结核病实验诊断研究进展
[6 G o c A,oa JPl eae hi atni te e t no m— 1] hs i R R i .o m rs an ec o t i f i sn s y c r i nh d e o c c m t ts n i ua n u l e s J . a cr 19 ,8 1 :0 o a as r e s e a dc c l i r t gt o cl 【 ] C e ,9 6 7 ( ) 1- nr l n
结 核 病 实 津 西 青 医 院 , 津 308 ) 天 天 030
中国 分 类 号 : 5 R2 文 献 标 识 码 : A 文 章 编 号 :0 62 8 ( 0 7 0 -2 30 10 .0 4 2 0 ) 30 3 -2
摘要 : 目前 , 核 病 发 病 率 在 全 球 逐 年 提 高 。 实验 室检 验 是 结 核 病 最 客 观 、 重 要 和 最 科 学 杆 菌 种 鉴 定 技 术 进 一 步 扩 大 应 用 范 结 最 的 诊 断 方 法。 传 统 的 检 验 方 法 均 存 在 着 不 同程度 的缺 陷 。 如抗 酸 菌 涂 片镜 检 灵 敏 度 低 , 枝 杆 围 , 结 核 病 的 I 检 验 更 趋 准 确 , 分 使 临床 但 菌分 离培 养 特 异 性 差 等 。 随 着 结 核 菌 蛋 白抗 原 的研 究和 应 用 , 胞 免疫 学 技 术 的 应 用 及 分 子 生 也 存 在 着 不 足 。 如 : 酸 菌 涂 片 存 在 细 抗 物 学 的研 究 为结 核 病 的诊 断 技 术 提 供 了更 科 学 的 方 法 。 随 着 多重 耐 药结 核 菌 感 染 率 的 升 高 , 单
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医 学 综 述 2O O7年 2月第 l 卷 第 3期 3
M dclRcpua ,e 07 V lI, . ei eai le Fb20 , o a t t
・
23 ・ 3
tece ohrp n ̄v c atccr nm [] A nSr no, i hm teayi v n d a e gsi ac o a J . n ugO cl r i
l 6.
[]Ci hm,96 4 () 16-3 1 J .l C e 19 ,2 9 :3918 . n 【 8 B s nS N l Pt l o u n t v vl r sr t n p l— l ] ut A, o n T. ia s fq a ta e r e e t n c p o o i a f l i t c p a ii i s y n ri c a ec o [ j JBo l eh 2 0 , 5 3 : 5 —6 . l s  ̄ h i rat n J . im c ,0 4 1 ( ) 15 16 e M n i o T 【9 E p J U d爪 ,l n L e . e l i e P R i c ncl i o i l ] s yM , l So M,t R a- n C l i c b— a Tl n i am r o g: p l a os frru n a oa r et [ j C n Mi bo l y api t n o o t e l rt y t i o ci i b o s n J . l c il g i o r
R v 2 O l ( ) 152 6. e ,O 6,9 1 :6 .5
[ 7 P l yT , r r nHF B u s E. o ua adi m n lg a d t — 1 ] ek J Fi s , rn e e c D M l lr u o i l e c e n m o c e c
依 据 。未 来 的结 核病 实 验 诊 断将 是 标 准 化 的 常 规 技 术 与 完 善 的 高 新技 术 的和 谐 统 一 。
P o rs fL b r tr ig oi i u e c l i L i ig. Xq, H si li T N n, rg es a o ao y D a n s n T b r uo s o s s U X- n ( i  ̄ o t i i u r i pa n a n 易 标 准 化 的 不 足 等 。 3 0 8 , hn ) 0 30 C i a A sr c :o a , h c e c f u ecls ces gy a a e er Lb t tst ot be — 2 结 核 病 实验 窒诊 断的 进 展 b ta tT d y T ei i n eo t ruoi i i rai er f r a . a s i h m s oj nd b ssn n t y e e c
