蛋黄卵磷脂的提取方法研究
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。
（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。
（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。
（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。
（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。
蛋黄卵磷脂的提取
蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2.更好的理解和利用相似相容原理。
3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质；2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法；3.通过提取和鉴定，初步了解卵磷脂的含量。
二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类，具有良好的亲水性和亲油性能。
卵磷脂是细胞膜的组成成分之一，并参与了许多生命过程的调节和控制。
由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基，因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上，形成磷双层结构和微乳液，从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。
2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄，用盐水洗净表面的蛋白质，然后压成泥，称取25g，加入160 ml乙醇和70 ml氯仿，振荡提取24h，滤去蛋黄泥，得到提取液。
用氮气吹干提取液，再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上，加热显色，可以看到卵磷脂的蓝色斑点。
通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点，可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。
三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器：薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。
药品：鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。
三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通；2.对于采用氮气吹干的提取液，需要注意气压和吹干时间，以免造成温度过高或时间过长的现象；3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制，避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常；4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间，尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定；5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。
四、实验结果分析通过本实验，我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量，并通过对标准试剂和实验结果的对比，也可以得到质量较好的卵磷脂含量。
通过初步检测，我们可以确定卵磷脂含量的多少，并初步判断蛋黄的质量。
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
蛋黄卵磷脂是一种重要的营养成分，它含有丰富的卵磷脂、胆碱、不饱和脂肪酸等成分，对人体健康有着重要的作用。
因此，研究蛋黄卵磷脂的提取方法具有重要的意义。
常用的蛋黄卵磷脂提取方法主要有以下几种：
1. 酸水解法
酸水解法是将蛋黄中的卵磷脂通过酸水解反应分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入酸性溶液中，使卵磷脂与蛋白质分离，然后通过离心、过滤等步骤分离出卵磷脂。
2. 溶剂萃取法
溶剂萃取法是将蛋黄中的卵磷脂通过溶剂的选择性萃取分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入有机溶剂中，使卵磷脂与蛋白质分离，然后通过蒸发、干燥等步骤分离出卵磷脂。
3. 超声波法
超声波法是利用超声波的作用将蛋黄中的卵磷脂分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入水中，然后通过超声波的作用使卵磷脂与水分离，最后通过离心、过滤等步骤分离出卵磷脂。
以上三种方法各有优缺点，选择合适的方法需要根据实际情况进行
