊断、疗效监测、预后评估等,对临床决策具有重要意义。

六、常见临床基础检验指标的临床意义和变化1、血常规指标:(1)白细胞计数:白细胞计数升高可能表示感染、炎症、内分泌紊乱等;降低可能表示骨髓抑制、免疫功能降低等。

临床检验基础知识

临床检验基础知识
临床检验基础知识
目 录
• 临床检验概述 • 标本采集与处理 • 常见临床检验项目 • 临床检验技术与方法 • 临床检验结果分析与解读 • 质量控制与实验室管理
01 临床检验概述
临床检验的定义与目的
定义
临床检验是一门对取自人体的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、 血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学等检验,以获得反映机体健康状况的 资料或数据,并为临床提供准确、及时的检验信息和检验结果的学科。
结果比对与改进
将外部质量评价结果与实验室内部质量控制数据进行比对分析, 针对存在的问题进行改进和优化。
经验交流与分享
与其他实验室进行经验交流和分享,共同提高临床检验质量和水 平。
实验室安全与管理制度
安全管理制度
建立健全实验室安全管理制度,包括 生物安全、化学安全、辐射安全等方 面的规定。
危险品管理
根据正常参考范围,判断患者某项指 标是否超出该范围,从而确定检验结 果是否正常。异常结果可能提示患者 存在某种疾病或病理状态。
检验结果的影响因素分析
生理因素
年龄、性别、昼夜节律、饮食、运动等生理因素可影响检 验结果。例如,新生儿和老年人的某些指标与成年人存在 差异,女性激素水平随月经周期变化。
病理因素
对实验室危险品进行严格管理,确保 危险品的采购、储存、使用和处置符 合相关规定。
应急预案与演练
制定实验室安全应急预案,并定期进 行演练,提高应对突发事件的能力。
监督检查与整改
定期对实验室安全管理制度执行情况 进行监督检查,针对存在的问题及时 整改落实。
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能存在感染。
动态观察
对于某些疾病,需要动态观察检 验结果的变化趋势,以评估病情 的发展和治疗效果。如肿瘤患者

