保健食品有助于改善骨密度功能检验方法2020
有助于改善骨密度功能检验方法
有助于改善骨密度功能作用检验方法根据受试样品作用原理的不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。
1 方案一
1.1 实验原理
机体中的钙绝大部分储存于骨骼及牙齿中，大鼠若摄入钙量不足会影响机体和骨骼的生长发育，表现为体重，身长，骨长，骨重，骨钙含量及骨密度低于摄食足量钙的正常大鼠。生长期大鼠在摄食低钙饲料的基础上分别补充碳酸钙（对照组）或受试含钙产品（实验组），比较两者在促进机体及骨骼的生长发育，增加骨矿物质含量和增加骨密度功能上的作用，从而对受试样品有助于改善骨密度的功能进行评价。
1.2 仪器和试剂
1.2.1 仪器：原子吸收分光光度计、骨密度仪（单光子骨密度仪或双能X线骨密度仪或相关仪器）、精密卡尺、动物解剖器械、动物天平、105℃烘箱。
1.2.2 硝酸，优级纯
高氯酸，优级纯
氧化镧，2%氧化镧溶液称取分析纯氧化镧（含量大于99.99%）25克，加75mL优级纯盐酸，加去离子水至1000mL。
钙标准溶液称取1.2486克分析纯碳酸钙（纯度大于99.99%），加50mL去离子水，加盐酸使之溶解。移入1000mL容量瓶中，加2%氧化镧溶液至刻度。此溶液1.00mL相当于500 g 钙。储于聚乙烯瓶中，4℃保存，临用时稀释。
1.3 实验方法
1.3.1 实验动物
出生4周左右的断乳大鼠，体重约60－75克，同一性别，每组8－12只。
1.3.2 基础饲料：用此基础饲料配制低钙对照组以及各剂量组。
表1 基础饲料配方（Ca2+计，调整Ca2+为150mg/100g饲料）
成分%
酪蛋白10.0
黄豆粉①15.0
小麦面粉54.0
玉米油或花生油 4.0
纤维素 2.0
混合盐② 2.6
混合维生素③ 1.0
氯化胆碱0.2
d1－蛋氨酸0.2
淀粉④11.0
①需高压处理后用
②混合盐：每kg混合盐中各组份含量：KH2PO4，501.4g；NaCl，74.0g；MgCO3，50.2g；乳酸亚铁，5.4g；乳酸锌，4.16g；MnCO3，3.5g；CuSO4·5H2O，0.605g；Na2SeO3，6.6mg；KI，
7.76mg；Cr3Cl·6H2O，0.292g；加蔗糖到1kg。
③混合维生素：每kg混合维生素中各组份含量：维生素A，400,000IU；维生素D3，100,000IU；
维生素E，500IU；维生素K，5mg；维生素B1，600mg；维生素B2，600mg；维生素B6，700mg；维生素B12，1mg；尼克酸，3g；叶酸，200mg；泛酸钙，1.6g；生物素，20mg；加蔗糖到1kg。
可根据各组待测受试物（或碳酸钙）的需用量调节淀粉用量。
1.3.3剂量分组及受试样品给予时间
实验设三个剂量组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，同时设一个低钙对照组（150mg/100g饲料）和与相应剂量受试物钙水平相同的碳酸钙对照组（如仅设一个碳酸钙对照组，推荐设立与高剂量钙水平相同的碳酸钙对照组）。用低钙对照组（150mg/100g饲料）饲料配制受试样品各剂量组和碳酸钙对照组。受试样品给予时间3个月。
1.3.4 受试物给予途径
经口灌胃给予受试物，无法灌胃时将受试物掺入饲料，并记录每只动物的饲料摄入量。
1.3.5.实验步骤
出生4周的断乳大鼠经适应期一周后，禁食12小时，称体重，按体重随机分组，分笼饲养。饮用去离子水以避免从饮水中获得钙。
1.4 观察指标
1.4.1 体重测定：
禁食12小时后，测定体重。每周一次。
1.4.2 股骨重量测定:
动物喂养3个月后处死，剥离出右侧股骨，于105℃烤箱中烤至恒重，称量骨干重。1.4.3 股骨骨密度测定:
用骨密度仪，（单光子骨密度仪或双能X线骨密度仪或其它相关仪器）测量股骨中点及股骨远心端的骨密度。
1.4.3.1 在股骨远心端及股骨中点画出标记以确定测量点。
股骨中点测量点的确定：测量股骨全长，通过其中点，沿横截面方向画一直线，此为股骨中点测量点（截面）。
股骨远心端测量点的确定：于股骨远心端关节凹槽最下缘处确定测量点，通过此点，画一与上述股骨中点处标记平行的直线，此为股骨远心端测量点（截面）。
1.4.3.2 测量前用骨模型对仪器进行校准。
1.4.3.3 经校准可以使用后，继续测定骨模型并与其标准值进行比较，误差不得超过3%。1.4.3.4 单光子骨密度仪或双能X线骨密度仪参数设定：
测定方式：精密
扫描次数：2次
扫描方式：自动
探测域值：99%
1.4.3.5 测量股骨中点及股骨远心端骨密度。
将待测骨放置于测量台上与骨密度仪探测头移动方向垂直；移动待测骨，令其待测点标记线与探测头移动轨迹于测量台上的垂直投影重合。开始测量，每点应重复测定两次，如两次结果不平行（误差大于10%），应当重新测量。将两次结果取平均值，以BW（骨宽）除BMC（骨矿物质含量），其结果即为BMD（骨密度）。
1.4.4 骨钙含量及饲料含钙量测定：
用原子吸收法测量。
1.4.4.1 样品采集与制备
1.4.4.1.1 饲料样品经均匀混合并过20目筛，在烘箱中烘干，置干燥器中冷却后称重，磨
细。注意防止在样品制备过程中的污染。
1.4.4.1.2 取大鼠一侧股骨在105℃烘箱中烘干至恒重后，置于三角瓶中进行消化。
1.4.4.2 样品消化
根据样品中钙的含量，准确称取0.300~1.00克，置于150mL三角瓶中，上盖小漏斗，加入混合酸（硝酸：高氯酸=4：1）15~20mL，在电热板上加热消化直至冒白烟并透明无色。酸液不够时可以再加入少量混合酸。消化液透明无色后加数毫升去离子水，煮沸以赶除剩余的酸，重复两次，最后消化液的体积不超过1mL。
消化样品时应同时作空白试验，加入与样品消化时相同体积的混合酸，在相同条件下消化。
1.4.4.3 测定
按照原子吸收分光光度计仪器说明书的步骤进行。测定液、标准溶液和空白均用0.5%氧化镧溶液稀释，定容。
1.5 数据处理及结果判定
实验数据采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F值 结果判定 骨钙含量或骨密度显著高于低钙对照组且不低于相应剂量碳酸钙对照组，钙的吸收率不低于碳酸钙对照组，可判定受试物具有有助于改善骨密度功能的作用。 2 方案二 2.1 实验原理 雌性成年大鼠切除卵巢后，骨代谢增强，并发生骨重吸收（破骨）作用大于骨生成（成骨）作用的变化。这种变化表现为骨量丢失，经过一定时间的积累，可以造成骨密度降低模型。在建立模型的同时或模型建立之后给模型实验组大鼠补充受试样品，通过受试物抑制破骨或促进成骨等骨代谢调节作用，观察其在增加骨密度功能及骨钙含量的效果，从而对受试样品有助于改善骨密度的功能进行评价。 2.2 实验动物 Wistar或SD雌性大鼠，300克左右，实验前适应1周。 2.3 饲料配方 参照AIN93饲料配方配制半成品饲料，用适当的物质替换饲料中来源于大豆的成分，以避免大豆异黄酮等植物雌激素对实验结果的干扰。参考配方见下表。 表2 参考饲料配方 成分含量（%） 酪蛋白23 DL-蛋氨酸0.3 玉米淀粉32 蔗糖30 纤维 5 玉米油 5 混合矿物盐1 3.5 混合维生素2 1 二酒石酸胆碱0.2 1 含有（mg/kg饲料）：MnSO4 110，CuSO4 0.8，FeSO4 1.2，KI 18.0，ZnSO4 2，960，CaHPO4 2，890，MgSO4 1.25×104。 2 含有（/kg饲料）：VitA 1.4×104IU，VitD 1，500 IU，VitE 120mg，VitK 3mg，VitB1 12mg，VitB2 20mg，VitB6 12mg，VitB12 0.03mg，烟酸60mg，泛酸24mg，叶酸6mg，生物素0.54mg。 