t n o i u ai u r c l d mir mea ts s f m o i u r i f cr lt o c g n tmo el a c o tsa e r sn o s l tmo s d
收稿 日期 : 0 60 . 2 0 .52 修 回 日期 :0 6 1-9 4 2O . O 2
着 特 异 性 差 、 敏 度 低 和 不 能 鉴 别 抗 灵 酸 菌 死 活 的 缺 点 ; 枝 杆 菌 分 离 培 养 分 存在着特异 性差 和需时 长的 缺点 ; 菌 种鉴定和药 敏试验 存在操 作 复杂 , 不
一
常规 药敏 实 验 已经 不 能适 应 临床 需 要 , 的 药 敏 实 验 方 法 为 结核 病 的临 床 用 药 提 供 了可 靠 的 新 关键词 : 核病; 结 实验 室诊 断 ; 测 技 术 检
奶牛结核病实验室诊断技术研究进展
品传 染 给 人 和 其 他 动 物 . 害 严 重 . 世 界 动 物 卫 生 危 被
组 织 ( I 列 为 B类动物 疫病 . 国将 其列 为二 类动 物 O E) 我
21 传 统 的结核 菌素 皮 内变 态反 应 ( TP D) . O ,P 0 T是 老 式皮 内变态 反应 .P P D是 目前 公 认最 有 效
通 讯 作 者 : 文平 。 李
此 类方 法均 是 利用 抗 原抗 体反 应 检测 针对 牛 结核
分 枝杆 菌抗 原 的循 环抗 体 [ 目前 用 于检 测 的抗 原有 6 1 。
P D E AT一 P1 P S 6 CF 0 MP 5 B 9 MP 6 B 4 MP 7 B8 、 B 0 MP 0
4 20 ; 2 5 9
3湖南株 洲市 畜牧水产 局 , 洲 . 株
中 图分类号 :8 82 . 2 文献 标识 码 : 文 章编号 :0 4 4 6 (0 9 0 — 0 8 0 ¥5 . 1 3+ A 10 — 2 4 2 0 )4 0 3 — 2 牛结 核病 ( oieT bru s ) 由牛 分枝 杆 菌 引 B v u ee l i 是 n os 起 的 一种慢 性 传染 病『 l 1 。该病 传染 性 强 . 且能 通 过奶 制 有 1%~ 0 0 2 %的病 例结 核菌 培养 失败 同时 由于各种条 件 的影 响 . 阳性 率较难 提 高
疫病 。牛结核病 的诊断大体上可归为两类 : 一是 临床症状
诊断 ; 二是 实验 室诊 断 , 括 细菌 学检 测 , 涂 片镜检 、 包 如
的方 法 。 也是 被世 界 动物 卫生组 织 ( I 确定 的法定 检 O E)
疫方 法 。 被世界各 国接受 和采用 的方 法翻 。它主要是用 提
结核分枝杆菌感染的实验室诊断进展
[ 6 P l T , teh f R, sM ,ta Nu7 d l e e ai 3 3 os w O tn of Vo e 1 r7mo ua sh Pt . t c
差 异却很 大 , 无法 区分 死菌 和活 菌 。而近 年 国外 且
菌 生长 指 示 管 ( atcMG T9 0 液 体 培 养 系 统 进 B ce— I 6 ) 行 培养 分别仅 需 1 5天和 1 . 2 9天[ ’] 而且 均 可 用 1“ , 。
于药物 敏 感 试 验 的 检 测 。B ce- B 6 atcT 4 0系统 是 采
机肽 展示技 术在 结核 病方 面主要 用 于筛选 重要蛋 白 质活 性配 体 , Sg Sg atr 和 热 休 克 蛋 白 如 iH( imafco )
Hs l . ( ets o k po e ) 这 类 特 征 性 蛋 白在 p 6 3 h a h c r ti , n 新药 研制 和免疫 学诊 断试 剂 的研 究方 面具 有广泛 的
sn微 生 物 实 验 室 开 发 的 B ce— 4 0和 分 枝 杆 o atc TB 6
对 于结核 病 的早 期诊 断和快 速指 导 临床用药 具有 重 要 意义 。涂 片镜 检 具有 良好 的特异性 、 简便 、 速等 快 特点, 但是 作 为结核 病 诊 断 的 ‘ 金标 准 ’ 其敏 感 性 的
l i meaoimtru h sp rsi fS B cat i J . i d tb l ho g u pes n o RE Pl ci t ] p s o v y[
Bi c e Bi ph sRe mm u 2 08, ; 6 4 9 0 o h m o y s Co n, 0 22 3 6( ): 1 .
