羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)活性测定试剂盒使用说明
稻飞虱生物学、生态学及其防控技术研究进展
浙江大学学报（农业与生命科学版）48（6）：692~700，2022Journal of Zhejiang University (Agric.&Life Sci.)http ：///agrE -mail ：zdxbnsb @稻飞虱生物学、生态学及其防控技术研究进展蒯鹏，娄永根*（浙江大学农业与生物技术学院昆虫科学研究所，水稻生物学国家重点实验室/农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室，杭州310058）摘要稻飞虱是制约我国水稻生产的一类最主要害虫，主要包括褐飞虱、白背飞虱和灰飞虱。
本文重点就稻飞虱重要遗传特性（翅型分化、繁殖力、抗药性）分子基础、水稻-稻飞虱-天敌-其他生物种间互作关系、稻飞虱灾变机制及其防控技术等方面的最新研究成果进行综述，并提出今后应进一步深入剖析稻飞虱灾变的生物学与生态学分子基础，明确集约农业与稻田生态系统抗性在微观层面的协调机制，以在集约农业背景下维持或提高稻田生态系统抗性，实现稻飞虱的可持续治理。
关键词稻飞虱；生物学特性；种间互作关系；灾变机制；可持续治理中图分类号S 435.11文献标志码A引用格式蒯鹏,娄永根.稻飞虱生物学、生态学及其防控技术研究进展[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2022,48(6):692-700.DOI:10.3785/j.issn.1008-9209.2022.08.221KUAI Peng,LOU Yonggen.Research advances in biology,ecology and management of rice planthoppers[J].Journal of Zhejiang University (Agriculture &Life Sciences),2022,48(6):692-700.Research advances in biology,ecology and management of rice planthoppersKUAI Peng,LOU Yonggen *(State Key Laboratory of Rice Biology/Ministry of Agriculture and Rural Affairs Key Laboratory of Molecular Biology of Crop Pathogens and Insects,Institute of Insect Sciences,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China )Abstract Rice planthoppers,mainly including Nilaparvata lugens ,Sogatella furcifera ,and Laodelphaxstriatellus ,are one of the most important insect pests of rice in China.In this review,we summarized the latest research progress on the molecular basis of important genetic characteristics (wing-morph differentiation,fecundity,insecticide resistance)of rice planthoppers,interactions among rice,rice planthoppers,natural enemies of rice planthoppers and other organisms,mechanisms underlying rice planthopper outbreak,and management of rice planthoppers.Finally,we suggest that future studies should further dissect the molecular basis of biology and ecology related to rice planthopper outbreak,and find the coordination mechanisms between intensified agriculture and rice ecosystem resistance at the micro level,so as to maintain or improve the rice ecosystem resistance,and achieve sustainable management of rice planthoppers in the context of intensified