临床检验基础知识点整理

临床检验基础知识点整理

临床检验基础知识点整理临床检验是指通过对人体生理和生化特征进行定量检测和分析,以提供有关疾病诊断和治疗的信息的一种医学方法。

以下是临床检验的基础知识点整理。

1.临床检验学:临床检验学是研究临床检验的科学,包括检验项目、方法、仪器、质量控制等方面的知识。

2.检验项目:指进行化学、生化、免疫学、微生物学、分子生物学、细胞学等检验和观察的指标和方法。

常见的检验项目包括血液学、尿液学、生化学、免疫学、血型学等。

3.检验标本:指在临床检验中采集的人体样本,包括血液、尿液、组织、体液等。

不同的检验项目需采集不同的标本。

4.检验方法:包括定性检验和定量检验两种方法。

定性检验是指通过观察和判断检验结果是否呈阳性或阴性,如尿液常规镜检;定量检验是指通过测量检验结果的数值来判断其浓度或含量,如血糖测定。

5.仪器设备:临床检验中常用的仪器设备有血细胞分析仪、自动生化分析仪、免疫分析仪、核酸分析仪等。

不同的仪器设备可用于不同的检验项目。

6.质量控制:质量控制是通过一系列标准和程序来确保临床检验结果的准确性和可靠性的一项管理工作。

包括内部质量控制和外部质量控制两个方面。

7.内部质量控制:是指在每天进行检验过程中,通过运行已知浓度标准样本和质控品,检验仪器和试剂的准确性和稳定性。

常见的控制指标有均值、标准差和偏差。

8.外部质量控制:是指通过参加外部质量评价活动,与其他实验室和质量控制中心进行比对和评价,以检验临床实验室的准确性和可靠性。

9.参考范围:也称正常值范围,是指在健康人群中,对特定指标的浓度或含量进行统计分析后得到的一组区间数值。

临床诊断中常用参考范围来判断检验结果是否正常。

10.临床意义:是指将临床检验结果与患者的临床症状和体征相结合,作出诊断、评估和监测治疗效果的判断。

常见的临床意义有阳性、阴性、异常、正常等。

11.误差和异常:误差是指检验结果与真实值之间的差异,可分为系统误差和随机误差。

异常是指检验结果与参考范围相比的偏离程度,可能提示疾病或异常生理状态。

临床检验基础知识

临床检验基础知识

临床检验基础知识是医学领域中非常重要的一部分,它涉及到对病人的血液、尿液、分泌物等样本进行检测和分析,以协助医生对疾病进行诊断、监测和治疗。

临床检验基础知识包括临床血液学检验、临床化学检验、临床免疫学检验、临床微生物学检验等多个方面。

临床血液学检验是临床检验中最基本的项目之一,通过对血液样本的检测,可以了解患者的红细胞、白细胞和血小板数量、形态等方面的变化,从而对贫血、感染、出血等病症进行诊断。

同时,血液生化检验还可以检测肝肾功能、血糖、血脂等指标,帮助医生了解患者的代谢状况和病情发展情况。

临床化学检验是通过对患者体液和排泄物的化学成分进行检测和分析,以协助医生对患者的肝、肾、心等器官的功能状况进行评估。

例如,通过检测尿液中的蛋白质、糖分等成分,可以了解肾脏或胰腺的功能状况;通过检测血液中的肌酐、尿素氮等成分,可以了解肾脏的功能状况。

临床免疫学检验是通过检测患者的免疫系统功能和相关抗体,以协助医生对患者的免疫系统疾病和感染性疾病进行诊断。

例如,通过检测乙肝病毒标志物,可以了解患者是否感染了乙肝病毒;通过检测肿瘤标志物,可以了解患者是否存在肿瘤。

临床微生物学检验是通过检测患者体内的病原微生物,以协助医生对感染性疾病进行诊断和治疗。

例如,通过检测痰液中的细菌,可以了解患者是否存在肺部感染;通过检测血液中的细菌,可以了解患者是否存在败血症。

临床基础检验总结知识点

临床基础检验总结知识点

临床基础检验总结知识点一、常用的临床基础检验方法临床基础检验方法种类繁多,根据检验目的和检测样本的不同,可以分为血液检验、尿液检验、生化检验、免疫检验、微生物检验等。

以下是其中一些常用的检验方法:1. 血液检验:血常规检验、凝血功能检测、血型鉴定等;2. 尿液检验:尿常规检验、尿蛋白、尿糖、尿酮体等;3. 生化检验:肝功能检测、肾功能检测、血脂检测、血糖检测、电解质检测等;4. 免疫学检验:免疫球蛋白检测、自身抗体检测、炎症因子检测等;5. 微生物检验:细菌培养、真菌培养、病毒学检测等。

这些检验方法可以为医生提供很多有用信息,但是在进行检验前,需要严格按照操作规程进行操作,避免造成误差。

二、常见的临床基础检验指标在临床基础检验中,常见的检验指标包括血常规指标、生化指标、免疫学指标、微生物指标等。

这些指标在诊断和治疗中具有重要作用,以下是一些常见的检验指标及其临床意义:1. 血常规指标:包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数等。

这些指标可以帮助医生了解机体的免疫状态、贫血情况、出血倾向等。

2. 生化指标:包括肝功能指标(ALT、AST、ALP、总胆红素等)、肾功能指标(肌酐、尿素氮、尿酸等)、血糖、血脂等。

这些指标可以协助医生评估患者的肝肾功能、糖脂代谢情况以及某些内分泌疾病的诊断。

3. 免疫学指标:包括各种免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM等)、自身抗体(抗核抗体、抗dsDNA抗体等)、炎症因子(TNF-α、IL-6等)。

