李斯特菌PPT课件
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李斯特菌感染ppt课件
4
人主要通过食入软奶酪、未充分加热 的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、 巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、 卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅 饼、冻猪舌等而感染，约占85-90%的 病例是由被污染的食品引起的。
2、该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进 入体内而造成感染，孕妇感染后通过 胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于 阴道、子宫颈的该菌也引起感染，性 接触也是本病传播的可能途径，且有 上升趋势。
3
流行病 学
1、单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中， 不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在 土壤、地表水、污水、废水、植物、青 储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动 物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的 途径进行传播。据报道，健康人粪便中 单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70% 的人可短期带菌，4-8%的水产品、510%的奶及其产品、30%以上的肉制品 及15%以上的家禽均被该菌污染。
7
潜伏期
在感染后3-70天出现症状，健康成人可出现 轻微类似流感症状，易感者突然发热，剧烈 头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、 孕妇出现流产。
单增李氏菌的抗原结构与毒力无关，它的致 病性与毒力机理如下：
1．寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进 入肠细胞与巨噬细胞。
2．抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性 过氧化物歧化酶，使它能抗活化巨噬细胞内 的过氧物（为杀菌的毒性游离基团）分解。
12
防控措施
1、李斯特菌通常存在于潮湿区域和辅助清 洗设备中，例如：地面、排水沟、洗涤池、 天花板、冷凝水、拖把、海绵、盐水冷冻 设备及剥皮机。因此，控制李斯特氏菌的 数量对减少深加工过程中的污染是很有必 要的。
2、控制李斯特菌这类病原菌的最好方法是 降低交叉污染。使原料和成品操作分离， 保持区域干燥，以防细菌生长和减少微生 物扩散。
人主要通过食入软奶酪、未充分加热 的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、 巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、 卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅 饼、冻猪舌等而感染，约占85-90%的 病例是由被污染的食品引起的。
2、该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进 入体内而造成感染，孕妇感染后通过 胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于 阴道、子宫颈的该菌也引起感染，性 接触也是本病传播的可能途径，且有 上升趋势。
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流行病 学
1、单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中， 不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在 土壤、地表水、污水、废水、植物、青 储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动 物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的 途径进行传播。据报道，健康人粪便中 单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70% 的人可短期带菌，4-8%的水产品、510%的奶及其产品、30%以上的肉制品 及15%以上的家禽均被该菌污染。
