《检验仪器分析》第10章 免疫分析

3．精密度
4．灵敏度
5．通道差与孔间差检测
6．线性范围
7．双波长评价
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五、仪器的操作与维护与常见故障处理
开机 接通接线板电源，打开酶标仪器开关，仪器 开始自检，自动预热2~3分钟。 打开酶联软件，进入主菜单，选择测量模式 以及某些参数 将离心好的样品，放入样品盘，选择相应的 测定程序以及试剂盘。 检查无误后，按”开始”键，酶标仪对样品 开始进行测试 测定结束后，保存测定结果，并用外置打印 机打印结果
样品盘
试剂盘 急诊标本
60个标本
13种试剂
60个标本
24种试剂
75或30个标本
18或25种试剂
均可随到随做，无需中断运行
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五、仪器的使用与维护及常见故障的处理
开机 打开仪器电源，等待仪器自检，按 “STARTUP”键启动 进入菜单，设定测量参数，放置检测试剂和 消耗品 将被测样品放入样品架，输入起始样品栏的 位置和起始样品编号，选择样品的测试项目 按已设定的参数和程序，按“Run”键仪器 自动检测 测定结束后，可以选择需要浏览的结果，打 印报告 取出试剂放入冰箱，清理废弃物，清洗探针 44 后，关闭仪器
以临床免疫检 验最常用的酶 标仪为例介绍 酶免疫分析仪 的工作原理。
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二、工作原理
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二、酶免疫分析仪的工作原理
酶免疫分析仪其实就是一台特殊的光电比色计或 分光光度计，根据ELISA技术的特点而设计。
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三、酶免疫分析仪的基本结构
全自动酶标仪可以将整个系统分为 加样系统 温育系统 洗板系统 判读系统 机械臂系统 这些 系统 既相 互独 立又 联系 紧密。
全自 动化 学发 光免 疫分 析仪
参数设置 样品装载 样本测定 结果 关机
五、操作与维护及常见故障处理
开机 打开仪器主电源和显示器，开机仪器进行初 始化
全自 工作前准备 在主屏幕进行系统设置后，装入各类耗材， 动微 并按要求进行质控和定标 粒子 将样本装入标本架，在试验菜单下输入标本 样品装载 化学 架号、标本号以及检测项目 发光 确认标本装载无误后，开始测定操作，仪器 样本测定 会自动检查耗材和校准状态 免疫 分析 测定结果可自动打印，也可以在菜单下选择 结果 浏览结果，以标准模式发送结果 仪
关机
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卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，让仪 45 器处于24h待机状态
五、操作与维护及常见故障处理
开机 打开供水系统和操作电源，开启启动程序， 输入操作者ID，进入软件，启动系统操作
全自 工作前准备 设置仪器参数，装载各种耗材，运行校准程 动电 序，再运行质控和定标 化学 将样本装入标本架，选择标本类型，输入标 样品装载 发光 本架号、标本号以及检测项目 免疫 确认启动条件后，按“Start”键，仪器会自 样本测定 动对标本进行测定 分析 仪 可以在仪器上选择浏览结果，也可以打印检
传送舱
全自 动微 粒子 化学 发光 免疫 分析 仪
电子 系统
微电脑 控制
主探针 系统
流体 系统
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分析 系统
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三、发光免疫分析的基本结构
全自动电化学发 光免疫分析仪 控制单元
就是一台完整 的计算机，并 配有支架及打 印系统。
核心单元
主要由条形码 阅读器、标本 舱位、标本架 转盘、模块轨 道等组成。
2．真空压力不足
3．发光体错误
4．轨道错误
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第三节
免疫浊度分析仪
免疫浊度技术将现代光学仪 器与自动分析检测系统相结 合应用于免疫沉淀反应，可 对各种液体介质中的微量抗 原、抗体、药物及其他小分 子半抗原物质进行定量测定 。
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一、免疫浊度分析仪的分型
（一）免疫浊度技术的分类 根据检测原理的不同，免疫浊度技术分为透射光 免疫浊度法（turbidimetric immunoassay）和散射 光免疫浊度法（nephelometry immunoassay）。
③避免阳光直射，以延缓光学部件的老化
④操作时电压应保持稳定
⑤保持工作台面干燥、干净、水平，有足够操作空间
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日常维护
①仪器外部的清洁 ②检查加样系统 ③清洁仪器内部 ④每日仪器工作结束后的维护 ⑤处理废弃物
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月维护
①使用仪器厂商提供的软件执行检查程序，并打印检 查结果报告归档；
分析模块
是检测系统的核 心，主要包括预 清洗区、测量区 、试剂区、耗品 区。
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四、性能评价
目前应用于临床检 验的发光免疫分析 仪有很多种类，具 有检测速度快、精 度好、重复性高、 条码识别系统、24 小时待机、系统稳 定等特点。
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四、性能评价
项目
测定速度 最小检测量 重复性 全自动化学发 光免疫分析仪 60~180个/h 10-15g/ml CV≤3% 全自动微粒子 化学发光免疫 分析仪 >100个/h ≥10-15g/ml CV≤3% 全自动电化学发 光免疫分析仪 >80个/h ≥10-15g/ml CV≤3%
