干扰素的研究概论
干扰素的研究进展

干扰素的研究进展摘要:干扰素是细胞和机体受到病毒感染, 或者受核酸、细菌内毒素和促细胞分裂素等作用后, 由受体细胞分泌的一种广谱抗病毒糖蛋白。
它具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性的细胞,能通过多种机制影响肿瘤细胞功能,促进免疫细胞的活性。
近半个世纪以来, IFN 一直是病毒学、细胞学、分子生物学、临床医学、免疫学和肿瘤学等相关领域的研究热点。
干扰素基因序列研究结果表明, 该序列早在5亿-10亿年前就存在于生命细胞的基因序列中, 是生物体内一种古老的保护因子。
关键词:干扰素;基本性质;作用机制干扰素是在用灭活的病毒处理鸡胚以后发现的, 即灭活的病毒可以诱导干扰素的产生。
能够诱生干扰素的物质很多, 一般称他们为干扰素诱生剂,主要包括:(1)活病毒、灭活的病毒及其产物, 如双链RNA;(2)其他病原微生物及其产物, 如细菌和细菌脂多糖;(3)有丝分裂原等;(4)特异性免疫诱导剂。
第一类物质诱生干扰素最有效,后两种主要诱生II型干扰素,即IFN-γ。
IFN-α和IFN-ω主要由白细胞产生,IFN-B主要由成纤维细胞产生,尽管在适宜的诱导情况下,大部分的人类细胞都能够产生这几种干扰素。
而IFN-γ主要由活化的T 细胞产生。
α、β、ω和γ等几种干扰素主要由诱生剂诱导产生。
IFN-κ在静息状态下表皮角化细胞和先天性免疫系统的细胞(如单核细胞和树突状细胞)中有表达, IFN-γ、IFN-β、病毒与双链RNA 诱导会使IFN-κ表达显著增强[1]。
IFN-κ表达的这些特点是和角化细胞的防御功能相适应的。
IFN-τ不能被病毒等诱生剂诱生, 仅仅在怀孕早期的一个特定时间由滋养层细胞表达, 它们的主要功能是为怀孕的完成做准备[2,3]。
Lin it in主要在骨髓、肾脏表达, 也不需要诱导, 主要活性是抑制淋巴系细胞的生成, 对骨髓系细胞和红细胞前体则没有抑制作用[4]。
IFN-K在正常的血液、脑、胰腺等不同的组织中都有低水平的表达, 也可以被病毒或者干扰素等诱导表达[5,6],。
干扰素简介

干扰素简介干扰素简介一、干扰素的定义及作用机制干扰素是在病毒感染后机体细胞产生的一种抗病毒的糖蛋白,是广谱抗病毒物质,能抑制多种DNA病毒的生长繁殖而不影响正常细胞的功能。
干扰素的作用机制除了诱导一些抗病毒蛋白直接抗病毒外(例如2,5寡腺苷酸合成酶可以降解病毒mRNA,蛋白激酶K可以阻断病毒蛋白翻译),还可以通过免疫调节间接起到抗病毒作用(例如促进感染的肝细胞表达HLA-I类抗原、增加NK细胞活性)。
普通干扰素α因其半衰期短,隔天给药应用不太方便。
改性的聚乙二醇干扰素α(PEG IFN-α)可以延缓自身吸收和排泄从而延长其半衰期,可以一周注射一次。
有资料证实干扰素特别是长效干扰素对慢性乙肝的治疗,大约有10%的患者可能出现表面抗体(HBsAb)的阳转,这个结果是其它药物难以达到的。
二、干扰素治疗效果及副作用评价关于干扰素治疗尖锐湿疣其疗效各家报道不一,从无效到治愈率达90%不等;有人认为干扰素可以用于某些顽固难治的复发性尖锐湿疣,对于这种情况干扰素无疑是一种治疗选择方法。
也有一些研究资料显示干扰素对尖锐湿疣的治疗效果与安慰剂相比,在统计学上差异无显著性,干扰素不能控制尖锐湿疣的复发。
一般来说α-干扰素作用快而不持久,而γ-干扰素则反应迟缓,4~6周生效,女性比男性疗效好,但原因不详。
美国疾病控制中心CDC不赞成用干扰素治疗尖锐湿疣,其理由有三:①疗效较低。
②毒性发生率高。
副作用有流感样症状;肌痛、发热、发冷,也有头痛、恶心、疲乏。
另外有暂时性白细胞减少和血小板减少以及轻度肝功能异常,三苷升高等【一般在用药时可服扑热息痛来预防(扑热息痛的推荐剂量是每次500mggc 1g,在用干扰素前30分钟给予)】治疗前中、后期定期查血常规、血小板、肝功能、血脂)。
