艾滋病梅毒和乙肝实验室检测
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术教材
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术岳阳市疾控中心白志永艾滋病抗体检测及样品保存、运送一、HIV抗体检测筛查方法酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）（建议配备合格的快速检测试剂，灰区。
）二、筛查程序初筛和复检流程（图1）样品筛查试剂初筛试验阳性反应阴性反应原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂复检试验均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1 HIV抗体筛查检测流程三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例）HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。
四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程1、适用范围HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。
2、检测程序图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程五、样品的保存、运送1、样品的保存用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。
2、样品的运送（例）（1）应符合生物安全要求；(2)应采用三层容器对样品进行包装。
第一层容器：直接装样品，应防渗漏。
样品应置于带盖的试管内。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。
外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。
(3) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。
质量控制一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制1、试剂盒内部对照即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。
用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序实验室是进行各类病原微生物检测的重要场所，包括艾滋病、梅毒和乙肝等项目的标准化操作程序也是实验室工作的核心。
标准化操作程序的制定，旨在确保实验室工作的准确性、可靠性和连续性，最大程度地减少误差和风险。
下面将详细介绍实验室艾滋病、梅毒和乙肝项目的标准化操作程序。
一、艾滋病检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用艾滋病抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
二、梅毒检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用梅毒抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
三、乙肝检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
病患艾滋病、梅毒和乙肝检测服务流程
病患艾滋病、梅毒和乙肝检测服务流程
本文档旨在介绍病患艾滋病、梅毒和乙肝检测的服务流程。
以
下是详细的步骤：
1. 预约和登记
- 患者需要提前预约检测服务，可以通过电话、在线预约系统
或直接前往医院前台预约。
- 在预约时，患者需要提供个人身份信息和联系方式，并填写
相关的健康调查表。
2. 接待和咨询
- 患者到达医院后，会被工作人员接待并进行初步咨询。
- 工作人员会向患者介绍检测程序和注意事项，并解答患者可
能有的疑问。
3. 血液采样
- 针对艾滋病、梅毒和乙肝的检测，一般需要进行血液采样。
- 医院工作人员会引导患者前往指定的采样室，进行血液采集。
4. 检测和结果分析
- 采集到的血液样本将被送往医院实验室进行检测。
- 实验室技术人员会根据不同的检测方法进行相应的检测。
- 检测完成后，医务人员会对结果进行分析，并记录在病患档案中。
5. 结果通知和咨询
- 当检测结果可得时，医院会主动联系患者，并通知他们的检测结果。
- 医务人员会给予患者合适的咨询和建议，包括必要的治疗或进一步测试。
6. 隐私保护
- 医院会严格遵守患者的个人隐私权，并保证检测过程的机密性。
- 患者的个人信息和检测结果将严格保密，并仅限授权人员使用。
请注意：本文档仅提供一般性的服务流程，实际的流程可能因医院和地区而有所不同。
为了获得准确的服务信息，请与目标医院的相关部门联系。
艾梅乙
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA） 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测（RT） 荧光螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
原理：用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与人 血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生 可见的凝集反应，具有较高的敏感性和 特异性。 是目前WHO公认的梅毒抗原血清学试验 的“金标准”，常用于新方法、新试剂 的参照标准。
TPPA操作步骤
TPPA结果判读
TPPA技术要点