2.4 仪器和试剂 2.4.1 仪器：原子吸收分光光度计、单光子骨密度仪或双能X线骨密度仪或其它相关仪器、精密卡尺、动物解剖器械、动物天平、105℃烘箱。 2.4.2 试剂 硝酸，优级纯 高氯酸，优级纯 氧化镧，2%氧化镧溶液称取分析纯氧化镧（含量大于99.99%）25g，加75mL优级纯盐酸，加去离子水至1000mL。 钙标准溶液称取1.2486g分析纯碳酸钙（纯度大于99.99%），加50mL去离子水，加盐酸使之溶解。移入1000mL容量瓶中，加2％氧化镧溶液至刻度。此溶液1.00mL相当于500 g钙。储于聚乙烯瓶中，4℃保存，临用时稀释。 2.5 实验设计和实验剂量 2.5.1卵巢切除术及术后筛查 大鼠经腹腔注射30 mg/kg BW的戊巴比妥钠溶液麻醉，腹位固定后于腹中线距阴道口3-4cm处去毛，分别用碘酒和酒精消毒，待稍干后切开皮肤和腹肌约2-3cm，切口视野可见白色脂肪，拨开脂肪层找到子宫后，轻轻将一侧子宫角拉出，在其末端可见被脂肪团包裹的卵巢。分离脂肪团，便可见到粉红色或黄红色的卵巢，以止血钳夹住卵巢，然后将卵巢下输卵管（包括脂肪）用丝线结扎，剪除卵巢（检查是否完全剪除），顺势将子宫角送回腹腔中.同法剪除另侧卵巢。腹肌和皮肤分层缝合后，再次消毒。最后经后肢肌肉注射2万U青霉素。也可经背部肋脊角切口行卵巢切除术。为保证手术成功，大鼠摘除卵巢后5天，进行阴道涂片检查（用滴管吸取少量生理盐水，轻轻插入阴道1-2cm，冲洗数次后吸出，涂于玻片上，镜下观察），每天一次，连续7天，以检查大鼠卵巢是否完全摘除；如涂片呈动情反应（镜下见大量半透明、扁平的表皮细胞），表明动物卵巢切除不完全，应弃去不用。有经验者可不进行术后筛查。 2.5.2 动物分组 大鼠经适应性饲养后分组，实验动物按体重随机分组为假手术组、切除卵巢组＋溶剂组、切除卵巢＋低剂量受试物组、切除卵巢＋中剂量受试物组、切除卵巢＋高剂量受试物组。必要时设切除卵巢＋阳性对照组（具雌激素活性的物质）。每组动物8－12只。 2.5.3 剂量分组及受试样品给予时间 如果受试物为不含钙产品，实验设三个剂量组和一个阴性对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。如果受试物是不以补钙为主（可少量含钙）的产品，在根据成人每公斤人体推荐量设置三个剂量受试物组的基础上，可再设与相应受试物钙水平相似的碳酸钙对照组。（如仅设一个碳酸钙对照组，推荐设立与高剂量钙相同的碳酸钙对照组。）各组动物手术后3-5天开始灌胃给予受试物或溶剂，无法灌胃时将受试物掺入饲料，并记录每只动物的饲料摄入量。要考虑饲料中是否存在大豆异黄酮对结果的影响。受试物给予时间3个月。 2.6 观察指标 2.6.1 体重 2.5.2 骨钙测定 2.5.2.1 样品采集与制备 取大鼠一侧股骨在105℃烘箱中烘干至恒重后，称量骨干重，置于三角瓶中进行消化。 2.6.2.2 样品消化 根据样品中钙的含量，准确称取0.300~1.00g，置于150mL三角瓶中，上盖小漏斗，加入混合酸（硝酸：高氯酸=4：1）15~20mL，在电热板上加热消化直至冒白烟并透明无色。酸液不够时可以再加入少量混合酸。消化液透明无色后加数毫升去离子水，煮沸以赶除剩余的酸，重复两次，最后消化液的体积不超过1mL。 消化样品时应同时作空白试验，加入与样品消化时相同体积的混合酸，在相同条件下消化。 2.6.2.3 测定 原子吸收法或化学法测定骨钙含量。 2.6.3 骨密度测定：用骨密度仪测定股骨中点和股骨远心端骨密度。 2.6. 3.1在股骨远心端及股骨中点画出标记以确定测量点。 股骨中点测量点的确定：测量股骨全长，通过其中点，沿横截面方向画一直线，此为股骨中点测量点（截面）。 股骨远心端测量点的确定：于股骨远心端关节凹槽最下缘处确定测量点，通过此点，画一与上述股骨中点处标记平行的直线，此为股骨远心端测量点（截面）。 2.6. 3.2 测量前用骨模型对仪器进行校准。 2.6. 3.3 经校准可以使用后，继续测定骨模型并与其标准值进行比较，误差不得超过3%。2.6.3.4 骨密度仪参数设定 测定方式：精密 扫描次数：2次 扫描方式：自动 探测域值：99% 2.6. 3.5 测量股骨中点及股骨远心端骨密度 将待测骨放置于测量台上与骨密度仪探测头移动方向垂直；移动待测骨，令其待测点标记线与探测头移动轨迹于测量台上的垂直投影重合。开始测量，每点应重复测定两次，如两次结果不平行（误差大于10%），应当重新测量。将两次结果取平均值，以BW（骨宽）除BMC（骨矿物质含量），其结果即为BMD（骨密度）。 2.7 数据处理和结果判定 实验数据采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F值 结果判定 不含钙的产品，卵巢切除+溶剂组骨钙含量或骨密度显著低于假手术组，表明造成大鼠骨密度低下模型；卵巢切除+受试物组的骨钙含量或骨密度较卵巢切除+溶剂组显著增加，而其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除+溶剂组，可判定受试物具有有助于改善骨密度功能作用。 不以补钙为主（可含少量钙）的产品，卵巢切除+溶剂组骨钙含量或骨密度显著低于假手术组，表明造成大鼠骨密度低下模型；卵巢切除+受试物组的骨钙含量或骨密度较卵巢切 除+溶剂组显著增加，且不低于相应剂量的CaCO3对照组，而其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除+溶剂组，可判定受试物具有有助于改善骨密度功能作用。 附录：钙吸收实验 1 原理 在稳定状态下测定大鼠摄入的钙量及粪便中排出的钙量，两者的差值即为表观吸收的钙。 钙的表观吸收率（%）=（摄入钙-粪钙）/摄入钙×100% 由于钙的吸收率受鼠龄、性别、饲料成分及钙摄入水平的影响较大，应在其他影响因素尽可能相同条件下，将受试样品与碳酸钙的吸收率进行比较，对受试样品钙的吸收率进行评价。 2 仪器及试剂 2.1 代谢鼠笼 2.2 动物天平 2.3 原子吸收分光光度计：具火焰法测定装置氘灯背景扣除 2.4 硝酸：优级纯 2.5 高氯酸：优级纯 2.6 2%氧化镧溶液：称取分析纯氧化镧（含量>99.99%）25g，加75mL优级纯盐酸，加去离子水至1000mL。 2.7 钙标准溶液：称取1.2486g分析纯碳酸钙（纯度大于99.99%），加50 mL去离子水，加盐酸使之溶解。移入1000 mL容量瓶中，加2%氧化镧溶液至刻度。此溶液1.00mL相当于500 g钙。储于聚乙烯瓶中，4℃保存，临用时稀释。 3 实验方法 3.1 实验动物：出生4周左右的断乳大鼠 3.2 基础饲料：低钙饲料配方见表1 4 动物分组及剂量设置 实验设三个剂量组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，同时设一个低钙对照组（150mg/100g饲料）和与相应剂量受试物钙水平相同的碳酸钙对照组（如仅设一个碳酸钙对照组，推荐设立与高剂量钙水平相同的碳酸钙对照组）。用低钙对照组（150mg/100g饲料）饲料配制受试样品各剂量组和碳酸钙对照组。 4.1 生长发育 出生四周的断乳大鼠经适应期1周后，分笼饲养4周。每组至少有同一性别动物8只。饮用去离子水以避免从饮水中获得钙。每周测量身长、体重一次。 4.2 代谢实验 实验3周后进行3天钙代谢实验。记录3天进食量，收集72小时粪便，测定饲料及粪便中钙含量。 4.3 饲料及粪便中钙的测定方法：用原子吸收分光光度法进行测定 4.3.1 样品采集与制备：饲料样品经均匀混合并过20目筛；鼠粪样品在80℃烘箱中烘干，置干燥器中冷却后磨细。注意防止在样品制备过程中的污染。 