猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较
不同提取方法猴头菇粗多糖的表征及其抗氧化活性的比较
（ １ 。 华 南Ａ － Ｙ － 大学食 品科 学与 工程 学 院 ， 广 东广 州 ５ １ ０ ６ ４ ０； ２ ． 广 东太 阳神 集 团有 限公 司， 广 东广 州 ５ １ ０ ６ ６ ５ ）
摘 要： 为探 究不 同提 取 方 法 对 猴 头 菇粗 多糖 提 取 效 果 及 抗 氧 化 活 性 的 影 响 。 以猴 头 菇 子 实体 为 原 料 ， 通过 热水 、 超
２ ． Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ａ ｐ ｏ ｌ ｌ ｏ Ｃ ｒ ｏ ｕ ｐ ． Ｃ ｏ ． ， Ｌ ｔ ｄ ， Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ １ ０ ６ ６ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｖ ａ ｒ ｉ ｏ ｕ ｓ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｃ ｒ ｕ ｄ ｅ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｅ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｓ ｒ ｆ ｏ ｍ Ｈｅ ｒ ｉ ｃ ｉ ｕ ｍ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｔ ¨ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｉ ｅ ｓ ， ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ， ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｉ ｎ ｇ ｈ ｏ ｔ ｗａ ｔ ｅ ｒ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｎ ｉ ｃ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ａ ｌ ｋ ａ ｌ ｉ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ，
具 有 较好 的 清 除 自由基 能 力 ， 可作 为 天然 抗 氧 化 剂 开发 利 用 。 关键 词 ： 猴头菇 ， 粗 多糖 ， 提取 ， 表征 ， 抗 氧 化
猴头菇多糖提取及纯化的研究
ｓ ｄ ｕ ｏ ｅ ｙ ｕｆ ｔ－ ｅ ｅ ｅ ｔ ｐ ｏｅ ｉ ａ ｄＣ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｙｃ ｌ ｍｎ ｏ ｉ ｍ ｄ ｄ ｃ ｌ ｌ ｅ ｇ ｌ ｌｃｒ ｈ ｒ ｓ ｎ ｈ ｏ ｔｇａ ｈ ｏｕ ． ｓ ａ ｏ ｓ
Ｋｅ ｙｗｏｒ ｓ： ｒｃｕ ｅ ｉ ａ ｅ ｓ ｐ ｌｓ ｃ ｈ ｒｄ ； ｘｒ ｃ ； ｕ ｉ ｃ ｔ ｎ ｄ Ｈｅ ｉｉ ｍ ｒｎ ｃ ｕ ； ｏｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ ｅ ｔａ ｔｐ ｒｆ ａｉ ｉ ｏ
率。 结果表 明在 ９ 加 水 ２ 倍 、 Ｈ ７５ 浸提 ８ｈ 超声波处理 ５ 的条件下浸提 率最高， Ｏｃ ｃ、 Ｏ ｐ ＝ ．、 、 Ｏｓ 可迭 ５４ ％。 用胰蛋 白 ．３ 利 酶和 Ｓｖｇ法进行脱蛋 白。聚丙烯酰胺凝胶 电泳和凝胶 柱层析检验结果都说 明猴 头菇 多糖是均一 多糖 。 ｅａ