这些指标可用于自身免疫性疾病、感染性疾病和肿瘤等的辅助诊断。

4. 微生物指标:包括细菌培养、真菌培养、病毒学检测等。

这些指标对于感染性疾病的诊断、治疗和预防具有重要意义。

在临床实践中,医生需要结合患者的临床表现和检验指标的变化,综合分析,才能做出正确的诊断和治疗计划。

三、临床基础检验质控临床基础检验中,质控是十分重要的一个环节,包括内部质控、外部质控和标准品使用。

只有严格控制检验过程中的各种误差,才能确保检验结果的准确性和可靠性。

临检基础知识点

临检基础知识点

临床检验基础知识要点1、血清与血浆的差别:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。

2、血浆除钙离子外,含有其他全部凝血因子3、正常人血量约为(70±10)ml/kg体重,成人约4~5L,约占体重的6%~8%,其中血浆占55%,血细胞占45%。

女性妊娠期间血量可增加23%~25%。

血液的主要生理功能包括:运输、协调、防御、维持机体内环境稳定等功能4、严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色5、酸碱度:正常人血液pH值7.35~7.45,动脉血pH值7.40,静脉血pH值7.35。

6、血浆渗透量:正常人约为290~310mOsm/(kg·H20)。

7、红细胞均匀混悬状态,与红细胞膜表面的唾液酸根、正常血浆成分、血浆黏度及血流动力学等因素有关8、乙二胺四乙酸、枸橼酸盐:能与血液中钙离子结合成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。

9、肝素:加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。

10、血涂片制备:制备涂片时,血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚,反之则愈薄。

血细胞比容增高、血液黏度较高时,应采用小血滴、小角度、慢推;血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。

11、血液细胞染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH值密切相关。

12、HbA占Hb总量95%以上,HbF占1%以下。

出生后HbA2(α2δ2)占Hb总量的2%~3%。

13、红细胞稀释液:①Hayem液由NaCl(调节渗透压)、Na2S04(提高比密防止细胞粘连)、HgCl2(防腐)和蒸馏水组成。

②枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。

14、发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。

大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高,小细胞低色素贫血的血红蛋白减低,但红细胞计数可正常。

临床检验基础理论核心考点整理

临床检验基础理论核心考点整理

临床检验基础理论核心考点整理临床检验是现代医学中不可或缺的一个环节,它通过对人体的生理和病理状态进行检测和分析,为医生提供诊断和治疗的依据。

而临床检验的基础理论是指在临床检验过程中所涉及的相应学科的理论基础,包括生物化学、生物学、物理学、微生物学等。

一、生物化学基础生物化学是研究生物体内生物分子以及其相互作用的一门学科,它在临床检验中的应用非常广泛。

临床检验中最常见的生物化学指标有血糖、血脂、肝功能指标、肾功能指标等。

血糖是指人体内血液中的葡萄糖浓度,是评价糖尿病的重要指标之一;血脂是指血液中的胆固醇和甘油三酯的浓度,与心血管疾病密切相关;肝功能指标包括血清谷丙转氨酶、血清谷草转氨酶、总胆红素等指标,可以反映肝脏的代谢和解毒功能;肾功能指标包括血肌酐、尿素氮等指标,可以反映肾脏的排泄功能。

二、生物学基础生物学是研究生命现象的一门学科,它在临床检验中的应用主要体现在微生物检验和细胞学检验方面。

微生物检验是指对临床样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验,以确定感染的病原菌和其对药物的敏感性,从而指导临床治疗;细胞学检验是指对体液或组织细胞进行形态学观察和分析,以诊断和鉴别各种疾病,如白血病、肿瘤等。

