2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1、纯化大肠杆菌最常用的接种方法? 2、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进 行划线？ 3、在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总 是从上一次划线的末端开始划线？ 4、注意不要将最后一区的划线与第一区相连？ 5、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要 灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼 烧接种环？
2、显微镜直接计数法： 1）工具：细菌计数板或血细胞计数板，在显微 镜下计算微生物的数量。
1mm
2）缺点： 不能区分死菌和活菌。
（死菌活菌都算上）
3）活菌统Leabharlann 结果： 比实际值偏大练习：统计活菌的计数方法？ 稀释涂布平板法
（三）设置对照
1、目的：是排除实验组中非测试因素对实验结果 的影响，提高实验结果的可信度。 2、设计实验证明培养基中是否有杂菌污染？
5、例题：完成课本22页讨论题。
1）该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的 葡萄糖 尿素 分别是什么物质？ 2）从物理性质看，培养基属于哪类？ 固体培养基
3）想一想这种培养基对微生物是否有选择作用？如果 有。因为培养基中尿素是唯一氮源，因 有如何进行选择的？ 此只有能够利用尿素的微生物才能生长 4）如果接种在全营养培养基上，菌落数量如何？为什么？ 以全营养培养基作对照，能说明图中培养基有什么作用？ 多。因为全营养培养基中牛肉膏、蛋白胨提供氮源，几乎
复习提问：
1、纯化大肠杆菌最常用的接种方法? 2、两种方法所需的工具？ 3、涂布时转动什么？目的？ 4、纯化大肠杆菌的实验如何设置对照实验？结果？ 5、培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗? 6、菌株的短期保存方法？长期保存方法？ 7、平板划线法和稀释涂布平板法区别？
课题2
学习目标
土壤分解尿素的细菌的 分离与计数
菌落
思考与讨论： 1、想一想：如何根据平板上的菌落数推测出每克 样品中的菌落数? 2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度 ？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解 尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 如果不同，你打算选用多大的稀释范围？ 3、反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官—瘤 胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微 生物能以尿素作唯一氮源。请你设计一个实验 ，从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物。
1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌
(一) 筛选菌株
1、筛选菌株的方法：制备选择培养基。 2、如何在自然界寻找目的菌株？ (1)依据：根据它对生存环境的要求，到相应环境 中去寻找。 (2)实例： PCR技术要求使用耐高温的DNA 聚合酶。如何寻找耐高温的DNA 聚合酶呢？ 从热泉中生存的耐高温Taq细菌 中分离出来的。
可能原因 设置对照 ①所取土 其他同学用与A 样不同 同学一样的土 样进行实验
实验结论 若结果与A同学的一致， 则说明A无误；若结果 与A不一致，则说明A同 学失误。 ②培养基 将A同学配制的 若有菌落出现，则说明 污染 培养基在不加 培养基污染；若无菌落 土样的情况下 出现，则说明未被污染 进行培养，作 空白对照
思考：下列微生物应该到什么环境中寻找？
耐盐微生物
耐寒微生物 分解石油的细菌
盐碱地等高盐的环境
冰川
油田
3、实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利 于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)， 同时抑制或阻止其他微生物的生长。 4、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类 的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物 生长的培养基，称作选择培养基。
④不同种类微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。
(五)实验结果的鉴定
1、原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培 养基的碱性增强，pH升高，因此，可通过检测PH 的变化来判断该化学反应是否发生。 反应式：CO(NH2)2+H2O 脲酶 CO2+2NH3 2、方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚 红指示剂，培养某种细菌，若pH升高，指示剂变 红，说明该细菌能够分解尿素。 3、成为鉴别培养基。 4、举例：大肠杆菌在伊红美蓝培养基上培养，大 肠杆菌的菌落呈现黑色。
由此可见，实验结果要有说服力，对照组的设置必不可少。
(四)实验设计
1、步骤：
①土壤取样②制备培养基③样品稀释涂布平板
④微生物的培养与观察⑤菌落的计数
样品稀释培养示意图
2、注意事项： ①选有机物含量高、土质肥的土壤，含微生物数量多。
②一般在距地表约3~8CM的土壤层，取样时要铲去表层土。
③保证菌落数在30~300之间的平板。
（二）统计菌落数目 1、方法 ：1）活菌计数法 2）显微镜直接计数法 1）活菌计数法（稀释涂布平板法） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约 含有多少活菌，一般选菌落数在30~300的平板。
第一位同学：应设置重复组，增强实 ②实验操作 验的说服力与准确性。 第二位同学：一般选择菌落数在30 ~ 300的平板进行计数，然后求平均值。 如果第二个同学第一组改为31，行不行？ 不行，不但要在30~300之间，还应该相差不大。