③价格昂贵。
因此我们认为对于是否使用干扰素,一定要对自己的情况综合分析,权衡利弊;未出现严重复发的患者,不一定要使用干扰素治疗。
即使注射干扰素也未必就不复发,但却非常有可能出现副作用。
干扰素生物学作用的研究进展

干扰素生物学作用的研究进展干扰素(Interferon,IFN)是人和动物细胞受到适宜的刺激时产生的一种微量的、具有高度生物学活性的糖蛋白,是由Issacs和Lindenmann等于1957年利用鸡胚绒毛尿囊膜研究流感病毒干扰现象时发现的。
随着分子生物学及DNA重组技术的迅速发展,应用基因工程技术将会生产出大量高效的干扰素应用于人畜疾病。
同时中药也能诱导机体产生干扰素,从而发挥其各种生物学作用,相信随着中药有效成分的进一步深入研究,干扰素将会得到更为广泛的应用。
一、干扰素的分类干扰素是诱生蛋白,正常细胞一般不自发产生干扰素,只存在合成干扰素的潜能,干扰素的基因处于被抑制的静止状态。
根据干扰素的来源、生物学性质及活性可分为以下两大类。
1.Ⅰ型干扰素Ⅰ型干扰素包括IFN-α与IFN-β等。
IFN-α主要由单核-巨噬细胞产生,此外B细胞和成纤维细胞也能合成IFN-α;IFN-β主要由成纤维细胞产生。
IFN-α/β二者结合相同受体,分布广泛,包括单核-巨噬细胞、多形核白细胞、B细胞、T细胞、血小板、上皮细胞、内皮细胞与肿瘤细胞等。
2.Ⅱ型干扰素Ⅱ型干扰素即γ干扰素,主要由活化的T细胞(包括Th0、TH1细胞和几乎所有的CD8+T细胞)和NK细胞产生,IFN-γ可以以细胞外基质相连的形式存在,故通过旁邻方式控制细胞生长,其可以分布在除成熟红细胞以外的几乎所有细胞表面。
二、干扰素的来源基因工程干扰素在体外大规模生产人工干扰素,这就是基因工程干扰素。
基因工程α-干扰素系从人体细胞中克隆出α-干扰素基因,然后将此基因与大肠杆菌表达载体连接物构成重组表达质粒,转化到大肠杆菌中,从而获得高效表达人α-干扰素蛋白的工程菌。
工程菌经发酵后可收集到大量菌体,将菌体破裂,用先进的生物工程手段将α-干扰素蛋白从菌体中分离、纯化,即得到高纯度的人基因工程α-干扰素。
基因工程α-干扰素与血源性干扰素相比,具有无污染、安全性高、纯度高、比活性高、成本低、疗效确切等优点中国兽药114网。
干扰素调研报告

干扰素调研报告干扰素调研报告一、调研背景近年来,干扰素作为一种重要的生物医药产品,被广泛应用于抗病毒、抗肿瘤和免疫治疗等领域。
干扰素具有抗病毒、免疫调节、抑制肿瘤生长等多种作用,被视为一种重要的治疗手段。
本调研报告旨在深入了解干扰素的应用现状和未来发展趋势,为相关行业从业者提供参考和指导。
二、调研内容1. 干扰素的分类和作用机制干扰素可分为α、β和γ三类,根据不同的分子结构和功能特点,其作用机制也有所不同。
α、β型干扰素主要用于抗病毒和抗肿瘤,γ型干扰素则主要用于免疫治疗。
2. 干扰素的应用现状目前,干扰素已被广泛应用于临床实践中。
在抗病毒方面,干扰素可有效抑制病毒的复制和传播,被运用于治疗乙型肝炎、艾滋病等病毒性感染。
在抗肿瘤方面,干扰素具有直接抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡、调节免疫功能等作用,被广泛用于治疗慢性骨髓性白血病、黑色素瘤等恶性肿瘤。
3. 干扰素的副作用和安全性尽管干扰素在临床上取得了显著疗效,但其副作用也不容忽视。
干扰素治疗可能导致乏力、发热、肌肉疼痛、白细胞减少等不良反应。
因此,合理的剂量和治疗方案至关重要。
4. 干扰素在未来的发展趋势随着生物医药技术的不断发展,干扰素的研究也在不断深入。
近年来,越来越多的研究集中于突破干扰素的生产工艺、改进干扰素的缺点以及开发更高效的剂型。