每批次要求同时检测阳性对照（1:320阳 性）； 建议双人判读； 对于“±”（保留）的结果，建议根据 其他实验结果和病人临床症状综合判断； 定期人员比对
TPPA注意事项
服用了含有免疫球蛋白血液制剂的患者 样品中，由于可能因服用的制剂而呈假 阳性。 需考虑前带现象。
TP-ELISA/CLIA
用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条， 加上梅毒血清和单克 隆抗体酶标记物， 形成抗原抗体复合物与酶标记物结合， 用酶标仪或全自动化学发光仪判定实验 阳性反应。 可用于大样本血清检测，可自动化。 结果直观，原始记录便于保存。 可能存在非特异性反应引起的假阳性， 建议用TPPA复检。
乙肝病毒感染血清学标志物
乙肝表面抗原（HBsAg） 乙肝表面抗体（抗–HBs） 乙肝e抗原（HBeAg） 乙肝e抗体（抗–HBe） 乙肝核心抗体（抗–HBc） HBVDNA
艾滋病梅毒乙肝配偶检查流程制度及标准
艾滋病梅毒乙肝配偶检查流程制度及标准下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by the editor. I hope that after you download them, they can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types of practical materials, suchas educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!艾滋病、梅毒和乙肝是三种常见的性传播疾病，它们对人体的健康造成了严重威胁。
艾梅、乙、检测服务流程图--
附件1（产科门诊、病房上墙）预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程图1. 预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程）附件2-I（检验科上墙）孕产妇艾滋病抗体检测及服务流程图2. 孕妇艾滋病抗体检测及服务流程附件2-II（检验科上墙）产时艾滋病抗体检测及服务流程说明：# 再次确认结果阴性报告“阴性”，结果阳性报告“阳性”，结果仍为“不确定”继续随访，4周后再次进行确认试验；仍为不确定结果，报告“阴性”。
必要时可进行HIV核酸检测作为辅助诊断。
图3产时艾滋病抗体检测及服务流程）（适用于孕期未接受HIV检测的产妇）附件3（检验科上墙）孕产妇梅毒检测及服务流程图4.孕产妇梅毒检测及服务流程艾滋病感染孕产妇及所生儿童抗艾滋病病毒用药方案预防艾滋病母婴传播抗病毒药物的应用可分为预防性抗病毒用药方案和治疗性抗病毒用药方案。
对于处于艾滋病临床I期或II期，免疫功能相对较好，CD4+T淋巴细胞计数>350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用预防性抗病毒用药方案；对处于艾滋病临床Ⅲ期或Ⅳ期，CD4+T淋巴细胞计数≤350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用治疗性抗病毒用药方案。
一、预防性应用抗病毒药物（一）孕产妇预防性应用抗病毒药物。
1.孕期和分娩时。
从妊娠14周或14周后发现艾滋病感染后尽早开始服用齐多夫定（AZT）300mg +拉米夫定（3TC）150mg +洛匹那韦/利托那韦（克力芝）（LPV/r）400/100mg，每天2次；或者AZT300mg+3TC150mg，每天2次，依非韦伦（EFV）600mg，每天1次，直至分娩结束。
2.分娩后。
若选择人工喂养，产妇可在分娩结束后停止抗病毒药物的应用；若选择母乳喂养，产妇持续应用抗病毒药物至停止母乳喂养后1周。
（二）婴儿应用抗病毒药物。
婴儿可以选择应用以下两种抗病毒药物方案中的任一种。
1.奈韦拉平（NVP）方案:新生儿出生体重≥2500g，服用NVP 15mg（即混悬液1.5ml），每天1次；出生体重＜2500g且≥2000g，服用NVP 10mg（即混悬液1.0ml），每天1次；出生体重＜2000g，服用NVP 2mg/kg（即混悬液0.2ml/kg），每天1次；至出生后4～6周。
艾滋与梅毒实验室检查
样品的编码和记录
应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编 号），保证其唯一性。 采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，最好使用预 先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品，同时录入电脑保存。
菌种的分类根据其危险性决定(包括实验室感染的可能性，感染后发病的可能性，症状 轻重及愈后情况，有无致命危险及有效的防止实验室感染方法，用一般的微生物操作 方法能否防止实验室感染、我国有否此种菌种及曾否引起流行、人群免疫力等情况)。 依其危险程度的大小，我国的菌种分为四类。 致病性病原微生物可根据其易感程度分为四类，第一类、第二类病原微生物统称为高 致病性病原微生物。人类免疫缺陷病毒（HIV）属第二类病原微生物，是高致病性病 原微生物。 HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检测和相关的免疫学检测应在符合Ⅱ级 生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。 HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究 工作，应在Ⅲ级生物安全实验室（BSL-3）中进行。 HIV核酸提取和检测均应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实 验室中进行。 HIV病毒株应保存在符合Ⅲ级生物安全实验室（BSL-3）要求的艾滋病实验室；HIV阳 性样品，包括全血、血清、血桨和其他组织（液）、核酸提取物应保存在符合BSL-2 要求的艾滋病实验室。