③计算公式： 每克样品中的菌株数=（C÷V) × M C代表平均菌落数，V代表稀释液的体积，M代表稀 释倍数。 练习：a新学案19页典例2② b将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分 别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的 菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中 的活菌数为（3.8×107） ④活菌统计结果：统计的菌落数往往比实际的活菌 数目低？ 因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到 的只是一个菌落。
设置未接种的牛肉膏、蛋白胨培养基作为空白对照，若此 培养基中没有菌落生长，说明培养基制备过程中没有被杂 菌污染。 3、设计实验证明选择培养基是否具有选择所用？ 制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的 倍数涂布，如果牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目明 显多于选择培养基上的数目，则判断选择培养基起到了选 择作用。 4、试分析课本23页实验，帮助A同学排除上述两个可能影 响实验结果的因素？
2-2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
• 将接种的培养基和未接种的培养基都放在 37度恒温箱，培养12h和24h,观察并记录结 果。
四、课题延伸：菌种的保存
1.临时保藏： 接种到固体斜面培 养基，菌落长成后置 于4℃冰箱保存。
2.长期保存： 甘油管藏法
尿素分子的立体结构
1、常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、 棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌 也能分解尿素。 2、课题目的 一、从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 二、统计每克土壤样品中尿素细菌的数目
（二）统计菌落数目 • 显微镜直接计数法
• 稀释涂布平板法（活菌计数法）
1、显微镜பைடு நூலகம்接计数法
1mm
每一个大方格边长为 1mm ，则每一大方格的面积为1mm2， 盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，所 以计数室的容积为0.1mm3。 下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设 五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个 大方格中的总菌数是多少? 5A 1ml菌液中的总菌数?(1ml=1cm3=1000mm3） 5AB×104
实验步骤
2.制备培养基
制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和15个 选择培养基，准备好无菌试管和移液管。
注：每个稀释度下需要3个选择培养基 （平行重复原则），1个牛肉膏蛋白胨培养 基。选用稀释倍数为103~107的稀释液。
为什么分离不同的微生物 要采用不同的稀释度？测定土 壤中细菌的总量和测定土壤中 能分解尿素的细菌的数量，选 用的稀释范围相同吗？
一般来说，在一定的培养条件下(相同的培养
基、温度及培养时间)，同种微生物表现出稳定的
菌落特征。菌落形状、大小、隆起程度和颜色
土壤中分解尿素的细菌的分离导学案-学生版
2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、预习学案1．基础知识1．1 尿素是一种重要的肥，农作物（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为，这是因为细菌能合成。
1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供的条件（包括等），同时其他微生物生长。
1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是法。
除此之外，也是测定微生物数量的常用方法。
1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于1个活菌。
通过统计，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
1．5统计的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。
因此，统计结果一般用来表示。
1．6设置对照的主要目的是排除因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
1．7对照实验是指除了条件外，其他条件都的实验。
满足该条件的称为，未满足该条件的称为组。
2．实验设计2．1 实验设计的内容包括、、和等。
2．2 根据图示2－7填写以下实验流程：Array2．3 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性的潮湿土壤中，约70％～90％为。
2．4 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是。
2．5 培养不同微生物往往需要不同培养温度和时间。
细菌一般在培养1～2d，放线菌一般在培养5～7d，霉菌一般在的温度下培养3～4d。
2．6菌落的特征包括等方面。
2．7实验过程1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要。
2）应在旁称取土壤10 g。
将称好的土样倒入盛有90mL 的锥形瓶中，塞好棉塞。
3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在旁进行。
4）实验时要对培养皿作好标记。
注明等。
5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先。
3．结果分析与评价3．1对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助的方法。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