未来,干扰素的应用范围将进一步扩展,为患者提供更好的治疗效果。
三、调研结论1. 干扰素作为一种重要的生物医药产品,已被广泛应用于抗病毒、抗肿瘤和免疫治疗等领域。
2. 干扰素具有抗病毒、免疫调节、抑制肿瘤生长等多种作用机制。
3. 干扰素的应用现状丰富多样,但其副作用需要引起重视。
4. 未来,干扰素的研究将更加注重生产工艺的突破和剂型的改进,以提高疗效和安全性。
综上所述,干扰素作为一种重要的生物医药产品,在医疗领域中发挥着重要作用。
对于相关行业从业者而言,需要深入了解干扰素的分类、作用机制、应用现状和未来发展趋势,以更好地开展工作和提供服务。
干扰素类药物的化学结构与功能研究

干扰素类药物的化学结构与功能研究干扰素是一类重要的蛋白质分子,它具有调节免疫、抵抗病毒感染等多种生物学功能,因此广泛应用于临床医学中。
自从干扰素首次被发现以来,对其化学结构与功能的研究一直备受关注。
本文将介绍干扰素类药物的化学结构与功能研究的进展。
一、干扰素类药物的化学结构干扰素类药物包括α、β、γ三种类型,其中α、β干扰素是由人类细胞产生的多种“被识别”病毒感染的干扰素,而γ干扰素则由T细胞和自然杀伤细胞产生,并作为对病毒感染和肿瘤生长的抗体。
不同类型的干扰素在结构上有所差异,主要体现在N端区域和C端区域的变异。
例如,干扰素的N端区域包括一个信号肽和一个共同的结构域,这一区域决定了干扰素的稳定性和生物活性;而C端区域则是各类型干扰素的特异性区域,这一区域是干扰素与受体结合的重要部分,也是干扰素产生不同生物效应的关键所在。
二、干扰素类药物的功能研究干扰素类药物具有多种生物学功能,主要包括免疫调节、抗病毒和抗肿瘤等方面。
干扰素与其受体的结合是产生这些生物效应的关键步骤,干扰素的N端区域和C端区域均参与了这一过程。
一些研究表明C端区域的结构变异将导致干扰素与其受体的亲和力和活性的不同程度变化,这种变化直接影响了干扰素的免疫调节和抗病毒效果。
三、干扰素的转化与制备干扰素类药物的大规模制备是广泛应用于临床的关键之一。
依据其来源分为两种制备方式:天然干扰素和重组干扰素。
天然干扰素的制备比较困难且效率低下,而重组干扰素的制备则是一种更加便捷高效的途径。
重组干扰素的制备一般采用大肠杆菌、酵母、家兔黑肝细胞等生物系统作为基因表达宿主,将干扰素表达基因经过重组DNA技术导入宿主细胞中,通过细胞培养和蛋白纯化等步骤获得纯度较高的干扰素。
四、干扰素类药物的应用干扰素类药物广泛应用于临床各个领域,主要用于治疗病毒感染、肝炎、癌症等。
其作用机制主要是通过刺激机体免疫系统,调节细胞免疫和体液免疫,增强巨噬细胞和自然杀伤细胞的活性,从而达到抑制病毒感染和肿瘤生长的效果。
干扰素的作用机理以及干扰素的分类和产生的细胞

干扰素的作用机理以及干扰素的分类和产生的细胞2014.9.29详细介绍:干扰素是人体受到病毒感染时产生的一种多功能蛋白质(生物学上叫细胞因子)。
我们都得过流行性感冒,当你发热、全身肌肉、关节酸痛、全身无力时,你就感受到了干扰素的存在。
当然也还有其它细胞因子的参与,但干扰素是病毒感染时产生的最主要的细胞因子之一。
如果您曾经注射过干扰素,医生会告诉你打干扰素后会出现“流感样症状”,这是因为流感时的症状其实也是干扰素引起的。
干扰素是个多功能的蛋白质,属于人体天然免疫的重要组成部分。
总的来说,干扰素具有以下几个重要作用:1、抗病毒作用。
当我们的机体感染病毒时,体内会产生大量的干扰素。
2、抗增生作用。
这是干扰素能用于治疗多种肿瘤的原因。
3、免疫调节作用。
干扰素是天然免疫的一部分,但干扰素也参与多种特异性的细胞免疫,如增强感染的肝细胞表达被T淋巴细胞识别的蛋白质,帮助T细胞识别病毒感染的细胞等。
4、抗纤维化作用。
这是为什么干扰素治疗的病人肝纤维化会明显好转。
