天然色素检测波长及溶剂一览表
高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素
2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过 本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
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2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同 蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别 为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他 蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度 评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要 求。
2、重复性和精密度
结论 本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。 该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类 胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬 菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混 合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素 浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝 卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
花青素检测内容和方法
花青素检测内容和方法花青素（Anthocyanins）是一类广泛存在于植物中的天然色素，具有丰富的抗氧化和抗炎特性。
以下是关于花青素检测的50条内容和方法：1. 花青素的检测可以通过分光光度法进行，该方法通过测量样品吸收特定波长的光来确定花青素的含量。
2. 除了分光光度法，高效液相色谱法（HPLC）也是一种常用的花青素检测方法，可以准确测量不同类型的花青素。
3. 在花青素检测中，常用的溶剂包括甲醇、乙腈和水，这些溶剂可以帮助提取样品中的花青素。
4. 还可以使用质谱法（MS）结合色谱法进行花青素的鉴定和定量分析，能够提高检测的精准度和准确性。
5. 花青素的含量可以通过比色法进行测定，该方法通过添加试剂产生有色产物来测量花青素的浓度。
6. 采用高性能液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）可以对花青素进行定性和定量分析，具有高灵敏度和选择性。
7. 使用紫外-可见分光光度法（UV-Vis）可测定花青素的吸光度，从而推算花青素的浓度。
8. 考虑到植物样品中可能存在其他干扰物质，需要对样品进行预处理，如蛋白质去除和净化，以提高花青素的检测灵敏度和准确性。
9. 对于不同环境下的花青素含量变化调查，可以通过原子吸收光谱分析（AAS）确定植物中金属离子对花青素生成的影响。
10. 考虑到花青素的稳定性，检测前样品处理和存储条件至关重要，如低温保存、光照避免、氧气隔离等。
11. 比较两个或多个样品中花青素的含量，可以通过内标法（Internal standard method）进行定量，以减小实验误差。
12. 回收率试验可以通过添加已知浓度的花青素作为标准品，验证提取方法的效果和准确性。
13. 花青素的结构分析可以使用质谱联用色谱技术（LC-MS）进行，以确定不同花青素的分子结构和质量。
14. 对于不同类型的花青素，还可以使用凝胶层析法（Gel Filtration Chromatography）进行分离和检测。
15. 非离子表面活性剂（Non-ionic surfactants）可以在样品制备中用来改善花青素的提取率和稳定性。
A13-甜菜红色素主要成分抗氧化能力
ABTS [2,2’-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfpni- 洗色谱柱 10 min 并平衡后再进样。 红色部分的检测波
cacid)] (Sigma)；Trolox[(6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchro-
