瘢痕疙瘩成纤维细胞P53基因突变检测

任何形式的 A"! 基因突变， 见表 & 。
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注： 瘢痕疙瘩图中 I： G:K <21R,1 ； :%9 :& ， :$ ：正常皮肤； W& ， W$ ： 为扩增出来的目的基因 在 B%% 7N 处可见荧光带，
B" # C #D
维细胞的生物学特征， 从而促进创伤修复， 同时通过直接或间接 过敏反应及免疫因 的作用刺激血管扩张和增生 L< N A M 。炎症反应、 素在 JK 中的作用已有研究证实， 故推测去炎松 N ? 可能通过其 抗炎， 抗过敏及免疫调节作用， 减轻创伤的炎症反应， 使成纤维 细胞在伤口内游走减少， 而抑制微血管生长和瘢痕增生。 无论是破 两种治疗方法在预防及治疗 JK 中均有明显疗效。 坏瘢痕内微血管， 还是改善胶原代谢、 降低胶原沉积， 均能有效 地防止瘢痕的过度增长。 JK 内微血管密度及 O、 OOO 型胶原含量之 间有很好的相关性， 两者均可作为治疗 JK 的可靠评价指标。 参考文献： L # M +‘J7 @6 S% %3?7 SR; P.)8)(5’,( ,1 -(1/8,./40) *2/.* -*’(Y )/.0W e-0*)Z ZW)0/*). 5.)/59)(5h / e.)0’9’(/.W .)e,.5 ?(( L + M ; P0/*5 K-.Y6 #FFF6 A! B # D h I N #A; L ! M TJ3%O%J JP; JYe).5.,e&’2 K2/.h /( ’(5)..-e5’,( ’( 5&) .)9,Z)0’(Y ,1 #FF>6 F" .)e/’.) V/*). R,ee0). 40,,Z 10,d *5-ZW L + M ; P0/*5 3)2,(*5. K-.W ， B $ D h FF< N FF>; L < M :TR? X6 ij3jU? T6 k?KjR? k6 )5 /0; JWe).5.,e&’2 *2/.* &/8) 2,(l 5’(,-* &’Y& 9)5/4,5’2 /25’8’5W L + M ; PV?K[6 3T%‘7K[36 Kj3U6 #FFF6 #"A B < D h $IA N $I>; L A M @TT [m6 @?VKmO7 J%6 U‘RR?3R +36 )5 /0; ?(Y’,Y)(5*’* ’( e/5&,l 0,Y’2/0 /(Z *-.Y’2/0 *2/. L + M ; J-9 P/5&,06 #FF>6 !F B ## D h #!I< N #!I>;
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作者简介： 段红杰 B #FI" — D ， 男， 山西稷山人， 主治医师， 硕士， 研究方 向为瘢痕疙瘩成纤维细胞纤维活性研究。
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万方数据
中国临床康复 $%%$ 年 && 月 第 ’ 卷 第 $$ 期 ()*+,-, ./01+23 /4 (3*+*523 6,)27*3*828*/+9 :/;,<7,1 $%%$9 =/3> ’9 :/> $$
注： 与对照组相比 " $ G "; "# ， 与同组 # 个月对照 , $ G "; "= ， 与 E @ 组对照 $ H "; "= 表< 组别 各时段瘢痕组织内 " 型胶原纤维密度 ! B" # C #D 型胶原纤维密度 # 个月 < 个月 ?组 ## "; #> C "; "A "; #= C "; A "* E @组 "; #= C "; "< "* #A "; #I C "; "= 组 % "; #> C "; "A * #" "; !# C "; "= 注： 与对照组相比 " $ G "; "# ， 与同组 # 个月对照 , $ G "; "= ， 与 @ 组对照 E $ H "; "= 修复的基础， 在创伤修复早期， 修复细胞的激活， 离不开炎性细 胞和炎性介质， 而 JK 形成过程中持续的慢性炎症反应导致微血 管的增生和紊乱、 通透性亢进， 血浆中析出的纤维蛋白及纤维蛋 白网， 将为成纤维细胞提供游走的场所和增殖的能源， 从而促进 另有研究表明， 多种炎性细胞 胶原的大量沉积， 导致 JK 形成 L ! M 。 和生长因子，在创伤修复中通过旁分泌或自分泌机制影响成纤
# #; # #; #; # 材料与方法 材料 标本 瘢痕疙瘩患者共 $ 例， 男 = 例， 女 # 例， 病变部位 P=< 基因外显子 A ：上游 [U%%U[%%%??U%??[UU?[ 下游 %[UUU??UUU?%?U??U?[U? 上游 [?%[%%%%[U%%%[%??%??U P=< 基因外显子 = ， $： 下游 ?U[[U%???%%?U?%%[%?U #; ! #; !; # 方法 成纤维细胞的培养 将手术切下的标本在无菌条件下
分别为前胸、 背部及耳垂， 均经临床及病理诊断证实， 年龄 > Q 共 $ 例， 男 A 例， != 岁。正常皮肤对照取自正常人腹部供皮区， 女 ! 例， 年龄 #= Q !> 岁。 #; #; ! 试剂及仪器 RSTS 培养基为 U’42, @3V 公司产品 6 胎 牛血清为 JW20,() 公司产品， 3(/*) ? 及蛋白酶 X 为 K’Y9/ 公司 产品，Z7[P*、 [/\ 聚合酶、 P%3 反应缓冲液为 [/X/3/ 公司产 品。 #; #; < 引物设计 B 由上海生工合成 D
B 收稿日期： !""! N "> N #F D
B 编辑： 姚
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康复相关基础研究
瘢痕疙瘩成纤维细胞 P=< 基因突变检测
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・论著・
段红杰 # ， 高建华 ! ， 沈光裕 # B #; 解放军第一八七中心医院，海南 海口 =I##=F ；!; 解放军第一军医大学南方医院，广东 广州
摘要： 目的 探讨瘢痕疙瘩体外培养成纤维细胞是否存在 P=< 基因突变及形成发展机制。 方法 对所取新鲜组织标本进行细胞 培养， 设计 P=< 基因外显子 A ， 从所培养各组成纤维细胞中提取细胞总 R7?， 采用 P%3 技术对所需基因片段进行扩 =， $ 的引物序列， （$ b $ ） 增， 并对目的基因进行测序。 结果 对 P%3 产物 R7? 序列分析后发现， 所有体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞 均存在 P=< 外显子 （! b $ ） 有!例 表现为点突变及移码突变， 而正常皮肤成纤维细胞则未发现有任何形式的 A 的基因突变， P=< 外显子 = 存在基因突变， 基因突变。结论 瘢痕疙瘩成纤维细胞存在 P=< 基因突变， 这可引起其细胞增殖凋亡异常。 关键词： 瘢痕疙瘩； 成纤维细胞； 基因突变 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： 3$#F ? #$I# N =F!$ B !""! D !! N <<=> N "!