安捷伦1100操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明：1.开机前准备：1.1仪器设备：Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。
● G1311A (四元泵)。
● G1329A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1315A（DAD检测器）。
● 色谱柱 1.2溶剂准备：● 有机相必须是色谱级纯。
● 水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。
● 流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。
有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。
产品类别代表产品品系产品特点纤维素酯类混合纤维素水相成孔性能好，亲水性好，材料成本低。
膜（CN-CA）可耐稀酸。
不适合于酮类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。
尼龙6 通用具有亲水性，较耐碱不耐酸。
在酮、酚、聚酰胺类（PA-6）醚及高分子醇类不被腐蚀。
聚砜（PS）通用良好的化学和热稳定性，耐辐射，机械聚砜类强度高。
有机PDEF耐化学腐蚀，耐氧化，耐高温，疏聚偏氟乙烯/PDEF/PTFE 水性（酒精处理后变清水性），PTFE耐酸聚四氟乙烯膜碱性强。
具有良好的化学稳定性，耐酸碱和各种聚烯烃类聚丙烯膜有机有机溶剂。
价格便宜，但孔径分布宽。
（PP）耐高温，耐有机溶剂、耐生物降解等。
无机材料陶瓷、玻璃通用 BP、金属膜2.基本操作步骤: (一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
C-SOP-102(00)Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程
1.0目的为Agilent 1100液相色谱系统使用提供标准操作规程。
2.0范围QC部门检测所使用的Agilent1100 高效液相色谱系统。
3.0责任QC检验人员。
4.0程序4.1 开机操作过程4.1.1 首先要启动电脑。
4.1.2 联液相色谱仪前各模块左下方的电源开关先打开，进样针、泵进行自检发出滋滋声，声音结束，启动完成。
4.1.3 双击电脑桌面的Instrument 1 Online（仪器联机），进入LC化学工作站Methodand Runcontrol（方法和运行控制）界面。
4.2 数据采集操作过程4.2.1 从化学工作站菜单Method（方法）中选择Edit Entire Method(编辑完整的方法)，或者Load Method（调用方法）调用原来已经编好的方法。
4.2.1.1 编辑一个完整的方法在Method（方法）栏下进入Edit Entire Method(编辑完整的方法)，出现CheckMethod Section to Edit（方法编辑选项）对话框，点击OK（确定）；进入Method information(方法信息)，出现Method Comment（方法注释）对话框，编辑所需信息后点击OK；进入Set up Pump（设置泵）设置泵的参数，编辑所需要的色谱条件（Flow流速、Solvents流动相溶剂比例、Stop time运行时间、Post Time后运行时间、Time table时间表）后点击OK（确定）；进入Set up Injector（设置进样器）设置自动进样器的参数，编辑所需的InjectorV olume（进样量），依据所需可以设置进样带洗针，点击OK（确定）；进入Column Thermostat Method（柱温箱控温方法）设置柱温箱的参数，设置柱温箱的Temperature（温度），点击OK（确定）；进入VWD Signal（VWD信号）设置检测器的参数，编辑所需的测定波长，点击OK（确定）；进入SignalDetails（信号细节），点击OK（确定）；进入Edit Integration Events（编辑积分事件）编辑积分事件参数，点击OK（确定）；进入Sepecify Report（设定报告）设定报告格式，点击OK（确定）；进入Instrument Curves（仪器曲线）选择重叠显示曲线（一般不选），点击OK（确定）；进入Run Time Checklist（运行时选项表）运行表，选中Data Acquisition(数据采集) 、Standard DataAnalysis（标准数据分析），点击OK（确定）；在化学工作站菜单Method（方法）栏下选择Save Method As（方法另存为）方法另存为：.M。
Agilent 1100型HPLC操作指南
Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤（通常过0.2μm滤膜）、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相，泵头清洗溶剂（10％的异丙醇）。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱（根据需要）、检测器电源，等待系统自检通过，黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑，双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站，软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶，旋松“排气阀（purge阀）”，将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min，进行清洗和排放气泡，至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时，需打开泵头清洗溶剂，使其逐滴流出，防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出，影响系统压力。
5、安装色谱柱：依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱（注意方向，箭头指向检测器）。
设置溶剂比例，1mL/min流速，平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法，依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数，保存方法。