为国产分析纯 。 １ ． １ ％苯酚溶液 的配制 ．２ ０ ２
保健效果［ 猴头菇多糖是猴头菇 中重要 的生物活性 物 ２ １ 。 质 ，可作 为免疫促进剂 ，能控制 细胞 的分裂 和细胞 分 化， 调节细胞 的生 长和衰老 。经 检测 ， 菇多糖具 猴头 有 明显的抗补体活性 和促进淋 巴细胞增殖作用 ，对提 高肌体 免疫力具有 重要 的作用口 可广泛应用于医药 、 。 保 健品及 功能食 品 ，作为绿色生 物医药产品具 有广 阔 的市场前景 。本文对猴头菇多糖提取纯化方 法进行 了
猴头菇菌丝体和发酵液中多糖的含量测定
猴头菇菌丝体和发酵液中多糖的含量测定1.河北省食品药品检验院，河北石家庄050011；2.河北医科大学第三医院，河北石家庄050051目的分别测定猴头菇菌丝体、猴头菇发酵液提取的粗多糖中的多糖含量。
方法采用蒽酮-硫酸比色法，利用紫外分光光度计测定多糖含量，样品与对照品分别在450～750 nm波长范围内扫描。
结果最大吸收波长为（625±1）nm，猴头菇多糖检测浓度在20～100?g/mL（r2=0.999）范围内与吸光度线性关系良好；加样回收率为96.0%。
结论猴头菇菌丝体与发酵液提取的粗多糖中多糖含量均能达到30%以上。
标签：猴头菇菌丝体；猴头菇发酵液；多糖；含量测定猴头菌（Hericium erinaceus，Bull.Ex Fr.）又名猬菌、刺猬菌、小刺猴头、猴菇、猴头菇，隶属于担子菌门，齿菌科[1]，是著名的药食两用菌。
猴头菇味甘，性平，归脾、胃经。
猴头菇多糖是猴头菌的主要活性成分之一，具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血糖、抗突变、防辐射等作用[2]。
猴头菇多糖制成的药物和保健品深受人们喜爱，开发前景广阔。
目前，通过猴头菇子实体提取猴头菇多糖的方法研究较多，但猴头菇子实体的生长周期相对较长，本文研究的是发酵的方法获得的多糖，具有生长周期短，提取多糖速度快的特点。
因此，液体深层发酵是开发猴头菇活性成分的有效手段。
但是在发酵获得多糖的方法中，采用菌丝体提取多糖的研究较多，而积极利用发酵液提取多糖的方法较少报道，本实验通过对猴头菇菌丝体和发酵液提取的多糖含量进行比较，把发酵液也积极的利用起来，为猴头菇多糖更好的开发利用打下基础。
1 材料与方法1.1 材料与仪器紫外可见分光光度仪GBC Cintra10（澳大利亚GBC公司），高效液相（美国Waters公司），旋涡混合振荡器（江苏海门其林医用仪器厂），恒温水浴锅（北京靖卫科学仪器厂）。
D-无水葡萄糖（中国药品生物制品检定所），蒽酮（北京金龙化学试剂有限公司），浓硫酸、95%乙醇、氯仿均为分析纯，猴头菇菌种为本实验室保存。
不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较
不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较对10株猴头菌（Hericium erinaceus）菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。
结果表明：不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激RAW264.7产生NO的能力上有明显差异，其中H5粗多糖含量最高且体外刺激RAW264.7的活性也最强。
猴头菌菌株；子实体多糖；巨噬细胞；NO猴头菌（Hericium erinaceus）是一种食药兼用菌，不仅营养美味，且具有多种药用活性作用。
国内外研究报道猴头菌的活性物质主要有多糖、萜类、脂肪酸、甾醇类、酚类等，其中最主要的活性成分是猴头菌多糖，具有保肝护胃、降血糖、增强人体免疫力、抗癌、抗氧化等功效[14]。
