关于细胞染色的总结
临检基础知识讲解：血液细胞染色
1）瑞氏染色法：为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。
瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。
瑞氏染料：是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。
染色原理：是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。
因此，染色后同一血片上各种细胞可以染上各自特征性的颜色。
pH值的影响：细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中下正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。
2）姬姆萨染色法：姬姆萨染液由天青、伊红组成。
姬姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，但对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更清晰，而胞质和中性颗粒则染色较差。
细胞染色总结表(检验主管技师考试)
细胞染色总结表(检验主管技师考试).doc细胞染色总结表（检验主管技师考试）引言细胞染色技术是医学检验领域中一项重要的实验技术，它通过特定的染料对细胞或细胞成分进行染色，以便于显微镜下观察和分析。
在检验主管技师考试中，对细胞染色的理论知识和实践技能的掌握是考核的重点之一。
本文档旨在总结细胞染色的基本原理、常见染色方法、应用场景以及实验操作要点，为检验主管技师考试提供参考。
细胞染色的基本原理染色剂的选择染色剂的选择基于其与细胞成分的亲和力，不同的染色剂可以特异性地与细胞的不同部分结合。
染色机制染色机制包括物理吸附、化学结合、离子交换等，不同的染色剂和细胞成分之间的相互作用决定了染色效果。
染色目的染色的目的是为了增强细胞结构的对比度，便于观察和分析细胞形态、大小、核质比例等特征。
常见染色方法瑞氏染色（Wright-Giemsa Staining）瑞氏染色是一种常用的多色染色方法，可以清晰地显示细胞核和细胞质，广泛应用于血液学和寄生虫学检查。
巴氏染色（Papanicolaou Staining）巴氏染色主要用于细胞学检查，特别是宫颈涂片，可以显示细胞的形态和核细节。
吉姆萨染色（Giemsa Staining）吉姆萨染色对细胞核和细胞质的染色效果较好，常用于血液和骨髓细胞的染色。
罗曼诺夫斯基染色（Romanowsky Staining）罗曼诺夫斯基染色是一种多色染色方法，可以清晰地显示细胞的形态和内部结构，适用于血液和骨髓细胞的染色。
细胞染色的应用场景血液学检查用于血细胞的形态学分析，如红细胞、白细胞和血小板的计数和分类。
骨髓检查用于骨髓细胞的形态学分析，评估骨髓造血功能。
细胞学检查用于宫颈涂片、尿液沉渣等细胞学标本的检查，筛查肿瘤和炎症。
微生物学检查用于细菌、真菌和寄生虫的染色和鉴定。
实验操作要点样本准备确保样本质量，避免细胞损伤和污染。
染色剂配制严格按照染色剂的配制比例和方法进行操作。
染色时间控制控制好染色时间和洗涤时间，避免染色过深或过浅。
细胞染色方法总结(干货分享)
细胞染色方法总结Hoeｃｈst染色：ｈoｅｃhst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoecｈst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。
ｈｏｅｃhst 有hｏｅchest33３42和hoechst3３2５8两种hｏｅchｓts33258，hoeｃｈst333４２二者区别不大,但是hｏeｃｈst33３42对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hｏｅcｈsts3３2５8用于细胞固定后再染色，而hoechsｔ3３3４2则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI （Ｐroｐiｄium Ｉodide碘化丙啶）染色：是一种可对DＮＡ染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。
碘化丙啶（Ｐｒoｐidium Iｏdide, PI)是一种核酸染料（红色）,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。
用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色)。
但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。