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潜伏期
在感染后3-70天出现症状，健康成人可出现 轻微类似流感症状，易感者突然发热，剧烈 头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、 孕妇出现流产。
单增李氏菌的抗原结构与毒力无关，它的致 病性与毒力机理如下：
1．寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进 入肠细胞与巨噬细胞。
2．抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性 过氧化物歧化酶，使它能抗活化巨噬细胞内 的过氧物（为杀菌的毒性游离基团）分解。
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防控措施
1、李斯特菌通常存在于潮湿区域和辅助清 洗设备中，例如：地面、排水沟、洗涤池、 天花板、冷凝水、拖把、海绵、盐水冷冻 设备及剥皮机。因此，控制李斯特氏菌的 数量对减少深加工过程中的污染是很有必 要的。
2、控制李斯特菌这类病原菌的最好方法是 降低交叉污染。使原料和成品操作分离， 保持区域干燥，以防细菌生长和减少微生 物扩散。
李斯特菌 PPT课件
• 多发生于发达国家，主要以散发性为主
地区分布
• 新生儿，孕妇，老人50-59岁，免疫缺陷 易感人群 人群
2019/9/13
• 农场动物牛、羊、猪、鸡、马、鹿、鸽 宿主 子、海鸥等均可能为李斯特菌的携带者
5
产单核细胞李斯特菌为需氧或兼性厌氧，感染后患者病死率高 达30％
该 菌 对 各 种 应 激 （低温、高盐、低 ｐＨ、氧 化 应 激 等） 条 件 有 很 强 的 耐 受性，进一步增大了该菌的危害性。此 菌不产生内毒素，可 产 生 一 种 溶 血 性 外 毒 素，对 人 类 致 病 性强
2019/9/13
10
发病机制
• 产单核细胞李斯特菌能产生 ２ 种磷脂酶Ｃ：磷脂酰肌磷 脂酶 Ｃ(ＰＩ－ＰＬＣ）和宽范围的磷脂酶Ｃ（ＰＣ－Ｐ ＬＣ）
• ＰＩ－ＰＬＣ毒性相对较小，对细菌在细胞间扩散作用 不 大，主 要 是 协 同 ＰＣ－ＰＬＣ 发 挥 作 用。 而ＰＣ －ＰＬＣ的功能则较复杂，它使细菌从吞噬泡中逃逸出来， 能破坏宿主细胞的信号通路，能调节细胞因子和化学因子 的合成，还能通过二酰基甘油、神经酰胺、肌醇磷酸盐等 调节细胞的生长、分化、凋亡等
2019/9/13
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临床表现
• 李斯特菌脑膜炎与其他细菌性脑膜炎相似 • 一般起病急，90%病例的首发症状为发热 • 有严重的头痛、眩晕、恶心、呕吐 • 脑膜刺激征明显，且常伴有意识障碍，如木僵、谵妄等亦
可发生抽搐
2019/9/13
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临床表现
• 重症者可在24～48h内昏迷 • 少数起病缓慢，病程较长而有反复 • 如病变累及脑实质则可有脑炎和脑脓肿的表现 • 个别发生脑干炎而呈复视、发音和吞咽困难、面神经瘫痪
胞被吸引到炎症部位，导致炎症清除 • 体液免疫对该菌感染无保护作用，故在细胞免疫
单核增生李斯特菌PPT幻灯片
李斯特氏菌属(Listeria)早在20世纪初即被发现，它 共有7个菌种，革兰氏染色阳性。其中单核细胞增生 李斯特菌(Listeria monocytogenes，简称单增李氏 菌) ，是唯一能引起人类疾病的，也是一种人畜共患 的病原菌。
（一）特点
短小的革兰阳性无芽孢杆菌,陈旧 培养物有时变为阴性
兼性厌氧,最适在含有CO2的微需 氧环境中生长
2. 磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶C（PI-PLC）：只有 致病菌才有分泌该酶的活性。PI-PLC与溶血素O协 同调节，说明该酶在LM菌感染中起重要作用。它 参与吞噬溶酶体膜的裂解，且其降解产物可以作为 第二信使介导许多病理反应。
3. 其它有关致病物质：prfA编码一种激活李斯特菌 溶血基因转录的蛋白，该蛋白为单核细胞增生性李 斯特菌多种毒力决定子的一种主要调节因子。
4. 单增李氏菌进入人体后是否发病，与菌的毒力和 宿主的年龄、免疫状态有关，因为该菌是一种细胞 内寄生菌，宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能。
（五）控制
单增李斯特氏菌在一般热加工处理中能存活，热 处理已杀灭了竞争性细菌群，使单增李斯特氏菌在 没有竞争的环境条件下易于存活，所以在食品加工 中，中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。