选择。
在实际应用中，可以根据需要选择不同的方法进行提取。
蛋黄卵磷脂的提取方法研究对于提高蛋黄卵磷脂的利用价值具有重要的意义。
未来，我们还需要进一步深入研究，探索更加高效、环保的提取方法，为蛋黄卵磷脂的应用开发提供更好的技术支持。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于动植物细胞膜中，对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂，了解其提取方法和鉴定技术，为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先，我们需要准备卵黄，将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂，使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后，通过离心将上清液和沉淀分离，将上清液转移到锥形瓶中，加入等体积的0.9%氯化钠溶液，摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后，将沉淀离心，得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构，我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先，将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中，然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品，放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射，我们可以观察到卵磷脂的斑点，并计算Rf值来确定其纯度。
另外，质谱技术也是一种常用的鉴定方法，通过质谱仪的分析，我们可以得到卵磷脂分子的质谱图，进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定，我们成功得到了卵磷脂，并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射，我们观察到了卵磷脂的斑点，并计算出了其Rf值，证明了其纯度。
同时，质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰，进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中，我们也发现了一些问题，比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰，导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此，在今后的实验中，我们需要进一步优化提取方法，提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验，我们成功提取和鉴定了卵磷脂，了解了其提取方法和鉴定技术。
同时，我们也发现了一些问题，为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力，能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
蛋黄中提取卵磷脂技术
蛋黄中提取卵磷脂技术人和动物的肾、肝、小肠和其他器官内均有卵磷脂酶存在，卵磷脂首先水解而生成甘油、脂肪酸、磷酸及胆碱，其中胆碱能在肝脏中对脂肪代谢起作用。
最重要的是它能参与合成乙酰胆碱而成为神经系统活动的重要物质。
在药用方面，可作强身滋补剂，又能治疗婴儿湿疹，可配制成注射剂及乳剂应用，又可作生物试剂，用于细菌培养，其中尤以培养固氮菌及磷菌效果很好。
1卵磷脂的特性卵磷脂主要存在于蛋黄中，含量为10%左右。
卵磷脂溶于乙醚、乙醇、甲醇、三氯甲烷等脂肪溶剂中，但不能溶解于丙酮，也不溶解于水，它的亲水性很强，能在水中膨胀而生成乳状液和胶体溶液，卵磷脂也能与酸、碱和其他盐类如氯化镉等相结合。
卵磷脂一般为淡黄色，但由于卵磷脂分子中含有不饱和脂肪酸，所以很容易氧化而逐渐由淡黄色变为棕褐色。
卵磷脂在空气中易被氧化，同时它能与蛋白质及其他物质生成化合物，所以卵磷脂一般很难得到结晶状态，而是无晶性物质。
2卵磷脂的提取2.1原料及其处理鸡蛋或变质发臭的次劣蛋及全蛋粉、蛋黄粉、冰全蛋和冰蛋黄，均可用于提炼卵磷脂。
除已成为干燥状态的全蛋粉和蛋黄粉外，其他原料还要经过一定的处理。
将鸡蛋或变质发臭的次劣蛋放在存器内，送入-10℃冷库内，使蛋的内容物凝固，然后取出，打蛋壳，将蛋黄分离出来，集中在铝质存器或搪瓷盘中。
如果黄白不能分离的变质蛋或打开壳后取出的蛋液，黄白不能分离的，若不及时提炼，存放在搪瓷盘中，也应送入-10℃冷库里贮存备用。
变质发臭的次劣冰蛋，要分装在搪瓷盘或铝质盘里贮存备用。
将上述原料放入烘箱或烘房内，在55℃下烘6h左右便成干燥状态，研磨成粉末，贮存备用。
2.2提炼卵磷脂2.2.1浸提2.2.1.1浸液的配制处理过的原料（即干燥蛋粉）1份，96%乙醇1份，98.5%甲醇1份。
2.2.1.2浸泡将上面配制好的醇浸液放入大釉缸中，徐徐加入干燥蛋粉，边加边搅，蛋粉加完后，再继续不断地搅拌4～5h。
