毒理学实验基础及安全性评价4课时
第二章-天然产物有效成分的毒理学安全性与功能性评价PPT课件
体内试验和体外试验各有其优点和局限性，应主要根据实 验研究的目的要求，采用最适当的方法，并且互相验证。
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3. 人体观察
通过中毒事故的处理或治疗，可以直接获得关 于人体的毒理学资料，这是临床毒理学的主要 研究内容。有时可设计一些不损害人体健康的 受控的实验，但仅限于低浓度、短时间的接触， 并且毒作用应有可逆性。
是在人类生活的外界环境中存在、可能与机体接 触并进入机体，在体内呈现一定的生物学作用的一些化 学物质，又称为“外源生物活性物质”。
内源化学物
是指机体内原已存在的和代谢过程中所形成的产 物或中间产物。毒理学研究外源化学物对机体的有害作 用，而不是有益作用(如营养作用、治疗作用等)。
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毒理学的目的 任何一种化学物质在一定条件下都可能是
❖ 毒理学实验可采用整体动物、游离的动物脏器、组织、 细胞进行。根据所采用的方法不同，可分为体内试验 (in vivo test)和体外试验(in vitro test)。毒理学还 利用限定人体试验和流行病学调查直接研究外源化学 物对人体和人群健康的影响。
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表1-1
化学物 乙醇 氯化钠 硫酸亚铁 硫酸吗啡
第二章 天然产物有效成分的 毒理学安全性和功能性评价
✓ 毒理学评价
✓ 安全性评价 ✓ 功能性评价
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一、毒理学安全性评价
❖ 毒理学(toxicology)
是研究化学、物理和生物因素对机体的损害作用、 生物学机制（biologic mechanisms）、危险度评价 （risk assessment）和危险度管理（risk management）的科学。毒理学主要分为三个研究领域， 即描述毒理学、机制毒理学和管理毒理学。
卫生毒理学 42-10-3第十章 毒理学安全性评价
第十章 毒理学安全性评价一、名词解释1、管理毒理学答：将毒理学的原理、技术和研究结果应用于化学物质管理，以期达到保障人类健康和保护生态环境免遭破坏的目的。
2、危险度答：在特定条件下，因接触某种水平的化学毒物而造成机体损伤、发生疾病甚至死亡的预期概率。
3、安全性答：化学毒物在特定条件下不引起机体出现损害效应的概率。
4、可接受危险度答：公众和社会在精神、心理等各方面均能承受的危险度。
5、实际安全剂量答：与可接受危险度相对应的化学毒物的接触剂量。
6、参考剂量答：人群（包括敏感人群）在终身接触该剂量水平待评物质的条件下，预期一生中发生非致癌或非致突变有害效应的危险度可低至不能检出的程度。
7、安全系数答：又称为外推系数或转换系数，在计算RfD时，把实验动物的NOAEL 或LOAEL缩小一定倍数来校正误差，确保安全，这一缩小的倍数即不确定系数。
8、危险度评价答：危险度评价是以定量的概念，在人类接触环境危害因素后，对健康的潜在损害的程度进行估测或鉴定。
9、毒理学安全性评价答：通过动物试验和对人群的观察，阐明待评物质的毒性及潜在的危害，决定其能否进入市场或阐明安全使用的条件，以达到最大限度的减少其危害作用、保护人民身体健康的目的。
二、选择题（选择一个最佳答案）1、关于危险度评价的结果在管理毒理学上的应用不正确的是 （ D ）A、确定化学物的ADIB、分析使用外源化学物的利弊C、为制定卫生标准提供主要依据D、确定环境污染治理的顺序2、一种食品添加剂，亚慢性试验最大无作用剂量为人可能摄人量的90倍，依据食品毒理学评价程序，该化学物 （ A ）A、毒性较强应予以放弃B、可进行慢性毒性试验C、可考虑允许使用于食品并制定ADID、需由专家评议决定3、关于致突变试验结果的判定，依据食品毒理学评价程序下列哪项不正确 （D ）A、三项阳性者一般应予放弃B、两项阳性者由专家评议C、一项阳性补做二项均为阳性应予放弃D、一项阳性补做二项有一项阳性者也应放弃4、危险度是指 （ D ）A、化学毒物损害机体的能力B、化学毒物损害机体的可能性C、对化学毒物损害机体的可能性的定性估计D、对化学毒物损害机体的可能性的定量估计5、危险度评定一般分以下几个步骤，除了 （ D ）A、对机体损害作用的评定B、剂量一反应关系的估计C、确定接触途径和接触剂量D、确定最大耐受量6、危险度评定的核心内容是 （ C ）A、定性评定B、人类接触情况评定C、剂量一反应关系的确定D、毒性大小的评定7、有关分阶段进行化学毒物安全性毒理学评价程序的叙述，不正确是 （ D ）A、按一定顺序进行B、省时、经济C、必要是可免去不必要的试验项目D、每一化学毒物需按程序先后进行四个阶段的毒理学试验项目8、一用于食品添加剂的化学毒物，其慢性毒性试验的最大无作用剂量为人可能摄入量的120倍，依据食品毒理学安全性评价程序，该化学毒物应该 （ C ）A、毒性较大，予以放弃B、需由专家评议决定C、可考虑用于食品，并制定其ADID、应重复进行一次慢性毒性试验9、用于食品的化学毒物需进行二阶段遗传毒性试验，试验项目如下，除了（ D）A、鼠伤寒沙门氏茵/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)B、小鼠骨髓微核率测定C、小鼠精子畸形分析D、传统致畸试验10、食品安全性毒理学评价时，若4项必做的遗传毒性项目中2项为阳性，则（ C ）A、表示该受试物很可能有遗传毒性B、表示该受试物很可能有致癌作用C、需补充短期喂养试验辅助决定D、需重复一项遗传毒性试验11、食品毒理学评价评价程序中规定，需进行全部四个阶段毒理学试验项目的化学毒物为 （ A ）A、凡属我国创新的化学毒物B、任何国外进口的化学毒物C、所有农药均需进行D、任何新资源食品12、化学毒物的安全性概念中，错误的是 （ C ）A、化学毒物安全性是指无危险或危险度极低。
毒理学安全性评价程序
遗传毒性试验结果进行判断。
①如其中三项试验为阳性，则表示该受试物 很可能具有遗传毒性作用和致癌作用，一般 应放弃该受试物应用于食品；毋需进行其他 项目的毒理学试验。
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②如其中两项试验为阳性，而且短期喂养 试验显示该受试物具有显著的毒性作用， 一般应放弃该受试物用于食品；如短期喂 养试验显示有可疑的毒性作用，则经初步 评价后，根据受试物的重要性和可能摄入 量等，综合权衡利弊再作出决定。
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接触评定涉及环境有害物质与接触人群 两方面的研究。
对于环境有害物质，要弄清其来源、在 环境中存在的总量及在不同介质(空气、水体、 土壤和食物)中的分布、转运、转化的情况和 消长规律。
对于接触人群，不仅要掌握人数、构成、 范围等资料，尤其要注意抽样的代表性问题。 否则会带来很大的不确定性。如对接触机会 较多(如生产工人)或较为敏感的某些亚群 (如 老弱病残者)需区别对待，分别进行评价。
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人群接触剂量的估测不仅应考虑 到经由不同途径吸收时吸收率的影响， 还要注意一种化学毒物经由多种途径 进入机体的可能性。另外，接触剂量 与靶器官剂量并非总是平行，而只有 后者才能引起损害效应，故估测接触 剂量时应结合健康效应进行。
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3．接触评定
接触评定是危险度评价的第三个 阶段，目的是：
确定危险人群接触待评化 学物质 的总量并阐明接触特征，为危险度评 价提供可靠的接触数据或估测值。如 经此阶段认定待评化学毒物与人群无 接触或虽有接触但不能引起健康损害， 则危险度评价可不再向下进行。
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4．危险度特征分析
是危险度评价的最后总结阶段。 通过对前三个阶段的评定结果 进行 综合、分析、判断、测算待评化学毒 物在接触人群中引起危害概率(即危险 度)的估计 值，并以文件的形式阐明 该物质可能引起的公众健康问题，为 政府管理机构决策提供科学依据。
03第四章-毒理学实验基础
(3)封闭群动物：指在5年以上不从外部引进新
血缘，仅由同一品系的动物在固定场所保存繁 殖的动物群. 具有一定程度的遗传学差异. 昆明种小鼠、 NIH小鼠、LACA小鼠、SD大鼠、 青紫蓝兔、新西兰兔等均属封闭群动物.
毒理学实验结果评价
结果评价需要解决的问题 是否具有统计学意义 是否具有生物学意义 是否具有毒理学意义
统计学意义和生物学意 义的相关p131表6-6
（1）纵向比较：剂量-反应关系； （2）横向比较：其它相关参数是否改变； （3）与历史对照比较
九、优良实验室规范 Good Laboratory Practice-GLP
制备成一定剂型：水溶液、油溶液、混悬液.