直径约0.2～0.4 mm、半透明、边缘整齐、微带珠 光的露水样菌落,在斜射光下菌落呈典型的蓝绿色光泽。
无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中 可形成荚膜，在20℃～25℃培养时能形成4根鞭毛,但 在37℃培养时无鞭毛 生长温度范围5℃～45℃ ，最适温度为30℃～37℃, 能在普通冰箱冷藏室生长,是一种典型的耐冷性细菌, 同时还具有耐盐性
热耐受性较强，50℃经40min不能杀死，63℃加热 15～20min死亡，酸性、碱性条件下都适应。
（一）特点
短小的革兰阳性无芽孢杆菌,陈旧 培养物有时变为阴性
兼性厌氧,最适在含有CO2的微需 氧环境中生长
2. 磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶C（PI-PLC）：只有 致病菌才有分泌该酶的活性。PI-PLC与溶血素O协 同调节，说明该酶在LM菌感染中起重要作用。它 参与吞噬溶酶体膜的裂解，且其降解产物可以作为 第二信使介导许多病理反应。
3. 其它有关致病物质：prfA编码一种激活李斯特菌 溶血基因转录的蛋白，该蛋白为单核细胞增生性李 斯特菌多种毒力决定子的一种主要调节因子。
4. 单增李氏菌进入人体后是否发病，与菌的毒力和 宿主的年龄、免疫状态有关，因为该菌是一种细胞 内寄生菌，宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能。
（五）控制
单增李斯特氏菌在一般热加工处理中能存活，热 处理已杀灭了竞争性细菌群，使单增李斯特氏菌在 没有竞争的环境条件下易于存活，所以在食品加工 中，中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。
直径约0.2～0.4 mm、半透明、边缘整齐、微带珠 光的露水样菌落,在斜射光下菌落呈典型的蓝绿色光泽。
无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中 可形成荚膜，在20℃～25℃培养时能形成4根鞭毛,但 在37℃培养时无鞭毛 生长温度范围5℃～45℃ ，最适温度为30℃～37℃, 能在普通冰箱冷藏室生长,是一种典型的耐冷性细菌, 同时还具有耐盐性
热耐受性较强，50℃经40min不能杀死，63℃加热 15～20min死亡，酸性、碱性条件下都适应。
单核细胞增生李斯特菌检验 ppt课件
产等。它广泛存在于自然界中。肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等都可被污染。 该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。 其易感人群主要为孕妇、老人、新生儿和免疫缺陷人群。大多数发达国家人类李斯特菌病 发生率约为每一百万人2-15例，死亡率为13-34% 加拿大由单增李斯特氏菌污染肉制品引发李斯特菌病暴发，导致十几人死亡。很多国家都 已经采取措施来控制食品中的单增李斯特氏菌，并制定了相应的标准。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
表1 单核细胞增生李斯特菌在选择性平板 上的菌落特征
选择性琼脂平板单核细胞增生李斯特菌科 玛嘉显色培养基菌落为:蓝色，周围有白色 晕圈.
PALCAM琼脂菌落:为灰绿色，小的圆形菌落 ，周围有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色 凹陷
L.M在 Chromagar培养基生长特征
L.M在OXA培养基生长特征
协同溶血试验 (cAMP):
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌 (R.equi), 在它们中两者之间垂直接种可疑李斯特菌 , 但不要触及它们, 于30℃培养24h～48 h, 检查平板 中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄 球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强, 斯氏李斯特菌（L.seeligeri）的溶血也增强, 而伊氏 李斯特菌（L.ivanovii）在马红球菌附近的溶血增 强。
PALCAM琼脂
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
表1 单核细胞增生李斯特菌在选择性平板 上的菌落特征
选择性琼脂平板单核细胞增生李斯特菌科 玛嘉显色培养基菌落为:蓝色，周围有白色 晕圈.
PALCAM琼脂菌落:为灰绿色，小的圆形菌落 ，周围有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色 凹陷
L.M在 Chromagar培养基生长特征
L.M在OXA培养基生长特征
协同溶血试验 (cAMP):