HIV实验室生物安全防护
二类生物安全实验室
ห้องสมุดไป่ตู้
定义
生物安全实验室（biosafety
laboratory ），也称生物安全防护实验室 (biosafety containment for laboratories)，是通过防护屏障和管理措施，能够避免或控制被操作的有害生物因子危害，达到生物安 全要求的生物实验室和动物实验室
艾、梅、乙、检测服务流程图附件1--9
附件1（产科门诊、病房上墙）预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程图1. 预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程）附件2-I（检验科上墙）孕产妇艾滋病抗体检测及服务流程图2. 孕妇艾滋病抗体检测及服务流程附件2-II（检验科上墙）产时艾滋病抗体检测及服务流程说明：# 再次确认结果阴性报告“阴性”，结果阳性报告“阳性”，结果仍为“不确定”继续随访， 4周后再次进行确认试验；仍为不确定结果，报告“阴性”。
必要时可进行HIV核酸检测作为辅助诊断。
图3 产时艾滋病抗体检测及服务流程）（适用于孕期未接受HIV检测的产妇）附件3（检验科上墙）孕产妇梅毒检测及服务流程图4.孕产妇梅毒检测及服务流程艾滋病感染孕产妇及所生儿童抗艾滋病病毒用药方案预防艾滋病母婴传播抗病毒药物的应用可分为预防性抗病毒用药方案和治疗性抗病毒用药方案。
对于处于艾滋病临床I期或II期，免疫功能相对较好，CD4+T淋巴细胞计数>350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用预防性抗病毒用药方案；对处于艾滋病临床Ⅲ期或Ⅳ期，CD4+T淋巴细胞计数≤350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用治疗性抗病毒用药方案。
一、预防性应用抗病毒药物（一）孕产妇预防性应用抗病毒药物。
1.孕期和分娩时。
从妊娠14周或14周后发现艾滋病感染后尽早开始服用齐多夫定（AZT）300mg +拉米夫定（3TC）150mg +洛匹那韦/利托那韦（克力芝）（LPV/r）400/100mg，每天2次；或者AZT300mg+3TC150mg，每天2次，依非韦伦（EFV）600mg，每天1次，直至分娩结束。
2.分娩后。
若选择人工喂养，产妇可在分娩结束后停止抗病毒药物的应用；若选择母乳喂养，产妇持续应用抗病毒药物至停止母乳喂养后1周。
（二）婴儿应用抗病毒药物。
婴儿可以选择应用以下两种抗病毒药物方案中的任一种。
1.奈韦拉平（NVP）方案:新生儿出生体重≥2500g，服用NVP 15mg（即混悬液1.5ml），每天1次；出生体重＜2500g 且≥2000g，服用NVP 10mg（即混悬液1.0ml），每天1次；出生体重＜2000g，服用NVP 2mg/kg（即混悬液0.2ml/kg），每天1次；至出生后4～6周。
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报告： 非梅毒螺旋体抗原 血清学试验阳性 梅毒螺旋体抗原血 清学试验阴性
报告： 两种检测均阳性
治疗病人
治疗后，随访监测非 梅毒螺旋体抗原血清 学试验
阳性 反应
每3个月进行非梅毒螺旋体 抗原血清学试验 如果需要进行治疗 16 幻灯片16
HIV感染病人的梅毒血清学试验
一些HIV感染病人，其梅毒血清学试验结果不典型， 包括
梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测特异性梅 毒螺旋体抗体）
• TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验） • ELISA（酶联免疫吸附试验） • POC（快速检测、一站式检测）
7
梅毒诊断检测
梅毒早期诊断的依据之一是病原学检测，即在组
织或分泌物中检测到苍白螺旋体： – 暗视野显微镜 – 镀银染色镜检
8
幻灯片8
一期梅毒：1年后抗体滴度转阴 二期梅毒：2年后抗体滴度转阴
晚期梅毒：
治疗后抗体滴度缓慢下降 50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性
13
梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验 检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体 可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性 结果，排除其假阳性 阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。* 梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动 度无关，不能用于鉴别现症感染还是既往 感染，也不能用于判断疗效
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体（非梅毒螺
旋体抗体）
非梅毒螺旋体抗体
• 又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原的抗体 • 随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高
除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体 抗原血清学试验假阳性结果，包括结核、疟疾、 妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫 学疾病
• 滴度超常高或超常低 • 滴度不断变动
如果临床表现提示早期梅毒，而血清学试验结果与 此不一致，考虑
• 病灶活检 或 • 暗视野显微镜检查