这些技术的发展为临床医学的疾病诊断提供了重要的依据。

三、物理学基础物理学是研究物质和能量的运动规律以及它们之间的相互作用的一门学科,它在临床检验中的应用主要体现在生物医学仪器方面。

临床检验中常见的仪器有电解质分析仪、生化分析仪、血细胞分析仪、免疫分析仪等。

这些仪器通过测量样本的物理性质,如电流、光学参数、生化反应等,得到相应的检测结果,为临床医生提供科学且准确的诊断依据。

四、微生物学基础微生物学是研究微生物的形态、生理、生化、遗传学、生态等方面的一门学科,它在临床检验中的应用主要体现在微生物感染和感染性疾病的诊断和治疗方面。

微生物感染是临床常见的疾病,通过对临床样本的检测和分析,可以确定感染的病原菌和药物敏感性,为临床治疗提供依据。

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临床检验医学clinicallaboratorymedicine血液三大尿液常粪便规体液脱落细胞学血型与血库临床检验医学的定义及研究范围临床检验医学的发展史及现状临床检验基础教学的目的学好临床检验基础的要求临床检验基础的发展史①古代最早是检测尿液开始的。

②17世纪的显微镜的发明推动了临床检验的发展。

AntonyvanLeeuwenhoek③上世纪50年代,库尔特(Coulter)电阻抗原理的提出,使临床检验从手工步入自动化、电脑化,使得检验变得简便、快速、精密度高更。

⑤目前,试剂更加批量化、配套化、专业化和多样化⑥检验液更加重视检验方法的标准化和质量控制,实施全面的质量控制和质量管理。

⑦试剂和仪器的更新使得检验更便捷:如床边检测(pointofcaretest,POCT),使检测标本更新鲜、交叉污染率低、更接近病人的生理和病理情况。

临床检验基础的现状(二):实施与保证全面质量管理1.分析前:生理变化、饮食因素、药物因素、标本采集与保存等。

2.分析中:检测方法、仪器设备性能与质量、试剂质量等。

3.分析后:发报告的把关。

复核其信息内容如姓名、性别、年龄、住院号、与疾病符合度等。

临床检验的特点:1.操作的自动化2.方法的标准化3.技术的现代化4.试剂的商品化5.计量单位的国际化6.质量管理的全程化7.生物安全的严格化8.检验人员的合格化绪论临床检验医学的定义及研究范围临床检验医学的发展史及现状临床检验基础教学的目的学好临床检验基础的要求临检的基础教学目的:1.疾病诊断和鉴别诊断2.疾病疗效监测和预后观察3.疾病预防4.科学研究教学目标:掌握:皮肤采血方法,Hb成分、种类及测定临床意义。

熟悉:血液的组成、理化性质和功能,Hb的结构,参考范围。

第一章chapter1血液标本采集和血涂片制备bloodcollection and bloodsmearpreparation血液组成血液主要理化性质①颜色:动脉血——鲜红色静脉血——暗红色血浆——浅黄色高脂膳食——乳白色溶血——血浆呈不同程度红色②量:成人约占体重的7%~9%,平均血量5L左右。

③pH:7.35~7.45④比密:1.05~1.06⑤渗透压:290~310mosm/Kg·H2O第一节血液标本采集blood collection血液标本的采集是分析前质量控制的重要环节一、标本采集的一般要求1.检验申请单:患者、临床信息完整2.标本采集和处理具体要求:标本种类标识、采集时间、急诊和危重患者信息、3.标本信息完整性:标本的防腐、保温等。

4.标本拒收:根据标本接收的文件不符合者。

二、血液标本类型1.全血(whole blood):静脉、动脉、毛细血管2.血浆(Plasma):全血加入抗凝剂离心后的上清液。

3.血清(serum):血液凝固后离心所得上清液。

4.分离或浓缩的血细胞成分:如血小板、白细胞、单个核细胞等。

三、血液标本采集方法(一)皮肤采血(二)静脉采血(三)动脉采血(一)皮肤采血法适用于血量<0.1ml的检验项目如RBC计数、WBC计数、Plt计数、Hb、ESR微量法等的测定等。