长为 538 nm，黄色部分的检测波长为 478 nm。
(trolox equivalent antioxidant capacity) 表示，空白为乙醇。
采用 Sephadex LH-20 分离甜菜红色素主要部分， 2.5 DPPH 自由基清除试验测定抗氧化能力[14-15]
用 pH=5～6 的乙酸洗 脱[7]，收集红 色 部 分 和 黄 色 部 分 ，
Trolox 当量。
3 结果与讨论 3.1 甜菜红色素中甜菜色苷和甜菜黄素的分离效果
利用 Sephadex LH-20 对甜菜红色素进行分离，结 果显示， 用 pH=5～6 的乙酸洗脱可以将红色素和黄色 素分成明显的两个大的区带，分别收集洗脱液得到色 素 的 两 大 部 分— — — 红 色 部 分 和 黄 色 部 分 。
道， 采用不同抗氧化体系对这两类化合物的抗氧化活 紫外一可见光检测器(model 525)测定甜菜色苷和甜菜
性进行评价，来探究甜菜红色素的主要抗氧化部分。
黄素。 将上述冷冻干燥样品溶解过 0.22 μm 滤膜后进
样， 进样量为 20 μL， 所用色谱柱为 Kromasil C18 5μL
1 材料和仪器
甜菜红色素[1-2]。 国内外现均已将其作为天然色素加以
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
度为 30 ℃，时间为 20 min。 纤维素酶水解枣纤维的最
中药中48种非法染色色素的TLC法检测
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中药与天然药物
中药中 48 种非法染色色素的 TLC 法检测
胡 青，孙 健，张 甦，冯 睿，季 申*
(上海市食品药品检验所，上海 201203) 摘要 ： 建立了薄层色谱法检测中药中的 48 种非法染色色素。分别采用乙腈、0.1％甲酸甲醇溶液、甲醇∶ 0.1％甲酸 (3 ∶ 2 ) 混合溶液超声提取样品粗粉。将乙腈提取液与脂溶性色素对照溶液点于同一硅胶 G 板上，以石油醚∶乙醚∶无水甲酸 ( 80 ∶ 20 ∶ 1 ) 为展开剂展开。将 0.1％甲酸甲醇溶液提取液与水溶性碱性色素对照溶液点于同一硅胶 G 板上，以乙酸乙 酯∶乙醇∶水∶氨水 ( 12 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1.2 ) 为展开剂展开。将甲醇∶ 0.1％甲酸 ( 3 ∶ 2 ) 提取液与水溶性酸性色素对照溶 液点于同一硅胶 G 板上，以乙酸乙酯∶乙醇∶水∶氨水 ( 6 ∶ 4 ∶ 2 ∶ 0.2 ) 为展开剂展开。均在日光下检视。48 种色素 的检测限为 0.025 ～ 0.6 g。本法快速简便，可应用于中药材多色素染色初步筛查。 关键词：色素；中药；薄层色谱；检测 中图分类号：O657.7 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2015)07-0695-06 DOI：10.16522/ki.cjph.2015.07.008
，但尚未见关于中药多
2 方法与结果 2.1 对照溶液的配制 2.1.1 对照试剂贮备液 准确称取 R13、R14、R22、O6、R20 和 Y5 对 照试剂 10 mg，各置 20 ml 量瓶中，分别用乙腈溶 解并定容，配制成 0.5 mg/ml 的对照试剂贮备液。 准确称取 R16 对照试剂 10 mg， 置 50 ml 量瓶中， 用乙腈溶解并定容，配制成 0.2 mg/ml 的对照试剂 贮备液。 准确称取 R15、R25 和 R18 对照试剂 10 mg， 各置 100 ml 量瓶中，分别用乙腈溶解并定容，配制 成 0.1 mg/ml 的对照试剂贮备液。 准确称取 V2、B4、B5、G3、O7、R10、R4、
天然姜黄素的纯化和分子与晶体结构研究(2)
以后，姜黄素和类姜黄素的结构表征及合成方面的报道 陆续出现［３，４］。国内外有关姜黄的研究一直十分活跃，研 究内容主要涉及姜黄药用活性成分及有效成分的提取、 分离、分析、检测和结构鉴定，姜黄素及其衍生物的 化学反应及药用功能研究等［ ５ ～７ ］ 。研究资料表明［ ８ ］ ，不 同产地的姜黄一般具有不同的化学成分及组成；那么， 从不同产地的姜黄中提取出的姜黄素是否有同样的分子 与晶体结构？本文的工作证实，分子与晶体结构基本相 同，但是结构数据有些差异。国内外对于天然姜黄素 分子与晶体结构的研究报道较少［ ９ ， １ ０ ］ ，因此本文在天然 姜黄素的纯化、谱学表征和分子与晶体测定方面的工作