但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PＩ单一染色显然不够! annexin—v染色细胞凋亡早期，细胞膜标志发生改变.其中，磷脂酰丝氨酸(Annexin-V，PS）外翻,Annexin-Ｖ在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合．这样,Ａnnexin-v 染色阳性，表示细胞处于早期凋亡状态.Anneｘｉn－V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用ＰE标记就发红色荧光....文档交流仅供参考...JC-1染色ＪＣ－１是一种阳离子染料,可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体（monomer)存在,发射光以绿光(～52５nm）为主;而在高浓度时则可以形成多聚体（agｇregａｔioｎ）,发射光以红光(-590nm)为主.线粒体本身存在一定的极性（polarizaｔion),其外膜为负极，内膜为正极。
血细胞化学染色方法汇总笔记
中文名称英文名称 粒系淋系分化差原粒 (-), 分化好原 过氧化物酶粒至中性成熟粒（ +），（- ） POX嗜酸性粒阳性最强，嗜碱 染色性粒（ - ）。
细胞越成熟越强。
分化差原粒 (-), 分化好原 过碘酸-雪粒至中性成熟粒（ +），一般为 (-) PAS嗜酸性粒颗粒不着色，颗 夫反应粒间胞浆阳性，嗜碱性粒(+) 。
细胞越成熟越强。
中性粒细胞中性成熟粒细胞 (+)(-)碱性磷酸酶 NAP 染色单核（ - ）/( ±)分化差原单 (-) ；其余 (+)(-)α- 醋酸萘一般(-) ，少数 ( ±) ， 一般 (-) ，少数 原单(-) 或( ±) α-NAE(±)，幼单或单核 (+) 酚酯酶染色阳性不被 NaF 抑制阳性不被 NaF 抑制阳性可被 NaF 抑制原粒(-) 或( ±) ，早幼粒 氯乙酸 AS-D 至成熟粒 (+) ，活性不随萘酚酯酶染 AS-D NCE细胞成熟而增强。
嗜酸性 (-)(-)色粒(-) 或( ±) ，嗜碱性粒细胞 (+)醋酸AS-D 萘原粒(-) 或( ±) ，早幼粒 一般 (-) ，少数原单(-) 或( ±) AS-D NAE至成熟粒 (+) ，阳性不被 (±)，幼单或单核 (+) 酚酯酶染色NaF 抑制阳性不被 NaF 抑制阳性可被 NaF 抑制碱性α - 丁酸萘酚酯酶α-NBE 染色酸性磷酸酶ACP染色分化差原单 (-) ，(-)B淋(-) ，其余 (+)分化好原单至成熟单(+) ，阳性可被NaF抑制(+)(+)(+)铁染色细胞内外铁染成蓝色，定位于含铁的部位；根据蓝色铁颗粒的多少、粗巨核细胞红系浆细胞组织细胞血小板(-)(-)(-)(-)(-) (+)(-)一般为(-)(+) (-)(-)(-)(-)(-)一般 (-) ，少数(+)(±)，(-)(+)阳性不被NaF抑制(-)(-)(-)(-)(-)早幼红(±)，随细胞成熟(+)强度减(+)弱，阳性不被 NaF抑制(-) 或(-) 或(-) 或(+) ，阳(-) 或(±)，阳 (±)，阳 (±)，阳(±)，阳性不被性不被性不被性不被 NaF NaF抑制性不被NaF抑制NaF抑制抑制NaF抑制(+)(+)(+)(+)少、粗细分为 I/II/III/IV型/环型铁粒幼红细胞。
细胞免疫荧光染色的自我总结
免疫荧光实验所需试剂1、PBS和PBST（0.05% Tween 20 in PBS：2000mlPBS+1ml吐温）2、4％多聚甲醛/PBS(4g多聚甲醛+50-80mlPBS+加热至60℃并搅拌+滴加少量1mol/L 的NaOH溶液使其变清亮，定容至100ml)3、0.1％ triton X-100/PBS配制（999mlPBS+1ml Triton X-100/曲拉通X-100（碧云天ST795），因为Triton X-100很粘稠，需减掉枪头尖慢吸）4、2％二抗同源血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合；也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致(中杉金桥封闭用正常羊血清工作液 ZLI9022)5、二抗（中杉金桥 594标记山羊抗兔IgG ZF0616）（中杉金桥 488标记山羊抗小鼠IgG ZF0512）细胞爬片的免疫荧光染色步骤：1）实验前一天，将细胞接入铺有22×22mm（或24×24mm）盖玻片[悬浮细胞需要用多聚赖氨酸包被过的玻璃片]的六孔板或十二孔板中。
2）第二天，待细胞汇合度达到70％左右开始进行染色步骤。
3）用新鲜配制4％多聚甲醛[4℃]固定细胞10分钟。
4）PBS洗三遍，每次5分钟。
5）用0.1％ triton X-100[PBS配制]对细胞透化处理10分钟。
6）加PBS，使液面覆盖玻片。
如果细胞贴壁好，PBS洗时可轻摇孔板洗三遍，每次5分钟[不必一直摇]。
如果细胞贴壁不好就不必了，可以考虑多加点PBS，或者每次浸泡时间稍延长1-2分钟。
7）2％二抗同源血清[购买的纯的羊或牛血清用PBS稀释至2%，当前用的是羊血清]封闭30分钟-60分钟，PBS简单冲洗两遍或者不洗。
8）染色前根据公司说明书建议的浓度配好1抗（1抗稀释液购自中杉金桥）[建议先测试抗体浓度，可依据公司推荐的浓度增加和减低浓度进行测试；如公司推荐1：200，可将抗体配成1：50、1：100、1：200、1：400、1：600，以不同浓度进行孵育，如果抗体有效，应当在有效染色的抗体浓度范围内都可染色，只是颜色深浅不同]，加入1抗，4℃冰箱孵育，一般要大于18小时[有的抗体可能需要多达50小时]。
病理学技术—特殊染色最最全总结