agriculture.Key words rice planthoppers;biological characteristics;interspecific interactions;outbreak mechanisms;sustainable management稻飞虱是危害我国和东南亚国家水稻生产的一类主要迁飞性害虫，主要包括褐飞虱（Nilaparvatalugens ）、白背飞虱（Sogatella furcifera ）和灰飞虱（Laodelphax striatellus ），属于半翅目（Hemiptera ）DOI ：10.3785/j.issn.1008-9209.2022.08.221基金项目：国家重点研发计划项目（2021YFD1401100）；农业农村部现代农业产业技术体系项目（CARS -01-43）。
羧酸酯酶(CarE)检测
迪信泰检测平台
羧酸酯酶（CarE）检测
羧酸酯酶（Carboxylesterase, CarE）是一种多聚蛋白，属于酯酶家族，主要分布于肝、其他组织及细胞胞液、线粒体和内质网，可催化酯、硫酸酯和酰胺的水解。
羧酸酯酶活性测定对于脂质运输和代谢分析，药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢研究具有重要意义。
迪信泰检测平台采用生化法，结合相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测羧酸酯酶的活性变化。
此外，我们还提供其他酯酶类的检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定羧酸酯酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 羧酸酯酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
一种羧酸酯酶活力的检测方法与流程
一种羧酸酯酶活力的检测方法与流程
一种羧酸酯酶活力的检测方法和流程主要包括以下几个步骤：
第一步：制备样品
从微生物或动植物中提取羧酸酯酶，并将其纯化至一定程度。
可
以采用各种方法提取和纯化酶，如超声波破碎、离心、柱层析等。
第二步：准备反应体系
将提取得到的酶加入含有特定底物的反应体系中，底物通常为p-
硝基苯酯、碱式酯等。
反应体系需要保证酶和底物的浓度和pH值等参
数合适，以确保反应的可靠性和准确性。
第三步：进行反应
将反应体系加热至一定温度，保持一定反应时间。
在反应过程中，底物被酶催化剂水解，产生相应的产物。
反应后，可以通过各种方法
检测产物的生成量，如分光光度法、荧光法、比色法、质谱法等。
第四步：计算酶活力
根据反应产物的生成量计算酶的活力，通常以酶单位（enzymatic unit，U）表示。
酶活力的计算与反应体系的参数、反应时间等有关。
通过以上几个步骤，就可以检测并计算出羧酸酯酶的活力。
这种
方法可以广泛应用于各种生物样品中的酶活力检测，有助于深入了解
各种生物中的基本代谢过程。
一种羧甲基纤维素酶活力的测定方法
一种羧甲基纤维素酶活力的测定方法一、概述羧甲基纤维素酶（carboxymethylcellulase，CMCase）是一种重要的木质素酶，它可以将木质素分解为更小体积的产物，从而可促进木质素利用。
因此，测定CMCase活性对于研究木质素加工过程和利用资源至关重要。
二、试剂①P-nitrophenyl 葡糖苷（PNPG）：20 mg/ml;②NaHCO3：0.1 mol/L;③Tris-HCl buffer：50 mmol/L, pH 7.2;④凝胶分离 Buffer：30 mmol/L Tris-HCl，1.5 mmol/L EDTA，10 mmol/L Na2SO4，pH=7.2三、实验步骤1.溶质处理：将木质素细胞壁材料（包括原料和残渣）用凝胶分离buffer缓慢搅拌，直至得到悬浮液。
2.仪器设置：将悬浮液100 μL加入定量瓶中，并加入足量的Tris-HCl缓冲液（50 mL）。
然后安装溶解度仪，并调节机器的参数，使水温调节在28-30℃，波速调节在400 Hz左右，进行10min的研磨处理。
3.测定：将研磨后的悬浮液取出，加入0.1mol/L NaHCO3 10 ml和P-nitrophenyl 葡糖苷（100 μL），搅拌均匀，测定其吸光度，以425nm波长，示定测定CMCase活性。
4.计算：根据吸光度值计算CMCase活性：CMCase活性（U/ml）=A/B，其中A为PNPG测定液的吸光度，B为研磨后悬浮液的吸光度。
四、安全措施1.实验时应戴好实验手套，操作时要注意卫生。
2.羧甲基纤维素酶属于酶分类，易挥发，操作时应尽量避免空气污染。
3.在实验室进行实验时，应注意实验室温度和湿度，使实验条件尽量达到推荐的实验要求。
4.搅拌完毕后，实验材料用大量水冲洗，然后再投入污水处理系统处理。
五、结论本实验介绍了一种简便、高效的羧甲基纤维素酶活性测定方法，建立的方法可以准确、灵敏地测定羧甲基纤维素酶活性，可广泛应用于木质素加工过程和资源利用的研究中。