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌 (R.equi), 在它们中两者之间垂直接种可疑李斯特菌 , 但不要触及它们, 于30℃培养24h～48 h, 检查平板 中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄 球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强, 斯氏李斯特菌（L.seeligeri）的溶血也增强, 而伊氏 李斯特菌（L.ivanovii）在马红球菌附近的溶血增 强。
PALCAM琼脂
李斯特菌对食品的污染及其防治ppt课件
2019 14
• ５、空气 在微生物实验中，用肉汤培养基显 示厌氧培养有助于Ｌｍ的生长。同时， 另一些实验表明在缺氧状态下，Ｌｍ能 在３℃到７℃的条件下在肉类中繁殖。 同样，在３－１０％的充二氧化碳的条 件下，Ｌｍ能在５℃的条件下在不同种 的蔬菜中得以生长。然而，高浓度的二 氧化碳（８０％）能抑制。
201能传播这种感染。特别是 在医院里，通过人和人的接触尤易感染。 据报道，健康人群粪便中lm的携带率为 0.6－16%，有70％的人可短期带菌。据 有关研究表明，大约有５％到１０％的 健康人群携带有这个病菌。
2019 5
• ２、动物及环境 李斯特菌传播给人类的主要途径是通过水 源到厨房的食物链中的任何一个环节。它既能 随食品原料进入食品加工厂，也可由灰尘或排 泄物经工作人员带入，污染工作场所机机械设 备，进而污染食品。直接或间接的接触动物， 都有可能成为感染李斯特菌的来源。牛和羊类 都能成为李斯特菌的携菌体。从环境方面来说， 李斯特菌（Ｌｍ）也广泛地存在于环境中。因 此，食品从环境当中受到李斯特菌（Ｌｍ）的 机会是很大的。
2019
-
10
• １、温度 李斯特菌Ｌｍ是在能引起食品传染的致病 菌中的比较特殊的一种。其原因是它属适冷细 菌，李斯特菌能在2.5～42℃的温度下生存(有 的资料讲在０～４４℃温度条件下能生长)，以 ４～６℃时繁殖最快。李斯特菌Ｌｍ能在冷冻 产品中存活至几个星期，在酸性条件下较为困 难。
2019
-
2019
-
2
• 单 核 细 胞 增 生 李 斯 特 ( L.monocytohenes) 绵 羊 李 斯 特 菌 ( L.iuanuii) 英 诺 克 李 斯 特 菌 ( L.innocua) 威 尔 斯 李 斯 特 菌 ( L.welshimeri) 西 尔 李 斯 特 菌 ( L.seeligeri) 格 氏 李 斯 特 菌 ( L.grayi) 默 氏 李 斯 特 菌 (L.murrayi)
• ５、空气 在微生物实验中，用肉汤培养基显 示厌氧培养有助于Ｌｍ的生长。同时， 另一些实验表明在缺氧状态下，Ｌｍ能 在３℃到７℃的条件下在肉类中繁殖。 同样，在３－１０％的充二氧化碳的条 件下，Ｌｍ能在５℃的条件下在不同种 的蔬菜中得以生长。然而，高浓度的二 氧化碳（８０％）能抑制。
201能传播这种感染。特别是 在医院里，通过人和人的接触尤易感染。 据报道，健康人群粪便中lm的携带率为 0.6－16%，有70％的人可短期带菌。据 有关研究表明，大约有５％到１０％的 健康人群携带有这个病菌。
2019 5
• ２、动物及环境 李斯特菌传播给人类的主要途径是通过水 源到厨房的食物链中的任何一个环节。它既能 随食品原料进入食品加工厂，也可由灰尘或排 泄物经工作人员带入，污染工作场所机机械设 备，进而污染食品。直接或间接的接触动物， 都有可能成为感染李斯特菌的来源。牛和羊类 都能成为李斯特菌的携菌体。从环境方面来说， 李斯特菌（Ｌｍ）也广泛地存在于环境中。因 此，食品从环境当中受到李斯特菌（Ｌｍ）的 机会是很大的。
2019
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10
• １、温度 李斯特菌Ｌｍ是在能引起食品传染的致病 菌中的比较特殊的一种。其原因是它属适冷细 菌，李斯特菌能在2.5～42℃的温度下生存(有 的资料讲在０～４４℃温度条件下能生长)，以 ４～６℃时繁殖最快。李斯特菌Ｌｍ能在冷冻 产品中存活至几个星期，在酸性条件下较为困 难。
2019
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2019
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• 单 核 细 胞 增 生 李 斯 特 ( L.monocytohenes) 绵 羊 李 斯 特 菌 ( L.iuanuii) 英 诺 克 李 斯 特 菌 ( L.innocua) 威 尔 斯 李 斯 特 菌 ( L.welshimeri) 西 尔 李 斯 特 菌 ( L.seeligeri) 格 氏 李 斯 特 菌 ( L.grayi) 默 氏 李 斯 特 菌 (L.murrayi)
李斯特菌的检验ppt课件
2019
.