4.3.2 样品消化：根据样品中钙的含量，精确称取烘干磨细的均匀样品0.30-1.00g，置于150mL 三角瓶中，上盖小漏斗。加入混合酸（硝酸:高氯酸=4:1）15-20mL，在电热板上加热消化直至消化液冒白烟并透明无色。酸液不够时可以再加少量混合酸。消化液透明无色后加数毫升 去离子水，煮沸以赶除剩余的酸，重复两次，最后消化液的体积不超过1mL。消化样品时应同时作空白实验，加入与受试样品消化时相同体积的混合酸，在相同条件下消化。消化液转移至容量瓶并用去离子水定容。 4.3.3 测定：按照原子吸收分光光度计仪器说明书的步骤进行。测定液、标准溶液和空白均用氧化镧溶液稀释。 4.4 计算 摄入钙（mg/d）=饲料中钙含量（mg/g）×饲料消费量（g/d） 粪钙（mg/d）=粪便中钙含量（mg/g）×粪便排出量（g/d） 4.5 饲料及鼠粪中钙的测定也可用滴定法进行（详见GB 12398.90）。 5 数据处理及结果判定 数据采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值 受试样品组动物喂养4周时的身长、体重如显著低于相同钙摄入水平的对照组动物，或受试样品所含钙的吸收率显著低于相同钙摄入水平碳酸钙的吸收率则应判定为不能作为补钙产品。 受试样品钙的吸收率如与相同钙摄入水平的碳酸钙相近而无显著性差异，受试样品可以作为补钙剂。 受试样品钙的吸收率若在两种钙摄入水平上均显著高于相同水平碳酸钙，则可以判定受试样品为“钙吸收率较高”。 长春市保健食品经营许可实施标准 第一章总则 第一条经营保健食品应取得《食品流通许可证》，按照批准的名称、经营场所、负责人、主体类型、许可范围等许可事项从事保健食品经营活动。 第二条申请《食品流通许可证》时，应明确经营场所的具体地址。 第三条申请《食品流通许可证》时，应明确经营方式和拟经营保健食品的名称、批准文号、生产许可证号、生产企业名称。审批部门应核对产品信息，用以审核确定许可范围。企业变更经营范围应向发证机关提出申请。 第四条从事保健食品经营和质量管理工作的人员，应符合有关法律法规规定，不得有相关法律法规禁止从业的情形。 第五条保健食品经营企业[专卖店（含批发）兼营店（大型商场、连锁超市、药店）]变更许可事项应向具有审批权限的食品药品监督管理部门提出申请。 第六条《食品流通许可证》有效期为3年，持证人应在有效期届满前30日内，向原发证机关申请延续。 第二章人员 第七条保健食品经营企业从事质量管理、保管、销售（营业员）等直接接触保健食品岗位的工作人员，应每年进行一次健康检查，患有精神病、传染病和其它可能污染保健食品疾病的人员，不得从事直接接触保健食品工作。企业应建立员工健康档案。 第八条企业应设立质量管理机构和专（兼）职质量管理人员，达到一定规模的企业应任命安全总监。安全总监应具有大专以上（含大专）学历（应优先考虑食品或医学、药学、生物、护理、化学等相关专业），或具有中级以上（含中级）相关专业技术职称，并具有2年以上保健食品经营企业工作经验。安全总监应经监管部门考试合格。 第九条安全总监应履行下列职责： （一）质量文件的批准； （二）供货商、购进保健食品的资质审核和购进保健食品的质量查验； （三）指导采购、销售、保管、养护等岗位质量工作； （四）销售保健食品的质量控制和召回。 第十条企业应对从业人员进行相关法律、法规、卫生 水质化验分析方法(常规) 1水质pH值的测定玻璃电极法 水质-pH值的测定一玻璃电极法 1.1范围 1.1.1本方法适用于饮用水、地面水及工业废水pH值的测定。 1.1.2水的颜色、浊度、胶体物质、氧化剂、还原剂及较高含盐量均不干扰测定；但在pH小于1的强酸性溶液中，会有所谓酸误差，可按酸度测定；在pH大于1;的碱性溶液中，因有大量钠离子存在，产生误差，使读数偏低，通常称为钠差。消除钠差的方法，除了使用特制的低钠差电极外，还可以选用与被测溶液的pH值相近似的标准缓冲溶液对仪器进行校 正。温度影响电极的电位和水的电离平衡。须注意调节仪器的补偿装置与溶液的温度一致，并使被测样品与校正仪器用的标准缓冲溶液温度误差在土1C之内。 1.2原理 pH是从操作上定义的(此定义引自GB3100-31C2-82 “量和单位))第151页)?对于溶液X，测出伽伐尼电池参比电极IKC1浓溶液11溶液XIH2IPt的电动势Ex。将未知pH(x) 的溶液x换成标准pH溶液S，同样测出电池的电动势E。，则pH(X) =pH(S)+(Es-Ex)F/(RTInl0)因此，所定义的pH是无量纲的量。pH没有理论上的意义，萁定义为一种实用定义。但是在物质的量浓度小于O.lmol/dm3的稀薄水溶液有限范围，既非强 酸性又非强碱性(2 9012 生物样品定量分析方法验证指导原则 保健食品功能评价规范 第一部分功能学评价程序 一、主题内容和适用范围 1、本程序规定了评价食品保健作用的统一程序。 2、本程序适用于评价保健食品的增强免疫力功能，辅助降血脂功能功能，辅助降血糖功能，抗氧化功能，辅助改善记忆功能，缓解视疲劳功能，促进排铅功能，清咽功能，辅助降血压功能，改善睡眠功能，促进泌乳功能，缓解体力疲劳功能，提高缺氧耐受力功能，对辐射危害有辅助保护功能，减肥功能，改善生长发育功能，增加骨密度功能，改善营养性贫血功能，对化学性肝损伤有辅助保护功能，祛痤疮功能，祛黄褐斑功能，改善皮肤水份功能，改善皮肤油份功能，调节肠道菌群功能，促进消化功能，通便功能，对胃粘膜有辅助保护功能。 3、本程序规定了评价食品保健作用的人体试食实验规程。 二、保健食品功能评价的基本要求 1 对受试样品的要求 1.1应提供受试样品的原料组成或/和尽可能提供受试样品的物理、化学性质(包括化学结构、纯度、稳定性等)有关资料。 1.2 受试样品必须是规格化的定型产品，即符合既定的配方、生产工艺及质量规范。 1.3 提供受试样品安全性毒理学评价的资料以及卫生学检验报告，受试样品必须是已经过食品安全性毒理学评价确认为安全的食品。功能学评价的样品与毒理学评价、卫生学检验的样品必须为同一批次（安全性毒理学评价和功能学评价实验周期超过受试样品保质期的除外）。 1.4 应提供功效成分或特征成分、营养成分的名称及含量。 1.5 如需提供受试样品违禁药物检测报告时，应提交与功能学实验同一批次样品的违禁药物检测报告。 2 对实验动物的要求 2.1 根据各项实验的具体要求，合理选择实验动物。常用大鼠和小鼠，品系不限，推荐使用近交系动物。 2.2 动物的性别、年龄依实验需要进行选择。实验动物的数量要求为小鼠每组10－15只（单一性别），大鼠每组8－12只（单一性别）。 2.3 动物应符合国家对实验动物的有关规定。 3 对给受试样品剂量及时间的要求 3.1 各种动物实验至少应设3个剂量组，另设空白对照组，必要时可设阳性对照组。剂量选择应合理，尽可能找出最低有效剂量。在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人体推荐摄入量（折算为每公斤体重的剂量）的5倍（大鼠）或10倍（小鼠），且最高剂量不得超过人体推荐摄入量的30倍（特殊情况除外），受试样品的功能实验剂量必须在毒理学评价确定的安全剂量范围之内。 3.2 给受试样品的时间应根据具体实验而定，一般为30天。当给予受试样品的时间已达30天而实验结果仍为阴性时，则可终止实验。 4 对受试样品处理的要求 4.1 受试样品推荐量较大，超过实验动物的灌胃量、加入饮水或掺入饲料的承受量等情况时，可适当减少受试样品中的非功效成分的含量。 4.2 对于含乙醇的受试样品，原则上应使用其定型的产品进行功能实验，其三个剂量组的乙醇含量与定型产品相同。如受试样品的推荐量较大，超过动物最大灌胃量时，允许将其进行浓缩，但最终的浓缩液体应恢复原乙醇含量。如乙醇含量超过15%，允许将其含量降至15%。