注意：对于大多数HIV感染病人而言，梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、 随访观察疗效准确、可靠的检测方法
17
梅毒血清学检测结果的解释
非梅毒螺 旋体试验 梅毒螺旋 体试验 临床参考意义
* 一期梅毒治疗病人中，15%-25%可在2-3年后转为血清学阴性
14
妊娠期梅毒检测
所有孕产妇应进行梅毒筛查检测： – 孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及 – 如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果，在分娩时检测 筛查检测可应用以下任何一类方法： – 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或 – 梅毒螺旋体抗原血清学试验 所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另外一类检测方法进 行复检确认是否为现症梅毒 所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录在 病历中，以确保需要时给予治疗
注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检 测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPR 和TRUST方法均有效，但检测的滴度结果不能直 12 接进行比较 幻灯片12
治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验 抗体滴度变化的临床意义
一期梅毒和二期梅毒：
成功治疗，抗体滴度应
• 3个月后下降2倍 • 6个月后下降4倍
梅毒血清学试验基本实验室设备
检方法
RPR/TRUST TPPA ELISA POCT检测
检测样本类型 血清
√ √ √ √
血浆
√ √ √ √
全血
必要设备
水平旋转仪 震荡仪 酶标仪、洗板机
√
无需特殊设备
6
梅毒诊断检测
血清学试验检测梅毒感染相关抗体 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测非特异性抗体）
• RPR（快速血浆反应素环状卡片试验） • TRUST（甲苯胺红不加热血清试验） • VDRL（性病研究实验室试验）
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孕产妇梅毒检测流程
孕产妇
或 非梅毒螺旋体抗原血清学 试验 阴性反应 阳性反应 梅毒螺旋体抗原血清学试 验 阳性反应 阴性反应
梅毒螺旋体抗验阴性 阳性反应
非梅毒螺旋体抗原血清学 试验 阳性反应
阴性反应 报告： 梅毒螺旋体抗原血 清学试验阳性 非梅毒螺旋体抗原 血清学试验阴性 报告： 梅毒螺旋体抗 原血清学试验 阴性
梅毒的实验室检测
综合产前检查服务+ 检测
孕产妇参加产前 检查服务 检测前信息 取血样
全血细胞计 数和其它检 测 HIV 检测 梅毒检测 HBV 检测
2
梅毒的实验室检测
3
梅毒筛查检测
筛查检测
– 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染 梅毒：梅毒血清学检测 – 筛查检测应
• 具有较高的灵敏度和特异度 • 操作简单、容易获得、便宜 • 尽可能在“当日”获得结果
4
幻灯片4
筛查检测何时使用何种检测？
梅毒
检测方法
• 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPR或 TRUST检测） • 梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、 ELISA或梅毒快速检测） • • • • 第一次产检（孕早期） 或下一次产检时 如有必要，孕晚期再次检测 此前无检测结果，则在分娩时检测
5
检测时间
9
非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点
非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
快速、简便、便宜
敏感性和特异性较高
硬下疳后1-2周变为阳性 可用于
– 筛查样本 – 评估对治疗的反应 – 鉴别复燃还是再次感染
10
幻灯片10
确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验 质量的关键点
1. 按照标准操作程序（SOPs）进行操作
2. 推荐使用评价特性较好的试剂*
3. 按照统一的标准报告结果
4. 开展实验室质控（QC）和参加室间能力验证（PT）
* 由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供
11
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
抗体滴度通常与疾病活动度有关。
• 治疗后（可能几个月）非梅毒螺旋体抗原血清学 试验通常转变为不反应 • 如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如 从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著 变化 • 有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时 可持续终生（血清固定）
RPR假阳性 – 考虑其他医学状况* 现症梅毒 既往感染
或 极早期梅毒
+ + -
+ +
-
-
排除梅毒感染
由于免疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期
*包括结核、疟疾、风湿性关节炎或妊娠。
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暴露婴儿的梅毒检测
19 幻灯片19
梅毒暴露婴儿先天梅毒检测