2、运行方法，监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样：设定样品名、数据文件存储位置，点击运行方法；将手动进样器扳至“Load”上样，上样完扳至“Inject”，工作站开始记录信号。
4、测试完毕，点击桌面的“仪器脱机”打开工作站，进行数据处理，积分，定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束，冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则（以反相C18为例）：先用90％水，10％乙腈（或其它有机相）冲洗水溶性物质；30min后改为50％水，50％乙腈；再过30min 后，改为100％乙腈，再冲洗30min后结束。
2、实验结束，停止泵，关闭化学工作站，关闭电脑，关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱，清理流动相，将各个抽滤头浸泡在有机相中，整理桌面、地面杂物。
注意事项：1、挥发性有毒有机相（甲醇、乙腈、正己烷等）需尽量包严实。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程 已有 179 次阅读 2023-7-17 13:351 目的制定 Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确标准地操作，维护液相色谱仪。
2 适用范围适用于Agilent1100 高效液相色谱仪的使用，维护。
3 编写依据Agilent1100 高效液相色谱仪使用说明书 4 职责QC 相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。
5 内容5.1安全留意事项本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器常常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，制止消灭电火花；配制流淌相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。
5.2仪器组成本仪器由 LC-10ATVP 泵、7725 手动进样器、柱温箱、Agilent1100 紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2023 或其它工作站)。
5.3 日常使用操作步骤 5.3.1 开机翻开计算机，进入 Windows 系统，CAG Bootp Server 程序将自动运行。
翻开 HPLC 1100 各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功〔约 1～2min 〕后，进入 Online 工作站。
5.3.2 系统初始化〔主要目的：排解系统中的气泡〕 5.3.2.1 翻开Purge 阀 5.3.2.2加大泵流量并开启泵，快速冲洗试验通道，至无气泡从废液管排出。
降低流量及溶剂比例成试验初始条件，并单击OK 确认执行；5.3.2.3 关闭Purge 阀，完成系统初始化。
5.3.3 系统平衡〔主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量〕调出本次试验所需方法，保持泵连续工作，以试验初始的流淌相冲洗、平衡柱子一段时间。
〔一般约 30min ，可自己依据本人的仪器配置状况计算，要求至少以色谱柱几何体积 5～10 倍体积的流淌相冲洗、平衡系统。
〕 5.3.4在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。
安捷伦1100工作站详细图文操作手册
2021/2/22
9
Author：Tianyou Yue
调用/储存方法
方法信息 编辑完整方法 调方法 存方法/覆盖保存 另存方法
右图为方法存/取对话框，方 法文件后缀名为.m
2021/2/22
10
Author：Tianyou Yue
其它功能菜单
文件处理 运行控制
仪器控制
序列
放弃任务
在线帮助
运行序列 运行方法
2021/2/22
柱箱、检测器、自动进样器等 参数改变操作与此相同
8
Author：Tianyou Yue
选择在线显示信号
在Online Plot上点击“Change”， 显出右面对话框，在此对话框中左 面为可用信号，右面为在线显示信 号，通过“Add””Remove”改变不 同的显示信号。
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗口选择 要监控的信号。
Author：Tianyou Yue
Author：Tianyou Yue
Author：Tianyou Yue
Author：Tianyou Yue
Author：Tianyou Yue
输入流动相的量
对着瓶子击左键，然后左键单击Solvent bottles Filling，显示右面对话框
在Total Volume下输入溶剂瓶容量，一 般为1.00Liter，Actual Volume下输入溶 剂实际加入的量，比如0.5Liter
选中下面两个选项后，在溶剂低于 0.1Liter时停止样品分析，溶剂用完后泵 自动关闭。
2021/2/226Author：Tianyou Yue
Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程-PPT课件
溶剂瓶 溶剂架
在线脱气
Purge阀 泵
自动进样器 柱温箱 检测器
仪器各组件
泵 ：四元泵、二元泵 在线脱气器 进样器：自动进样器及手动进样器 柱温箱 检测器： DAD检测器、UV检测器
Agilent1100在线脱气机
Agilent1100在线脱气机工作原 理
何时需要使用Agilent在线脱气机
如果在低UV波长段，用最高灵敏度进行检测 如果要求使用最佳进样精度 如果要求保留时间重现性很高 （在0.5ml/min流速以下） 如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感
Agilent 1100泵
Agilent 1100四元泵工作原理
Agilent 1100泵头结构
编辑分析方法
新方法建立：点击【 Method】，点击 【 Edit entire method】 或 【 New method】选项，进行方法编缉。
在Method Comments 中加入方法的信息如方 法的用途等
泵参数设定
在Flow 处输入流量, 在Solvent A、B、C、D 处输入比例，也可Insert一 行”Timetable” ,编辑梯度，在Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高 压。单击Ok进入下一画面