醇浸液的液面务必高出原料面约30cm，搅拌4～5h后放在室温下使其继续浸泡24～48h，甚至更长时间。
蛋黄卵磷脂的制备研究
比较了水提方法与醇提法，醇提法效果较好。
为全面考查醇提法影响因素，设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的３因素３水平正交试验，结果见表４。
试验结果及方差分析表明：乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件Ａ２Ｂ３Ｃ２即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，影响因素的大小依次为：乙醇浓度、提取时间、溶媒量；此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为１２．５９％。
３结 论对多穗柯中黄酮类物质的提取，水提法以８０℃的恒温水浴，ｐＨ值为１０的氢氧化钠液提取效果最好。
醇提法的正交试验的结果表明：多穗柯中黄酮类物质的最佳提取条件是Ａ２Ｂ３Ｃ２，即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，醇提法提取总黄酮类物质的含量是１２．５９％。
而碱提法色素成分浸出太多。
所以，多穗柯中黄酮类物质的最佳提取方法是醇提法。
此法的提取工艺简单，条件容易控制，提取率高，提取剂乙醇易除净，所以可将此工艺应用于工业化生产，所生产的提取液可浓缩成膏状物，也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中，作为保健食品、营养食品和功能食品的原料，应用前景良好。
参考文献：［１］中科院植物研究所．中国高等植物图鉴（第一册）［Ｍ］．科学出版社，１９７２．［２］廖代富，等．多穗柯叶的综合利用［Ｊ］．中国野生植物，１９９２（３）：１０．［３］江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］．上海：上海科技出版社，１９９７．２４３３．［４］郭建平，等．葛根药理作用研究进展［Ｊ］．中草药，１９９５，（３）：１６３．［５］马慧萍，贾正平，谢景文，等．淫羊藿总黄酮的提取分离工艺研究［Ｊ］．华西药学杂志，２００２，１７（１）：１．［６］覃洁萍，许学键，董明姣，等．广西藤茶中黄酮类成分的提取工艺研究［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２０００，１７（３）：１９６，［７］丁利君，吴振辉，蔡创海，等．金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（２）：６２．蛋黄卵磷脂的制备研究吴晓英，林 影，叶倩君，李晶晶（华南理工大学生物工程系，广东 广州 ５１０６４０）摘 要：研究了鸡蛋卵黄卵磷脂的制备工艺和产品质量分析。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验过程中，我们遇到了许多困难和挑战，如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进，我们逐渐找到了解决问题的方法，提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中，我们发现提取卵磷脂的 效率不够高，且鉴定结果有时不够准确 。此外，实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等，通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析，确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法（如薄层色谱法、高效液相色谱法）对提取的卵磷脂进行纯度鉴定， 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果，与前人研究进行比较， 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结，概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处，以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验，我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，并对其进行了鉴定。实验过程中，我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法，加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来，卵磷脂的研究将继续深入开展，探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时， 随着人们对健康饮食的关注度不断提高，卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信，随着研究的不断 深入和应用领域的拓展，卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