六、毒理学实验设计要点
一、体内毒理学试验设计
剂量分组—以获得剂量-反应关系，确认受试物 与毒作用的关系 ： 至少三个剂量组（高、中、 低）；设对照组（阳性、阴性、未处理对照、 历史性对照）
各组动物数：实验目的和设计、统计学要求
试验期限： 由实验目的和所用动物种或品系决 定：急毒为一次或24h内多次染毒观察 14天，亚 慢性规定持续至动物寿命的10%，慢性实验、致 癌实验为持续至动物寿命的大部分。
六、毒理学实验设计要点
二、体外毒理学试验设计
溶解性测试：在实验测试期间，受试物溶解性可 能改变，起始和结束时评价溶解性具有意义； 最高剂量推荐：高剂量会影响渗透压引发损伤， 上限为：动物细胞 10mmol/L 或 5mg/ml; 细菌实验 5mg/平板。毒性物应有毒效应和致死率。
毒理学课件4
三、食品安全性毒理学评价具体规定
3、食品安全性毒理学评价程序 准备工作包括两方面： （1）了解受试物（必要时包括杂质）的物理、化学性质 （包括化学结构、纯度、稳定性等），与受试物类似 的或有关物质的毒性等资料，以及所获得样品的代表 性如何，要求受试物能代表人体进食的样品。 （2）估计人体可能的摄入量。例如每人每日平均摄入量 或某些特殊人群的最高摄入量。获得这些资料后，根 据动物试验结果推测平均受试物对人体的可能危害。 如果动物实验的无作用水平(NOEL)比较高，而最 高摄入量很小，也就是摄入量远小于无作用水平，那 么，这类受试物就可能被允许使用。反之，如最高摄 入量甚至平均摄入量接近无作用水平，则这类受试物 就难以被接受了。
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二、亚慢性和慢性毒性试验设计
亚 （二）实验动物染毒期限 慢 性 毒 性 试 验
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时象或年龄状态的相似性
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第三阶段：亚慢性毒性试验
“食品安全毒理学评价程序”中要求，对于我国创 制的化学物质，在进行最终评价时，至少应进行 以下几项代谢方面的试验: ①胃肠道吸收； ②测定血浓度，计算生物半衰期(进入机体的外来 化学物质由体内消除一半所需的时间)和其他动力 学指标； ③主要器官和组织中的分布； ④排泄(尿、粪、胆汁)。有条件时， 对于国际上许多国家已批准使用和毒性评价资料
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试验阶段简介
第一阶段：急性毒性试验（acute toxicity test）
急性毒性(acute toxicity)是指机体(人或试验动物)一次接触或24小时
内多次接触化学物后在短期(最长到14天)内所发生的毒性效应，包括一
般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应。
通过急性试验可以确定试验动物对受试物的毒性反应、中毒剂量或致死
第五章 食品毒理学实验基础
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落户武汉大学实验动物中心的慰灵碑， 旨在纪念在抗非典疫苗和药物实验中为人 类健康献身的38只恒河猴
第一节 食品毒理学实验的原则和局限性 食品毒理学实验的原则 化学物在实验动物产生的作用，可以外推 于人 实验动物必须暴露于高剂量
成年的健康实验动物(雄性和雌性未孕)和 人可能的暴露途径是基本的选择 代表性、可重复性
常用实验动物生物学和生理学参数
2、实验动物品系的选择 品系(strain) 指用计划交配的方法，获得起源于共同 祖先的一群动物。 实验动物按遗传学控制分类可分为： ①近交系：指全同胞兄妹或亲子之间连续交配20代以上 而培育的纯品系动物。如小鼠有津白I、津白Ⅱ、615， DBA／1和DBA／2，BALB/C，C3H，C57B／6J，A 和A／He等。 ②杂交群动物(杂交1代，F1)，指两个不同的近交系之间 有目的进行交配，所产生的第一代动物。 ③封闭群：一个种群在五年以上不从外部引进新血缘， 仅由同一品系的动物在固定场所随机交配繁殖的动物 群。如昆明种小鼠、NIH小鼠、LACA小鼠、F344大 鼠、Wistar大鼠、SD(Sprague-Dauley)大鼠等。