此外,干扰素还有抗新血管增生、促进细胞凋亡等多种功能。
但在治疗慢性乙肝方面,抗病毒作用和免疫调节作用,以及抗纤维化作用可能是主要的。
干扰素(IFN)是病毒或其他干扰素诱生剂刺激细胞所产生的一类分泌性蛋白,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种生物学活性。
α干扰素主要由人白细胞产生,β干扰素主要由人成纤维细胞产生,α和β干扰素属于Ⅰ型干扰素,抗病毒作用较强。
γ干扰素由T细胞产生,为Ⅱ型干扰素(免疫干扰素),其免疫调节作用较抗病毒作用强。
根据干扰素蛋白质的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ。
IFN-ω属于IFN-α家族,其结构和大小与其它IFN-α稍有差异,但抗原性有较大的不同。
现在公认IFN-β和IFN-γ只有一个亚型,而IFN-α有约二十余个亚型。
自80年代以来,许多研究显示,干扰素(尤其是α-干扰素及γ-干扰素)除具有抗病毒、免疫调节的作用外,还具有明显的抗细胞增殖作用。
干扰素 原理

干扰素原理
干扰素是一种细胞因子,可以在免疫应答中起到重要的调节作用。
它由免疫细胞产生,可以抵御病毒感染、调节免疫细胞活性和增强免疫反应。
干扰素主要通过与特定的受体结合,激活下游信号通路来发挥其功能。
干扰素的主要作用机制可以归纳为以下几个方面:
1. 抗病毒作用:干扰素可以抑制病毒的复制和传播。
当细胞感染病毒后,病毒感染的细胞会产生干扰素,干扰素进一步传递给附近的细胞。
这些受到干扰素刺激的细胞会合成并释放一系列的抗病毒蛋白,抑制病毒的复制。
2. 免疫调节作用:干扰素可以调节免疫细胞的活性。
它可以增强巨噬细胞的吞噬能力,提高抗原递呈细胞的抗原递呈效率,并增强NK细胞的杀伤能力。
干扰素还可以通过调节细胞因子的产生和受体表达来调节免疫应答。
3. 抗肿瘤作用:干扰素可以抑制肿瘤的生长和扩散。
它可以通过多个途径抑制肿瘤细胞的增殖和生存。
干扰素可以抑制肿瘤血管的形成,阻断肿瘤的供血和营养来源。
此外,干扰素还可以增强免疫系统对肿瘤细胞的攻击,提高肿瘤的免疫消灭能力。
总之,干扰素是一种重要的免疫调节因子,具有抗病毒、免疫调节和抗肿瘤作用。
它通过与受体结合,激活下游信号通路来发挥其功能。
干扰素的研究对于理解免疫调节和疾病治疗具有重要意义。
干扰素(interferon,IFN)

2.抗肿瘤作用
1)抑制肿瘤病毒的增殖,但必须连续使用 2)抑制肿瘤细胞增生,其作用随肿瘤细胞 的增加而增强(抑制癌基因的表达) 3)改变瘤细胞表面的性能,诱发新的抗原, 从而易被免疫监视细胞识别,并加以排斥 4)通过免疫调节作用,增强机体抗肿瘤能 力,如激活巨噬细胞,增强NK和ADCC效 应。
3.免疫调节作用
干扰素(interferon IFN)
概述 生及其机理 干扰素的效应机理 干扰素的生物学功能及其作用机制 干扰素在临床方面的应用 干扰素的开发前景
一、概述
1.定义:干扰素是指动物机体细胞,在干扰 素诱生剂作用下,产生的一组低分子量的 具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节作用等高 度生物学功能的糖蛋白。
IFN具有很强的免疫调节作用,特别是IFN- γ。 使用剂量不同,作用不同。较大剂量的干扰素如 10 6~10 7单位,在细胞免疫方面,抑制T细胞增 殖,主要是DNA合成受阻;影响迟发型变态反应 异体组织移植排斥反应的发生;在体液免疫方面, 可抑制初次抗体反应和再次抗体反应:既可抑制 IgM也可以抑制IgG的合成,还可抑制IgE的合成 与
较小剂量的干扰素对T和B细胞的功能明显 增强,如用200~800u/ml干扰素处理T细胞 时,可使T细胞的功能显著增强,用2000~ T 2000 8000 u/ml的干扰素处理“低反应”的B细 胞时,可使形成抗体的细胞明显增加。