调整受试样品乙醇含量应使用原产品的酒基。 4.3 液体受试样品需要浓缩时，应尽可能选择不破坏其功效成分的方法。一般可选择60-70℃减压进行浓 附件6： 增加骨密度功能评价方法（征求意见稿） 保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1试验项目： 动物试验：分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（骨代谢有关的其它功效成份，如以内分泌调节等作用为主的不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。方案二仅适用于每日钙摄入量在100mg以下的受试物，其它受试物均采用方案一。 \ 体重 骨干重 骨钙含量 骨密度 骨组织病理形态 2 试验原则： 根据受试样品作用原理的不同，方案一和方案二任选其一进行动物试验。 所列指标均为必做项目。 … 样品使用未批准用于食品的含钙化合物，必须进行钙吸收代谢试验；样品使用属营养强化剂范围内的钙源及来自普通食品的钙源（如可食动物的骨、奶等），可以不进行钙吸收代谢试验。 3 结果判定 方案一： a) 生长发育指标（体重、身长、股骨干重）中至少一项显著高于低钙对照组； b) 股骨骨钙含量或骨密度显著高于低钙对照组，且病理学上（骨组织学结构或钙沉积）两方面结果中的任一方面优于低钙对照组； c) 进行钙吸收试验时，钙吸收率显著高于低钙对照组，且高剂量组不低于相应钙含量的碳酸钙对照组。 符合以上三项要求，可判定受试物具有“有助于增加骨密度功能”的作用。方案二： @ 受试物试验组的股骨骨钙含量或骨密度显著高于模型对照组，且骨组织形态学指标较去势模型对照组有显著性改善，方可判定受试物具有“有助于增加骨密度功能”的作用。 增加骨密度功能检验方法 Method for the Assessment of Increasing Bone Density Function 有助于增加骨密度功能作用的检验方法根据受试样品作用原理的不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（骨代谢有关的其它功效成份，如以内分泌调节等作用为主的不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。方案二仅适用于每日钙摄入量在100mg以下的受试物，其它受试物均采用方案一。 1. 方案一 实验原理 机体中的钙绝大部分储存于骨骼及牙齿中，若摄入钙量不足会影响机体和骨骼的生长发育。生长期大鼠在摄食低钙饲料的基础上补充受试含钙产品，与低钙对照组比较在促进机体及骨骼的生长发育，增加骨矿物质含量和增加骨密度功能上的作用，从而对受试物“有助于增加骨密度的功能”进行评价。 仪器和试剂 1.2.1 仪器： 原子吸收分光光度计、骨密度仪（双能X线骨密度仪或固体密度仪）、精准卡尺、动物解剖器械、105℃烘箱 1.2.2 试剂： 钙含量测定所需试剂（硝酸、高氯酸、氧化镧等） 实验方法 1.3.1 实验动物： 出生4周左右的断乳SD大鼠，体重约60-80克，同一性别，每组至少10只。 1.3.2基础饲料配方： 同2003版《规范》（钙含量150mg/100g饲料）即低钙饲料。 1.3.3 动物分组及剂量设置： 实验设三个剂量组，以人体推荐剂量的10倍为其中的一个剂量组，另设计两个剂量组；同时，设低钙对照组。 1.3.4 受试物给予途径及时间： 经口灌胃给予受试物，低钙对照组灌胃给予配样溶剂（去离子水），灌胃量 附件5 药物非临床药代动力学研究技术指导原则 一、概述 非临床药代动力学研究是通过体外和动物体内的研究方法，揭示药物在体内的动态变化规律，获得药物的基本药代动力学参数，阐明药物的吸收、分布、代谢和排泄（Absorption, Distribution, Metabolism, Excretion, 简称ADME）的过程和特征。 非临床药代动力学研究在新药研究开发的评价过程中起着重要 作用。在药物制剂学研究中，非临床药代动力学研究结果是评价药物制剂特性和质量的重要依据。在药效学和毒理学评价中，药代动力学特征可进一步深入阐明药物作用机制，同时也是药效和毒理研究动物选择的依据之一；药物或活性代谢产物浓度数据及其相关药代动力学参数是产生、决定或阐明药效或毒性大小的基础，可提供药物对靶器官效应（药效或毒性）的依据。在临床试验中，非临床药代动力学研究结果能为设计和优化临床试验给药方案提供有关参考信息。 本指导原则是供中药、天然药物和化学药物新药的非临床药代动力学研究的参考。研究者可根据不同药物的特点，参考本指导原则，科学合理地进行试验设计，并对试验结果进行综合评价。 本指导原则的主要内容包括进行药物非临床药代动力学研究的 基本原则、试验设计的总体要求、生物样品的测定方法、研究项目（血 药浓度-时间曲线、吸收、分布、排泄、血浆蛋白结合、生物转化、对药物代谢酶活性及转运体的影响）、数据处理与分析、结果与评价等，并对研究中其他一些需要关注的问题进行了分析。附录中描述了生物样品分析和放射性同位素标记技术的相关方法和要求，供研究者参考。 二、基本原则 进行非临床药代动力学研究，要遵循以下基本原则： （一）试验目的明确； （二）试验设计合理； （三）分析方法可靠； （四）所得参数全面，满足评价要求； （五）对试验结果进行综合分析与评价； （六）具体问题具体分析。 三、试验设计 （一）总体要求 1. 受试物 中药、天然药物：受试物应采用能充分代表临床试验拟用样品和/或上市样品质量和安全性的样品。应采用工艺路线及关键工艺参数确定后的工艺制备，一般应为中试或中试以上规模的样品，否则应有充分的理由。应注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件、有效期及配制方法等，并提供质量检验报告。由于中药的特殊性，建议现用现配，否则应提供数据支持配制后受试物的质量稳定性及均匀性。当给药时间较 增加骨密度的保健食品 一、骨骼的生长和矿化概述 骨骼的生长和矿化在胎儿期及出生后持续进行，在21岁时达到相对稳定。骨骼中钙含量从新生儿期的30g增加到成人期的1200g；同时，磷含量从17g增加到700g。骨组织中有一系列酶机制保证其细胞外基质的矿化。骨基质由胶原、蛋白多糖和其他非胶原蛋白质组成，其中沉积的不溶性羟磷灰石和少量其他盐类，使骨组织成为能支撑机体的一种结构。其中最重要的两类细胞为成骨细胞和破骨细胞。成骨细胞负责细胞外基质的形成和组建及其后的矿化过程。破骨细胞负责骨基质的再吸收。 骨生长或骨成形是下述两个过程的综合结果：首先形成新骨，继之再吸收以维持原结构形态，其净结果是获得骨量。男性和女性青少年到18岁时可达到其个体骨量峰值的95％～99％。青春期后，骨生成和再吸收在数量上达到平衡，这种状态称为骨的再成形。 35～40岁后，骨的生成和再吸收不再匹配，发生骨的净丢失，最终导致骨质疏松症。骨质疏松症是指骨量减少，即单位体积内骨组织含量减少。由于人口趋向老龄化，骨质疏松不仅威胁老年人特别是经绝后妇女的健康，而且已经成为严重的社会问题。预防或延缓骨质疏松症的策略包括：提高在青春期可达到的骨量峰值和预防生命后期的骨丢失。 二、保健食品增加骨密度的原理 (一)直接补充钙质 如各种钙剂、磷酸盐、维生素D等，可通过直接补充钙质而达到增加骨密度的目的。磷酸盐可促进骨形成，抑制骨细胞的破坏，可以长期应用。 (二)调整内分泌而促进钙的吸收 如降钙素可减少骨质吸收，降低血循环中的钙，增加骨质中的钙含量，降钙素由于可降低血钙，所以在用降钙素时应补足钙量，起到治疗骨质疏松的作用。对防治绝经性骨质疏松，雌激素替代疗法是一种有效措施。