器材:采血针专用的“采血针”或三棱针,用前应高压灭菌,一人一针。

专用采血针三棱针采血部位(1)手指采血:WHO推荐采取外周血以左手无名指或中指指采血部位尖内侧优点:方便、获较多血量结果比较恒定缺点:与静脉血仍存在某些差异。

(2)耳垂采血:优点:痛感轻、方便、适用于反复采集缺点:血循环差受气温影响大、检查结果不恒定、RBC、WBC、Hb、Hct结果均比静脉血高,特别是冬季。

(3)其他拇指、拇趾或足跟采血——半岁以下婴幼儿皮肤完整处——严重烧伤者采血操作1、准备:2、采血部位按摩:3、消毒皮肤:4、针刺:5、擦去第一滴血后吸血:6、压住伤口片刻:注意事项(1)采血部位皮肤完整。

(2)无菌技术操作:防采血部位感染,一人一针。

(3)采血针刺入皮肤应深浅适中。

(4)多项检查时,采血次序为:Plt计数→RBC计数、Hb→WBC计数与分类。

(5)取血用于自动化血细胞分析仪,要防止棉球纤维混入堵塞仪器。

第二章chapter2血液一般检验blood general examination第一节红细胞检查Red blood cell (erythrocyte)examination红细胞检查内容:RBC是血液中最多的一种血细胞,其检查包括红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞形态观察、红细胞平均指数计算、网织红细胞计数、红细胞沉降率等。

形态:无核,双凹圆盘形不染色:呈草黄色RBC的生成及破坏:(见PPT)早幼红细胞中幼红细胞干细胞原始红细胞晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞一、红细胞计数(red blood cell count)【原理(principle)】血液用等渗稀释液稀释一定倍数→滴入血细胞计数盘→显微镜下计数一定范围内的RBC 数→换算得每升血液中的RBC数。

【参考范围(range)】成年女性:(3.5~5.0)×1012/L成年男性:(4.0~5.5)×1012/L新生儿:(6.0~7.0)×1012/L婴儿:(4.0~4.3)×1012/L儿童:(4.0~4.5)×1012/L【临床意义(clinical meaning)】一、生理性变化(一)生理性增多1.机体缺氧而使RBC代偿性↑:新生儿、高原生活、强烈的体力劳动2.成年男性比女性高:男性在6~7岁时最低,25~30岁时达高峰。

女性21~35岁维持最低水平。

3.其他:抽烟、肾上腺素及糖皮质激素的应用等(二)生理性减少1.生长发育造血原料相对不足:从6个月至2岁婴幼儿2.造血功能减退:部分老年人生理性贫血3.血容量增加:妊娠中晚期二、病理性变化(一)病理性增多1.相对增多:血液浓缩2.绝对性增多:①继发性增多:如心肺疾病②原发性增多:如真性RBC增多症高于6.8×1012/L应采取治疗措施(二)病理性减少1.RBC生成减少:※骨髓功能衰竭:AA ※造血物质缺乏或利用障碍:IDA、MA2.RBC破坏过多:※内在缺陷※外在异常3.RBC丢失过多:低于1.5×1012/L应考虑输血二、血红蛋白测定Hemoglobin measurement(一)Hb分子结构及成分:血红蛋白(hemoglobin,Hb或HGB)是人体有核红细胞及网织红细胞内合成的含色素辅基的结合蛋白质,由珠蛋白和亚铁血红素组成。

0.347g铁相当于100gHb;每克Hb可携带1.34ml氧。

4.其它:①还原Hb:Fe2+②氧合Hb:与O2结合的Hb③Hb衍生物:HbCO、SHb④高铁Hb:Fe3+2014年6月17日59P24(二)Hb的测定:ICSH(International council for standardization haematology)推荐氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)1.原理:Hb是色素蛋白,在血液中以多种形式存在,利用高铁氰化钾将Hb氧化成高铁血红蛋白(Hi),Hi可与CNˉ结合成氰化高铁血红蛋白,在540nm处有一吸收峰,用分光光度计测定其吸光度,换算成每升血液中血红蛋白的含量。

