Weel 细胞周期 Weel抑制剂 细胞增殖
《细胞生物学》题库+第十一章+细胞增殖及其调控
《细胞生物学》题库第十一章细胞增殖及其调控一、名词解释1.MPF2.细胞周期蛋白3.APC4.复制起点识别复合体5.DNA复制执照因子学说6.G0期细胞7.癌基因8.长因子9.细胞周期10.联会复合体11.抑癌基因二、选择题1.G1期PCC(染色体超前凝集)为( ),S期PCC为( ),G2期PCC为( )。
A.粉末状，细单线状，双线状B.细单线状，粉末状，双线状C.双线状，细单线状，粉末状D.双线状，粉末状，细单线状2.周期蛋白中有一段相当保守的含100左右氨基酸序列,称为。
A.破坏框B.PEST序列C.周期蛋白框D.PSTAIRE序列3.破坏框主要存在于周期蛋白分子中。
A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期4.G1中序列,与G1期周期蛋白的更新有关。
A.PEST序列B.PSTAIRE序列C.破坏框D.周期蛋白框5.CDK激酶结构域中,有一段保守序列,称( ),此序列与( )结合有关。
A.信号肽,破坏框B.信号肽,周期蛋白C.PSTAIRE,周期蛋白D.PSTAIRE,破坏框6.APC活性受到监控。
A.纺锤体检验点 B.检验点 C.Mad2 D.cdc2o7.S期起始的关键因子是。
A.cyclinA B.cyclinB C.cyclinD D.cyclinE8.染色质在期获得DNA复制执照因子。
A.G1 B.M C.S D.G29.复制起点识别复合体的蛋白质为。
A.Acp B.Orc C.Mcm D.Pcc10.第一个被分离出来的cdc基因是( ),又称( )。
A.cdc2 CDK2B.cdc1 CDK1C.cdc2 CDK1D.cdc1 CDK211.RNA和微管蛋白的合成发生在。
A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期 E.G0期12.有丝分裂器的形成是在。
A.间期 B.前期 C.中期 D.后期 E.末期13.对药物的作用相对不敏感的时期是。
A.G1期 B.S期 C.M期 D.G2期 E.G0期14.CyclinA的合成发生在。
细胞周期调控
2.cdc基因 Leland Hartwell、 Paul Nurse分别以不同的酵母为实验材料，发现了许多与细胞分裂
有关的基因(cell division cycle gene，CDC)。如芽殖酵母的cdc28、裂殖酵母cdc2基因。 进一步研究发现：P34cdc2与P34cdc28是同源物，二者本身并不具有激酶活性，只有当其与有 关蛋白结合后，其激酶活性才能够表现出来。例如：P34cdc2必须与另一种蛋白P56cdc13结合 后才具有激酶活性。
表皮生长因子（EGF)受体 集落刺激因子－1（CSF-1)受 体 神经生长因子（NGF)受体
酪氨酸激酶 丝氨酸激酶 GTP/GDP结合蛋白
转录因子（AP-1) DNA结合蛋白 类固醇受体家族成员
3．抑癌基因 抑癌基因可抑制细胞周期于静止期，并使DNA复制不完全或损伤的细胞不能进入分裂期，
避免细胞的癌变。
（1）Ink4(Inhibitor of cdk 4) 如P16ink4a、P15ink4b、P18ink4c、P19ink4d，专一地与CDK4、CDK6结合，阻止CDK和 cyclinD的结合。使细胞周期不能从G1期的调控点进入到下一个时相。
（2）Cip/Kip
包括P21cip1 (cyclin inhibition protein 1)、P27kip1(kinase inhibition protein 1)、 P57kip2等，能与多种cyclin - CDK复合物包括cyclinE–CDK2、cyclinD–CDK6、cyclinD– CDK4结合，抑制cyclin - CDK复合物的蛋白激酶活性，使一些细胞增殖所需要的蛋白质磷 酸化受阻，细胞停留在G1期。