第三，毒理学实验所用动物数量有限，那些发 生率很低的毒性反应，在少量动物中难以发现 。而化学物一旦进入市场，接触人群往往会很 大。这就存在小数量实验动物到大量人群外推 的不确定性。
• 四，实验动物一般都是实验室培育的品系，一 般选用成年健康动物，反应较单一，而接触人 群可以是不同的人种、种族，而且包括年老体 弱及患病的个体，在对外源化学物毒性反应的 易感性上存在很大差异。
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2. 剂量-反应(效应)研究。剂量-反应(效应)研究是 毒性评价和安全性评价的基础。 在急性(致死性)毒性试验中，应该得到LD50（半数致死 剂量/浓度），也可以得到LD01（最小致死剂量或浓度 ）和MTD（最大耐受剂量或浓度）。 在急性非致死性毒性试验中，可应该得到急性可观察到 有害作用的最低剂量(LOAEL)和未观察到有害作用的剂 量(NOAEL)。 在亚急性、亚慢性及慢性毒性试验中，可得到相应的 LOAEL和NOAEL。 在致突变、致癌和致畸等特殊毒性试验中，剂量-反应( 效应)研究将为确定受试物是否具有这些特殊毒性提供 依据。在致畸试验也可得到LOAEL和NOAEL；在致突变、 致癌试验中，尽管认为是无阈值的，但也可得到表观的 LOAEL和NOAEL。
保健食品毒理学安全评价
11 ． 甲 基 乙 基 酮 ， 丁 酮 （ Methyl ethyl ketone，MEK）； 12．凡士林油（Mineral oil；liquid petrolatum）； 13． 橄榄油（Olive oil）； 14． 花生油（peanut oil/Arachis oil） 15 ． 凡 士 林 （ Petrolatum/Vaseline /petroleum Jelly）； 16 ． 聚 乙 二 醇 -400 （ Polyethylene Glycol-400，PEG400）； 17．生理盐水（Saline）； 18．吐温80（Tween 80）； 19．水（Water）
（一）主题内容与适用范围
• 本程序规定了保健食品安全性毒理 学评价的统一规程。
• 本程序适用于保健食品的安全性评 价。
（二）对受试物的要求
• 以单一已知化学成分为原料的受试物；含有多 种原料的配方产品。
• 提供原料来源、生产工艺、推荐人体摄入量、 使用说明书等有关资料。
• 受试物应是符合既定配方和生产工艺的规格化 产品，其组成成分、比例及纯度应与实际产品 相同。
附件3 保健食品禁用物品名单
八角莲、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、 川乌、广防己、马桑叶、马钱子、六角莲、天仙 子、巴豆、水银、长春花、甘遂、生天南星、生 半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、关木 通、农吉痢、夹竹桃、朱砂、米壳（罂粟壳）、 红升丹、红豆杉、红茴香、红粉、羊角拗、羊踯 躅、丽江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、 闹羊花、青娘虫、鱼藤、洋地黄、洋金花、牵牛 子、砒石（白砒、红砒、砒霜）、草乌、香加皮 （杠柳皮）、骆驼蓬、鬼臼、莽草、铁棒槌、铃 兰、雪上一枝蒿、黄花夹竹桃、斑蝥、硫磺、雄 黄、雷公藤、颠茄、藜芦、蟾酥。 59
毒理学基础考点
Toxicology：毒理学，研究所有外源因素对生物系统的损害作用、生物学机制、安全性评价与危险性分析的科学。
Spectrum of toxic effects：毒效应谱，指机体暴露（接触）外源化学物质后，产生的效应取决于外源化学物质的性质和剂量，可引起多种变化,表现为：1、机体对外源化学物的负荷增加；2、意义不明的生理生化改变；3、亚临床改变；4、临床中毒；5、死亡Selective toxicity:选择性毒性,指一种化学物只对某种生物产生损害，对其他种类生物无害；对机体某一组织和器官有毒性，对其他组织器官则无毒性。
LD50/LC50：半数致死剂量或浓度，指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量或浓度，用以表示急性毒性的大小Toxic effect zone：表示化学毒物毒性和毒作用特点的重要参数。
