抗生素微生物检定法.ppt

1定义——抗生素微生物检定法
抗生素微生物检定法是利用抗生素在低微浓度 下有选择地抑制或杀死微生物的特点，以抗生 素的抗菌活性为指标，来衡量抗生素中的有效 成分效力的方法。
1定义——抗生素
1929 年Flemming发现第一种抗生素（ 青霉素）
1942年，链霉素的发现者Waksman定义： “抗生素是微生物在代谢中产生的具有抑制它种微生 物生长活动、甚至杀灭他种微生物的化学物质”。
0.6微克为1单位，即1667单位/毫克。 ➢ 第二批青霉素国际标准品，青霉素G钠称重
0.5988微克为1单位，即1670单位/毫克。
1.定义－抗生素效价定义
特定单位：这一类抗生素大都组成成分较复 杂，或还不易得到纯品，在开始生产及临床 使用时，只能以一特定量的标准品（或对照 品）作为1单位。
如：杆菌肽国际标准品 第一批杆菌肽国际标准品为55单位/毫克； 第二批杆菌肽国际标准品为74单位/毫克。
如：青霉素G钠 以青霉素单位也称牛津单位（Oxford unit） 表示其抗菌活性，最初的定义为“1个青霉 素效价单位（u）为能在50毫升肉汤培养基 中完全抑制金黄色葡萄球菌标准菌株发育的 最小青霉素剂量”。
1.定义－抗生素效价定义
例：青霉素国际标准品 ➢ 第一批青霉素国际标准品，青霉素G钠称重
抗生素效价以“单位（u）”或“微克 （μg ）”表示。
1.定义－抗生素效价定义
例：硫酸链霉素 抗菌活性是以链霉素效价单位表示的，其链
霉素的效价单位是以具活性成分链霉素碱的 “活性”重量表示的，即1链霉素效价单位 ＝1微克链霉素碱，这里是“活性微克”而 不是“重量微克”。
1.定义－抗生素效价定义
1.定义－抗菌活性
抗菌活性是指抗菌药物抑制或杀死病原微生 物的能力。
抗生素的抗菌活性通常用效价单位来表示。
在临床应用中，抗生素的抗菌活性可准确地 反映抗生素的医疗价值。
硫酸链霉素 798单位/毫克
青霉素G钠 1670单位/毫克
杆菌肽
74单位/毫克
1.定义－抗生素效价定义
“活性”重量单位 重量折算单位 特定单位
在制成盐类或其他衍生物后，其相应的折算 效价，可以从分子量折算而得。
如：硫酸链霉素的折算效价为
C21H 39 N7O12 2 1000 581 .58 2 1000 798单位 / 毫克
(C21H 39 N 7O12 ) 2 • 3H 2 SO4
1457 .4
1.定义－抗Biblioteka Baidu素效价定义
重量折算单位：以特定的纯抗生素制品的某 一重量为1单位而加以折算。
抗生素微生物检定法
HPLC 紫外分光光度法
化学滴定法 效价测定
SH
TH
TL
SL
前言
抗生素微生物检定法是国际上通用的、经典 的抗生素效价测定方法。自20世纪40年代建立 至今，在各国药典中被普遍采用。虽然伴随着 HPLC等化学分析技术的发展，一些抗生素品种 的效价测定已被化学方法所取代，但由于以下 原因：
等量的试验菌菌液
一 一 一 一 一一 12 3 4 56
一一 78
不同浓度的
抗生素液体培养基
浓
稀
1.定义－比浊法
通过监测等量的试验菌菌液在不同浓度的抗 生素液体培养基中的生长情况，利用分光光 度法测定含不同浓度的抗生素的液体培养基 的浊度，从而衡量抗生素抑菌效力的方法， 可用于抗生素药物的含量（效价）测定。
前言
微生物检定法可直观、特异地反映出抗生素 药品的抗菌活性；
多组分抗生素由于不同活性组分生物活性的 差异，化学测定结果难以准确表征组分组成、 含量和生物活性间的关系；
许多抗生素品种由于各种原因目前没有适当 的化学分析方法表征其活性。
所以抗生素微生物检定法目前在各国药典中仍 占有重要地位，且短期内化学分析法不可能取 代微生物检定法。
及临床药敏试 验等方面
1.定义－管碟法
此法系根据抗生素在一定浓度范围内，对数 剂量与抑菌圈直径（面积）呈直线关系而设 计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用， 比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计 算出供试品的效价。
1.定义－抗生素效价定义
“活性”重量单位：以抗生素中所含特定的 抗菌（抗肿瘤细胞、抗病毒）活性部分的重 量作为效价单位。
如碱性抗生素，以纯碱的量作为有效部分的 量；酸性抗生素，以纯酸的量作为有效部分 的量。
1.定义－抗生素效价定义
在抗生素的生产、研究和应用等方面，均以 抗生素活性成分的“活性”重量计量抗生素 的效价单位，采用活性成分的“活性”重量 1μg＝1效价单位的方法表示。
1.定义－抗生素微生物检定法
抗生素微生物检定法可分为： （1）稀释法 （2）比浊法 （3）琼脂扩散法（管碟法和打孔法）
➢ 各国药典通常采用后两种方法测定抗生素的效价。
1.定义－稀释法
通过监测等量的试验菌菌液在不同浓度的抗 生素液体培养基中的生长情况，观察含不同 浓度抗生素的液体培养基中有无细菌的生长， 从而测定抗生素最低抑菌浓度（MIC）的方 法，常用于新药研制及临床药敏试验等方面。
生素液体培养基中的生长情况
在含有试验菌固体培养
基中的扩散情况
含不同浓度抗 用光度法测定 含不 测定不同浓度的抗生素
生素的液体培 同浓度的抗生 素的 溶液在固体培养基表面 养基中有无细 液体培养基的浊度 产生的抑菌圈大小 菌生长
抗生素最低抑 菌 浓 度 (MIC) 的测定 用于新药研制
抗生素抑菌效力的测定 抗生素效力的测定方法
1.定义－（琼脂）扩散法
通过测定由不同浓度的抗生素溶液在含有试 验菌固体培养基中的扩散，而在其表面所产 生的抑菌圈的大小，衡量抗生素抑菌效力的 方法，多用于抗生素药物的含量（效价）测 定。
抗生素微生物检定方法比较：
相同点 不同点
目的 应用
稀释法
浊度法
琼脂扩散法
标准品、供试品抗菌效力的比较
等量的试验菌菌液在不同浓度的抗 不同浓度的抗生素溶液
抗肿瘤、抗寄生虫等抗生素的不断发现 、化学改造推 动半合成抗生素的迅速发展 ——定义为
“是在低微浓度即可对某些生物的生命活性有特异抑 制作用的微生物次级代谢产物及其衍生物 ”
由生物发酵改为化学合成（氯霉素）、全新结构的全合成抗生素（氨曲南）
“抗生素是生物（包括微生物、植物、动物在内）在其生命 活动中产生的（或并用化学、生物或生化方法衍生的），能 在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的化学物质 的总称。”