此外P21cip1还可与DNA聚合酶δ亚单位PCNA (proliferating cell nuclear antigen, PCNA )相互作用， 抑制DNA复制，但不影响DNA修复。
细胞周期的调控
在真核细胞中，复制和有丝分裂是染色体周期中的 主要事件，它们因受到调节而不能自发进行。 在细胞周期中，许多过程协同作用，有些连续发生 (如细胞生长)，有些是非连续发生的(如细胞分裂)。 细胞分裂必须与细胞生长和DNA复制相协调，这样才能
保证细胞的大小和DNA含量保持恒定。
2. 细胞周期的调控(Cell-Cycle Control)
2.3.1.1
周期素（细胞周期蛋白）
⑴ 周期素的概念 该蛋白质的浓度在有丝分裂前增加，有丝分裂后消失， 由于这种蛋白质周期性地出现，人们将它命名为周期素。 ⑵ 周期素的种类及结构特点 目前从芽殖酵母、裂殖酵母和各类动物中分离出的周 期蛋白有30余种，在脊椎动物中为A1-2、B1-3 、C、
D1-3、E1-2、F、G、H等。分为G1型、G1/S型S型和M型4
次细胞周期的关键步骤。周期素的降解是通过泛肽依赖性
的蛋白酶水解途径而完成的。
2.3.1.2 周期素依赖蛋白激酶（cyclin dependent kinases, CDK）
CDK是一类重要的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，主要生物 学作用是启动DNA的复制和诱发细胞的有丝分裂，以周期 素- CDK复合物形式出现，复合物有催化亚基和调节亚基 两部分，催化亚基为CDK，调节亚基为周期素。 CDC2与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性，称为细 胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase，
CIG1-CDC2
CIG2-CDC2
MPF=CDC2+Cyclin B
2001年诺贝尔生理医学奖获得者
2.3 细胞周期调控系统
多米偌理论（Domino theory): 细胞周期的运转是由一条精巧的装配线组成的，像一副 紧密排列的骨牌一样，只有前一张骨牌到下，接着才会有 下一张骨牌的到下，这意味着细胞周期前一反应的产物是
课时分层作业11 细胞的增殖
课时分层作业(十一)细胞的增殖1．(2020·浙江7月选考)高等动物胚胎干细胞分裂过程中，发生在同一时期的是()A．核糖体的增生和环沟的形成B．染色体的出现和纺锤体的出现C．染色单体的形成和着丝粒的分裂D．中心体的复制和染色体组数的加倍B[高等动物胚胎干细胞进行的是有丝分裂。
细胞周期中，核糖体增生发生在G1期，环沟形成于后期或末期，A项错误。
染色体出现在前期，纺锤体也出现在前期，B项正确。
染色单体因为染色体复制而形成，发生在间期，着丝粒分裂发生在后期，C项错误。
中心体复制发生在间期，染色体组数加倍发生在后期，D项错误。
]2．(2019·江苏高考)下列关于观察植物细胞有丝分裂实验的叙述，正确的是()A．只有从新生的根尖上取材，才能观察到有丝分裂B．解离时间要尽量长，以确保根尖组织细胞充分分离C．滴加清水、弄碎根尖以及压片都有利于细胞的分散D．临时装片镜检时，视野中最多的是处于分裂中期的细胞C[高等植物的根尖、芽尖等分生区的细胞均可进行有丝分裂，A错误；解离的目的是用药液使组织中的细胞相互分离开来，解离时间过长，细胞会被破坏，将会影响实验结果，B错误；制片时用镊子将之前处理的根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片，然后，用拇指轻轻地按压载玻片，可以使细胞分散开来，有利于观察，因此，滴加清水、弄碎根尖以及压片都有利于细胞的分散，C正确；临时装片镜检时，视野中最多的是处于分裂间期的细胞，D错误。
]3．(2021·南通检测)花青素是一类天然色素，能抑制多种癌细胞增殖。
用不同浓度的蓝莓花青素处理人口腔癌(KB)细胞，得到结果如图所示。