活性氧（ROS）测定试剂盒说明书
②、波长设置：最佳激发波长 500(50015nm)，最佳发射波长 525 (53020 nm)。也可按照 FITC 荧光检
测条件检测。 ③、结果以荧光度值表示。
四、细胞样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
二、试剂组成及保存： 1、0.1ml 10mM DCFH-DA in DMSO，20℃保存。 2、1ml 活性氧供氢体，4-8℃保存。
三、组织样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
1、单细胞悬液制备： 方法 1、采用单细胞悬液制备仪制备单细胞悬液。 方法 2、酶消化法： 方法 3、机械法（网搓法）：
本试剂盒仅用于科研实验
1、直接将探针加入培养液中： ①、直接将 DCFH-DA 探针加入无血清培养基中：一般按照 1 ：1000 用无血清培养液稀释 CFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜， 通常对于 6 孔板的一个孔加入稀释好的 DCFH-DA 不少于 1ml。 ②、取一份不加探针，只加入培养基的细胞设为阴性对照管。阳性对照管：取一份已加入探针的细胞，同 时加入活性氧供氢体诱导细胞，推荐该试剂的工作浓度为 20～100µM。 ③、37℃孵育细胞 30min～几小时，通常为 30～60min 即可，孵育时间长短与细胞类型、刺激条件、DCFH-DA 浓度有关。一般阳性对照在刺激细胞 30 分钟左右，即可观察到明显的绿色荧光。 ④、吸去培养液，利用无血清培养液或者 0.01MPBS 反复吹打，肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成 片)转为透明，细胞层几乎全部吹打到 PBS 中。 ⑤、将细胞悬液全部收集到 1.5ml 离心管中。用无血清培养液或者 PBS 洗涤 2 次，以充分去除未进入细 胞内的 DCFH-DA。1000rpm/min，5min，吸净上清后加入 PBS 重新悬浮细胞进行测定。
羧基酯脂肪酶
羧基酯脂肪酶羧基酯脂肪酶是一种重要的酶类催化剂，具有广泛的应用价值。
本文将从定义、分类、催化机制、应用领域等方面介绍羧基酯脂肪酶的相关知识。
一、定义羧基酯脂肪酶（Carboxyl ester lipase，简称CEL）是一类能够催化羧酸酯的加水分解反应的酶。
羧基酯脂肪酶主要存在于胰腺、肠道等组织和器官中，是消化系统中重要的消化酶之一。
二、分类根据催化反应的底物和产物的不同，羧基酯脂肪酶可以分为三类：甘油酯脂肪酶（Triacylglycerol lipase，简称TGL）、磷脂酯脂肪酶（Phospholipase A2，简称PLA2）和胆固醇酯脂肪酶（Cholesterol ester lipase，简称CEL）。
三、催化机制羧基酯脂肪酶的催化机制主要包括两个步骤：亲核攻击和脱酸。
在亲核攻击步骤中，底物中的羧基氧原子受到羧基酯脂肪酶中的亲核基（如组氨酸）的攻击，形成酯酶中间体。
在脱酸步骤中，酯酶中间体中的羧基氧原子与底物中的羟基氧原子发生酸碱催化的反应，生成羧酸和醇。
四、应用领域1. 食品工业：羧基酯脂肪酶可以用于乳化、酯化和脱脂等工艺，提高食品的品质和口感。
2. 制药工业：羧基酯脂肪酶可以用于药物的合成和纯化过程中，提高合成反应的效率和产物的纯度。
3. 生物技术：羧基酯脂肪酶可以用于生物催化反应中，如酶促反应和酶生物传感器等。
4. 生物燃料领域：羧基酯脂肪酶可以用于生物柴油的生产过程中，提高生物柴油的产率和质量。
五、发展趋势随着生物技术和酶工程的发展，羧基酯脂肪酶的催化性能和稳定性得到了很大的提高。
同时，利用基因工程技术，可以通过改变羧基酯脂肪酶的氨基酸序列，使其具有更广泛的催化底物和更高的催化活性。
因此，羧基酯脂肪酶在未来的应用前景非常广阔。
总结：羧基酯脂肪酶是一种重要的酶类催化剂，具有广泛的应用价值。
本文从定义、分类、催化机制、应用领域等方面对羧基酯脂肪酶进行了详细的介绍。
随着生物技术的不断发展，羧基酯脂肪酶的应用前景将更加广阔。
羧酸酯酶及其在含酯类化合物代谢中的作用
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第 ４ 卷第 ６期 ６
２０ 年 ６月 Ｏ７
农 药
ＡＧＲｏＣＨＥＭＩ ＣＡＬ Ｓ
Ⅵ）． ６ Ｎｏ ６ １４ ． ．
羧 酸 酯 酶 及 其 在 含 酯 类 化 合 物 代 谢 中 的 作 用
郭 晶 ， 高菊 芳 唐振华 ，
（． 海师范大学 生命与环 境科学学 院 ， １ 上 上海 ２ ０ ２ ； ． ０ １ ３ ２ 中国科学 院 上海生 理生态研究所 ， 上海 ２ ０ ２ ） ００５
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羧酸酯酶杀虫剂代谢
羧酸酯酶杀虫剂代谢-概述说明以及解释1.引言1.1 概述羧酸酯酶杀虫剂是一类广泛应用于农业和卫生领域的农药，其作用是通过干扰昆虫体内的代谢过程而达到杀虫的效果。
