南京林业大学 植物组织培养 实验二
组织培养实验报告
植物组织培养实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。
（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。
六、实验步骤（一）培养基母液的配制表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l）表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml)500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l20 20 20 20 20 10 10 5（注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积）表3.配制母液所需的药品及称取量（注：根据表1与表2计算各物质的称取量）药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4 称取量（mg）41250 47500 4250 药品名称 kina2mno4?2h2o cuso4?5h2o 称取量（mg）20.75 6.25 0.625 cacl2?2h2o 11000 cocl2?6h2o 0.625 mgso4?7h2o 9250 肌醇 2000 feso4?4h2o 695 甘氨酸 40 na-edta 932.5 盐酸硫胺素 8 mnso4?7h2o 557.5 盐酸吡哆醇 10 znso4?7h2o 215 烟酸 10 h3bo3 155 （1） ms大量元素母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml存放于冰箱中备用。
植物组织培养实习报告
植物组织培养实习报告篇一：植物组织培养实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。
（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70%酒精、0.1%升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、84消毒液、蔗糖、琼脂等。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告植物组织培养是一种现代生物技术，主要是通过外界条件控制细胞的生长和分化，培养所需要的组织，从而通过细胞分裂和分化，实现植物的再生和繁殖。
为了更好地了解这项技术的原理和流程，我在实验室进行了一次植物组织培养实验。
实验材料在实验中，我们使用的植物为萝卜。
实验所需的其他材料包括无菌操作板、橡胶塞、手套、无菌皮层剪刀、烧杯、暗反应箱、培养基、灭菌器等。
实验过程首先，我们要进行实验前的准备工作。
将培养基溶解，加入适当的药物，将其灭菌，倒在Petri 瓶中。
之后，我们需要准备植物材料，将其清洗干净后，切下需要的组织。
注意，每次切下组织后，都要更换一次手套，以防止污染。
接着，我们需要将组织放在实验室内的无菌操作板上，用无菌皮层剪刀将其切开，取出其中的小块，并将其植入到培养基中。
然后，我们将瓶子封上橡胶塞，并将其放入暗反应箱中。
在其中进行恒温培养。
实验结果在培养7天后，我们观察到萝卜的种子开始破裂，开叶，并在切口处呈现出叶绿素的色泽，显示出组织细胞开始生长。
在培养15天后，种子植物的生长速度加快，茎和叶子均出现，并开始向四周地扩散生长。
在培养30天后，种子植物已经长成一株大小适中、青翠健康、叶面丰富的植株。
结论通过实验，我们了解到了植物组织培养的原理和方法，发现该实验技术所需的环境条件较为苛刻，需要进行多次细致的操作，才算得上成功。
同时，该技术具有非常广泛的应用价值，可以为植物育种和研究提供新的途径，促进了植物科技的发展。
总之，通过本次实验，我对植物组织培养技术有了更深入的了解，掌握了更多的实验技能，同时也提高了我在生命科学方面的实验操作能力。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告植物组织培养是一种重要的生物技术手段，通过对植物细胞和组织进行离体培养，可以实现植物再生、遗传改良、病毒检测等多种目的。
本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作方法，以及培养条件对植物再生的影响。
首先，我们选择了小麦离体子叶和茎段作为实验材料，进行了消毒处理和植物组织培养基的配制。
消毒处理是植物组织培养的关键步骤之一，它能有效杀灭外源微生物，保证培养组织的纯净性。
接着，我们将消毒后的植物材料转移到含有植物生长调节剂的培养基上，进行培养。
在培养的过程中，我们注意观察培养组织的生长情况，记录下不同处理条件下植物再生的效果。
实验结果表明，植物组织培养的成功与否受到多种因素的影响，包括植物材料的选择、培养基的成分、光照和温度等环境条件。
在本次实验中，我们发现小麦离体子叶的再生能力较强，而茎段的再生效果较差。
此外，培养基中生长调节剂的种类和浓度也对植物再生有显著影响，适当的生长调节剂可以促进再生过程，而过高或过低的浓度则会抑制再生。
综合实验结果，我们得出了一些结论和建议，首先，选择适宜的植物材料对于植物组织培养至关重要，不同植物材料的再生能力存在差异，需要根据具体情况进行选择；其次，培养基的配制需要根据具体植物材料和培养目的进行调整，合适的生长调节剂浓度可以提高再生效率；最后，培养条件的控制也是影响植物组织培养效果的重要因素，包括光照、温度、湿度等，都需要进行合理的调节。
总之，植物组织培养是一项复杂而有趣的实验技术，通过不断的实践和探索，我们可以更好地理解其中的原理和规律，为植物育种和生物工程领域的研究提供重要的技术支持。
希望本次实验结果能对相关领域的研究工作有所启发，也希望能为植物组织培养技术的进一步完善贡献一份力量。
植物组织培养综合实验2
通过满天星等的茎尖培养获 得完整的幼苗，学会茎尖组培快 繁的基本原理和操作技术。
实验原理
植物组织培养的原理: 植物细胞的全能性.