研究发现，大豆中的某些成分，如大豆皂甙、大豆异黄酮等物质具有雌激素样作用，可与雌激素竞争受体，同时可避免雌激素的副作用。因此，中老年妇女经常摄人大豆及其制 保健食品四大检测试验 一、保健食品卫生学检测 1、卫生学试验检验项目的确定： 根据产品的详细配方和原料组成、主要工艺、剂型及其他相关资料，依据保健食品和各类食品相关国家、行业标准，确定卫生学检验项目。 2、卫生学试验常用检验方法 ?《食品卫生理化检验方法》 GB/T5009.1- 203-2003 GB/T5009.23;190;191-2006 ?《食品卫生微生物检验方法》 GB/T4789.1-31;33-35-2003 ?每个指标都要列出具体的检验方法,如一个指标的标准检验方法有多个,要列出具体用的是哪一个方法。 3、确定卫生学试验检验项目的主要依据之一是GB16740《保健（功能）食品通用标准》： ?感官指标 ?净含量 ?铅、总砷、总汞 ?微生物 （1）单件定量包装产品净含量允许负偏差 （2）铅、总砷、总汞 检测方法： 铅GB/T5009.12-2003 第一法:石墨炉原子吸收光谱法 第二法:氢化物原子荧光光谱法 第三法:火焰原子吸收光谱法总砷GB/T5009.11-2003 第一法:氢化物原子荧光光度法 第二法:银盐法 第三法:砷斑法 总汞GB/T5009.17-2003 第一法：原子荧光光谱法 第二法：冷原子吸收光谱法（3）微生物指标 检测方法： ?菌落总数：GB/T4789.2-2003 ?大肠菌群：GB/T4789.3-2003 ?霉菌：GB/T4789.15-2003 ?酵母：GB/T4789.15-2003 ?致病菌（指肠道致病菌和致病性球菌） 沙门氏菌：GB/T4789.4-2003 志贺氏菌：GB/T4789.5-2003 金黄色葡萄球菌：GB/T4789.10-2003 溶血性链球菌：GB/T4789.11-2003 从安全性角度出发，测定胶囊类样品的铅、总砷、总汞、微生物指标时须包括胶囊皮。 （4）其他经常检测的卫生学指标 中国药典2015年版 9012生物样品定置分析方法验证 指导原则 一、范围 准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和制剂研发非常重要。这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。因此，必须完整地验证和记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。 本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。本指导原则二和三主要针对色谱分析方法，四针对配体结合分析方法。 生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。应该在相应的生物样品分析中遵守 G L P原则或GC P原则。 二、生物分析方法验证 (一）分析方法的完整验证 分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析物浓度的可靠性。此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。一般应对每个新分析方法和新分析物进行完整验证。当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质替代，但要说明理由。 一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液中储存和处理全过程中的稳定性。 有时可能需要测定多个分析物。这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。在这些情况下，验证和分析的原则适用于所有涉及的分析物。 对照标准物质 在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加人到空白生物基质中。此外，色谱方法通常使用适当的内标。 应该从可追溯的来源获得对照标准物质。应该科学论证对照标准物质的适用性。分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质不产生干扰。 当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内标。它们必须具有足够高的同位素纯度，并且不发生同位素交换反应，以避免结果的偏差。 1.选择性 该分析方法应该能够区分目标分析物和内标与基质的内源性组分或样品中其他组分。应该使用至少6个受试者的适宜的空白基质来证明选择性（动物空白基质可以不同批次混 9012生物样品定量分析方法验证指导原则 合），它们被分别分析并评价干扰。当干扰组分的响应低于分析物定量下限响应的20%,并低于内标响应的5%时，通常即可以接受0 应该考察药物代谢物、经样品预处理生成的分解产物以及可能的同服药物引起干扰的程度。在适当情况下，也应该评价代谢物在分析过程中回复转化为母体分析物的可能性。 2.残留 应该在方法建立中考察残留并使之最小。残留可能不影响准确度和精密度。应通过在注射高浓度样品或校正标样后，注射空白样品来估计残留。高浓度样品之后在空白样品中的残留应不超过定量下限的20%，并且不超过内标的5%。如果残留不可避免，应考虑特殊措施，在方法验证时检验并在试验样品分析时应用这些措施，以确保不影响准确度和精密度。这可能包括在高浓度样品后注射空白样品，然后分析下一个试验样品。 3.定量下限 定量下限是能够被可靠定量的样品中分析物的最低浓度，具有可接受的准确度和精密度。定量下限是标准曲线的最低点，应适用于预期的浓度和试验目的。 4.标准曲线 应该在指定的浓度范围内评价仪器对分析物的响应，获得标准曲线。通过加人已知浓度的分析物（和内标）到空白基质中，制备各浓度的校正标样，其基质应该与目标试验样品基质相同。方法验证中研究的每种分析物和每一分析批，都应该有一条标准曲线。 在进行分析方法验证之前，最好应该了解预期的浓度范围。标准曲线范围应该尽量覆盖预期浓度范围，由定量下限和定量上限(校正标样的最髙浓度）来决定。该范围应该足够描述分析物的药动学。 应该使用至少6个校正浓度水平，不包括空白样品（不含分析物和内标的处理过的基质样品）和零浓度样品（含内标的处理过的基质〉。每个校正标样可以被多次处理和分析。 应该使用简单且足够描述仪器对分析物浓度响应的关系式。空白和零浓度样品结果不应参与计算标准曲线参数。 应该提交标准曲线参数，测定校正标样后回算得出的浓度应一并提交。在方法验证中，至少应该评价3条标准曲线。 校正标样回算的浓度一般应该在标示值的:t l5%以内，定量下限处应该在±20%内。至少75%校正标样，含最少6个有效浓度，应满足上述标准。如果某个校正标样结果不符合这些标准，应该拒绝这一标样，不含这一标样的标准曲线应被重新评价，包括回归分析^ 最好使用新鲜配制的样品建立标准曲线，但如果有稳定性数据支持，也可以使用预先配制并储存的校正标样。 5.准确度 分析方法的准确度描述该方法测得值与分析物标示浓度的接近程度，表示为：（测得值/真实值)x l00?^应采用加人已知 ? 363 保健食品注册检验复核检验管理办法 第一章总则 第一条为规范保健食品注册检验、产品质量复核检验工作，保证其公开、公平、公正、科学，制定本办法。 第二条本办法适用于保健食品注册检验、产品质量复核检验工作的监督管理。 第三条本办法所称保健食品注册检验（以下称注册检验）是指申请人向食品药品监督管理部门提出保健食品注册申请前，按照有关规定，在保健食品注册检验机构（以下称注册检验机构）所进行的产品安全性毒理学试验、功能学试验、功效成分或标志性成分检测、卫生学试验、稳定性试验等。 