11
临床表现
• 感染LM的孕妇多表现有宫内感染并可发 生早产、流产、死胎，预后险恶。产下 的婴儿常在24~72h内死亡。
• 有时可侵犯上呼吸道而呈现咽峡炎的症 状，常伴有局部淋巴腺炎。
• 可引起人的心内膜炎，并可感染皮肤、 眼睛、泌尿道而引起皮肤损伤、结膜炎、 尿道炎等症状。
2019
.
12
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李斯特菌鉴定
• 除个别菌外，触酶阳性，氧化酶阳 性，水解七叶苷，不水解尿素、明 胶和，其不它产种生类糖H2产S、酸吲。哚。发酵葡萄糖
• 属的鉴定：革兰染色，湿标本中的 翻转运动试验，触酶阳性，发酵D葡萄糖产酸，水解七叶苷，VP阳性， 甲基红阳性。
2019
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19
李斯特菌鉴定
• 种的鉴定：窄的β溶血环，CAMP表 现和金黄色葡萄球菌有协同溶血作 用，不发酵木糖，微量鉴定系统 API-Listeria（法国生物梅里埃）和 Micro-IDListeria（OrganonTeknika）， 菌落DNA探针杂交。
• 血清型分型确认。
2019
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致病力检测
• 动物试验可用于分离的李斯特菌的潜在 毒力，如小鼠腹膜内接种、兔眼结膜接 种（Anton）试验、鸡胚绒毛膜尿囊接种。 但并非是常规的，因为大多数刚分离出 的单核细胞增生性李斯特菌株都有毒力。
• 已经建立了一种敏感的免疫抑制小鼠模 型，少量的有毒力菌即可导致小鼠在3d 内死亡。
• 脑脊液中及组织中单核细胞增生性李斯特菌的DNA 能以PCR方法检测。应该在专门的实验室中操作， 方法的敏感性、特异性高，当抗生素的使用影响细 菌的分离时尤其有用。
2019
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LM的实验室检测方法
单核细胞增生李斯特菌检验 ppt课件
在李斯特氏菌属的六个种中，只有两种致病菌：单核增 生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动物 发病。但是，其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的 李斯特氏菌症（listeriosis）相关。因此，李斯特氏菌中最 有检测意义的是单核增生李斯特氏菌。
单增李斯特氏菌能引起人、畜的李斯特氏菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和流
一方面血清是进口的，无国产的；另一 方面只存在“O”抗原因子血清，并且各 型之间含有多种共同的抗原因子，因此 其血清学上鉴别意义不大。
2.商业生化鉴定系统的应用 原国标中未涉及，FDA、AOAC标准使用API 10300、Vitek GNI（AOAC 989.13），这些方法都比较成熟，稳定性较好，已 被许多国家和组织的标准采用。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
将7羊血琼脂平板底面划分为2025个小格从tsaye上挑取菌落刺种到血平板上每格刺种一个菌落并刺种阳性对照菌单增李斯特菌和绵羊李斯特菌和阴性对照菌英诺克李斯于35培养24h48h穿刺时尽量接近底部但不要触到底面同时避免琼脂破裂于明亮处观察洁净的血琼脂平板单增李斯特菌和斯氏李斯特菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环无害李斯特菌无溶血环伊氏利斯特菌产生大的透明溶血环
PALCAM琼脂
接种木糖、鼠李糖，36 ℃±1 ℃，24 h；同时于TSA-YE平板划线纯化，30 ℃±1 ℃，24 h～48 h
单增李斯特氏菌能引起人、畜的李斯特氏菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和流
一方面血清是进口的，无国产的；另一 方面只存在“O”抗原因子血清，并且各 型之间含有多种共同的抗原因子，因此 其血清学上鉴别意义不大。