下列叙述正确的是()A．蓝莓花青素可抑制KB细胞的DNA复制B．蓝莓花青素可能使KB细胞停留在G2或M期C．随蓝莓花青素浓度增加，G1期细胞所占比例不断降低D．蓝莓花青素抑制KB细胞增殖的最适浓度是200μg/mLB[蓝莓花青素不抑制KB细胞的DNA复制，A错误；由图中可以看出，蓝莓花青素可使KB细胞在G2与M期的比例增加，因此蓝莓花青素可能使KB 细胞停留在G2或M期，B正确；随蓝莓花青素浓度增加，G1期细胞所占比例不断降低，但超过150μg/mL后，不再降低，C错误；蓝莓花青素抑制KB细胞增殖的最适浓度可能是150μg/mL，D错误。
WEE1在结直肠癌组织中的表达及意义要点
析，所有检验均为双侧检验，计量资料采用独立样本ｔ
０．５“ｌ，荧光探针０．５斗ｌ，耐热ＤＮＡ聚合酶（ＴＡＱ）酶
０．５斗１，脱氧核糖核苷三磷酸（ｄＮＴＰ）０．５肛ｌ，１０×ＰＣＲ
检验，计数资料采用矿检验或Ｆｉｓｈｅｒ’ｓ确切概率法检
验。生存期由手术当日开始计算，至随访截止日期或 死亡、失访时为止。患者若非肿瘤死亡、随访截止时仍
部１０２例患者均经随访获得预后资料。本研究已通过 广州市红十字会医院伦理委员会审核，标本的采集均
经患者知情同意。
（ＤＡＢ）显色。正常兔血清代替ＷＥＥｌ抗体作为阴性 对照。结果判断：由两位不了解标本临床病理特征的 病理科医师阅片，以细胞核内出现的棕黄色颗粒为阳 性染色。同时参照文献中的方法，以无阳性染色记为 “０”，＜１０％的细胞出现阳性染色记为＋，１０％一５０％
ＴＣＧＴＣＣＣＡＧＴＩ＇ＧＧＴＧＡＣＧＡＴ．３’；荧光探针序列为：５’一
ＦＡＭ—ＣＣＴＣＡＣＣＣＴＧＡＡＧＴＡＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＣ－ＢＨＱｌ—３’： 扩增片段长度为１０６ ｂｐ。所有ＰＣＲ引物及荧光探针
达高于癌旁组织（０．３９２比０．２９７），差异有统计学意
义（Ｐ＜０．０１）。 ２．ＷＥＥｌ基因表达上调与结直肠癌临床病理特征
缓冲液２．５¨ｌ，蒸馏水１８斗ｌ。反应条件为：９３℃
２ ｍｉｎ，９３ ｏＣ １５ Ｓ，５５℃２５ Ｓ，７２℃２５
Ｓ，共４０次循环。
健在或失访均被视为删失数据。采用Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ法
绘制生存曲线，采用Ｌｏｇ—ｒａｎｋ检验比较生存率。以 Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 结 果
ＷＥＥｌ上游弓ｌ物：５’一ＧＣＴＦＧＣＣｃＴＣＡＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧ－ ３’；下游弓Ｉ物序列：５’．ＣＣＧＡＧＧＴＡＡＴＣＴＡＣＣＣＴＧＴＣＴ—
Wee1蛋白激酶的研究及进展
Wee1蛋白激酶的研究及进展Wee1蛋白激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的一员，其主要通过抑制Cdc2的活性对细胞周期进行调控，进而抑制细胞进行有丝分裂。
本文将对Wee1蛋白酶的作用机制、活性调节等内容进行阐述，并对研究前景进行展望。
标签：Wee1蛋白激酶；磷酸化；细胞周期调节；活性调节Wee1蛋白激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的一员，最早由Nurse等人在裂殖酵母细胞（S.pombe）中分离出来。
由于其可以通过抑制Cdc2的活性来抑制细胞进行有丝分裂，从而使得真核生物体积减小，因而被命名为“Wee”家族[1]。
目前，人们对于Wee1蛋白激酶的研究已经不仅仅局限于最初的裂殖酵母，而是相应的扩展到鲫鱼、爪蟾、鼠等多种模式生物，且在人体内，也找到了Wee1的同源基因编码产物。
在哺乳动物中，Wee1蛋白激酶家族包括Wee1A、Wee1B和Myt1三个成员，Wee1A在体细胞中表达，Wee1B在胚细胞中表达，Myt1在体细胞和胚细胞中都表达[2]。
在人体中，Wee1是一个含有647个氨基酸，且在SDS-PAGE中大小为94 KDa的蛋白质。
在其他真核生物中，也可以找到与其功能类似的酶类，但分子大小、结构不尽相同。