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支，它利用各种不同的方法和技术，对组织和细胞进行分析和研究。
其中，特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分，通过使用不同的染色剂，有助于观察并区分不同的细胞和组织结构，以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）：PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质，如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应，将含有醛基的物质氧化，然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色：铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量，它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色：去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中，然后用溴化黄染色，观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性，如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色：免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位，从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色：组织切片染色是一种常见的特殊染色技术，它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色：核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能，其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交（FISH）和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色：肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述，特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义，通过使用不同的染色剂，可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
细胞染色知识点总结
细胞染色知识点总结一、细胞染色的基本原理1. 细胞染色的概念细胞染色是指利用染色剂将生物细胞的各种器官、细胞核和细胞质等成分着色，以便于观察和研究的一种实验技术。
2. 细胞染色的基本原理细胞染色的基本原理是利用染色剂对细胞中的某些结构或化合物有选择地着色，从而突出目标结构，使之能够被观察。
3. 细胞染色的目的细胞染色的目的是为了使细胞各部分或特定结构在显微镜下能够清晰的观察到，并且可以研究细胞的结构、功能和动态变化。
二、常用的细胞染色方法1. 基本染色技术基本染色技术主要包括HE染色、Giems染色和PAP染色等，这些染色方法可以将细胞核、细胞质以及其他不同的细胞结构在显微镜下清晰的观察到，是细胞学研究中最常用的染色方法。
2. 免疫组化染色免疫组化染色是利用抗体-抗原特异性反应原理，通过特定的抗体将被检测的分子或结构着色的方法。
这种方法可以用于检测细胞中特定的蛋白质、细胞器等，广泛应用于细胞生物学和病理学研究中。
3. 分子生物学标记法分子生物学标记法主要是利用特定的标记分子对细胞中的遗传物质进行标记，如荧光标记、辐射标记等，通过显微镜观察能够清晰的观察到目标分子的位置和表达情况，是现代生物学研究中的重要技术。
4. 着色体分析着色体分析主要是通过对染色体进行着色，观察染色体的结构、数量和变化等，包括有丝分裂图像分析、FISH法、G带分析法等，是细胞遗传学研究的重要手段。
5. 细胞动力学标记法细胞动力学标记法主要是通过对细胞内特定结构或分子进行标记，如微管标记、细胞骨架标记等，可以研究细胞的运动、分裂和形态变化等过程。
6. 变性染色法变性染色法主要是通过对细胞内蛋白质的特性进行变性后着色，如石蜡切片染色、单克隆抗体法等，能够实现对细胞内蛋白质的定位和研究。
三、细胞染色的应用领域1. 细胞生物学研究细胞染色是细胞生物学研究中最为常用的技术之一，通过染色可以观察细胞的结构、功能和动态变化，研究细胞内各种器官的形态和功能。
细胞涂片染色分析
细胞涂片染色分析学习细胞学时，对常规的技术环节曾作了大致总结，请指正：染色不良原因分析细胞涂片常规巴氏染色步骤及原理：具体步骤：1、涂片投入95%酒精固定液固定15分钟。
目的：细胞及胞内物质形态稳定（由半液态变为半固态），易于染色。
原因：固态比液态（流动性）更具稳定性，着色更迅速，染色效果也更稳定。
2、水洗用浓度由高到低的梯度酒精入水或直接自来水漂洗。
目的：脱醇—置换出细胞内酒精，以便使水溶性苏木素进入。