γ干扰素释放分析T-SPOT.TB在诊断结核感染中的研究进展
r37 c 分别 编码 相应蛋 白。6K v89 , D早 期分 泌靶 向抗
原 (al scen ni nt gt , S T6 是 R 1区 er ert gat e re 6 E A . ) y i g a . D
发现较 早 的小 分 子 分 泌 型 蛋 白 , r37 由 v85基 因 编
码, 全长 2 5 碱 基 对 , 码 9 8个 编 5个 氨基 酸 。 19 9 8年 B r e 6 在研究 ea e ht t [等 3 st 因表 达 调控 机 制 时 , 现 6基 发
了l h 因 , p基 因 即 r 84基 因 , 于 ea p基 l h v7 3 位 st 因 6基
上游 3 b 处 , ea 4 p 和 s 6基 因处 于 同一 操 纵 单 元 。编 t 码 10个 氨 基 酸 , 白分 子 量 大 小 约 为 lk 由 于 0 蛋 O D, 其基 因产物 在早 期培养 滤液 中出现 , 因此称 为 IK OD 培养滤 液 蛋 白 (ut eft t po i一 , F cl r i r e r e 1 C P一1 ) u la t n 0 0。 e t基 因和 c 1 因 由 同一 操 纵 子 调 控 , 行 协 s6 a f 0基 p 进 同转 录。研究 证 实结 核 R 1区编码 抗 原 E A . D S T6和 C P1 F .0具有 良好 的免 疫 活性 , 够用 于 诊 断结 核 感 能
中国实验诊断学
21年 1月 00 2
第 l 4卷
第 l 2期
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2 5 。— 06 _ _ — _
ห้องสมุดไป่ตู้
文 章编 号 : 0 — 272 1)2 05— 4 1 7 4 8 (00 1 —26 0 0
结核病实验室诊断技术研发进展
结核杆 菌培养是诊 断结核病 的金标 准 , 但传 统 的罗 氏培 养需要 4~ 6周 的培养方能 检测 到结 核菌 的生长 。 目前 正在
推广 的液体培养系统 仅需 1 —3周 , 更加敏 感 、 快速 。早 期 的
B C E -6 由于具有 放射 性 而 限制 了其应 用 。M I A T C4 0法 G T为 m cbc r l r t idct b yoat i o h n i o t e的简称 , ea g w a ru 其原 理是 J试 管 : 底部的荧光复合物与氧气结 合时处 于淬灭状 态 , 当结核 菌生 长时 , 氧气逐渐减少 , 荧光 复合 物就发出荧光 而被 检测 到。 自 动化的 MGT还可 加入 临 界浓 度 的抗 结核 药物 进 行药 敏 分 I 析。B D公 司 推 出的 B C E - I 6 A T C MGT 90全 自动分 枝杆 菌 培 养/ 鉴定/ 药敏系统操作简便 ; 阳性标本检出时间平均为 9天 ;
诊断性能优于标准荧光显微镜。多项研究经 m t e a分析显示 : L D检查 的敏感 性 比传 统镜 检方法 高约 1 %… 。同时具 备 E 0 荧光染色的优点 , 且花 费低 、 可实施性 强 , 可更广泛 的常规 使 用。中国卫 生部 一 茨基金会 和中国卫 生部 一 国梅 里埃 基 盖 法 金会结核病防治项 目已准备将 L D显微 镜在 我 国基 层实 验 E
室推广。 二 、 枝 杆 菌 培 养 技 术 研 发 进 展 分
扩增反应在 等温条 件下进行 , 不需 要专 门的 P R仪 , C 只需一 个水浴 锅或 简单 的保 温桶 和温度计 ; 其结果可以肉眼读值 : 通 过 生成 的焦磷 酸盐置换锰 离子 , 使与之结 合的钙黄绿素 ( a— Cl ci) e 游离 而发 出荧光 J也可通过 加人 核酸燃料 S B re n , Y RG en I 或产生 白色混浊焦磷酸镁沉淀进行 肉眼观察或实时浊度计 观察 。其对于发展 中国家而言是一项分子检测结核杆菌的很 有前景 的方法 。 文献报 道 L MP的 总 特 异 性 为 9 % J 总 敏 感 性 为 A 9 , 8 .% , 中在痰涂 片 阴性 、 82 其 培养 阳性 病 例 中 的敏 感性 只 有 4 . % , 在 痰 涂 片 阳性 、 养 阳 性 病 例 中 的 敏 感 性 达 88 但 培 9 . % 。中国卫生部 一盖茨基金会和 中国卫生部 一法 国梅里 77 埃基金会结核病防治项 目已将 L M A P列 入我国基层实验室推
结核病的实验室诊断方法学比较及进展
病流行病学抽样调查结 果显示 , 结核病 年发病患者数约为 1 3 0万。正因为我国结核病发病率居高不下 因此 如何快速检