猴头菌多糖可从栽培子实体和发酵菌丝体中提取得到，李巧珍等[5]发现不同菌株的发酵菌丝体多糖的产量及其体外免疫活性有较大差异，笔者对收集到的10个猴头菌菌株栽培得到的子实体多糖含量和体外免疫活性进行了比较，为筛选多糖产量高、体外免疫活性好的菌株提供帮助，也为猴头菌栽培菌株筛选提供了一定的依据。
1 材料与方法1.1供试菌株及来源供试菌株0627、0608、0617、0611、0605分别编号为H1～H5，由上海市农业科学院食用菌研究所提供；长刺猴头、911、920、猴头王、华中猴头分别编号为H6～H10，其中长刺猴头和华中猴头由华中食用菌栽培研究所提供，911和920由江苏高邮食用菌研究所提供，猴头王由牡丹江海丰食用菌研究所提供。
1.2子实体培养按照85%木屑、14%麸皮、1%石灰搅拌培养料并调整其含水量为64%，装入聚丙烯塑料袋（17 cm×33 cm×0.05 cm），每袋装湿料1 kg，121 ℃灭菌120 min，接种后25 ℃避光培养；菌丝满袋后转入培养房，在18～23 ℃、85%～95%相对湿度、自然散射光条件下培养子实体；当子实体菌刺长约0.5 cm时采收，分别将10个菌株子实体样本烘干备用。
猴头菇多糖的提取与脱蛋白工艺生物技术及应用
重点研究问题
猴头菇多糖的热水浸提的方法和sevag法脱蛋白的方法。
主要技术指标
使用热水浸提方法提取猴头菇多糖更有效，使用sevag法脱蛋白方法更方便我们使用。
其它要说明的问题
猴头菇多糖的提取量不高，脱蛋白不彻底，总的提取纯化工艺流程复杂等。
学号061401214姓名沙媛媛
题目猴头菇多糖的提取与脱蛋白工艺
答辩小组意见：
1、对论文的评价
2.建议成绩等级
优 良 中 及格 不及格
3.需要说明的问题
答辩小组长签字
年月日
摘要：猴头菇是药用兼用菌而且具有很好的保健效果，采取热水浸提和sevag法是提取和除蛋白的最优工艺，多糖生物活性的作用和重要性，可作为药用保健等工厂化生产，广阔的前景。
江苏农林职业技术学院
毕 业 设 计（论 文）
SNL/QR7.5.4-3
猴头菇多糖的提取与脱蛋白工艺
专 业生物技术及应用
学生姓名沙媛媛
班 级06生物技术及应用（2）
学 号061401214
指导教师谢春芹
完成日期2009-6-5
成绩评议
学号061401214姓名沙媛媛
题目猴头菇多糖的提取与脱蛋白工艺
指导教师建议成绩：
2.2猴头菇多糖的生物活性………………………………………1
3猴头菇多糖的提取……………………………………………2
3.1 热水浸提猴头菇实验的步骤和方法…………………………2
3.1.1材料和设备………………………………………………‥2
3.1.2实验的原理………………………………………………‥2
3.1.3热水浸提操作步骤………………………………………‥2
超声法提取猴头菇多糖的研究
超声法提取猴头菇多糖的研究孙舒玉摘要：在对提取猴头菇多糖的提取方法进行介绍、比较之后，采用单因素分组实验和正交试验方法,结合实际情况分别确定了超声波法和传统热水法提取猴头菇多糖的最佳工艺。
结果表明: 超声波法提取多糖明显优于传统热水法，通过与传统热水提取法相比较，超声波法提取时间缩短4/ 5 ,而多糖提取率提高40 %以上。
关键词：猴头菇超声提取多糖猴头菇(Hericium erinaceus)，又名猴头蘑、熊头菇、刺猬菌,隶属于担子菌门,猴头菇科,是中国著名的药食两用菌[1]。
猴头菇鲜美无比，菌肉鲜嫩，香醇可口，与熊掌、燕窝、香菇齐名为“四大山珍”。
猴头菇是食用菌中名贵的品种，野生于密林深处，生长在栎(俗称柞树)、胡桃等阔叶树种的立木及朽木上，或生长在活立木的受伤处，数量极稀少，我国黑龙江小兴安岭和完达山出产的猴头菇最负盛名。