羧酸酯酶作为一种重要的酶类，参与了羧酸酯酶杀虫剂的代谢过程。
因此，对羧酸酯酶杀虫剂的代谢进行深入研究，不仅有助于揭示其作用机制，还能够为农药的合理应用和环境保护提供科学依据。
然而，羧酸酯酶杀虫剂的代谢过程复杂而多样，受到众多因素的影响。
羧酸酯酶杀虫剂既可在昆虫体内经过一系列的反应代谢为无毒的物质以实现解毒，也可被转化为具有更强毒性的代谢产物。
此外，环境因素如温度、湿度、光照等也可能对羧酸酯酶杀虫剂的代谢产生影响，导致其效果不稳定或失去活性。
对羧酸酯酶杀虫剂代谢的认识不仅有助于评估农药的安全性和效果，还能够指导农药的改良和研发工作。
同时，深入研究羧酸酯酶杀虫剂代谢对于环境保护来说也具有重要意义。
通过了解农药在环境中的代谢转化规律，可以更好地预测和评估其在环境中的残留情况，从而采取相应的措施来减少农药对生态系统的影响。
然而，目前对羧酸酯酶杀虫剂代谢的研究还存在一些不足之处。
首先，羧酸酯酶杀虫剂代谢的机制尚不完全清楚，需要进一步深入的研究来揭示其详细的代谢途径和代谢产物。
此外，对羧酸酯酶杀虫剂代谢的影响因素还需要更加全面和系统的研究，以便更好地了解其在不同环境条件下的代谢特点和规律。
综上所述，羧酸酯酶杀虫剂的代谢是一个复杂而重要的研究领域。
通过深入研究羧酸酯酶杀虫剂的代谢机制和影响因素，可以为农药的安全应用和环境保护提供科学依据，也有助于促进农药领域的发展和进步。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：文章结构部分主要介绍了整篇文章的组织结构和各个章节的内容概要。
通过清晰地列举和简述各个章节的主题和目标，读者可以更好地理解整篇文章的逻辑结构和主要内容。
在本篇文章中，结构部分的内容可以按照以下方式编写：文章结构部分的内容：本文主要包含以下章节：引言、正文和结论。
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羧酸酯酶（Carboxylesterase，CarE）活性测定试剂盒使用说明产品简介：
哺乳动物CarE，也称脂族酯酶（aliesterase），广泛分布于组织和器官，属于丝氨酸水解酶家族。
CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解，但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。
CarE参与脂质运输和代谢，并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关，有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固蓝显色；通过测定450nm光吸收增加速率，计算出CarE的活性。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水和无水乙醇。
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体×1瓶（棕色），4℃避光保存（收货后一周内完成测定）。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
称取约0.1g样品，加1.0mL试剂一，冰上充分研磨，15000rpm4℃离心30min，取上清液待测。
二、测定操作表：
1，分光光度计预热30min以上，调节波长到450nm，蒸馏水调零。
2，试剂二置于37℃水浴中预热30min以上。
3，空白管：在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL蒸馏水和1000μL试剂二，迅速混匀后于450nm处测定3min内的吸光值变化，第10s吸光值记为A1，第190s
的吸光值记为A2。
注意：空白管只需做1-2次。
△A空白管=A2-A1。
4，测定管：在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL上清液和1000μL试剂二，迅速混匀后于450nm处测定3min内的吸光值变化，第10s吸光值记为A3，第190s
的吸光值记为A4。
△A测定管=A4-A3。
CarE活力计算：
CarE活力单位定义：37℃中每分钟催化吸光值增加1，定义为一个CarE活力单位（U）。
1，按照蛋白浓度计算：
CarE酶活(U/mg prot)=(△A测定管–△A空白管)÷（Cpr×V样）÷T
=66.7×(△A测定管–△A空白管)÷Cpr
Cpr：蛋白浓度，mg/ml；V样：加入上清液体积，0.005mL；T：反应时间，3min。
蛋白浓度需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白含量测定试剂盒。
2，用样品质量计算：
CarE酶活(U/mg Fresh Weight)=(△A测定管–△A空白管)×（V样总÷V样）÷W ÷T
=66.7×(△A测定管–△A空白管)÷W
W：样品质量，g；V样总：上清液总体积，1mL；V样：加入上清液体积，0.005mL；T：反应时间，3min。