验结核病对于我国控制及治疗结核病起到 了至关重要的作用。作 为医学检验工作者要充分掌握新 知识 、 新技术 , 在实 践 中灵活运用 , 优势互补 , 予找准确度高 、 特异性好 、 敏感度高 、 简便快捷 、 经济的结核分枝杆菌检测新方法 。 本 文从 细 菌学检测 , 免疫学检测和分子生物学检测 等方 面 , 对各种检 测方法 的优缺 点进行综述 , 并对结核病 实验室诊断技术进
mo l e c u l a r b i o l o g y d e t e c t i o n, t h e a d v a n t a g e s a n d d i s a d v a n t a g e s o f v a r i o u s d e t e c t i o n me t h o d s a r e r e v i e we d,
Ab s t r a c t : Tu b e r c u l o s i s i s a n i n f e c t i o u s d i s e a s e c a u s e d b y My c o b a c t e r i u m i n f e c t i o n, i s a s i n g l e p a t h o g e n i n f e c t i o n d e a t h s c a u s e d mo s t o f t h e d i s e a s e . Re s u l t s t u b e r c u l o s i s e p i d e mi o l o g i c a l r a n d o m s a mp l i n g s u r v e y i n C h i n a i n 2 0 1 0 s h o w e d t h a t t h e n u mb e r o f a n n u a l i n c i d e n c e o f t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s i s a b o u t 1 3 0 0 0 0 0 . B e c a u s e o f t h e h i g h r a t e o f T B i n c i d e n c e i n o u r c o u n t r y S O h o w f a s t t h e i n s p e c t i o n o f t u b e r c u l o s i s t o t h e i mp o r t a n t r o l e i n T B c o n t r o l i n C h i n a a n d t h e t r e a t me n t . As a me d i c a l l a b o r a t o r y wo r k e r s t o f u l l y ma s t e r n e w k n o w l e d g e a n d n e w t e c h n o l o g y , f l e x i b l e u s e o f c o mp l e me n t a y r a d v a n t a g e s i n p r a c t i c e , a n e w me t h o d f o r d e t e c t i o n o f My c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s b y t h e e c o n o my f i n d h i g h a c c u r a c y, g o o d s p e c i f i c i t y , h i g h s e n s i t i v i t y , s i mp l e a n d f a s t .T h i s a r t i c l e f r o m t h e b a c t e r i o l o g i c a l d e t e c t i o n , i mmu n o l o g y t e s t i n g a n d
结核病血清学诊断进展
结核病血清学诊断进展结核病的细菌学检查目前是结核病实验室诊断的金标准。
由于痰涂片阳性率较低,镜检需要经验,难以区分环境分枝杆菌造成的假阳性;痰培养需时太长,因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限。
随着分子生物学技术的迅速发展,用高度敏感的方法检测结核菌及其特异性DNA 片段,如PCR、生物探针和基因芯片等,需要相应的检测设备和检测费用高未能广泛推广。