野生猴头菇得之不易，现在已掌握了人工培养技术，全国各地均有栽培[2]。
《本草纲目》记载，猴头菇性平，味甘，有“利五脏，助消化”之功能，特别是对胃溃疡，十二指肠溃疡和神经衰弱等患者有很好的保健效果。
猴头菇的生物活性成分有多糖、多肽和脂肪族酰类等物质，其中最主要的是多糖[3]。
近年研究证明，猴头菇多糖有增强巨噬细胞吞噬功能、增强体液免疫功能、促进溶血素形成、降血糖、降血脂、抗白细胞下降、抗凝血、抗突变等作用[4,5].而且，可广泛应用于医药、保健品及功能食品, 作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景。
据相关文献资料表明，食用菌多糖是目前最具发展前途的医疗保健资源之一。
20世纪60年代以来，随着生物物理和化学科学的发展，人们对多糖的研究逐步活跃起来。
近年来，国内外已从高等担子菌中筛选到200余种有生物活性的多糖物质，我国发现有重要价值的食用菌多糖近30种[6]，并且在多糖的提取纯化、分离鉴定及生物活性等方面进行了深入研究，对生命科学、医学科学的研究和发展具有重要意义。
食用菌多糖的提取主要根据其溶解性质（水溶、水不溶、酸溶或碱溶性的），并结合食用菌原料的特点而确定相应的提取方法。
超声法提取猴头菇多糖的研究
参考文献
[1]刘海森，陈海晏．猴头菌的药用价值概述[J]．中国食用菌，1998, 18(1): 24-25. [2]王薇．猴头菇的营养保健功能及其在食品工业中的应用[J]．食品与药品，2006, 8(4): 24-26. [3]但飞君，付若秋．猴头菇的研究概况[J]．中医药研究，2000, 16(4): 60. [4]杨焱，周昌艳，白韵琴，等．猴头菇子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较[J].菌 物系统，2001, 20(3): 397. [5]樊伟伟，黄惠华．猴头菇多糖研究进展[J]．食品科学，2008, 29(1): 355-358. [6]郭嘉铭，上官舟建，陈景潮．药用真菌的研究与开发概述[J]．中国食用菌，1994, 13(3): 8-10. [7]徐翠莲，杜林洳，樊素芳，等．多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究[J]．河南科学， 2009, 27(12): 1524-1529. [8]廖周坤，姜继祖，王化远．超临界CO2萃取藏药灵芝中总皂苷及多糖的研究[J]．中草药， 1998, 29(9): 601-602. [9]Stahmann K P, Monschau N, Sahm H, et al. Structure properties of native and sonicated cinerean, α-β-(1-3)-(1-6)-D-glucan produced by botrytiscinerea[J]. Carbohydrate Research, 1995, 226(1): 115-128. [10]Wei Lingyun, Wang Jianhua, Zheng Xiaodong. Studies on the extracting technical conditions of inulin from Jerusalem antichoke tuber[J]. Journal of Food Engineering, 2007, 79: 1087-1093. [11]刘志诚，于守洋．营养与食品卫生学[M]．北京：人民卫生出版社．1989. 121-122． [12]胡斌杰，师兆忠．超声法提取猴头菇多糖最佳工艺优化研究[J]．化学世界，2009, 9: 557560. [13]梁华，李雪林，陆亚春．猴头菇多糖提取工艺研究[J]．食品与机械，2006, 22(1): 35-38.