5.测定细胞总氮量或总碳量
7
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
8
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
1.想一想，如何从平板上的菌落数推测出每克样品中 的菌落数？
答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计 3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁 栏的公式进行计算。
9
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
富集一些。
检测：酚酞的灵敏度不
如酚红，因此建
议最好使用酚红，
否则效果不明显。
31
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
培养基 类型
日期 第一天 第二天
平板细菌数（土壤稀释度）
选择性培养基
（涂布接种）
（未涂布接种）
牛肉膏蛋白胨 培养基
32
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀课件
本课题知识小结:
33
12
两稀释度 菌数之比
1.6 2.2
-
菌落总数 个/g或个/ml
16400 38000 27100 513000
270 30500
报告方式 个/g或个/ml 16000或1.6×104 38000或3.3×104 27000或2.7×104 510000或5.1×105 270或2.7×102 31000或3.1×104
102
103
104
105
106
107
101
10g土壤
9ml
无菌水
9ml 无菌水
104
105
106
107
104
105
106
107
104
105
106
107
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验方案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验方案尿素是一种含氮有机化合物，广泛用作化肥和动物饲料。
土壤中的细菌可以通过分解尿素来获取氮元素，从而促进土壤微生物群落的生长和发展。
为了研究土壤中分解尿素的微生物群落，可以进行以下实验：
1.采集土壤样品，将其通过蒸馏水过滤器过滤，以去除大颗粒物和悬浮物。
2.将过滤后的土壤样品接种到含有尿素的培养基中，利用不同的培养条件(如温度、pH值、氧气含量等)筛选出适宜于生长的细菌。
3.将筛选出的细菌进行单一克隆培养，然后通过染色、显微镜观察和生化测试等方法对其进行鉴定和分类。
4.最后，可以利用计数板等设备对土壤中分解尿素的细菌进行计数。
实验步骤：
1.收集土壤样品，通过蒸馏水过滤器过滤。
2.制备含尿素的培养基，分别设置不同的培养条件，如温度、pH 值、氧气含量等。
3.将过滤后的土壤样品接种到培养基中，进行培养。
4.观察培养基中是否有细菌生长，记录细菌的数量和形态特征。
5.对生长的细菌进行单一克隆培养，然后进行鉴定和分类。
6.利用计数板等设备对土壤中分解尿素的细菌进行计数。
实验注意事项：
1.在实验过程中要注意卫生，避免污染。
2.制备培养基时要严格按照配方和操作步骤进行。
3.培养时要控制好温度、pH值、氧气含量等条件，以便筛选出适宜于生长的细菌。
4.鉴定和分类时要准确和细致，避免误判。
5.计数时要进行多次重复，以提高结果的精度和可靠性。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
3.重复组的结果是否一致
如果各位同学选取的是同一种土样，统计的结 果应该接近。如果结果相差太远，则需要从各项操 作过程中去分析、寻找可能的原因。
六、课 题 延 伸
能分解尿素的细菌的鉴定
鉴定的原理： 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基
的pH升高。 鉴定方法：
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指 示剂，利用此培养基进行细菌培养，观察培养基 的颜色变化。
三、设置对照
设置对照的主要目的是排除实验组中非测试 因素对实验结果的影响
A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种。 一是由于土样不同，二是由于培养基污染或培养基混有 其它氮源。究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。实 验方案有两种。一种方案是可以接种其它菌种，看是否 有菌落的出现，验证培养基是否混有其它氮源。另一种 方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培 养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。
1.培养物中是否有杂菌污染以及选择 培养基是否筛选出菌落
对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长， 说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的 菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选 择培养基已筛选出一些菌落。Leabharlann 2.样品的稀释操作是否成功
如果得到了2个或2个以上菌落数目在 30～300的平板，则说明稀释操作比较成 功，并能够进行菌落的计数。
碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
2.分析该配方的培养基对微生物是否具有筛选 作用？如果有，又是如何进行筛选的？
有筛选作用，它的氮源只含有尿素，只有能合 成分解尿素的脲酶的细菌才能生长。
二、 统计菌落数目
原理
运用稀释涂布平板法来统计样品中的活 菌数。
统计菌落数目的理论依据是：当样品的稀释 度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源 于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释 度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果 准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板 上，培养后再选择菌落数在30 ～300的平板进行 计数。