保健食品产品质量复核检验（以下称复核检验）是指食品药品监督管理部门受理保健食品注册申请后，注册检验机构按照申请人申报的产品质量标准对食品药品监督管理部门提供的样品所进行的全项目检验。 第四条国家食品药品监督管理局负责注册检验、复核检验工作的监督管理。 第五条注册检验机构应当依法经国家食品药品监督管理局遴选确定，并根据国家有关法律法规和标准规范的要求以及本办法的规定，开展注册检验、复核检验工作，提供准确可靠的保健食品注册检验、产品质量复核检验报告（以下均称检验报告）。 注册检验机构和检验人对出具的检验报告负责，并承担相应的法律责任。 第六条注册检验机构及其检验人从事注册检验、复核检验工作，应当尊重科学、恪守职业道德，并保证出具的检验报告客观、公正和准 确，不得出具虚假的检验报告。 第七条同一产品的复核检验不得由承担该产品注册检验工作的注册检验机构进行。 第八条省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门（以下称省级食品药品监督管理部门）进行抽样时，应当保证抽样的代表性，抽样过程不得影响所抽样品的质量。 第二章申请与受理 第九条申请注册检验的单位（以下称申请单位）申请国产保健食品注册检验的，应当向产品试制所在地的省级食品药品监督管理部门提出抽样申请，填写抽样申请表。 省级食品药品监督管理部门在收到抽样申请表后，应当按照国家食品药品监督管理局有关规定及时派员到产品试制现场进行抽样并封样，同时填写抽样单。 申请单位应当将封样和抽样单一并提交注册检验机构。 第十条申请单位应当按照本办法及《保健食品注册检验复核检验规范》（以下称《检验规范》）的有关要求，向注册检验机构提交保健食品注册检验申请表及有关资料，国产保健食品提供封样样品、进口保健食品提供未启封的市售样品，并按有关规定缴纳注册检验费用。 注册检验机构应当按照《检验规范》的要求，对检验样品及有关资料进行审核，符合要求的，出具保健食品注册检验受理通知书（以下称注册检验受理通知书），进行注册检验受理编号，并与申请单位签订协议书。 第十一条食品药品监督管理部门受理保健食品注册申请后，应当按照有关规定向注册检验机构发出保健食品产品质量复核检验通知书（以下称复核检验通知书），并提供产品质量标准和连续三个批号规定 抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则 摘要： 几乎所有的生物制药产品都会引起一定的抗药抗体（anti-drug antibody，ADA）反应，抗药抗体反应可能会降低药物疗效或导致严重的不良反应。在人体内，抗药抗体通常不会引起明显的临床反应。但是对于某些治疗性蛋白质，抗药抗体反应能引起各种临床的不良反应，包括温和事件及严重不良事件。临床前研究表明，抗药抗体能对药物暴露、药物毒性作用、药物代谢动力学、药物效应动力学等造成影响。因此治疗性蛋白质的免疫原性引起了临床医生、药企及监管机构的注意。为了评估生物药物分子的免疫原性，以及将实验结果与临床事件联系起来，在临床前研究和临床研究中，很有必要开发可靠的能够有效评估抗药抗体反应的实验方法。这里方法学验证显得尤为重要，并且方法学验证是药物上市申请必不可少的。现行的监管文件对于免疫分析方法的验证的指导相当有限，特别是缺乏有关免疫原性分析方法的验证的指导。因此，本文对抗药抗体免疫分析方法的验证提供科学的建议。在现有的关于生物分析的规范性文件的基础上加入独特的性能验证。笔者建议采用实验和统计学的方法进行免疫分析的方法学验证。这些建议被视为最佳的例子，旨在促进整个医药行业形成一个更加统一的抗体检测方法。 1．简介： 生物制药产品包括氨基酸聚合物、碳水化合物或核酸，一般通过人细胞系、哺乳动物细胞或细菌进行表达，比常规的小分子药物更大（一般大于1~3KD）。由于以上特性，生物制药产品引起免疫反应的潜力更大。生物制药的免疫原性与产品的内在因素（种属特异性表位、外源性、糖基化程度、聚合或变性程度、杂质和制剂）、外在因素（给药途径、慢性或急性给药、药代动力学及内源性当量）、患者因素（自身免疫性疾病、免疫抑制、和替代疗法）相关。 抗药抗体反应可能会导致严重的临床症状，包括过敏、自身免疫和不同的药代动力学特征（例如，药物中和、生物分布异常和药物清除率增强等均可能会使 保健品功能－增加骨密度 2009-11-25 11:03:31 作者：phpcms来源：浏览次数：3 网友评论0 条由于世界人口的老龄化，发生骨质疏松与骨质减少，即使在发达国家也是常见的代谢性骨病。它是一种全身性的骨骼疾病，其特点是骨质减少，骨组织的细微结构被破坏，使骨的脆性增加，骨折的危险性增加。它可以使除头颅外 由于世界人口的老龄化，发生骨质疏松与骨质减少，即使在发达国家也是常见的代谢性骨病。它是一种全身性的骨骼疾病，其特点是骨质减少，骨组织的细微结构被破坏，使骨的脆性增加，骨折的危险性增加。它可以使除头颅外的任何部位的骨骼发生骨折。 据不完全统计，我国60岁以上的老年人骨质疏松症发病率约为59．89％，增加骨密度、有效治疗骨质疏松症已经成为人们广泛关注的重要课题。 一、骨质疏松与健康 （一）什么是骨密度 骨组织的强度有75%～85%与骨密度（BMD）有关。骨密度指骨单位面积的骨质密度，是指骨组织结合的紧密程度（BMD），通常指骨矿物含量（BMC）。是目前衡量骨质疏松的一个客观的量化的指标，也是反映骨量的一个指标，其单位为G/CM2，骨密度越高，骨质强度越好。它与骨骼结构、骨量、骨矿物含量等因素相关。 随着年龄的老化，周身各骨骼的BMD均呈逐渐下降趋势，股骨颈的BMD在20~ 90岁之间，女性要下降58%，男性要下降39%；股骨粗隆间区（intertrochanteric region）则分别下降53%及35%。BMD下降到一定程度，易于发生骨折。 （二）产生骨质疏松的原因 骨质疏松是一种以骨量减少为主要特征，骨组织的显微结构改变，并伴随骨质脆性增加和骨折危险度升高的全身性骨骼疾病。也就是说骨质疏松时，骨量减少是骨矿物质（钙、磷等）和骨基质（骨胶原、蛋白质、无机盐等）比例的降低，通过调线及骨形态计量学检查发现骨量丢失的变化，表现为骨密度降低，在轻微的外力作用下就可能发生骨折的一种疾病。 产生骨质疏松的原因是多方面的，骨质疏松与骨质减少有着多种致病因素，其中包括遗传、生活方式、营养状况、疾病及药物等，见表1。 表常见的骨质疏松与骨质减少的原因 XXX药店 年度保健食品经营情况自查报告根据西安市药品监督管理局建立《保健食品经营单位食品安全信用档案目录》精神，结合药店的实际经营情况，本着实事求是、不断完善提高、逐步规范的原则，现将本药店保健食品经营自查的情况作如下报告。 自接到去药监部门的通知后，我们立即向员工传达了通知精神，同时采取集中学习和员工自学的方式，认真学习了《食品安全法》等文件。通过学习，进一步提高了员工对保健食品专项整治工作重要性的认识，达到进一步规范保健食品经营行为，提高消费者的自我保护意识和能力，保障公众使用保健食品安全有效的目的。具体自查情况如下： （1）保健食品管理制度及其落实情况：建立健全了索证索票制度、卫生管理制度、进货检查验收制度、储存制度、出库制度、不合格产品处理制度、培训等制度，并能按照制度要求落实工作。 （2）标识标签：经营的保健食品标识标签符合《保健食品标签标识管理规定》要求。 （3）产品保质期：未发现经销过期保健食品。 （4）供货商及产品资质：能索取供货商及产品资质。包括供货商许可证件、营业执照，保健食品批准证书（注册批件），产品检验合格报告（从生产企业购进必须索取） （5）进货查验记录：进货查验记录及票据完整。记录和票据真实齐 全，并按规定妥善保管。 （6）产品台帐：能清楚的显示进销存记录。记录包括所经销保健食品产品名称、进货时间、数量、供货商等内容。 （7）从业人员体检情况：从业人员均有健康体检证明。 （8）场地卫生安全及产品码放：经营场所干净卫生、安全，符合经营保健品要求；产品陈列有相对独立的专用销售区域或专用货柜。（9）店内宣传：店内无夸大保健食品功效的宣传资料，不存在宣称预防、治疗疾病功能等违法违规行为。 （10）签订了保健食品经营单位质量安全承诺书。 在保健食品经营的实践中，我们经常遇到新问题，为了保障公众使用保健食品安全有效的目的，我们在今后的工作中一定加强法律法规及业务知识的学习，加强质量环节的管理，同时欢迎药监部门的莅临指导，以期最大限度地减少主观无过错现象地发生。 年月日 水质化验分析方法（常规） 1水质pH值的测定玻璃电极法 水质-pH值的测定—玻璃电极法 1.l 围 1.1.1 本方法适用于饮用水、地面水及工业废水pH值的测定。 1.1.2水的颜色、浊度、胶体物质、氧化剂、还原剂及较高含盐量均不干扰测定；但在pH小于1的强酸性溶液中，会有所谓酸误差，可按酸度测定；在pH大于1；的碱性溶液中，因有大量钠离子存在，产生误差，使读数偏低，通常称为钠差。消除钠差的方法，除了使用特制的低钠差电极外，还可以选用与被测溶液的pH值相近似的标准缓冲溶液对仪器进行校正。温度影响电极的电位和水的电离平衡。须注意调节仪器的补偿装置与溶液的温度一致，并使被测样品与校正仪器用的标准缓冲溶液温度误差在±1℃之。 1.2 原理 pH是从操作上定义的（此定义引自GB3100-31C2-82“量和单位））第151页）．对于溶液X，测出伽伐尼电池参比电极IKC1浓溶液ll溶液XIH2IPt的电动势Ex。将未知pH(x)的溶液x换成标准pH溶液S，同样测出电池的电动势E。，则pH(X) =pH(S)+(Es-Ex)F/(RTlnl0)因此，所定义的pH是无量纲的量。pH没有理论上的意义，萁定义为一种实用定义。但是在物质的量浓度小于O.lmol/dm3的稀薄水溶液有限围，既非强酸性又非强碱性(2 有助于改善骨密度功能检验方法 有助于改善骨密度功能作用检验方法根据受试样品作用原理的不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。 1 方案一 1.1 实验原理 机体中的钙绝大部分储存于骨骼及牙齿中，大鼠若摄入钙量不足会影响机体和骨骼的生长发育，表现为体重，身长，骨长，骨重，骨钙含量及骨密度低于摄食足量钙的正常大鼠。生长期大鼠在摄食低钙饲料的基础上分别补充碳酸钙（对照组）或受试含钙产品（实验组），比较两者在促进机体及骨骼的生长发育，增加骨矿物质含量和增加骨密度功能上的作用，从而对受试样品有助于改善骨密度的功能进行评价。 1.2 仪器和试剂 1.2.1 仪器：原子吸收分光光度计、骨密度仪（单光子骨密度仪或双能X线骨密度仪或相关仪器）、精密卡尺、动物解剖器械、动物天平、105℃烘箱。 1.2.2 硝酸，优级纯 高氯酸，优级纯 氧化镧，2%氧化镧溶液称取分析纯氧化镧（含量大于99.99%）25克，加75mL优级纯盐酸，加去离子水至1000mL。 钙标准溶液称取1.2486克分析纯碳酸钙（纯度大于99.99%），加50mL去离子水，加盐酸使之溶解。移入1000mL容量瓶中，加2%氧化镧溶液至刻度。此溶液1.00mL相当于500 g 钙。储于聚乙烯瓶中，4℃保存，临用时稀释。 1.3 实验方法 1.3.1 实验动物 出生4周左右的断乳大鼠，体重约60－75克，同一性别，每组8－12只。 1.3.2 基础饲料：用此基础饲料配制低钙对照组以及各剂量组。 表1 基础饲料配方（Ca2+计，调整Ca2+为150mg/100g饲料） 成分% 酪蛋白10.0 黄豆粉①15.0 小麦面粉54.0 玉米油或花生油 4.0 纤维素 2.0 混合盐② 2.6 混合维生素③ 1.0 氯化胆碱0.2 d1－蛋氨酸0.2 淀粉④11.0 ①需高压处理后用 ②混合盐：每kg混合盐中各组份含量：KH2PO4，501.4g；NaCl，74.0g；MgCO3，50.2g；乳酸亚铁，5.4g；乳酸锌，4.16g；MnCO3，3.5g；CuSO4·5H2O，0.605g；Na2SeO3，6.6mg；KI， 7.76mg；Cr3Cl·6H2O，0.292g；加蔗糖到1kg。 ③混合维生素：每kg混合维生素中各组份含量：维生素A，400,000IU；维生素D3，100,000IU； 保健食品自查报告 保健食品药店的自查报告应该要如何写呢？以下是ww w .zicha b a o g a o.c o m小编收集的自查报告，仅供大家阅读参考! 保健食品自查报告一 一、企业概况 本企业位于XX县XX镇X市场首层1、2两卡，营业面积85平方米，本店在硬件方面：包括其布局、柜台、养护等设施设备，都能够达到XX市保健食品零售企业的有关要求。 二、企业的自查情况如下： 1、人员管理 本店设有食品质量管理员一名，具有药学初级资格，熟悉保健食品有关的法律法规和技术规范。所有从业人员均已通过健康检查，具备健康证。本店所有员工均参加过本店组织的保健食品法律法规培训，有培训记录。 2、质量管理 我店已建立比较齐全的质量管理制度，包括有索证管理制度、卫生管理制度、进货检查验收制度、储存制度、出库制度、不合格产品处理制度、召回制度、培训制度等。我店已索取供货方提供的加盖供货方公章的生产企业卫生许可证、营业执照、批准证书复印件及购进的产品检验报告等资料建档保全。我单位已建立真实完整的保健食品购进记录，内容包括进货时间、产品名称、数量、批号、供货单件等信息。 3、经营及储存条件 本店经营场所面积与经营规模相适应，场所整洁、干净；周围无污染源。配备有专用保健食品陈列橱柜，并有空调、风扇等用于保健食品储存的温控设施。 经自查，我店符合《广东省保健食品零售企业卫生许可现场验收工作指导原则》规定，现申请验收。 保健食品自查报告二 “民以食为天，食以安为先。”近年来，在保健食品生产取得了显著成效、生产安全状况总体较好、行业也取得了长足发展的大背景下，我公司上下员工齐心一致，特根据衢食药监函20175号《关于督促进一步做好保健食品生产企业监管工作的函》，我们公司的管理人员非常重视开展自查，通过狠抓落实保健食品安全、规范生产，我公司已获批的2个保健食品生产进展顺利。一直以来，在上级主管部门的指导下，严格按照《保健食品良好生产规范》组织生产，从原辅料采购生产过程管理及质量检测等方面全面落实质量控制制度和规范措施，确保产品质量安全，同时规范产品标签和说明书，不夸大宣传保健功效。在进行常规生产的过程中，响应上级领导明确“第一责任人”的意识也与日俱增，为公司今后继续生产合格产品做足工作。公司现有获保健食品批文的产品2个（？牌蜂胶软胶囊，批准文号为国食健字G20XX和牌破壁松花粉，批准文号为国食健字G20XX）。现将自查情况汇报如下： 一、根据《食品安全法》《保健食品良好生产规范》等法律法规，制定公司产品质量安全责任书，明确公司各部门负责人是本部的食品质量安全的第一责任人。 二、做好保健食品原辅料采购索证检验工作，做到不合格原辅料不进厂，保证所有的原辅料、添加剂等符合国家有关规定，并做好采购记录台帐。 三、生产环境符合GMP要求，加工工艺流程科学合理，生产加工过程严格规范，对生产关键工序进行严格控制，生产记录完整。 四、做好保健食品出厂检验工作，未经检验或检验不合格产品决不出厂。 五、加强库房卫生管理，保持良好的原辅料、成品库房环境。 六、严格按照GB7718《预包装食品标签通则》和《保健食品标识规定》制作产品标签和说明书。 养殖水质检测常用的方法有哪些？ 养殖水质检测常用的方法有哪些？众所周知，养殖生产成功的关键在于水，只有管好水，养殖的成功才有保障。保持良好的水质环境，水质检测是至关重要的。水质检测的方法有很多，从传统的经验法到化学法再到目前正在推广的仪器法，经历了漫长的三个阶段。 