2.商业生化鉴定系统的应用 原国标中未涉及，FDA、AOAC标准使用API 10300、Vitek GNI（AOAC 989.13），这些方法都比较成熟，稳定性较好，已 被许多国家和组织的标准采用。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
将7羊血琼脂平板底面划分为2025个小格从tsaye上挑取菌落刺种到血平板上每格刺种一个菌落并刺种阳性对照菌单增李斯特菌和绵羊李斯特菌和阴性对照菌英诺克李斯于35培养24h48h穿刺时尽量接近底部但不要触到底面同时避免琼脂破裂于明亮处观察洁净的血琼脂平板单增李斯特菌和斯氏李斯特菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环无害李斯特菌无溶血环伊氏利斯特菌产生大的透明溶血环
PALCAM琼脂
接种木糖、鼠李糖，36 ℃±1 ℃，24 h；同时于TSA-YE平板划线纯化，30 ℃±1 ℃，24 h～48 h
食品李斯特菌控制PPT课件
第16页/共31页
雇员卫生
• 洁净区和非洁净区使用不同颜色的工作服。 • 洁净区的工作服每日清洗消毒。 • 如果接触了不洁净的表面，应洗手和更换手套。 • 不要在储物柜内储存污染的衣物和设备。 • 使用橡胶鞋和脚池。
第17页/共31页
环境监控
• 测试环境李斯特菌，以体现单增李斯特菌存在的潜在 性。 • 多数不会频繁地发现李斯特菌 • 环境李斯特菌检出并不代表会致病 • 优势：更快的提供测试结果
第18页/共31页
需检测的区域
• 支撑结构 • 悬空的区域 • 墙壁 • 地面、排水沟 • 产品接触面
第19页/共31页
频率
• 潮湿区域—每周 • 干燥区域—每月或每双月 • 一段时间后，反复得到阴性结果，可以降低频率。 • 可以取混合样本，但是当出现阳性时，需要进一步测试。 • 每周每条线都要取样
• 其中单核细胞增生李斯特氏菌对人类致病性强，绵 羊李斯特氏菌对人类也有一定的致病性，其余李斯 特氏菌无致病性。
第2页/共31页
单核细胞增生李斯特氏菌
李斯特氏菌是条件致病菌，在自然界中分布很广，水、土壤、人和动物粪便中均可 存在，大多为散发病例，也可因污染食品而暴发。
【临床意义】
本菌能产生一种溶血素性质的外毒素。能引起人和牛、绵羊等动物的脑膜炎，可使家 兔豚鼠等实验动物感染扣引起血中单核细胞增高。
• 清洁用工具能够滋生李斯特菌而且经常被忽视。 • 放在600-1000ppm 季铵溶液内杀菌 • 晾干或放在季铵溶液中
第15页/共31页
清洗时的一般注意事项
• 减少生产过程中的清洗（特别是地面、地沟）
• 冲水会溅起水雾 • 李斯特菌会扩散
• 冷凝水要通向排水沟。在滴水接盘内加入杀菌剂。 • 当产品在冷藏库内时，决不能清洁冷藏库。 • 如排水沟内翻涌，应停产。 • 使用杀菌性的排水材料或定期对排水管实施杀菌。 • 循环使用季铵和过氧化酸性杀菌剂，更有效。 • 在高温下消毒有助于清除生物被膜。
雇员卫生
• 洁净区和非洁净区使用不同颜色的工作服。 • 洁净区的工作服每日清洗消毒。 • 如果接触了不洁净的表面，应洗手和更换手套。 • 不要在储物柜内储存污染的衣物和设备。 • 使用橡胶鞋和脚池。
第17页/共31页
环境监控
• 测试环境李斯特菌，以体现单增李斯特菌存在的潜在 性。 • 多数不会频繁地发现李斯特菌 • 环境李斯特菌检出并不代表会致病 • 优势：更快的提供测试结果
第18页/共31页
需检测的区域
• 支撑结构 • 悬空的区域 • 墙壁 • 地面、排水沟 • 产品接触面
第19页/共31页
频率
• 潮湿区域—每周 • 干燥区域—每月或每双月 • 一段时间后，反复得到阴性结果，可以降低频率。 • 可以取混合样本，但是当出现阳性时，需要进一步测试。 • 每周每条线都要取样
• 其中单核细胞增生李斯特氏菌对人类致病性强，绵 羊李斯特氏菌对人类也有一定的致病性，其余李斯 特氏菌无致病性。
第2页/共31页
单核细胞增生李斯特氏菌
李斯特氏菌是条件致病菌，在自然界中分布很广，水、土壤、人和动物粪便中均可 存在，大多为散发病例，也可因污染食品而暴发。
【临床意义】
本菌能产生一种溶血素性质的外毒素。能引起人和牛、绵羊等动物的脑膜炎，可使家 兔豚鼠等实验动物感染扣引起血中单核细胞增高。