膜分离技术纯化猴头菇粗多糖
膜分离技术纯化猴头菇粗多糖
采用醇沉、膜分离、膜分离+醇沉等技术对猴头菇子实体多糖进行分离。
同时，对所得猴头菇粗多糖的分离纯化效果、结构和主要成分进行对比分析。
不同分离技术对猴头菇多糖体外抗氧化活性的影响。
以期对猴头菇多糖的分离纯化技术进行改进，并为多糖物质的有效利用提供理论依据。
微滤+纳滤技术分离纯化效果较好，其粗多糖得率为10.08%，纯度为43.01%，提取液中80.34%的多糖得到保留。
经傅里叶变换红外光谱分析，5种工艺处理获得的粗多糖样品均具有典型的吡喃型葡聚糖和β-型糖苷键吸收峰。
5种处理获得的粗多糖样品中均含一定量的蛋白质，且B-HeP的蛋白质量分数高于C-HeP，说明微滤处理可以除去部分蛋白而提高多糖的纯度。
还原力、·OH、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除结果表明，5种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力，且D-HeP的抗氧化能力强。
德兰梅勒是一家处于领导地位的高科技创新公司。
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将膜分离设备应用在工业分离纯化领域中，循环的生产方式，有效地帮助客户提高生产效率、实现清洁生产和节能环保。
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猴头菌菌丝多糖的分离纯化及其性质研究
Ｄ － ｙｏ ｅ ａ ｄ Ｄ － ｒ ｔｓ ．Ａｎ ｈ ｏｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ ｍｏ ｅ ｕａ ａ ｉｙ ｓ ｏ ｄ ａ ｔ ｉａ ｆｅ ｔｂ ｓｅｉ ｃ ｔ ｎ ｘ ｌｓ ｎ ｆｕｃｏ ｅ ｄ ｔｅ ｐ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒｄ ｌｃ ｌｒｅ ｓｌ ｈ ｗｅ ｎ ｉ ｒ ｌｅｆ ｃ ｙ ｅ ｔｒｆ ａｉ ｖ ｉ ｏ
２１ 年 １ ０ １ ０月
食品研究与开发
Ｆ ｏ ｅ ａｃ ｎ ｅｅ ｐ ｅｔ ｏｄＲ ｓ ｒｈＡ ｄＤ ｖｌ ｍ ｎ ｅ ｏ 生物 工 程糖 的分 离纯化 及其性质研 究
杜志强 ， 王建英
（ 内蒙古科 技大学 数理 与生物 工程学 院 ， 内蒙古 包头 ０４ １ ） １０ ０
关 键 词 ： 头 菌 ； 丝 多糖 ； 离纯 化 ； 质 研 究 猴 菌 分 性
Ｓｅ ｒ ｔｏ ｐａ ａ ｉ ｎ，Ｐｕ ｉ ｃ ｔｏ ａ ｄ Ｐｒ ｐ ｒｉ ｓＲｅ ｅ ｒ ｈ ｆ ｒＨ ｅ ｉｉ ｍ ｒｎ ｃ ｕ ｙ ａ ｌｓ ｃ ｈａ ｉ ｅ ｒ ｆ ａ ｉｎ ｎ ｏ ｅ ｔｅ ｓ ａ ｃ ｏ ｒｃ ｕ ｅ ｉａ ｅ ｓＨ ｐｈ ｅ Ｐ０ｙ ａ ｃ ｒｄ ｉ
性研 究方 面 的不 断深入 ， 取得 了 良好 的成果 。 都 那么 ，
猴头 菌作 为一种重要 的药食两用真 菌 ，研究 清楚多糖 结 构与生物活性之 间的联系 ， 就显得 十分必要 了。 本文
通 过对猴头菌丝 多糖进 行分离纯化 ，以及多糖性质 的
Ｓｐ ａ ｅ 一 ０ ： 典Ｐ ａ ａ ｉ 司 ； 他试剂 均 为国 ｅｈ ｄｘ ２ ０ 瑞 Ｇ ｈｒ ｃ 公 ｍ ａ 其
目前 ， 于真菌类多糖 的研究 已经 十分全 面 了 ， 关 不
Ｓ Ｎ １４ ： 阳农 业大学生物科学技 术学院生物 Ｔ程 Ｙ Ｄ ５ ）沈 实验 室馈赠 。 １ 实验药 品与试剂 ． ２ ＤＡ 一 Ｅ Ｅ 纤维 素 ：上海试剂 二厂 ；ｅｈ ｄｘＧ １０ Ｓ ｐａ ｅ 一 ０ 、
猴头菌丝体多糖提取工艺比较研究
猴头菌丝体多糖提取工艺比较研究
苗晓燕;朱维红;陈梅香;张筱梅
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2013(000)006
【摘要】采用正交试验优化猴头菌丝体多糖酶法提取方案,并结合超声波处理及对比研究热水提取法、酶法、超声波法和酶-超声波联合这4种方法对猴头发酵菌丝体多糖的提取工艺.结果表明,在提取温度50℃、pH4.2、料液比1∶30(g/mL)、酶量3%、酶解90 min时,多糖提取率达5.93%,同时结合超声波处理20 min,多糖提取率可达7.71%,分别是水提法、酶法和超波法提取的1.6倍、1.3倍和1.22倍,明显提高了多糖得率.