一、传统经验法 是指养殖人员凭借多年的工作经验，人为地判断水质的各项指标。如鱼类摄食减少，则可能是pH值偏高或偏低，也有可能是氨氮超标；鱼类集中于水面，可能是水中缺氧等。这些人为的判断只是一个粗略的结果，误差是相当大的，而且随着养殖行业的发展，各企业的养殖规模越来越大，养殖的品种也越来越多，养殖的质量要求在不断提高，那么养殖水质的变化就是多样的，造成水质改变的原因更是多样的，例如投喂饲料、投放药物、自然环境、养殖品种数量的变化等因素，都会造成水质改变，单纯依靠人为经验的判断，已根本无法满足需要，有时甚至会带来巨大的损失。因此，这种依靠经验判断水质的土办法虽然运用了很长时间，但随着科学的进步和人们观念的转变，养殖专家的经验依然是各企业的宝贵财富，但作为检测水质的方法，已经逐渐被淘汰了。 二、化学法 在很多人依靠经验判断水质好坏的时候，采用化学方法检测水质还不被广泛利用，这一方法的最大优势就是检测数据准确可靠，但为什么没有推广应用呢？有几个方面的原因：第一，化学方法的检测过程比较复杂，需要较长的时间，要求检测人员具备相当的专业技能，才能准确的检测，如化学滴定法。有的化学检测试纸，如pH试纸，一般只能进行粗略的测量，如观察试纸颜色判断pH值在7～8之间，而无法得到准确的数字；另一方面，试纸容易受到外界环境（如温度、湿度、光照等）的影响，会导致试纸失效，粗略的测量也无法保证了。第二，化学法检测都需要取样测量，而水样采集到实验室时，各项指标都可能已发生变化，因而最终的检测结 一、准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％)表示。准确度应在规定的范围内测定。 1.化学药含量测定方法的准确度 原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加人已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 2.化学药杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂处方量空白辅料中加人已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物对照品，可用所建立方法测定的结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过验证的方法。在不能测得杂质或降解产物的校正因子或不能测得对主成分的相对校正因子的情况下，可用不加校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量。应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％) 或面积比（％ )。 3.中药化学成分测定方法的准确度 可用对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加人一定量的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。在加样回收试验中须注意对照品的加人量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率：％= (C - A ) /S X 100% 式中：A为供试品所含被测成分量；B 为加入对照品量； C 为实测值。 4.校正因子的准确度 对色谱方法而言，绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。待测定物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子。相对校正因子计算法常应用于化学药有关物质的测定、中药材及其复方制剂中多指标成分的测定。校正因子的表示方法很多，本指导原则中的校正因保健食品经营许可标准
水质检测方法
生物样品定量分析方法验证指导原则
1. 范围
准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和 制剂研发非常重要。这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动 学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。因此，必须完整地验证和 记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。
本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实 际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。
生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。 应该在相应的生物样品分析中遵守 GLP 原则或 GCP 原则。
2. 生物分析方法验证
2.1 分析方法的完整验证
分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析 物浓度的可靠性。此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。一般应对每 个物种和每种基质进行完整验证。当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质 替代，但要说明理由。
一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范 围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液 中储存和处理全过程中的稳定性。
有时可能需要测定多个分析物。这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一 个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。在这些情况下，验证和 分析的原则适用于所有涉及的分析物。
对照标准物质 在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加入到空白生物基质 中。此外，色谱方法通常使用适当的内标。 应该从可追溯的来源获得对照标准物质。应该科学论证对照标准物质的适用 性。分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。 对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质 不产生干扰。 当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内 标。它们必须具有足够高的同位素纯度，并且不发生同位素交换反应，以避免结 果的偏差。
1保健食品功能评价规范
增加骨密度功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
药物非临床药代动力学研究技术指导原则
增加骨密度的保健食品
保健食品四大检测试验
9012生物样品定量分析方法验证指导原则
保健食品试验注册检验规范
抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则(中文版)
保健品功能-增加骨密度
保健食品经营的自查报告
水质检测方法
保健食品有助于改善骨密度功能检验方法2020
保健食品自查报告
养殖水质检测常用的方法有哪些
方法学验证指导原则