• 清洁用工具能够滋生李斯特菌而且经常被忽视。 • 放在600-1000ppm 季铵溶液内杀菌 • 晾干或放在季铵溶液中
第15页/共31页
清洗时的一般注意事项
• 减少生产过程中的清洗（特别是地面、地沟）
• 冲水会溅起水雾 • 李斯特菌会扩散
• 冷凝水要通向排水沟。在滴水接盘内加入杀菌剂。 • 当产品在冷藏库内时，决不能清洁冷藏库。 • 如排水沟内翻涌，应停产。 • 使用杀菌性的排水材料或定期对排水管实施杀菌。 • 循环使用季铵和过氧化酸性杀菌剂，更有效。 • 在高温下消毒有助于清除生物被膜。
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• 多发生于发达国家，主要以散发性为主
地区分布
• 新生儿，孕妇，老人50-59岁，免疫缺陷 易感人群 人群
2020/3/26
• 农场动物牛、羊、猪、鸡、马、鹿、鸽 宿主 子、海鸥等均可能为李斯特菌的携带者
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产单核细胞李斯特菌为需氧或兼性厌氧，感染后患者病死率高 达30％
该 菌 对 各 种 应 激 （低温、高盐、低 ｐＨ、氧 化 应 激 等） 条 件 有 很 强 的 耐 受性，进一步增大了该菌的危害性。此菌 不产生内毒素，可 产 生 一 种 溶 血 性 外 毒 素，对 人 类 致 病 性强
同时也是食品中常见的、公共卫生学上重要的食源性病 原 菌
ＷＨＯ 和 ＦＤＡ 于 １９８６ 年设立了李斯特菌研究中心， 专门协调该菌的病原学、流行病学及临床等研究工作。该菌已 被列为 ２０世纪９０年代四大食源性疾病致病菌之一
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其中，单增李斯特菌是唯一能引起人类疾病的。单核细胞增
代表菌株 生李斯特菌是一种人畜共患病的病原菌。
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发病机制
• 产单核细胞李斯特菌能产生 ２ 种磷脂酶Ｃ：磷脂酰肌磷 脂酶 Ｃ(ＰＩ－ＰＬＣ）和宽范围的磷脂酶Ｃ（ＰＣ－Ｐ ＬＣ）
• ＰＩ－ＰＬＣ毒性相对较小，对细菌在细胞间扩散作用 不 大，主 要 是 协 同 ＰＣ－ＰＬＣ 发 挥 作 用。 而ＰＣ－ ＰＬＣ的功能则较复杂，它使细菌从吞噬泡中逃逸出来， 能破坏宿主细胞的信号通路，能调节细胞因子和化学因子 的合成，还能通过二酰基甘油、神经酰胺、肌醇磷酸盐等 调节细胞的生长、分化、凋亡等
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发病机制
• 作为侵袭性胞内菌，产单核细胞李斯特菌可逃离宿主吞噬 小体，在细胞质中增殖，并将抗原呈递给 ＭＨＣ－Ｉ类分 子途径，促进抗原特异保护性 ＣＤ８＋Ｔ 细胞的生成。 而且产单核细胞李斯特菌感染宿主的专职性抗原递呈细胞 （ＡＰＣ）后，可诱导有效的细胞免疫应答和 Ｔｈ１细胞 因子的分泌
• 与感染易感性增加有关的一个重要细胞因子就是IL-10。有 研究显示， IL-10产量增多可提高李斯特菌感染易感性； 一旦炎性反应被控制， IL-10对减缓炎性反应有重要意义。 由不同数量的 Ｔ 淋巴细胞、Ｂ 淋巴细胞、巨噬细胞和树 突状细胞产生的IL-10 ，其最重要的作用是抑制免疫系统 的多种免疫细胞产生细胞因子
在美国，李斯特菌是法定传染病！
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特点
➢ 可引起食物中毒，病死率高达30％— 70％
➢ 本菌可引起婴儿及新生儿的化脓性脑膜炎或脑膜脑炎病 死率可达70%
➢ 在成年人中本病多见于老年人或有慢性基础疾病者，也可 发生于以前健康的青年人
2020/3/26
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发病机制
➢ 李斯特菌主要毒力因子为一个具有成孔蛋白特性的李斯特 菌溶血素( LLO)、肌动蛋白聚合蛋白和一个依赖锌的金属 蛋白酶
➢ LLO是产单核细胞李斯特菌的重要毒力因子,由HLY 基因 编码。其相对分子质量为6000，属于胆固醇依赖细胞溶素 家族，参与产单核细胞李斯特菌一级和 次级吞噬小体的逃 离