茎尖离体快繁技术
植物的茎尖和腋芽在适宜的培养基上，在合 适的激素条件下，其生长点分化形成大量芽并 能形成良好的苗。苗经诱导可长出根而形成完 整的植株，这就是茎尖组培快繁。此技术已广 泛用来繁育那些不能形成种子进行繁殖或难以 繁育的花卉杂交品种或其它具有重要经济价值 的植物，由于病毒一般不侵入生长点细胞，因 此，这种方法也广泛用来脱病毒获取脱毒苗。
室实 验
选材：材料类型、大小，年龄与发育状况等 修剪：去除较老和脏的叶片，尽量减小体积，减少污染 清洗：自来水冲洗，2％洗涤剂浸泡20分钟，清水冲洗
无 菌 间 室培 养
灭菌：75％乙醇30-60s；0.1%升汞8-10分钟; 无菌水
冲洗3-5次。
无菌修剪：用无菌镊子和剪刀进一步去除多余的叶片，
依据需要切割成相应大小的茎段（带2-3个叶片）。
接种：无菌操作将处理好的材料接种于培养基上，2-3个
材料/瓶
培养：25 ℃，光照培养
观察记录：污染，生长状况，分枝
实验结果与分析
培养过程请进行下列观察和记录:
1、污染情况：内生菌污染？外源菌污染？ 2、茎尖诱导情况，分枝状况，诱导率。 3、幼苗生长状况：弱小？健壮？玻璃化？
褐化？
理论基础
利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、 腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离 体培养。在短期内获得大量遗传性一致的个体 的方法（技术）称离体无性繁殖，由于这种方 式得到的植株群体来自一个单株（或一个单 芽），它们的遗传组成相同，这些株群可称单 株无性系或单芽无性系。 优越性：
植物组织培养实验报告
一、实验目的（1）学习植物外植体表面灭菌的常规方法；（2）了解物组织培养无菌操作技术；（3）学习诱导植物器官形成愈伤组织的方法与技术。
二、实验原理愈伤组织诱导培养是指在无菌条件下，将植物的器官或组织（如芽、茎尖、根尖、种子或花药）放在人工培养基上进行培养，通过脱分化和细胞分裂，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
诱导的愈伤组织在适宜的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，可进行再分化，重新产生出植物的各种器官和组织，进而发育成完整的植株。
植物组织培养采用无菌操作方法，如果使用的植物材料是带菌的，则在接种前就必须选择合适的消毒剂对植物外植体进行消毒，获得无菌材料，这是取得组织培养成功的前提和重要保证。
三、实验器材和试剂仪器：超净工作台、光照培养下、酒精灯、打火机、橡皮筋、记号笔、脱脂棉、水果刀、1000ml烧杯(装废液用)，500ml广口瓶，内装75%酒精及棉球、100ml锥形瓶，250ml试剂瓶，内装HgCI2或次氯酸钠的消毒液。
无菌器材：培养基、吸水纸（定性滤纸）、直径90mm的培养皿、250ml三角瓶（或烧杯），250ml无菌水、镊子、解剖刀。
植物材料：直根胡萝卜、蔬菜种子或其它植物茎叶。
试剂：95%乙醇、0.1%氯化汞（或次氯酸钠）。
培养基：MS+1mg/L 2,4-D+30g/L 蔗糖+0.6-1.0g/L琼脂,pH5.8四、实验步骤（1）接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养基及接种用具放入超净工作台台面，打开超净工作台紫外灯及接种间紫外灯，照射约30min，然后关闭紫外灯，通风20min后，打开日光灯即可进行无菌操作。
（2）外植体预处理：将胡萝卜根等外植体用流动的自来水冲洗干净，用小刀削去胡萝卜表皮1-2mm，切成大约20-30mm厚的块段，置于250ml三角瓶或大烧杯中，然后放入超净工作台中。
（3）双手用肥皂洗净，然后以70-75%乙醇棉将手擦试一遍。
开始在超净工作台中进行操作。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。
通过培养植物的组织和细胞，可以实现对植物特定性状的调控和改善。
研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤，研究不同培养条件下植物组织生长情况，为植物生物技术的研究提供参考。
研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度，提高植物的遗传改良效率，对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。
实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基，对其进行灭菌处理。
2. 取样品进行无菌处理，切取植物组织。
3. 将植物组织置于培养基上，放入生长室进行培养。