7.IFN的临床应用
人们根据干扰素的多种生物学活性及功能,在临 床上进行了广泛的应用: α干扰素商品化制剂主要为重组型,治疗乙型肝 炎、T细胞白血病、AIDS等。
γ干扰素称为 Ⅱ型干扰素。 IFN- α有17个以上不同的基因编码, IFNβ、 IFN- γ的基因只有一个。
三、干扰素的生物学活性
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华中农业大学毕业论文中国·武汉二○一二年四月目录姓名 (1)摘要 (3)关键词 (3)Abstract (3)Key words (3)前言 (4)1 干扰素的发展历程 (4)1.1 干扰素出现的背景——病毒肆虐的年代 (4)1.2 干扰素之源——干扰素发现者Alick Isaacs (4)1.3 干扰素的定义 (4)1.4 发展概况 (5)1.5 干扰素(IFN)分类 (5)1.5.1 普通干扰素 (5)1.5.2 长效干扰素 (5)1.6 作用机制 (6)2 干扰素的生产工艺过程 (6)2.1 菌种制备 (6)2.2 种子罐培养 (6)2.4 菌体收集 (6)3 干扰素发酵过程控制 (6)3.1 溶解氧控制 (7)3.2 温度控制 (7)3.3 pH值 (7)4 干扰素的应用前景 (7)参考文献 (8)致谢 (8)干扰素的研究概论摘要干扰素是由干扰素诱生剂诱导生物细胞后所产生的一类高活性多功能的糖蛋白,自发现后一直处于细胞因子基础和临床研究的前沿。
干扰素首先作用于细胞的干扰素受体,经信号转导等一系列生化过程,激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白,实现对病毒的抑制作用。
本文叙述了干扰素的作用原理、特点以及生产,并对今后的发展前景进行了展望。
关键词干扰素;生物活性;细胞因子;AbstractInterferon is interferon induced by the guide to living agent biological cells produce a kind of highly active muti_function glycoprotein, after the discovery has been in the cell factors basic and clinical research field. Interferon in the role of the first cell receptor interferon, the signal transduction and so on a series of biochemical process, the activation cell gene expression of antiviral protein, and to realize the inhibition of the virus. This paper describes the role of the interferon principle, characteristics and production, and the development in the future was prospected.Key wordsIFN;Biological;CellFactor;前言干扰素是1957年Isaacs和Lindenmann在研究流感病毒的干扰现象时发现的。
当时,人们认为干扰素是干扰现象的一种介质,并以此而取名。
经过二十多年的研究,对干扰素的认识已有了根本的改观。
目前认为干扰素是细胞分泌的具有高度生物学活性的调节细胞功能的一类重要蛋白。