尽管研究的进程在逐步深入，但对于Wee1蛋白酶的研究，还是以裂殖酵母中最为透彻。
1 Wee1蛋白激酶的作用机制总的来讲，Wee1的作用方式是通过磷酸化Cdc2的Tyr15和Thr14位点，使Cdc2的活性被抑制从而来抑制细胞的有丝分裂[3]。
具体来讲，Wee1的作用机制有以下几个方面：1.1 Wee1蛋白激酶对于G2/M检查点的作用Wee1可以通过磷酸化Cdc2的Tyr15和Thr14位点，使Cdc2的活性被抑制来抑制细胞的有丝分裂。
在裂殖酵母中，Wee1编码基因的缺失，可使细胞生长而不分裂。
而当细胞顺利通过G2/M检查点时，Wee1的活性就会在多种调控因子的作用下减弱，使得Cdc2的活性大大增强，同时，Cdc2本身也可以通过磷酸化的方法使得Wee1的活性降低，从而形成正反馈环。
抗肿瘤细胞增殖抑制药物的作用机制及其在临床治疗中的应用
抗肿瘤细胞增殖抑制药物的作用机制及其在临床治疗中的应用一、引言癌症，作为全球范围内严重威胁人类健康的疾病之一，其发病率和死亡率持续攀升。
为了应对这一挑战，科学家们不断探索新的治疗策略，其中抗肿瘤细胞增殖抑制药物的研发和应用成为近年来的研究热点。
这类药物通过干扰肿瘤细胞的分裂、增殖过程，从而抑制肿瘤的生长和扩散，为癌症患者带来了新的希望。
本文将从作用机制、临床应用及未来展望三个方面，深入探讨抗肿瘤细胞增殖抑制药物的奥秘。
一、抗肿瘤细胞增殖抑制药物的作用机制1.1 微环境调控机制肿瘤微环境是肿瘤细胞赖以生存的土壤，其复杂性和异质性决定了肿瘤治疗的难度。
抗肿瘤细胞增殖抑制药物通过调控肿瘤微环境，改变其中的细胞成分、血管结构、细胞外基质等，从而影响肿瘤细胞的行为。
例如，某些药物能够促进肿瘤相关成纤维细胞的凋亡，减少其对肿瘤细胞的支持；另一些药物则能够抑制肿瘤血管生成，切断肿瘤的营养供应，从而达到抑制肿瘤生长的目的。
这些药物还能调节肿瘤微环境中的免疫细胞，增强机体对肿瘤的免疫应答，形成多维度的攻击策略。
1.2 细胞周期调控机制细胞周期是细胞生命活动的基本过程，包括G1期、S期、G2期和M期四个阶段。
抗肿瘤细胞增殖抑制药物通过作用于细胞周期的特定环节，如DNA复制、染色体分离等，阻止肿瘤细胞的分裂和增殖。
例如，一些药物能够特异性地结合到DNA拓扑异构酶上，阻止DNA链的断裂和重连，从而阻断DNA复制过程；另一些药物则能够干扰微管蛋白的聚合和解聚，影响纺锤体的形成，导致细胞周期停滞。
这些药物的精准作用不仅提高了治疗效果，还减少了对正常细胞的损伤。
1.3 信号转导通路干预机制信号转导通路是细胞内信息传递的重要途径，参与调控细胞的生长、分化、凋亡等多种生物学过程。
在肿瘤细胞中，这些通路往往发生异常激活或失活，导致细胞失控性增殖。
抗肿瘤细胞增殖抑制药物通过干预特定的信号转导通路，如PI3K/Akt/mTOR通路、Ras/Raf/MEK/ERK通路等，恢复细胞的正常生理功能。
细胞周期调控在癌症发展中的作用
细胞周期调控在癌症发展中的作用癌症是一种由于细胞增殖、分化和凋亡的调控失常而引发的疾病。
而细胞的增殖、分化和凋亡都是由一个复杂且精细的细胞周期调控系统来控制的。
细胞周期指的是从细胞分裂开始到下一次细胞分裂之间的过程，包括G1、S、G2和M四个阶段。
在这个过程中，许多调控因子以及多种蛋白质参与其中，任何一个环节的失控都可能导致癌变。
1. 细胞周期调控的核心机制细胞周期调控的核心机制是细胞周期蛋白激酶（Cyclin-Dependent Kinases，CDKs）与细胞周期蛋白（Cyclins）的相互作用。
CDKs是一类酶，而Cyclin是与CDKs结合后才能发挥调控作用的蛋白质。
Cyclins的种类不同，会对不同的细胞周期阶段起到特定的调控作用。
一般来说，当细胞需要完成某个特定的细胞周期阶段时，就会有相应的Cyclin表达，与CDKs结合，进而调控之后的细胞行为。
除了CDKs和Cyclins外，还有许多其他的细胞周期调控因子参与其中，比如是控制进程的正向调节因子（如G1/S-CDKs、S-CDKs、G2/M-CDKs等），和控制进程的负向调节因子（如CDK抑制因子、WEEL kinase等）。