4. 定期观察植物组织的生长情况，记录数据。
5. 根据实验设计，对不同处理组进行相应操作。
实验设计本实验设计了对照组和不同处理组，比较不同处理条件对植物组织生长的影响，以验证植物组织培养的有效性。
结果与讨论实验结果经过一段时间的培养，观察到植物组织在培养基上出现生长现象，不同处理组的生长情况有所不同。
结果分析通过对实验结果的分析，可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性，为进一步研究提供了重要依据。
结果讨论在讨论部分，对实验结果进行解释和归纳，总结出植物组织培养的特点和应用前景，为相关研究领域提供参考和启示。
结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。
本实验结果表明，植物组织培养具有可行性和有效性，对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。
《植物组织培养》实践教学指导书教程
《植物组织培养》实践教学指导书目录实验实训部分实验一植物组织培养实验室及常用仪器设备的构造及使用实验二无菌操作技术（选做）实验三接种训练实验四组培苗的移栽驯化实验五试管苗的转接与扩繁（选做）实验六生根培养（选做）实验七胡萝卜离体根的培养（选做）实验八茎尖的组织培养（选做）实验九茎段的组织培养实验十百合鳞茎的组织培养（选做）实验十一叶片的组织培养（选做）实验十二花药培养实验十三西葫芦子房的培养（选做）实验十四苹果胚（embryo）培养（选做）实验十五黄瓜下胚轴愈伤组织的诱导（选做）实验十微茎尖的剥离训练专业实训部分实训一培养基的制作实训二器官培养技能实训三果树、蔬菜、经济类植物组织培养一、果树类组织培养（一）苹果的组织培养（二）草莓微茎尖培养（三）枣的组织培养（四）树莓的组织培养二、蔬菜类组织培养（一）芦笋的组织培养（二）无籽西瓜的组织培养（三）大蒜的组织培养（四）马铃薯组织培养三、经济类组织培养（一）香石竹的组织培养（二）菊花茎段的组织培养（三）菊花微茎尖的组织培养（四）唐菖莆的组织培养（五）串红的组织培养（六）蝴蝶兰的组织培养附1：观看组织培养实验室和组培工厂化生产的录像或课件附2：组培技能考核标准实验实训部分实验一植物组织培养实验室及常用仪器的构造及使用一、目的要求（一）一般掌握组织培养常用仪器设备的结构与维护；（二）熟练掌握常用仪器设备的正确使用方法。
二、常用仪器设备分析天平；灭菌器；蒸馏水器等。
三、方法步骤（－）岛津进口电子分析天平的构造及使用1．构造：岛津进口电子分析天平主要由：天平机体、称重舱、天平盘、键板（包括4个键）、液晶显示屏等构成。
2．使用：（1）调平天平放稳后，转动脚螺旋，使水平气泡在水平指示的红环内；（2）自检在空载下，天平内部进行自检，显示屏上相继显示CHE3→0，CAL4→0，CAL，END，CAL，OFF；（3）全显示按“ON／OFF”键，液晶屏进入全显示态；（4）这时再按“ON／OFF’键，液晶屏进入预热状态，有绿色指示灯显示。
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植物组织培养实验报告
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周玥实验二: 外植体的消毒与接种
一、实验目的
通过在超净工作台上进行无菌操作训练,掌握外植体消毒和接种的无菌操作技术。
二、实验原理
用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。
在组织培养中，外植体如果是带菌的，在接种前都必须进行表面消毒，这是取得培养成功的最基本的和重要的前提; 植物细胞具有全能型，其外植体接种在无菌的人工培养基上，能长成完整的无菌植株。
三、实验材料
材料：金叶银杏的胚、培养基
试剂：无菌水、70%酒精、升汞
仪器设备：超净工作台、镊子、剪刀、烧杯、试管、高压灭菌锅、酒精灯、棉球四、实验步骤
1．准备工作：打开超净工作台，用紫外灯烧2h,关闭紫外灯，
将灭菌溶液，无菌水，大烧杯等放入超净工作台，在台上点
燃2个酒精灯。
外植体消毒：70%酒精浸泡10-30秒--无菌
水清洗--0.1-1%升汞5min--无菌水冲洗
2. 灭菌：先洗净双手，上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，然
后擦拭工作台面；再用酒精棉球擦拭接种工具，将镊子和剪刀用酒精灯消毒。
3.接种：镊子消毒--从金叶银杏中取出外植体放入培养皿--镊
子消毒--取出试管，揭开塑料盖--镊子消毒--取出培养皿中的外植体--斜插入培养基中--镊子消毒--盖上塑料纸，用皮筋绑紧—放入试管架。
接种时双手不能离开工作台，不能说话4．用黑笔标上制作人姓名
5．接种完要清理干净工作台。