干扰素的研究与病毒学、细胞学、免疫学、临床医学、分子生物学及肿瘤学等均有密切关系,越来越受到医学界、生物学界的重视。
近5~6年来国际上千扰素研究的重点放在干扰素的分子生物学和干扰素的临床应用上。
我国也在这方面取得了较大的进展。
1 干扰素的发展历程1.1 干扰素出现的背景——病毒肆虐的年代就像弗莱明发现青霉素一样,干扰素的出现也充满了神奇和偶然色彩,50年代之前由病毒造成的传染病大流行严重影响了人类的健康,仅1918年的一次全球爆发的流感大流行就造成了4千万人的死亡,此外天花、麻疹、脊髓灰质炎等病毒引起的传染病也是非常流行,然而,人类一直没有找到一个象对抗细菌感染一样对抗病毒的有力武器,索性当时免疫学的发展促成了人类疫苗的研制成功,通过疫苗人们成功的抵御住了天花、麻疹、脊髓灰质炎的侵袭,然而,对于流感病毒感染却一直没有取得很好的突破,由于流感病毒容易变种的原因,流感疫苗一直未能研发成功,但仍有很多科学家在不遗余力的进行着流感病毒疫苗及其免疫接种等相关的研究。
1.2 干扰素之源——干扰素发现者Alick Isaacs1935年,美国科学家用黄热病毒在猴子身上做试验。
黄热病是一种由病毒引起的恶性病。
这种人和猴子都会得的病有几种类型。
他们先用一种致命性弱的病毒感染猴子,猴子安然无恙,可是再用致病性很强的黄热病毒染同一只猴子,猴子竟然没有反应。
这一现象使美国科学家得到启发:前一种病毒可能产生了某种物质,使细胞受新病毒的进攻时能自我防御。
1937年,有人重复类似的实验,证实给经裂谷热病毒感染的猴子注射黄热病毒,猴子也没事。
1957年,英国病毒生物学家Alick Isaacs和瑞士研究人员Jean Lindenmann,在利用鸡胚绒毛尿囊膜研究流感干扰现象时了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,后者作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素。
1.3 干扰素的定义干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。
国际上对于干扰素是这样定义的:干扰素是一类在同种细胞上具有广谱抗病毒活性的蛋白。
它的活性的发挥受到细胞基因组的调节和控制,涉及到RNA及蛋白的合成。
1.4 发展概况1957年科学家从流感病毒的鸡胚试验中发现干扰素1960年从人体血细胞中纯化出干扰素1969年证实干扰素可以抑制动物的肿瘤生长1975年纯化人类白细胞干扰素1986年基因工程技术使干扰素得以大规模生产1986年干扰素α被用于毛细胞白血病的治疗1991年FDA批准干扰素α用于治疗丙肝(美国食品药品管理局FDA )1992年FDA批准干扰素α用于治疗乙肝,使其成为治疗乙肝的第一个药物1993年FDA批准干扰素用于治疗多发性硬化2002年FDA批准聚乙二醇干扰素α-2a用于丙肝的治疗2005年FDA批准聚乙二醇干扰素α-2a用于乙肝的治疗1.5 干扰素(IFN)分类1957年发现干扰素以来,已知晓干扰素是真核细胞对各种刺激作出反应而自然形成的一组复杂的蛋白质。
如果用医学上更为详细的说法则是:干扰素是由病毒和其他种类的干扰素诱导剂,刺激网状内皮系统(人体免疫系统的一种)、巨噬细胞、淋巴细胞以及体细胞所产生的一种糖蛋白。
这种蛋白具有多种生物活性,包括抗增殖、免疫调节、抗病毒和诱导分化作用。
根据干扰素蛋白质的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ;若根据制作方法,可分为重组α-干扰素和人自然干扰素;人自然干扰素主要是体淋巴母细胞样多亚型天然干扰素(IFN-N1),重组α-干扰素临床上主要有α2a、α2b和α2b。
按药理作用分为:普通干扰素和长效干扰素。