Ｃ２１ Ｈ ２０ Ｏ６ ３６８．３７ ２９３（２） Ｋ ０．０７１０７３ｎｍ Ｍｏｎｏｃｌｉｎｉｃ， Ｐ２／ｎ ａ ＝ １．２６９５（３） ｎｍ α＝ ９０° ｂ ＝ ０．７２０７５（１６） ｎｍ β＝ ９５．０９８（４）° ｃ ＝ １．９９６０（４） ｎｍ γ＝ ９０° １．８１９１（７）ｎｍ３
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈｏｈｈｏｔ ０１００６２， Ｃｈｉｎａ； ２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｈｏｈｈｏｔ ０１００２２， Ｃｈｉｎａ；
ＦＴＩＲ 光谱在 Ｎｉｃｏｌｅｔ ＦＴ－ＩＲ 光谱仪上测定，ＫＢｒ 压 片；ＵＶ－Ｖｉｓ 光谱在 Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＶ－３１０１ 光谱仪上记录； １ＨＮＭＲ 和 １３ＣＮＭＲ 光谱在 ＪＥＯ－ＪＮＭ－ＡＬ－３００ＦＴＮＭＲ 仪上 测定，ＴＭＳ 作内标，ＣＤＣｌ３ 作溶剂；ＭＳ 谱在 Ｆｉｎｎｉｇａｎ－ Ｐｌｏａｒｉｓ Ｑ－ＭＳ 质谱仪上记录；利用 ＳＧＷ Ｘ－４ 型熔点仪测 定天然姜黄素的熔点。 １．２ 姜黄素的提取、纯化及谱学表征数据
石榴花中花青素的提取与理化性质分析
编号学士学位论文石榴花中花青素的提取与理化性质分析学生姓名：美合日古丽·努尔麦麦提学号：20060303025系部：生命与环境科学系专业：生物科学年级：2006年级3班指导教师：阿布来提·阿布都热西提完成日期：2011 年 5 月 6 日1中文摘要本文以已晾干备用的石榴花瓣为原料酸性乙醇做溶剂提取了花青素并分析了该色素的溶解性、光照、热、PH 、氧化剂、还原剂、食品添加剂和金属离子对石榴花花青素理化性质的影响。
结果表明：该色素水溶性好，最大吸收波长为 376nm 。
耐热性、耐光性和耐氧化还原性较差，尤其是还原剂对该色素的理化性的影响较显著，在酸性条件下较稳定，食品添加剂（NaHCO 3 、食盐、柠檬酸）和Na +、Ca 2+、Zn 2+对石榴花花青素无影响，它们具有一定的护色作用，但 Fe 3+、Al 3+和Cu 2+对花青素有破坏作用，因此在使用和保存过程中考虑Fe 3+、Al 3+ 、Cu 2+和还原剂的作用。
石榴花花青素是颜色鲜艳、提取容易、操作简便、稳定性较好、易保存的天然色素，可用于食品、饮料、妆品等其它化工产品中。
关键词：石榴花；花青素；理化性质目录中文摘要 (1)引言 (3)1实验部分 (4)1.1实验仪器与材料 (4)1.1.1实验仪器 (4)1.1.2实验材料 (4)1.1.3实验试剂 (4)1.2实验方法 (4)1.2.1花青素的提取 (4)1.2.2花青素的溶解性 (4)1.2.3花青素溶液的光谱特性 (4)1.2.4pH值对花青素的影响 (4)1.2.5花青素溶液的热稳定性 (5)1.2.6花青素溶液的光稳定性 (5)1.2.7花青素溶液的耐氧化还原性 (5)1.2.8金属离子对花青素的影响 (5)1.2.9不同添加剂对花青素的影响 (5)2结果与讨论 (5)3结论 (10)参考文献 (10)致谢 (11)2引言天然色素与合成色素相比,安全性高,且具有一定的营养和药理作用[1]。
天然色素(1)
1.天然色素的概述
1.3 天然色素的特点 (1) 绝大多数天然色素无毒、无副作用，安全性高。 (2) 天然植物色素大多为花青素类、黄酮类、类胡萝卜素类化合物，因此，天然 食用色素不但无毒无害，而且很多天然食用色素含有人体必需的营养物质或 本身就是维生素或具有维生素性质的物质。如核黄素、番茄红素、玉米黄色 素、胡萝卜素等，尤其是β-胡萝卜素，国家已归类为营养强化剂，用于食品
1.天然色素的概述
1.4 天然色素的基本性质 1.4.4 安全性 根据(LD50)可将物质毒性分级：
用做食品着色剂的天然食用色素其LD50 应在基本无毒范围内。
1.天然色素的概述
1.4 天然色素的基本性质 1.4.4 安全性
(1) 毒性试验 是研究动物在一定时间内以一定剂量进入机体所引起的毒性反应。
1.天然色素的概述
1.4 天然色素的基本性质 1.4.2 pH值的影响 几种天然色素在不同pH值下的显色情况
1.天然色素的概述
1.4 天然色素的基本性质
1.4.3 稳定性 (1) 对热的稳定性 很多天然食用色素在遇热时就会分解，造成褪色，其对热的稳 定性较差。天然食用色素用于食品着色时，常常需加热食品，热稳定性差的 色素在使用中应尽量控制短的加热时间以保证色素尽可能少的破坏。 (2) 对光的稳定性 多数天然食用色素在紫外光照射下都会发生褪色，有的甚至放
在生产过程中有毒物质的带入，国家规定天然食用色素产品中砷、 汞、铅等有害物质不得超过规定量。 (3) 卫生检验 主要是检验致病微生物，应呈阴性反应，其他不应含有
