番茄果实品质测定

可溶性糖含量测定（蒽酮法）
材料
仪器：分光光度计、天平、水浴锅、
大试管、三角瓶、容量瓶100ml、量筒25ml、移液管5ml一支、1ml一支、小漏斗
药品：标准葡萄糖溶液、准确城区无水葡萄糖200mg，放入200ml容量瓶中，加入蒸馏水定容，使用时稀释10倍（100ug/ml）
蒽酮试剂：称取0.1g蒽酮溶于100ml稀硫酸中（76ml浓硫酸稀释成100ml），贮于棕色瓶内，冰箱保存，可用数日。

方法
记录光密度值，绘制标准曲线。

2、样品中可溶性糖的提取称取减碎新鲜样品0.5~1g，放入三角瓶50ml中，再加入25ml 蒸馏水，放入沸水浴中煮沸20min，取出冷却，过滤入100ml容量瓶中，用热水冲洗残渣数次，定容至刻度。

在分光光度计上比色，测出光密度值，在标曲上查出相应含糖量（ug）
4、结果计算
可溶性糖含量%=【（糖含量（ug）×稀释倍数）/（样品质量×106）】×100
有机酸测定
仪器：天平、刀、研钵、漏斗、玻璃棒、水浴锅、滴定管、滤纸、移液管10ml一支，容量瓶50ml、三角瓶50ml，量筒25ml1个
药品：0.1mol/L氢氧化钠，1%酚酞，石英砂
步骤
1、城区5g番茄果肉，放入研钵中，加少许石英砂研磨成匀浆，用蒸馏水洗入50ml三角瓶中，加水约30ml，放在80°水浴锅中浸提30分钟，每隔5分钟搅拌一次。

取出冷却，过滤入50ml容量瓶中，并用蒸馏水洗残渣数次，定容至刻度，充分摇匀作测定用。

2、两区10ml样液放入50ml三角瓶中，加三滴酚酞指示剂，用0.1mol/L 氢氧化钠滴定至微红色，摇1min不褪色为终点，取3次平均值
计算结果
有机酸含量=(A×0.1×K×C)÷(W×D)×100
A滴定时消耗的氢氧化钠量，0.1=4×10-3 g/ml
K=0.67
C稀释总量
W样品质量
D测定时所取样液量ml
抗坏血酸测定（2,6-二氯酚靛酚法）
仪器 研钵、漏斗、玻璃棒、定量滤纸、滴定管、移液管、容量瓶、三角瓶 药品 2%草酸溶液：溶解20g 草酸结晶与200ml 水中，然后稀释至1000ml 。

200ml0.01% 2,6-二氯靛酚钠溶液：称区2,6-二氯靛酚钠60mg ，放入容量瓶中，加热的蒸馏水100-150ml ，滴加0.01mol/L 的氢氧化钠4-5滴，强烈震动10分钟，冷却后加水至刻度，摇匀后用精密滤纸过滤于棕色瓶内，贮于冰箱中备用。

有效期一周。

抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg 抗坏血酸，溶于2%草酸溶液中，定容至200ml ，混匀，吸取比液10ml ，再以2%草酸溶液稀释定容至200毫升。

方法
样品处理和提取
城区适量5g 样品置研钵中，加4毫升2%草酸，研磨成匀浆，用玻璃棒将样品提取液转移到50毫升容量瓶中，残渣用草酸洗2-3次和提取液一并转入容量瓶中，最后用2%草酸定容至刻度，摇匀过滤，滤液备用。

空白的测定
吸取10ml2%草酸，放入50毫升三角瓶中，用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内部褪色为止，记录所用滴定液体积（重复三次，取平均值）。

2,6-二氯靛酚钠溶液滴标定
吸取标准抗坏血酸溶液10ml ，放入50ml 三角瓶中，立即用所要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值）。

按下式计算K 值，K=
200G ×20010×v
10
K 为1ml2,6-二氯靛酚钠所能氧化抗坏血酸的质量，G 为称取抗坏血酸的质量V 滴定10毫升抗坏血酸溶液所用去2,6-二氯靛酚钠的体积与丁丁空白所用体积的差值。

样品测定
吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值）。

结果与分析
X=
滤
空样）（WV KV V V ×100
x 为100g 样品中所含维生素含量（mg/100g ）w 为称取样品的质量（g ）；v 样为滴定样品所用的2,6-二氯靛酚钠溶液的体积（ml ），v 滤为样品测定测定时所用滤液体积（ml ）；V 为样品提取液稀释之总体积，K 为上k 值。

可溶性总糖的测定
仪器：分光光度计；20ml刻度试管；刻度吸管（5ml，1ml）；记号笔；吸水纸适量
试剂1、蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。

2浓硫酸（比重1.84）
材料与方法
1标准曲线的制作
葡萄糖标准曲线的制作
取6支20ml试管，编号，按下表数据配置一些列不同浓度的标准葡萄糖溶液。

在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值，以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。

2样品中可溶性糖的提取
称取1克样品，研磨成匀浆，然后转入20ml刻度试管中，用10ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中，置沸水浴中加盖煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集于100ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。

3糖含量测定
用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度试管中，加1ml水合0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸（注意：浓硫酸遇水会产生大量的热），盖上试管塞后，轻轻摇匀，再置沸水浴中10分钟（比色空白用2毫升蒸馏水与0.5毫升蒽酮试剂混合，并一同于沸水浴保温10分钟）。

冷却至室温后，在波长620nm下比色，记录光密度值。

查标准曲线上得知对应的葡萄含量（ug）。

结果计算
样品含糖量（g/100g鲜重）=
考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白含量
标准蛋白质溶液（100ug/ml牛血清蛋白）：称取牛血清蛋白25mg，加水溶解并定容至100ml，吸取上述溶液40ml，用蒸馏水稀释至100ml即可。

4℃下保存备用。

考马斯亮蓝G250溶液：称取100mg考马斯亮蓝G250，溶于50毫升90%乙醇中，加入100ml85%（W/V）的磷酸，再用蒸馏水定容到1000毫升，贮于棕色瓶中。

常温下可保存一个月。

材料与方法
标准曲线的绘制：取6支试管，编号后，按下表加入试剂，混合均匀后，向各管中加入5ml 考马斯亮蓝G250溶液，摇匀，并放置2min后，以0号试管为空白管凋零，在595nm下比色测定吸光度（比色应在1h内完成）。

以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制
1）样品提取：称取鲜样0.25g~0.5g，用5ml蒸馏水研磨成匀浆后，3000r/min离心10分钟，上清液备用。

2）吸取样品提取液1ml（视蛋白质含量是当稀释），放入试管中（每个样品重复2次），加入5毫升考马斯亮蓝G250溶液，摇匀，放置2分钟后，在595nm波长下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。

样品中蛋白质含量（mg/g）=C×V T/(V S×W F×1000)
式中C-查标准曲线值ug
V T--提取液总体积ml
W F---样品鲜重g
V S--测定时加样量ml。