方法学评价(1)氰化高铁血红蛋白测定法优点:①操作简单、显色稳定,便于推广。

②转化液较稳定,易保存。

③除SHb外各Hb均可测读A后直接计数。

④HiCN参考品可长期保存,便于质控。

缺点:①KCN剧毒,易污染环境。

②不能测SHb,HbCO转化慢。

③浊度高引起Hb浓度假性增高:高球蛋白血症,脂血,试剂混浊,WBC和Plt高。

(2)十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)测定法SDS能破坏WBC,摩尔消光系数未定。

(3)碱羟血红蛋白测定法:HbF不能转化,最大吸收峰在575nm。

(4)叠氮高铁Hb测定法:具有与HiCN法相似的优点,但仍存在试剂污染。

(5)溴代十六烷基三甲铵血红蛋白测定法:不破坏WBC,精密度、准确性略低。

2014年6月17日65P254.参考值新生儿:170~200g/L女:110~150g/L男:120~160g/L70岁以上老年人:男:94~122g/L女:87~112g/L质量控制(1)血清浊度:(2)器材及试剂质量:(3)技术与操作:(4)废弃物的处理:临床意义与RBC计数相似(1)鉴别贫血类型:IDA:RBC↓Hb↓↓MA:RBC↓↓Hb↓(2)影响检验结果的因素:血液总容量改变全身血浆容量改变教学目标:掌握:血红蛋白测定的原理、Hb成分、种类及测定临床意义;网织红细胞的形态、计数方法及测定的临床意义。

熟悉:血涂片制备与染色、红细胞的形态学改变。

了解:Hb测定的方法学评价。

血红蛋白测定Hemoglobin measurement(一) Hb分子结构及成分:血红蛋白( hemoglobin,Hb或HGB )是人体有核红细胞及网织红细胞内合成的含色素辅基的结合蛋白质,由珠蛋白和亚铁血红素组成。

第三节血涂片制备与染色preparation and staining ofblood smears血涂片的制备(一)载玻片和推片:载玻片推片载玻片:清洁、干燥、中性、无油腻。

推片:边缘光滑。

(二)血涂片制作:良好血涂片:①血膜至少长25mm。

②边缘整齐,两侧、两端留有空隙。

③头体尾分明:细胞从厚区到薄区逐步均匀分布。

④血膜末端无粒状、画线或裂隙。

(三)制备血涂片的影响因素推制适当的血膜角度大,速度快→太厚,太短推片边缘不光整→刷尖用力不均→厚薄不匀血量过多、血液粘度高→无尾载玻片有油腻血涂片染色染色就是染料透入被染物并存留其内部的过程。

1..瑞氏染色法是血液染色最经典和最常用的染色法。

2.吉姆萨染色法3.瑞氏吉姆萨复合染色法4.细胞活体染色法5.巴氏染色法6.苏木素-伊红染色法(一)瑞氏染色法(Wright Stain)1. 瑞氏染料成分:⑴美蓝(又称亚甲蓝,methylene blue,M+)通常为氯盐,氯化美蓝(MCl),阳离子,一种碱性染料。

⑵伊红(eosin Eˉ):通常为钠盐(NaE),阴离子,一种酸性染料。

⑶Wright染料MCl + NaEME+ NaCl⑷甲醇(溶剂、固定剂):①MEM+ + Eˉ②具有强大的脱水力。

可将细胞固定为一定形态;使蛋白沉淀为颗粒状、网状等结构;增强染色效果;染色原理:物理的吸附作用和化学的亲和作用正常情况染色结果:外观:淡紫红色镜下:①RBC呈粉红色,略有碟状感。

②WBC浆中颗粒清楚,并显示各种细胞特有的色彩。

③细胞核染紫红色,核染色质结构清楚。

RBC嗜碱性颗粒中性颗粒嗜酸性颗粒3. PH对细胞染色的影响:PH↓→正电荷增多→易与伊红结合→染色偏红PH↑→负电荷增多→易与美蓝结合→偏蓝染色的质量保证染液质量染色时间与染液浓度染色过程染液的冲洗脱色与复染4.方法学评价:瑞氏染色法:优点:对于细胞质成分及中性颗粒等的染色可获得很好的染色效果,缺点:对细胞核的染色不如吉姆萨染色吉姆萨染色:原理:同瑞氏染色。

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