➢ 产单核细胞李斯特菌的致病性与 LLO 密切相关，具有 LLபைடு நூலகம்的产单核细胞李斯特菌有致病性，无LLO 则无致病性
➢ 研究表明 LLO是一个多功能的毒力因子，能引起宿主细胞 诸多反应，如细胞增殖、黏膜细胞外渗作用、巨噬细胞中 细胞因子的表达、树突状细胞的凋亡、磷脂代谢及引起机 体产生免疫反应等
生长温度范围5℃～45℃ ，最适温度为30℃～37℃,能在普 通冰箱冷藏室生长,是一种典型的耐冷性细菌,同时还具有 耐盐性
热耐受性较强，50℃经40min不能杀死，63℃加热15～ 20min死亡，酸性、碱性条件下都适应
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• 多发生于夏秋两季6-9月为发病高峰。11 季节性 月至次年2 月极少发病
单核细胞增生李斯特菌 L.monocy togenes
绵羊李斯特菌 L.ivanovii
英诺克李斯特菌 L.innocua
单增李斯特菌
威尔斯李斯特菌 L.welshimei
李斯特菌
西尔李斯特菌 L.seeligeri
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格氏李斯特菌 L.grayi
默氏李斯特菌 L.murrayi
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来源及传播途径
• 胞外菌的免疫应答主要由产生中和抗体的 Ｂ 淋巴细胞介导， 而 胞 内 菌 的 免 疫 应 答 则 由 识 别 专 职 性ＡＰＣ细胞表面 MHC分子中抗原的 Ｔ 淋巴细胞介导
• Ｔ 淋巴细胞由不同的亚群组成，包括识别吞噬体内抗原的
CD4+Ｔ 淋巴细胞和识别细胞质中抗原的CD8+Ｔ 淋巴细胞。
2020/3/26
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发病机制
• 李斯特菌感染时由CD4+CD25+Ｔ淋巴细 胞,CD4+CD25+FOXP3+Ｔ 淋巴细胞和巨噬细 胞 产 生IL-10， 与 此 同 时 巨 噬 细 胞 也 产 生 ＩＦＮ 和ＴＮＦ，这２种细胞 因子是感染时机体保护性免疫反应的重要细胞因子，会在感 染 时 被IL-10负调节
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特点
短小的革兰阳性无芽孢杆菌
兼性厌氧,最适在含有CO2的微需氧环境中生 长
直径约0.2～0.4 mm、半透明、边缘整齐、 微带珠光的露水样菌落,在斜射光下菌落呈 典型的蓝绿色光泽
2020/3/26
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特点
无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中可形成 荚膜，在20℃～25℃培养时能形成4根鞭毛,但在37℃培养 时无鞭毛
单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐 受较高的渗透压，在土壤、地表水、污水、废水、植物、 青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该 菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播
食品常被此菌污染，常见的由产单核细胞增生李斯特菌引 起的食物中毒为奶及奶制品、肉制品、水产品、和水果蔬 菜等， 中毒多发生在夏秋季
李斯特菌
武汉大学人民医院新生儿科 方成志
2020/3/26
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李斯特菌
• 李斯特氏菌属(Listeria)早在20世纪初即被发 现，它共有7个菌种，革兰氏染色阳性。其 中单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes，简称单增李氏菌) ，是唯一 能引起人类疾病的，也是一种人畜共患的 病原菌。