【总页数】4页(P30-32,33)
【作者】苗晓燕;朱维红;陈梅香;张筱梅
【作者单位】保定学院生化系，河北保定 071000;保定学院生化系，河北保定071000;保定学院生化系，河北保定 071000;保定学院生化系，河北保定 071000【正文语种】中文
【相关文献】
1.猴头菌子实体与菌丝体粗多糖理化性质及抗胃粘膜细胞氧化活性比较 [J], 肖旭朗;薛德冬;张薇;张洪贺;高阳;徐多多;王明星
2.正交试验优化猴头菌菌丝体中猴头菌素A的超声提取工艺 [J], 刘若曦;何晋浙;王平
3.不同培养基对猴头菇菌丝体生长量及多糖含量的影响 [J], 高颖;李田春;徐晓宇
4.猴头菇菌丝体多糖的超声辅助提取工艺研究 [J], 王锋;刘晓鹏;王应玲;张宝翠;付蕾;向晓双;陈莉莉;姜宁
5.猴头菇菌丝体/子实体多糖对胃黏膜的保护作用 [J], 袁尔东;黄敏;李良;杨宜婷;任娇艳
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菌物系统20
398 菌物系统20卷
1.3主要仪器
756分光光度计LBS—100自动部分收集器
上海国际微电子公司上海新
波无线电厂上海医疗器械厂SIGMA公司产品
SIGMA公司产品Waters公司IR-611
SICO-GC
·ÖÀëºÍ´¿»¯
1.4.1 多糖的提取分离: 分别称取风干后的猴头菌固体培养菌丝体和子实体适量
加热提取,合并提取液90%乙醇沉淀得
子实体和菌丝体的提取分离物从固体培养菌丝体得到的提取物编号为HMP
¼ÓÈë100ml 蒸馏水抽滤
滤液用3~4倍体积的10%H2O2进行脱色脱色完成后用Sevage法去蛋
白5:2v/vÈ¡ÉϲãÈÜÒº·´¸´ÝÍÈ¡5-6次至游离
蛋白质完全去除１０4)中
再对蒸馏水(中间最好换几次蒸馏水) 透析一天加入三倍体积的60%乙醇沉淀离心收集沉淀静置过夜
用乙醇50加热溶解沉淀同时挥发残留的乙醇制
得样品液
以Sephadex G-100作柱填料上柱处理以0.06ml/min为准以0.05mol
/L 氯化钠洗脱用苯酚-硫酸法检测吸收
值为纵坐标画出洗脱曲线流水透析无水乙醇沉淀沉淀
用无水乙醇得子实体多糖纯品hfp-1
由于hfp-2和hmp-1的量极微小
1.4.3纯品鉴定: 将hfp-1和hmp-2两个样品经0.001mol/LNaOH溶解后
HPLC的条件为流速0.5ml/min
±ÃΪWaters 515 HPLC Pump
1.5性质测定
1.5.1比较两提取物得率和多糖含量差异: 分别测出HFP和HMP两提取物的干重
用苯酚
1.5.2 hfp-1和hmp-2单糖组成分析: 用气相色谱法对两分离纯化物进行单糖的组成分析
阿拉伯糖甘露糖葡萄糖等六种单糖混合溶液进行气相色谱分析
GC条件为FID检测
110减压蒸发去酸
NaBH4室温下还原2.5hÈ»ºóÒÒõ£»¯
1.5.3hfp-1和hmp-2的分子量测定: 用不同标准分子量之葡聚糖Dextran T系列
3期杨焱等
作对照由
LgMw对Rt作图获得标准曲线由GPC
¼ÆËãµÃ·Ö×ÓÁ¿
ÔÚºìÍâ¹âÆ×ÒÇIR-611上测定
HFP和HMP½á¹û
Èç±í1所示
%
%
ÿ1KG猴头菌子实体能得约44.36克的纯多糖子实体提
取的有效率是菌丝体的三倍多
2.2 HFP和HMP的性质比较结果
粗多糖HFP
260nm及280nm处均无紫外吸收
将hfp-1和hmp-2两个样品经0.001mol/LNaOH溶解后HPLC分析结
果显示hfp-1有两个峰次峰含