实验03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、实验原理：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿酶。
（2）配置以尿素为唯一氮源的培养基，能够在这个培养基上生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
二、操作步骤：(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。
②取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。
(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。
(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。
细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。
②观察a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b．记录菌落的特征：包括菌落的形状、大小和颜色等。
2、灭菌培养基：高压蒸汽灭菌法3、培养皿灭菌：干热灭菌法三、操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在酒精灯火焰旁进行。
(2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。
例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题(1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。
(3)为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少三个平板作为重复组，目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。
(4)分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。
(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏，在菌落计数时，每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
2020-2021高二生物1学案：专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数含解析
2020-2021学年高二生物人教版选修1学案：专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数含解析课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数知识点一菌株的筛选与选择培养基1．筛选菌株(1）原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
（2）实例：从热泉中筛选出Taq细菌。
热泉70～80 ℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的Taq细菌脱颖而出。
（3）方法:利用选择培养基分离。
归纳总结：选择培养微生物的方法通常有两种：(1)可利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好"的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基；（2)可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质,经培养后，其他微生物生长受抑制,而分离对象却可乘机大大繁殖，在数量上占优势.2．选择培养基(1)概念：选择培养基指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
（2）选择培养基的制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某一化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
(3)选择培养基的制备方法：在培养基中加入某种允许特定种类微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物生长的化学成分。
（4)选择培养基的用途：使混合菌株中的目的菌变成优势菌，提高该菌的筛选率。
（5)实例:在培养基中以尿素为唯一的氮源可得到能利用尿素的微生物；在培养基中加入青霉素可分离得到酵母菌和霉菌。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基配方培养基组成提供的营养或作用KH2PO4 1.4 g、Na2HPO4 2。
1无机盐g、MgSO4·7H2O 0。
2 g葡萄糖10.0 g碳源尿素1.0 g氮源、碳源琼脂15.0 g凝固剂用蒸馏水定容至1 000 mL氢元素、氧元素尿素，以尿素为氮源,缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，会因缺乏氮源而不能生长繁殖，所以，用该培养基能够筛选出可分解尿素的微生物。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
耐高温的酶
寻找
寻找 耐高温生物体 耐高温环境（热泉等）
小结：从自然界筛选目的菌株的原则：
根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
耐盐微生物
盐碱地等高盐的环境
冰川
耐寒微生物
分解石油的细菌
油田
2、 实验室中微生物的筛选 筛选原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营 养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
（二）制备培养基