3、苏木（水溶液）染核时间灵活掌握，根据镜下观察染色效果确定。
4、水洗洗去过多残留苏木染液，5、碱水（饱和碳酸锂）返蓝目的：使苏木色精进一步形成，且使胞浆偏碱性，以便更好的与酸性染料结合。
6、水洗去多余碱水。
7、脱水用浓度由低到高的梯度酒精或直接由水进入95%酒精。
8、橘黄和EA（O—E染色）染胞浆操作：每次染后进入95% 酒精漂净多余染液，以保证不影响下一步。
9、无水酒精脱水——二甲苯透明——树胶封固。
可能出现误差的步骤：1、固定时间要求是：大于15 分钟，小于48小时。
如果制完片后马上进入水洗染色，固定效果必然欠佳。
2、水洗脱醇应保证足够的时间和换水次数，否则脱醇不彻底，会干扰水溶性苏木素进入细胞内进行染色反应。
3、苏木素的染色效果与本身的浓度、纯度，染色反应的速度直接相关。
此外，染色速度还受温度影响（温度越高，染色速度越快，效果越好）。
所以：本步骤注意事项为：苏木素的质量——每日过滤并加新液；天气温度（室温）的变化——调整时间，温高则时间短，温度低则时间长，皆以镜下观察的效果为准灵活掌握。
4、碱水返蓝：为水溶液,其浓度和纯度都会影响返蓝效果。
如果碱水使用时间过长，未及时更换，其浓度、纯度必然下降。
为加快速度或工作时间调整，玻片放入碱水中的时间常常偏长或偏短。
偏短——苏木色精形成不充分；偏长——涂片在水溶液中浸泡过久会影响细胞固定效果,从而影响染色效果。
以至于影响苏木素的显色效果和下一步胞浆染色效果。
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原理
正常细胞
临床评价
POX
过氧化物酶染色
粒细胞和部分单核的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶。
1.粒细胞：（+）随分化成熟而阳性程度渐增强。嗜酸性粒最强（颗粒粗大有折光性）。嗜碱性粒为阴性。
2.单核：多阴性或弱阳性（颗粒少而细小）
3.吞噬细胞有的阳性，其余为阴。
1.鉴别白血病①急粒时（+）；急淋时，原淋和幼稚淋都（-）②小型原始粒细胞（+）和原始淋巴（-）③急性早幼粒（强+）急性单核（+）
2.成熟中性粒中：①活性增高见于再障、感染（特化脓性细菌）、急淋和慢淋。②活性降低：急粒、慢粒、急单核、MDS、放射病。
SBB
苏丹黑B
脂溶性染料，脂类物质在粒细胞中丰富，单核中有少量
同POX
比POX敏感，急性粒时POX为阴性的可再做SSB，且可用陈旧涂片。
NAP
中性粒细胞碱性磷酸酶
主要存在于成熟中性粒（杆状粒和分叶粒）
1.中性粒呈（+）其它为（-）
2.正常积分35~70
1.生理性：新生儿、应激、经前期、分娩期增加
2.病理性：细菌感染、再障、某些骨髓增殖性病（慢性中性粒白血病、骨髓纤维化、真红、原发血小板增多症）、慢粒（加速期、急变期）、急淋、慢淋时增多；慢粒（慢性期）、PNH、MDS、恶组病时降低。
3.鉴别：类白↑与慢粒↓；
2.辅助诊断红血病和红白血病：异常幼红（+）不被抑制
AS-D NAE
醋酸AS-D萘酚酯酶染色
同α-NAE
α-NBE
α-丁酸萘酚酯酶染色
α-NBE主要存在于单核细胞中，其阳性能被氟化钠抑制，其他细胞系列的阳性产物不能别氟化钠抑制。
ANAE
酸性α-醋酸萘酚酯酶染色
T淋巴细胞（+）
B淋巴细胞多数（-）
急性T细胞白血病程点状或块状（+），急粒呈（-）或（+），急早幼粒（强+）呈弥散分布，急单（强+）呈弥散分布。
①多毛白（强+）且不被L-酒石酸抑制。②戈谢细胞（+）尼曼-匹克细胞（-）③T淋巴（+）B淋巴（-）
PAS
糖原染色
（过碘酸-雪夫反应）
粒细统：分化差的原粒为（-），其余（+）呈细颗粒，均匀红色；红系（-）；单核;分化差的原单（-）其它（+）颗粒或块状；淋巴（-）；巨核（+）成颗粒状或块状
1.红系统：红血病、红白血病、MDS中幼红可（+）（均匀红色或块状）
2.白血病：急淋时原淋和幼淋呈细颗粒或均匀红色；急单时原单和幼单（+）
3.戈谢细胞（强+），尼曼-皮克（+），骨髓转移性腺癌细胞（强+）
AS-D NCE
氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色
粒细胞特异性酯酶
粒系（+）酶活性不随细胞成熟而增强，嗜酸（+）嗜碱（+）；肥大（+）单核（-）
急性粒：原粒（-）或（+），所以不能做排除试验；急性早幼粒（强+）；急单（-）；急淋、急巨核（-）
α-NAE
α-醋酸萘酚酯酶染色
α-NAE存在于单核、粒、淋巴细胞中，为非特异性酯酶染色，常同时做氟化钠抑制试验。
1.单核细胞（+），能被NaF抑制
2.各期粒、淋巴多（-）少数（+），不能被抑制
3.其它细胞（+）不抑制，浆（-）
1.辅助鉴别急性白血病：急单（+）能被抑制；急粒（+）不被抑制；急早幼粒（强+）不被抑制；急淋不抑制；急粒-单白血病部分抑制
慢粒(慢性期)↓与慢性中性粒白血病↑；细菌感染↑病毒感染N；再障↑PNH↓；急粒↓急淋↑；恶性淋巴瘤↑恶组病↓反应性细胞增多症N；真红↑及发性红多↓；原发PLT多↑继发PLT多N
ACPቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
酸性磷酸酶然色
酸磷酶存在于细胞溶酶体颗粒中
粒C、单核、淋巴、巨核、血小板、浆C、巨噬均为（+）
主要用于多毛白的诊断及脂质代谢障碍病鉴别。