量为3.94%hmp-2有两个峰次
峰含量为5.54%
由HPLC层析图谱对照标准品的保留时间ｈｍｐ－２主
峰分子量为68000
ͼ4ľÌÇÆÏÌÑÌÇËÄÖÖµ¥ÌÇ
0.040.71
ͼ5ľÌÇ°ëÈéÌÇ
Ara, Xyl, Man, Gal,GlcµÄĦ¶û±ÈΪ0.250.310.29
400 菌 物 系 统 20卷
图1 hfp-1的HPLC 纯度分析图 图2 hmp-2的HPLC 纯度分析图
Fig.1 HPLC of hfp-1 Fig.2 HPLC of hmp-2
图4 hfp-1的气相色谱图 图5 hmp-2的气相色谱图
Fig.4 GC of hfp-1 Fig.5 GC of hmp-2
从HFP 和HMP 主成分的单糖组成上看猴头菌丝体多糖比子实体多糖
多一个木糖组分
子实体多糖以半乳糖和葡萄糖为主
红外光谱结果显示hfp-1和hmp-2均含有多糖的3300cm -1
1417.4 cm -1特征吸收峰外-型连接的890 cm -1吸收峰-型吸收峰hfp-1在1373.1 cm -1处有一明显的吸收
3期杨焱等
存在着不同的酶因此从菌丝体或子实体
中获取的化学成分就会有差异
有关猴头菌子实体和菌丝体的化学成分的研究已有一些报道
石勇民和苏凤岩从猴头菌子实体中提取得到的多糖经水解层析显色后得出由等量的葡萄糖和半乳糖组成１９８７
黄年来认为猴头菌子实体多糖是由葡萄糖潘继红
等甘露糖半乳糖和葡萄糖
阿拉伯糖和半乳糖
在已有的研究报道中菌丝体多糖的研究较少
因此本实验对
二者的化学成分组成差异进行了全面的研究
多糖的含量相差较大将子
实体和菌丝体提取分离得到的多糖进一步纯化后
阿拉伯糖这与以往研究报道有所差异
甘露糖半乳糖和葡萄糖五种单糖组成的
本研究通过单糖组成摩尔比的计算得出
菌丝体多糖主要以半乳糖和木糖为主本实验用
ＨＰＬＣ对猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化主成分进行了分子量的测定
红外光谱分析二者均有多糖的特征吸收峰-
型连接的890 cm-1吸收峰-型吸收峰二者无核
酸和蛋白质的吸收峰
综合上述的结果分析
这是否会影响其功效作用的不同还需进一步研究证实
猴头菌子实体提取物的有效成分多糖的含量较高从结构上分
析更具有活性
402 菌物系统20卷
［参 考 文 献］
中国植物学会真菌学分会
苏凤岩9
Ñϻ۷¼1999. ºïÍ·¾úÌáÈ¡Îï¶Ô´óÊóθð¤Ä¤ËðÉ˱£»¤×÷ÓõÄÑо¿. ʳÓþúѧ±¨１
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严慧芳1996. 猴头菌药效学研究. 食用菌学报4
1987. 自修食用菌学. 南京大学出版社
潘继红程宝勤等食用菌学报3
0.040.71
0.41 1.00
-glycoside linkage but
did not in hmp-2. The result of HPLC showed that the average molecular weight of hfp-1 and hmp-2 were 54 000 and 68 000, respectively.
KEY WORDS:Hericium erinaceus, polysaccharides of fruit body, polysaccharides of mycelia, isolation, purification, comparison of characteristic。