排气
将流动相放入溶剂瓶中，打开 Purge 阀，依次单击 【 Pump】→【Set up Pump】， 设 Flow 为 2 ml/min， 单 击 OK ， 再 依 次 单 击 【 Pump】→ 【control】，选中 on，单击OK，则系统开始 Purge 至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均 无气泡。 在【control】选项中选off，关闭泵，关闭Purge 阀。 单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。 如图所示。 打开10％异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有 液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为 每分钟5～15滴。
安捷伦1100液相色谱仪的使用说明书
（３） 单击Ｏｋ． （４） 从 Ｒｅｐｏｒｔ 菜单中选择 Ｐｒｉｎｔ
ｒｅｐｏｒｔ 则报告结果将打印到屏幕上 如想输出到打印机上 则单击Ｒｅｐｏｒｔ 底部的 Ｐｒｉｎｔ 钮
（四） 关机：
关机前 用 １００％的水冲洗系统２０分钟 然后用有机溶剂冲洗系统１０分钟 如ＡＣＮ 然后关泵 适于 反相色谱柱 ［正相色谱柱用适当的溶剂冲洗］
色谱柱： Ｚｏｒｂａｘ ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ Ｃ８，１５０ｍｍ ４．６ｍｍ ｉ．ｄ ２ 溶剂准备 色谱级纯或优级纯乙腈 ＡＣＮ 或甲醇 二次蒸馏水
基本操作步骤： （ 一） 开机 １ 打开计算机，进入Ｗｉｎｄｏｗｓ ＮＴ 或Ｗｉｎｄｏｗｓ ２０００ 画面，并运行Ｂｏｏｔｐ Ｓｅｒｖｅｒ程序
样 品 波 长 －－一般选择最大吸收处的波长 样品带宽ＢＷ —
一般选择最大吸收值一半处的整个宽度 ＢＷ Ｎｏｉｓｅ
参比波长—
一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域
参比带宽ＢＷ —
至少要与样品信号的带宽相等 许多情况下用１００ｎｍ作为缺省值 Ｐｅａｋ
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安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程
1、操作前的准备
流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。
2、仪器的操作
2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。
2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。
2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。
2.4编辑仪器方法
2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。
2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。
2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。
2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。
2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。
2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。
2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。
2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。
2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。
2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。
2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。
（若遇到编辑冲柱方法时，“运行前命令/宏”设为“LAMPALL
OFF”，“运行后命令/宏”设为“PUMPALL OFF”,这样可以延长灯的使用寿命）2.4.12单击菜单栏中的“方法”选择“保存方法”，输入“方法名称”，选择保存方法的路径。
2.5采集数据
选择上述已建立好的方法后，单击菜单栏中“仪器”选择“启动系统”待基线走平后，进样采集数据。
2.5.1单次进样
选择单次进样图标，单击菜单栏中“运行控制”选择“样品信息”，选择数据文件的“路径”，在“子目录”中输入相应的名称；选择数据文件名的命名方式，“手动”或“前缀/计数器”，选择后输入相应的参数；“样品位置”输入对应的样品瓶号，若未输入则运行空白；“样品名称”输入对应的样品。
单击“运行方法”即可进样。
（单击“确定”，点击工作站界面上的“开始”也行）
2.5.2序列进样
（1）序列表的设置选择序列进样图标，单击菜单栏中“序列”选择“序列表”，输入“样品瓶”、“样品名称”、“方法名称”、“进样次数/瓶”、“数据名称”，（需要进样几个样品瓶中的样品依次“追加一行”，输入相应的参数）单击“确定”。
（2）序列表的保存单击菜单栏中“序列”选择“保存序列模板”，输入“文件名”，单击“确定”。
（3）运行序列单击菜单栏中“运行控制”选择“运行序列”或者单击工作站界面上的“开始”。
2.6数据处理双击桌面上的“仪器1脱机”，进入脱机界面
2.61选择数据单击“文件”，选择“调用信号”，出现“调用信号”窗口，选择要处理的数据的“文件名”，单击“确定”。
2.6.2选择方法单击“方法”，选择“调用方法”，选择所需的方法，单击“确定”。
2.6.3积分单击“积分”，选择“自动积分”。
积分结果不理想，再从菜单中选择“积分”- “积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”。
（如果实在调不到合适的参数，可以考虑手动积分）
2.7打印报告单击“报告”，选择“打印报告”。
2.8关机
2.8.1关机前，先用低浓度的甲醇（5%-20%）冲柱0.5-1小时后，用高浓度甲醇（80%）冲柱0.5-1小时（压力降至不再下降为止）。
若柱子第二天不用，可用纯甲醇灌注后取下柱子。
2.8.2退出化学工作站，及其它窗口，关闭电脑。
2.8.3关闭Agilent 1100各模块电源开关。