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学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分，了解其组成和比例。
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根 测 定 结 果 绘 制 磷 标 准 曲 线 ， 其 磷 标 准 曲 线 为 w (p)=0.0812x+ 0.0072，式中 x 为吸光度，w 为含磷量（ug）。
2.2 蛋黄卵磷脂粗提试验结果 蛋黄卵磷脂粗提试验结果见表 1。
表 1 蛋黄卵磷脂粗提试验结果
有机溶剂提取法
酶解法
原 料 (g)
加样回 收率(%) 卵磷脂 含磷 量(%) 加样回 收率(%) 卵磷脂 含磷 量(%)
3.3 高校宽松的管理体制，缺乏必要的网络文明教育 目前，关于规范文明使用网络的法律法规并不完善。 网络法律法 规并不健全，即使现有的法律法规也比较陈旧，不能适应迅速发展的 网络环境，这给高校网络文明环境带来了极大的挑战。 高校还未形成 网络教育和辅导队伍，缺乏实效性的管理机制。 思政教育不能与网络 文明教育很好的结合起来， 高校网络文明教育缺乏实效性和正对性。 在此次调查发现，各系（院）在学生思政教育比较少涉及到大学生的网 络文明建设，学校开展诸多活动也很少涉及到有关学生网络文明。 高 校作为大学生网络文明建设主要场所，并未占领网络文明系统建设的 主阵地，基本没有形成良好的校园网络文化氛围。 学生群体中的学生 权益保障委员会也没有专门针对网络文明成立相对的“网络文明督导 小组”。 大学社团里也没有形成相应的“网络文明”协会。 4.提 升 大 学 生 文 明 使 用 互 联 网 的 对 策 4.1 加强对互联网的监控，净化网络环境 网络作为现代信息传播的媒介，具有方便、快捷、信息量大等诸多 优点，对当代大学生的学习生活起了良好的辅助作用。 但是，受市场经 济过分追逐利益的不良社会风气的影响， 网络经营者以及软件开发 者，利用大学生的猎奇心理以及对互联网的过分依赖，肆意传播与文 明相悖的信息。 首先政府及其相关部门要认真贯彻《中共中央关于加 强和改进思想政治工作的若干意见》，加强对互联网的监控，加大打击 力度。 做好网络文明宣传工作，督促厂商自觉遵守行业道德与职业道 德，从源头上净化网络环境。 其次作为网络游戏的开发商、网站及网吧 的经营商身上要流有道德的血液，自觉遵守相应的法律法规，净化大 学生使用网络的环境。 再次，学校有关部门要规范网络使用的管理办 法。 采取多种手段来加强对网络的监控和管理，对大学生进行网络道 德 教 育 ， 制 定 大 学 生 网 络 网 络 行 为 准 则 [2]。 4.2 拉近心灵距离，建立和谐的亲子关系 首先，要建立良好的家庭环境。 大学生的行为方式可以从其家庭 环境、家庭氛围中找到依据[3]。 在与部分同学访谈后 ，基本可以得出这 样一个结论，那些在缺乏关爱和理解的家庭中长大的孩子相对比较孤 僻，性格比较怪异。 容易出现无聊、空虚等情况，相应的也就比较容易 沉迷于网络，他们认为网络可以使自己得到认可和尊重；因此，作为家 长要认真关注的孩子的心理成长历程， 父母亲应主动加强与子女沟 通，尽量不要给孩子心理负担，营造良好的家庭气氛，为在校大学生提 供一个和谐的家庭环境。 其次，运用人性化的关怀来对待孩子的网络行为。 许多家长发现 自己的孩子沉迷于网络之后，采取粗暴的方式来解决问题，而没有从 学生的角度出发。 大学生处于世界观人生观和价值观形成的重要时 期，还未形成理性思维，容易受到不良思想和行为的影响。 当大学生不
脂的总得率为 8.66%，卵 磷 脂 的 含 磷 量 为 13.77%；经 酶 解 法 粗 提 和 柱
硅 胶 层 析 法 纯 化 后 卵 磷 脂 的 总 得 率 为 10.95%， 卵 磷 脂 的 含 磷 量 为
14.57%；经 酶 解 法 粗 提 后 再 经 金 属 离 子 复 合 沉 淀 法 纯 化 卵 磷 脂 总 得 率
化法
13.77
酶解法粗提+柱硅 胶层析纯化法
12.73
10.59
14.57
酶解法粗提+金属 离子复合沉淀纯化
法
12.73
10.95
13.09
由表 3 可以看出：各用 300g 蛋黄进行提取和纯化试验，经有机溶
剂粗提和柱硅胶层析法纯化后卵磷脂的总得率为 8.38%，卵磷脂的 含
磷量为 15.33%； 经有机溶剂粗提和金属离子复合沉淀法纯化 后 卵 磷
2.3 蛋黄卵磷脂纯化试验结果 蛋黄卵磷脂纯化试验结果见表 2。
表 2 蛋黄卵磷脂纯化试验结果
原
柱硅胶层析法
金属离子复合沉淀法
料
（g） 卵磷脂 回收 率(%) 卵磷脂含磷量(%) 卵磷脂回收率(%) 卵磷脂含磷量(%)
300
83.21
15.33
85.98
13.77
由表 2 可以看出：通过有机溶剂粗提后经柱硅胶层析法纯化卵磷 脂的加样回收率为 83.21%，其中卵磷脂的含磷量为 15.33%；经金属离 子复合沉淀法纯化卵磷脂的加样回收率为 85.98%， 其中卵磷 脂 含 磷 量为 13.77%。 说明经柱硅胶层析法提纯卵磷脂粗品比金属离子 复 合 沉淀法所获得的纯度高。
2.4 交叉组合试验结果比较 蛋黄卵磷脂提取与纯化交叉组合试验结果比较见表 3。
表 3 蛋黄卵磷脂提取与纯化交叉组合试验结果比较
项目
粗提得率(%) 纯化回 收总 得率(%) 卵磷脂含磷量(%)
有机溶剂粗提+柱 硅胶层析纯化法
10.07
8.38
15.33