黄曲霉素等有害物质。一般菌数应在30个以下。只有在以上几个方 面达到要求，该品种才达到要求的安全性。
1.天然色素的概述
1.4 天然色素的基本性质
第九章着色剂、发色剂和漂白剂
（4）叶绿素铜钠 ） 天然叶绿素稳定性差。 叶绿素经提取后，再经铜化、成盐可得到稳定的叶绿素铜钠。 墨绿色、有金属光泽的粉末；易溶于水、水溶液呈蓝绿色； 1％溶液pH为9.5 ~ 10.2。 着色能力强，色泽鲜艳。 LD50：小鼠口服>10g／kg； ADl 0~15 mg／kg 配制酒、糖果、青豌豆罐头、冰淇淋：0.5g／kg 注意事项：遇硬水或酸性食品或含Ca食品，可产生沉淀。
泉 州 师 范 学 院
（三）色调的选择与拼色 色调选择应该与食品原有色泽相似或与食品的名称相一致。 在使用合成着色剂时，我国规定允许使用8种食品合成着色剂拼 色，它们分属红、黄、蓝3种基本色，可以根据不同需要来选择 红 其中2种或3种拼配成各种不同的色谱。 基本方法： 基本方法： 由基本色拼配成二次色，或再拼成三次色。 红 黄 橙 绿 蓝 紫 红 橙 黄 （基本色） （二次色） （三次色
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（2）胭脂虫红 ） 干燥的雌性胭脂虫受精虫体用水提取。 深红色液体；呈酸性(pH5—5.3)；易溶于水、丙二醇、甘油。 LD50 小鼠口服>21.5g／kg ADI：0—5mg／kg 碳酸饮料：0.02g／kg 冰淇淋、雪糕：0.025g／kg
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三、食品着色剂的发色机理
（一）吸收波长 不同的物质能吸收不同波长的光。如果某物质所吸收的光， 其波长在可见光区以外，这种物质看起来是白色的；如果它 吸收的光波长在可见光区域（400－800nm），那么该物质 就一定会呈现一定的颜色，其颜色是由未被吸收的光波所反 映出来的，即被吸收光波颜色的互补色。 生色基（ 和助色基（ （二）生色基（团）和助色基（团） 生色基（ 生色基（团）： 分子本身含有的能使物质吸收可见光而呈现不同的颜色的特 殊基团。这些基团有碳一碳双键、酮基、醛基、羰基、偶氮 等。
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天然色素检测波长及溶剂一览表 天然色素应用技术推广实验室
名称 检测项
目
所用溶剂 使用波长nm 备注
辣椒红 色价 丙酮 460
色调 丙酮 470/454
红色素 丙酮 495/422*72.5-24.5
叶黄素 含量 正己烷 474 姜黄
色价 95%乙醇 425
丙酮 420 紫草红 色价 正己烷
丙酮
515
甘蓝红 色价 PH=3.0
缓冲液 524、526、528、530、
535取最大值
配法：柠檬酸45.8g
磷酸氢二钠38g加
纯净水3250ml
红米红 色价 酸性乙醇 535 配法：先加95%乙
醇850ml再加
0.15mol盐酸
150ml
甜菜红 色价 纯净水 535
甘薯红 色价 PH=3.0
缓冲液
535
紫苏 色价 PH=3.0
缓冲液
520
红花黄 色价 纯化水
PH=5.0
400、403
WG-131 纯净水 442 复配色素 WR-210 缓冲液 520 复配色素 OR-122 丙酮 456 复配色素 OR-122 丙酮 456 复配色素 OG-153 丙酮 421 复配色素 OG-152 丙酮 421 复配色素 OR-134 丙酮 453 复配色素 OR-610 丙酮 515 复配色素 OR-652 丙酮 484 复配色素 OR-121 丙酮 455 复配色素 WR-550F 纯化水 518 复配色素 WR-1504 丙酮 469 复配色素 WR-150 丙酮 460 复配色素 WG-110 纯化水 405 复配色素 OY-130 丙酮 447 复配色素 OY-1580 丙酮 420 复配色素 WR-41100 70%乙醇 505 复配色素 WG-133 蒸馏水 405 复配色素 EY-110 95%乙醇 425 复配色素 WY-310 蒸馏水 440 复配色素 WR-151 丙酮 460 复配色素 WR-159 丙酮 460 复配色素 WY-220 去离子水 462-464 复配色素 WY-140 丙酮 474 复配色素 WR-410 70%乙醇 505 复配色素 WR-510 蒸馏水 518 复配色素 WR-513 纯化水 518 复配色素 WB-110 PH7.0柠595 复配色素
液
辣椒精 辣度 甲醇 248、296
番茄红 色价 正己烷 502
水溶番茄红 色价 二氯甲烷 481 复配色素。