2. 细胞周期的调控与癌症我们知道，癌症发展涉及到细胞的增殖。
因此，细胞周期的调控与癌症发展之间是密不可分的。
在正常情况下，细胞周期的各个阶段都是需要受到精密调控的。
而在癌症细胞中，细胞周期调控机制出现了错误，导致细胞的增殖、分化和凋亡的节律失常。
以肺癌为例，许多癌细胞中CDKs和Cyclin D、E的过度表达，导致细胞循环阶段过快，并不完全准确。
这种快速、不准确的节律会导致细胞内存在大量功能不良或异常的蛋白质。
而在癌细胞中，许多正常的细胞周期调控因子和CDKs等存在着突变。
这些改变会导致迅速的细胞增殖，同时许多的基因也被异常激活。
这种异常表达的基因会进一步影响其他基因的表达，而这是肿瘤细胞内部发生的错误行为，正是它们失控增殖的原因。
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Weel论文：Wee1在大肠肿瘤细胞株中的表达及意义
【中文摘要】检测大肠肿瘤细胞中Wee1及其磷酸化蛋白的表达,选用了Wee1的抑制剂PD407824作用于大肠肿瘤细胞,观察抑制Wee1的作用后对大肠肿瘤细胞增殖的影响,旨在为发现大肠肿瘤基因治疗新的靶点提供理论依据。
方法：1、首先采用western blotting的方法筛选出不同大肠肿瘤细胞株(lovo、HCT116、SW620、SW480)中Weel 表达较高的细胞株来进行下一步的研究。
2、使用血清饥饿法将细胞大致停滞于同一细胞周期后,用western blotting法测定细胞株中Weel总蛋白及p-Wee1Ser53和p-Wee1Ser642的表达。
3、将Weel抑制剂PD407824稀释成不同浓度后,采用CCK8测定不同时间细胞株的增殖情况及显微镜下观察细胞株的形态变化。
结果：1、在四种不同大肠肿瘤细胞株lovo、HCT116、SW620、SW480中,以HCT116细胞株中的Weel的表达相对较高。
2、在不同时间点,Weel及其磷酸化蛋白的表达高低不一样,我们发现它们会在6h、12h、24h表达升高,而Wee1、p-Wee1Ser53和p-Wee1S...
【英文摘要】:In this study, we investigate the expression and significance of Weel and its phosphated forms, and analyze the effect of Weel inhibitor PD 407824 on human colorectal cancer cell proliferation. We aim not only to investigate the the molecular mechanism of tunlor proliferation, but also to search new effective target for gene therapy of colorectal
cancer.Methods:1. At first, western blotting analysis was used to detect the expressions of Weel different colorectal cancer cells, including lov...
【关键词】Weel 细胞周期 Weel抑制剂细胞增殖
【英文关键词】Weel cell cycle Weel inhibitor cell proliferation
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【目录】Wee1在大肠肿瘤细胞株中的表达及意义中英文缩略词对照表5-7中文摘要7-8Abstract8-9引言10-13资料和方法13-26结果26-32讨论
32-37结论37-38参考文献38-42文献综述
42-50参考文献47-50就读研究生期间所发表的文章50-51致谢51。