有机溶剂粗提+金
属离子复合沉淀纯
10.07
8.66
2011 年第 23 期
◇高教论述◇
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
曲怀坤 (临沂市技术学院 山东 临沂 276000）
【摘 要】为探讨从蛋黄中提取蛋黄卵磷脂的方法。试验以蛋黄为原料，采用有机溶剂和酶解法从蛋黄中提取卵磷脂粗品，然后分别经柱硅 胶层析和金属离子沉淀法纯化获得卵磷脂精品 ，通过测定卵磷脂的含磷量 ，判断其纯度高低。 结果显示：采用有机溶剂法获得蛋黄卵磷脂粗品 ， 然后经柱硅胶层析纯化可获得高纯度蛋黄卵磷脂精品，总得率为 8.38%，卵磷脂的含磷量为 15.33%。 是一种高效、经济的蛋黄卵磷脂提取方法。
1.1.2 试验仪器 三角瓶、容量瓶、微量移液器、真空干燥箱、旋转蒸发器、玻璃棒、 分光光度计、电子分析天平、真空干燥器、冷冻干燥器、循环式真空泵、 电动搅拌器、离心机、微量进样器、电炉、坩埚。 1.2 试验方法 1.2.1 蛋黄卵磷脂的粗提 （1） 有 机 溶 剂 提 取 法 首先将鸡蛋打破，分离蛋黄，将蛋黄放入洁净的带塞的三角瓶中， 加入 92%乙醇（用量 12ml/g）浸取 ，搅 拌 60min 后 ，静 置 15min，然 后 加 入 乙 醚 （用 量 为 乙 醇 用 量 的 1/3），搅 拌 15min 后 静 置 15min，过 滤 ，将 滤液收集放入旋转蒸发器中低温、减压浓缩，加入一定量的丙酮除杂， 卵磷脂即沉淀出来，过滤，用丙酮冲洗几次，至冲洗液无色，即得蛋黄 卵磷脂粗品。 在真空干燥箱中干燥后，充入氮气低温保存。 （2） 酶 解 法 首先将鸡蛋清洗、杀菌、打蛋去壳，分离蛋黄，将蛋黄放入洁净的 带塞的三角瓶中，加入 0.06%的蛋白酶，在温度 25℃的环境下实验，加 90%的乙醇搅拌，然后用离心机离心、提取(反复 3 次)，合并上清液、蒸 发回收、冷冻干燥，最后得到卵磷脂粗品。 1.2.2 蛋黄卵磷脂的纯化 （1） 柱 硅 胶 层 析 法 将适量的柱硅胶（60～100 目）用氯仿打成浆状、湿法装柱。 用不同 浓度的氯仿/甲醇混合液连续冲洗(氯仿:甲醇的体积比分别为 40:1、35: 1、30:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、2:3、1:2)，每个浓度以 100ml 总量 加入，当 加 入 氯 仿/甲 醇 浓 度 为 1:1 时 ，以 后 的 溶 液 加 入 量 根 据 需 要 变 大。 收集氯仿/甲醇比例为 1:2 洗脱液，然后放入旋转蒸发器浓缩成膏 状，再在冷冻干燥器中干燥，即得卵磷脂精品，放入密封瓶内充入氮气 低温保存。 （2） 金 属 离 子 复 合 沉 淀 法 把卵磷脂粗品溶于无水乙醇中，加入 金 属 沉 淀 剂 40%的 ZnCl2 水 溶液，待生成沉淀后，分离出沉淀物，而后加入丙醇洗涤，然后放于真 空中干燥，最终得到精制的卵磷脂。 1.2.3 蛋黄卵磷脂含磷量的测定 分 光 光 度 法(GB/T 5009.87-2003)测 定 蛋 黄 卵 磷 脂 中 的 含 磷 量[2]， 以含磷量的高低，判别其纯度的高低。 2.结 果 与 分 析 2.1 蛋黄卵磷脂含磷量的测定标准曲线
近年来，由于卵磷脂的用量不断增长，对它的提取研究得到很大 发展，以形成了许多方便、有效的提取方法。 本试验采用不同的方法提 取，并纯化蛋黄卵磷脂，以探讨不同方法提取和纯化蛋黄卵磷脂的效 果。
1．材 料 与 方 法 1.1 试验材料 1.1.1 材料与试剂
新鲜鸡蛋、无水乙醇、乙醚、丙酮、甲醇、氯仿、蛋白酶、氯化镉、抗坏血 酸 、金 属 沉 淀 剂 (ZnCl2) 、丙 醇 、钒 钼 酸 铵 。
为 10.95%，卵磷脂的含磷量为 13.09%。 四种组合方法对比可知，以有
机溶剂粗提+柱硅胶层析纯化法进行蛋黄卵磷的提取和纯化效果最
好，获得的蛋黄卵磷脂的纯度较高。
3.讨 论
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2011 年第 23 期
◇高教论述◇
强的学生对网络产生强烈的神秘感。 二是家长与学生缺乏必要的沟 通，如孩子上网与学习时间的合理搭配，以及必要的网络知识等。 这些 缺乏人性化的教育方式容易造成不解、使学生与家长产生代沟甚至升 级为争执。 并最终导致子女觉得无法在家长身上找寻到家的温暖，体 会不到人性的关怀和伟大。 从而更多地把注意力转投向可以给他们带 来慰藉的网络上面。
【关键词】蛋黄卵磷脂；提取；纯化
卵磷脂是由甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷 脂类物质，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份。 研究 发现卵磷脂具有延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆 力 ，促 进 脂 肪 代 谢 、防 止 出 现 脂 肪 肝 、降 低 血 清 胆 固 醇 等 方 面 的 作 用 [1]。 被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。 在西方国家卵磷脂被 誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。 卵磷脂在动植物体内分 布广泛，其中以蛋黄中含量最为丰富。