制备选择培养基（尿素为唯一氮源） 制备牛肉膏蛋白胨培养基 思考：为什么要制备牛肉膏蛋白胨培养基？ （对照作用）
相同的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应 明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基 可以作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
（三）稀释涂布平板
（1）测土壤中细菌数： 一般用104、105、106稀释液
（2）测放线菌： 一般用103、104、105稀释液 （3）测真菌数： 一般用102、103、104稀释液 以保证获得菌落数在30-300之间。
思考：（P24页左侧）
原因：不同微生物在土壤中含量不同
（三）稀释涂布平板
每个稀释度均用3个选择培养基和1个牛肉膏蛋白胨培养基 为保证计算结果准确 ①选择菌落数在30～300的平板上计数。 ②每个稀释度取3个或以上平板做重复组，其平均值。
三、设置对照 （三）设置对照：
（1）设置对照的目的： 是排除实验组中非测试因素对实 验结果的影响，提高实验结果的可信度。 （2）对照实验： 指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
请你通过设置对照实验，（P23页），帮助A同学排除上述两个可 能影响实验结果的因素。 可能原因 设置对照 实验结论 其他同学用与A同学 如结果与A同学一致，则证明 土样不同 相同土样进行实验 A无误；反之，则证明A同学 失误 若有菌落出现，则培养基被污染 培 养 基 污 染 或 将A同学的培养基不接种， 培 养 中 混 入 了 进行培养，作为空白对 若无菌落出现，则没污染 照 若菌落数和A同学一致，说明培养基 其他的含氮物 中混入了其他含氮物质，若菌落数 其他同学用A同学的培养 质) 与其他同学一致说明培养基中没有
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
基础知பைடு நூலகம்：
（一）筛选菌株
KH2PO4
1.4g
NaH2PO4
2.1g
MgSO4`7H2O 葡萄糖
0.2g 10.0g
尿素 琼脂
选择培养基
1.0g 15.0g
培养基配方
思 考：该培养基对微生物具有选择作用吗？如果 具有，是如何进行选择的？
只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长
选择培养基：在微生物学中，将允许特定种
• 2.提示：反刍动物的瘤胃中含有大量的微生 物，其中也包括分解尿素的微生物。由于 瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后 会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生 物除了需要准备选择培养基外，还应参照 厌氧菌的培养方法进行实验设计。
分析P22实例:
你认为哪个同学的结果更接近真实值？你认 为这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如 何改进？
第一位同学没有重复实验(至少涂布3个平板)，结 果不具有说服力。
第二位同学有重复实验，但结果不一致（误差较 大），说明在操作过程中可能出现错误，需要重 新实验。
【例1】为了计数微生物的数量，一位同学在4
1、酚红培养基： 鉴定分解尿素的细菌。 原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增
强，PH升高→酚红指示剂，变红 2、伊红—美蓝培养基： 鉴定大肠杆菌。 原理：代谢产物与伊红-美蓝结合→菌落呈黑
色。
大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征
大肠杆菌呈黑色中心 ,有或无金属光泽
本课题知识小结:
课后练习
——利用血球计数板在显微镜下直接计数。
（2）活菌计数法——统计菌落数目
方法： 稀释涂布平板法。 原理：
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长 的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
2013-2014学年高二生物人教版选修一学案课件：2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
( D )
A．菌落数量最多的平板 B．菌落数量最少的平板 C．菌落数量适中的平板 D．取若干个平板菌落数量的平均值 解析 用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计,只是一
种估测,根据此方法的实验过程可知,在某一稀释度下涂布的 平板菌体数具有一定的偶然性,并不是绝对均匀,所以取若干 个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌株数的真实值。
研 4 研 1 研 稀 稀 稀 稀 稀
学习·探究区
第6课时
本 课 时 栏 目 开 关
3．设置对照 ( 设置对照的主要目的是排除实验组中 非测试 因素 对实验结果的影响，提高实验结果的 可信度 。 ( 对照实验是指除了 被测试 的条件外，其他条件都 相同 的实验。满足该条件的称为 对照 组，未满足 该条件的称为 实验 组。 ( 教材提供的案例中 A 同学的结果与其他同学不同， 可能 的解释有两种。一是由于土样不同，二是由于培养基污染 或操作失误。如何设置对照实验来确定原因？ 答案 ①其他同学用与 A 同学一样的土样进行实验,如果 结果与 A 同学一致,则证明 A 无误;如果结果不同,则证明 A 同学存在操作失误或培养基的配制有问题。②将 A 同学配 制的培养基在不加土样的情况下进行培养 ,作为空白对照 , 以证明培养基是否受到污染。
答案 D
学习·探究区
4．在做分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从对应 1 基上筛选出大约 1
本 课 时 栏 目 开 关
.
当菌落数目 稳定 时,选取菌落数
①如果得到了2个或2个以上
.
在 3 ～3 的平板进行计数。在 则说明稀释操作比较成功; 计 同一稀释度下,至少对 3 个平板 ②如果学生选取的是同一 数 进行重复计数,然后求出 平均值 , 种土样,结果相差太远,教师 并根据平板所对应的稀释度计算 需要引导学生一起分析产 出样品中细菌的数目 生差异的原因学习·探Βιβλιοθήκη 区【归纳提炼】 选择培养基