血清学诊断技术有其固有的优势,如操作简便、快速、便于推广、无需特殊精密仪器,已有多种纯化的特异性抗原可采用,可以发展成自动化检测,尤其是对痰培养阴性和肺外结核病有较为重要的辅助诊断价值,受到广泛的重视。
本文从靶抗原的选择和检测技术的改进等方面综述了结核病血清学诊断的现状和进展。
抗原的选择特异性的抗原是提高血清学检测敏感性、特异性的重要环节。
应用于血清学诊断的理想抗原应具有种的特异性及强的免疫原性。
尤其是结核分枝杆菌全基因组序列测定以后,单克隆抗体、分子生物学、蛋白质组学和比较基因组学等技术的应用,已获得多种纯化和特异性的诊断抗原。
现将当前最受关注的抗原及其临床评估结果归纳如下:1.脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原 脂阿拉伯甘露聚糖是分枝杆菌细胞壁的重要组成部分,是属特异性抗原,具有较强的免疫原性和免疫调节功能,可刺激机体产生相应的抗体,因而是结核病的血清学诊断应用较广的抗原。
有关LAM抗原的应用报道很多, Antunes等用美国生产的结明(MycoDot TM)试剂盒检测活动性肺结核病人的敏感性为63.0%,特异性为92.4%,认为检测LAM抗体是结核病一项有效的辅助诊断方法。
2.A60(antigen 60) A60是从牛分枝杆菌胞浆中提取的一种大分子物质,是脂质蛋白和多糖的复合抗原。
Wu等用ELISA法检测了178例活动性肺结核患者和151例其他疾病患者血清中的IgG A60,根据受试者工作特性曲线(ROC)取261.2单位为截切值(cutoff point),其敏感性和特异性分别为49.4%和79.5%,认为胸部X片异常的患者结合IgG A60阳性将有助于肺结核病的准确临床诊断。
结核病的临床诊治进展讲课文档
细胞数量就可以判断机体是否存在结核杆菌感染。
第18页,共40页。
细胞免疫学诊断--IGRAs试验
由于效应T细胞存活时间短(6周左右),具有特异性 ,可以作为机体是否正处于被感染的指标。 特异性好:美国FDA数据:特异性97.1%(297/306)
国内临床数据:特异性94.1%(478/508) 灵敏度高:美国FDA数据:灵敏度95.6%(175/183)
国内临床数据:灵敏度95.3%(624/655) 快速简便:简单的血液检测,隔天报告结果。
第19页,共40页。
细胞免疫学诊断--IGRAs试验
❖ 敏感性高:结核感染引起的细胞免疫反应早于 细菌学及影像学表现;
❖ 采血量要求:2岁以下儿童2-3ml,其他患儿4-6ml,免疫低下/
免疫抑制患者6-8ml; ❖ 样本室温(15—25度)保存和运输,不得冷冻/冷藏;
❖ 样本采集后4小时内送到实验室,8小时内完成标本处理; ❖ 1周内有输血史或做过PET-CT的患者会影响血液淋巴细胞分离,大
剂量免疫抑制剂使用者,建议1-2周后在进行检测; ❖ 运输过程中防止颠簸,避免样本溶血影响实验结果。
第24页,共40页。
MTB潜伏感染管理指南
❖ (2)对于羁押人员、医务人员、高负担国家的 移民、无家可归及药物滥用者开展系统性 MTB潜伏感染的检测和治疗;(3)对于糖尿病 患者、嗜酒者、吸烟者及低体重者不建议开 展系统性MTB潜伏感染检测;(4)在检测 MTB潜伏感染前应询问是否有结核病症状, 必要时需进行X线或CT等检查。(5)推荐的治 疗方案包括:6个月或9个月INH,3个月INH+ 利福喷丁1次/w,3-4月INH+RFP。
IP—10的研究进展及在结核诊断中的价值
IP—10的研究进展及在结核诊断中的价值IFN-γ 诱导蛋白10 (IFN-γ inducible protein 10,IP-10)是属于CXC 类的趋化因子,主要由IFN-γ诱导产生。
I它的生物学功能包括募集中性粒细胞,促进多种细胞因子分泌,它还能抑制部分肿瘤生长。
其中募集中性粒细胞的作用尤为明显。
它诊断活动性肺结核的敏感性与特异性均高于干扰素,特别是对于免疫功能受损者,多项研究提示IP-10 的诊断结核性胸膜炎的效能与IFN-γ 相近。
IP-10 在各种疾病中,特变是在结核诊断中发挥了一定的作用,但其具体机制需进一步研究阐明。
标签:IP-10;结核;诊断IFN-γ 诱导蛋白10 (IFN-γ inducible protein 10 ,IP-10)是属于CXC 类的趋化因子,由IFN-γ诱导产生。
活化的成纤维细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞和各种淋巴细胞等30 多种细胞都可以产生IP-10。
它的生物学功能包括募集中性粒细胞,促进多种细胞因子分泌,它还能抑制部分肿瘤生长。
其中募集中性粒细胞的作用尤为明显。
感染性疾病如结核病、病毒性肝炎等、1 型糖尿病等内分泌系统疾病1 型糖尿病、以及恶性肿瘤等均发现这种趋化因子的作用与参与。