1.5.1 普通干扰素普通干扰素分子小、作用时间短,一般情况下,普通干扰素注射12小时后基本完全排出体外,因而需要多次注射,普通干扰素的注射方法可以为隔一天注射一针或是一周注射三针。
对于普通干扰素的价位,普通干扰素价格比较低,300万剂量的普通干扰素价格一般在50-80元不等。
1.5.2 长效干扰素相对于普通干扰素,长效干扰素半衰期长,长效干扰素的半衰期长达40小时,可以在乙肝患者体内持续作用168个小时,因而,长效干扰素一周只需要注射一次,使用比较方便,而且提高了干扰素治疗的安全性。
至于长效干扰素的价格是多少?长效干扰素价格相对较贵,长效干扰素的价格一般在1200-1500元之间。
1.6 作用机制干扰素不能直接灭活病毒,而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白(A VP)发挥效应。
干扰素首先作用于细胞的干扰素受体,经信号转导等一系列生休过程,激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白,实现对病毒的抑制作用。
抗病毒蛋白主要包括2′-5′A合成酶和蛋白激酶等。
前者降解病毒mRNA、后者抑制病毒多肽链的合成,使病毒复制终止。
2 干扰素的生产工艺过程2.1 菌种制备取-70℃下保存的甘油管菌种(工作种子批),于室温下融化。
然后,接入摇瓶,培养温度30℃,pH7.0,250 r/min活化培养18±2小时后,进行吸光值测定和发酵液杂菌检查。
2.2 种子罐培养将已活化的菌种接入装有30L培养基的种子罐中,接种量10%,培养温度30℃,pH7.0,级联调节通气量和搅拌转速,控制溶解氧为30%,培养3~4小时,转入发酵罐中,同时取样发酵液进行显微镜检查和LB培养基划线检查,控制杂菌。
2.3 发酵罐培养将种子液通入300L培养基的发酵罐中,接种量10%,培养温度30℃,pH7.0。
级联调节通气量和搅拌转速,控制溶解氧30%,培养4小时。
然后控制培养温度20℃,pH6.0,溶解氧60%,继续培养5~6.5小时。
同时进行发酵液杂菌检查,当OD值达9.0±1.0后,用5℃冷却水快速降温至15℃以下,以减缓细胞衰老。
或者将发酵液转入收集罐中,加入冰块使温度迅速降至10℃以下。
2.4 菌体收集将已降温的发酵液转入连续流离心机,16000 r/min离心收集。
进行干扰素含量、菌体蛋白含量、菌体干燥失重、质粒结构一致性、质粒稳定性等项目的检测。
菌体于-20℃冰柜中保存时,不得超过12个月。
每保存3个月,检查一次活性。
3 干扰素发酵过程控制在假单孢杆菌的发酵生产中,菌体在培养1.5小时分裂速度最快,到3.5小时开始下降。
而干扰素的迅速合成出现在3.5小时之后,在4小时达到最大,然后由于降解而迅速下降。
可见在发酵生产工艺中,假单孢杆菌的生长和干扰素的生产基本处于不相关状态,可采用两段培养的策略进行过程控制。
3.1 溶解氧控制分别在生长阶段和生产阶段采用各自最佳溶解氧浓度,以期提高干扰素的发酵水平。
通过级联调节通气量和搅拌转速得以实现。
3.2 温度控制假单孢杆菌生长最适温度与产物形成最适温度是不同的。
产物合成温度控制在20℃可以有效防止干扰素-α2b的降解,而其最佳生长温度则为30℃。
质粒的稳定性随温度的升高而迅速下降,因此在培养后期降温可以减少目标产物的降解,增加质粒的稳定性。
3.3 pH值发酵过程中,pH的变化由工程菌的代谢、培养基的组成和发酵条件所决定。
干扰素-α的等电点在pH 6.0附近,在低酸性条件下稳定,能耐受pH 2.5的酸性环境。
因此可在发酵后期降低pH,从而造成大量蛋白酶失活,减少干扰素-α的水解,提高干扰素的积累量。
4 干扰素的应用前景迄今为止,世界上还没有一项科学新发现像干扰素那样能深刻改变肝炎治疗的进程。