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发光免疫分析的基本种类及常用标记物
种类
化学发光免疫分析 电化学发光免疫分析 微粒子化学发光免疫 分析
常用标记物
氨基酰肼类及其衍生物，如5-氢基邻苯二 甲酰肼(鲁米诺)等 三联吡啶钌 二氧乙烷磷酸酯（金刚烷）等
化学发光酶免疫分析
生物发光免疫分析
辣根过氧化物酶
荧光素
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（二）常用的发光免疫分析仪的特点
结果 测报告，以标准模式发送结果 卸载标本，清理废弃物，清洗管路后，关闭 46 主电源，关闭供水系统 关机
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（二）仪器的维护
1．日保养 保持机器外壳干净。检查系统基本状态 ，之后再 按保养程序进入清洗系统进行清洗针。 2．周保养 检查主探针上、下导轨，进行特殊清洗 。每周保养后一定要做系统检测。
采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术 相结合，是一个全自动、随机存取、软件 控制的智能分析系统。（雅培） 采用微粒子化学发光技术对人体内的微量 成分以及药物浓度进行定量测定。（贝克 曼）
全自动化学发光 免疫分析仪
全自动微粒子化学 发光免疫分析仪
磁性微珠包被采用“链酶亲和素-生物素” 全自动电化学发光 新型固相包被技术，使检测的灵敏度更高， 免疫分析仪 线性范围更宽，反应时间更短。（罗氏）
②检查所有管路及电源线是否有磨损及破裂;
③检查样品注射器及与之相连探针是否有泄露及破损;
④检查微孔探测器是否有堵塞物;
⑤检查支撑机械臂的轨道是否牢固，并检查机械臂及 其轨道上是否有灰尘。
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（三）常见故障处理
1．洗板头堵塞 此故障在该分析仪最为常见
2．加样注射器和硅胶管连接处漏水或脱落
3．开机自检时报试剂盘错误
液路动力系统
软件控制系统
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温育箱
反应板
存储器
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X-Y头架
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样品架 50根装 50×3
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4根独立 上下 吸移管
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检
测 光
纤
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反应板
反应板 夹具
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清 洗 装 置
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供水箱
废水箱
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四、性能评价
目前国内已经初步建立起一套酶免疫分析仪 性能的评价体系。 1．噪声检测 2．准确度
3．月保养 每月用专用不锈钢小刷刷洗1次主探针、 标本采样针、试剂针的内部。生理盐水反复冲洗 针内部，针外部用酒精擦拭干净，然后上好针。
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（三）常见故障处理
全自动的发光分析仪一般都具备很好自我诊断功 能，一旦有故障发生时，仪器一般都能自动检测 到，显示错误信息并伴有报警声。 1．压力表指示为零
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二、发光免疫分析的工作原理
（一）全自动化学发光免疫分析仪
这种免疫分析技术又称为微量倍增技术，包括：
①竞争法：多用于测定小分子抗原物质。 ②夹心法：多用于测定大分子的抗原物质。
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（二）全自动微粒子化学发光免疫分析仪 应用经典的免疫学原理，小分子物质采用竞争法或 抗体捕获法进行测定，而大分子物质采用夹心法 。
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第一节
酶免疫分析仪
酶免疫分析（enzyme immunoassay，EIA）
目前临床免疫检验最常用 的分析技术，具有灵敏度 高，特异性强，试剂稳定 ，操作简单、快速且无放 射性污染等优点。
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一、酶免疫分析仪的分型
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（一）酶免疫分析技术的分类
根据抗原抗体反应后是否需要分离结合与游离的 酶标记物，可分为：
均相酶免疫分析法
测定对象主要是激素、药物 等小分子抗原或半抗原，其 测定模式为竞争抑制法，无 需分离结合和游离的酶标记 物。主要有酶扩大免疫测定 技术和克隆酶供体免疫测定 技术两种方法。
非均相酶免疫分析法
需采用适当的方式将游离的和 结合的酶标记物加以分离，可 分为液相酶免疫法和固相酶免 疫法两种，后者称为酶联免疫 吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）。
第十章 免疫分析相关仪器
主讲人：周振华
教学基本要求
掌 握（1）免疫分析相关仪器检测的基本原理 （2）免疫分析相关仪器的基本结构
（3）免疫分析相关仪器的使用与维护