本文就IP-10在各种疾病中的作用,特别是对结核病的诊断价值进行综述。
1 IP-10 及其受体的结构与来源IP-10 (interferon-inducible protein-10 )是1985年Luster等在研究IFN-γ诱发的免疫应答时从U937细胞中克隆到的,由于N端的2个半胱氨基酸残基被一个非保守性氨基酸残基分割,它被归类于CXC趋化因子。
77 个氨基酸残基组成了IP-10,4个保守的半胱氨基酸残基组成了它的一级序列。
CXCR3是IP-10的受体,它属于一种G蛋白偶联的七亚单位穿膜受体,研究显示它的配体是CXCL10 / IP-10、6Ckine、CXCL11 / I-IAC和CXCL9 /Mig[1- 2]。
结核病实验室诊断技术进展
摘要:早期确诊和提高治愈率是控制结核病的现实目标。
结核病患者的发现率基本反映结核病发病趋势,而诊断技术决定了结核病患者的发现率水平。
当前对结核病的诊断主要依赖于患者的临床表现、影像学、病原学、血清抗体检测等技术。
近年来,结核病实验室诊断技术发展突飞猛进,然而,目前很多实验室对于结核病的诊断仍停留在痰涂片镜检、痰结核菌培养及PPD皮试等传统方法。
本文现将具有代表性的几项结核病实验室诊断新技术的进展进行综述。
关键词:结核分枝杆菌;实验室;诊断中图分类号R378.91+1,R52文献标识码A文章编号1674-1129(2012)06-0570-03doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2012.06.017·综述·结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)引起的结核病是常见的人类传染病之一。
约三分之一的世界人口曾经感染MTB,亚洲地区感染者占全世界的三分之二。
据WHO估计,2007年全球约有927万新发结核患者,175万人死于结核病,中国是全球22个结核病高发国之一,发病人数130万,居世界第2位,仅次于印度[1,2]。
结核病的实验室诊断是发现传染源的主要途径和手段,是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据,长期以来,结核病的实验室诊断主要依赖细菌学涂片和培养检查。
由于方法所限,严重影响了结核病的及时诊断,因此建立检测快速、灵敏度高、特异性强的诊断方法,对于结核病防治工作具有重要意义[3]。
现将近年来结核病实验室检测技术的进展综述如下。
1结核病病原菌检测技术1.1抗酸杆菌涂片镜检1.1.1萋-尼氏抗酸染色涂片萋-尼抗酸染色涂片镜检是经典的结核分枝杆菌检测方法,目前很多实验室仍然依靠此方法进行结核检测,但其灵敏度较低,仅20%~30%,而且此方法繁琐,假阳性和假阴性较高。
张立群对比了4种不同结核分枝杆菌检测方法,显示萋-尼抗酸染色涂片的阳性率为11.6%,灵敏度仅为26.3%[4]。
结核病实验室诊断技术研究进展
1 3 Ame r i c a n Di a b e t e s As s o c i a t i o n .c a l c re a i n d i bc a t e s . 2 0 1 0 . Di be a t e s Ca r e, 2 0 1 0, 3 3: 1 1 61 - .
1 2 Ca r n e t h o n MR, Bi g g s ML, Ba r z i l a y J, e t a 1 . Di a b e t e s a n d c o r o n a r y h e a t r d i s e a s e s a r i s k f a c t o r s f o r mo r t a l i t y i n o l d e r a d u l t s . Am J Me d, 2 0 1 0,
1 5 黄春 桃 , 杜万 红. 糖 尿病合 并冠心 病的研 究进展 . 医学 临床研 究 ,
2 0 1 1, 28: 7 41 - 7 4 3. 1 6 Sa t t a r N, P r e i s s D, Mur r a y HM , e t a 1 . S t a t i ns a n d is r k o f i n c i d e n t d i a b e - t e s : a c o l l a b o r a t i v e me t a — a n a l y s i s o f r a n d o mi z e d s t a t i n t ia r l s .L a n c e t , 2 0 1 0, 3 7 5: 7 3 5- 7 4 2.
业 , 2 0 1 2 , 7 : 1 8 9 — 1 9 0 .