半数致死剂量与急性阈剂量的比值为急性毒作用带。
急性阈剂量与慢性阈剂量的比值为慢性毒作用带。
急性毒作用带值小，引起死亡的危险性大。
慢性毒作用带值大，发生慢性中毒的危险性大。
Toxicokinetics：毒物动力学，指研究外源化学物的数量在ADME过程中随时间变化的动态规律的学科。
Accumulation：蓄积作用，指外源化学物连续、反复地进入机体，且吸收速度或总量超过代谢转化排除的速度或总量是，外源化学物逐渐增加并贮留的现象。
Storage depot：贮存库，指外源化学物蓄积的部位，可作为贮存库的有血浆蛋白、肝脏、肾脏、脂肪组织、骨骼。
Biotransformation：生物转化，指外源化学物在体内精力酶促或非酶促反应形成代谢产物的过程。
Metabolic detoxication：代谢解毒，指外源化学物经过生物转化以后成为低毒或无毒的代谢物。
Metabolic activation：代谢活化或生物活化，指一些外源化学物经过生物转化毒性作用但未减弱反而明显增强，甚至产生致突变致癌甚至致畸变作用的现象。
毒理学安全性评价程序
毒理学安全性评价程序：
（⼀）毒理学安全性评价的概念
是通过动物试验和对⼈群的观察，阐明某种化学物质的毒性及其潜在的危害，以便对⼈类使⽤该物质的安全性作出评价，并为确定安全作⽤条件制订预防措施决策提供依据的过程。
（⼆）毒理学安全性评价程序的原则
根据化学物质的种类和⽤途来选择国家标准、各部委和各级政府发布的法规、规定和⾏业规范中相应的程序。
安全性：在规定条件下接触化学物不引起有害作⽤的实际确定性。
毒理学安全性评价程序采⽤分阶段进⾏的原则，先安排实验周期短、费⽤低、预测价值⾼的试验。
安全性评价程序⼤部分把毒理学试验划分为4个阶段。
第⼀阶段为急性毒性试验和局部毒性试验；第⼆阶段包括重复剂量毒性试验、遗传毒性试验和发育毒性试验；第三阶段包括亚慢性毒性试验、⽣殖试验和毒物动⼒学试验；第四阶段包括慢性毒性试验和致癌试验。
化妆品第五阶段为⼈体激发斑贴试验和试⽤试验。
通常在化学物质投产之前或登记、销售之前，必须进⾏第⼀、⼆阶段的试验。
凡属我国⾸创的化学物质要求进⼀步选择第三阶段甚⾄第四阶段的某些有关项⽬进⾏测试。
试验⽅法和操作技术的标准化，优良实验室规范（GLP），标准操作规程（SOP）。
蛋黄磷脂的毒理学安全性评价试验
蛋黄磷脂的毒理学安全性评价试验目录一、内容综述 (2)1.1 研究目的与意义 (3)1.2 研究范围与限制 (4)二、材料与方法 (5)2.1 实验动物与饲养环境 (6)2.2 食物与水源 (7)2.3 实验分组与剂量设计 (8)2.4 毒理学试验方法 (9)2.5 数据收集与分析 (11)三、结果与讨论 (11)3.1 生理指标变化 (12)3.2 肝肾功能检测结果 (13)3.3 神经系统检查报告 (13)3.4 血液生化学指标分析 (14)3.5 致癌性评估 (15)3.6 毒性分级与安全性评价 (16)四、结论与建议 (17)4.1 结论总结 (18)4.2 政策建议 (19)4.3 未来研究方向 (20)一、内容综述蛋黄磷脂作为一种天然提取物，广泛应用于食品、医药及化妆品领域。
随着其应用的不断扩大，对其毒理学安全性评价的重要性也日益凸显。
本综述旨在全面概述蛋黄磷脂的毒理学安全性评价试验，从研究背景、现状、目的与意义等方面展开阐述。
蛋黄磷脂因其独特的理化性质和生物活性，在多个领域得到广泛应用。
关于其安全性和毒理学特性的研究尚不完全，尤其是长期和大量摄入后的潜在风险需要深入研究。
开展系统的毒理学安全性评价试验至关重要。
国内外对蛋黄磷脂的安全性评价已经开展了一系列研究，包括急性毒性、亚急性毒性、慢性毒性等方面的试验。
仍存在一些问题和挑战，如不同来源的蛋黄磷脂可能存在差异，不同试验方法和模型得出的结果可能存在差异等。
需要进一步完善评价体系，确保结果的准确性和可靠性。
本综述旨在通过对蛋黄磷脂的毒理学安全性评价试验进行全面分析，为相关研究和应用提供理论参考和实践指导。
通过对不同来源、不同纯度的蛋黄磷脂进行系统研究，评估其潜在风险，为合理制定食品安全标准、药品监管政策等提供依据。
为今后的研究提供方向和建议，推动蛋黄磷脂在相关领域的安全应用。
通过对蛋黄磷脂的毒理学安全性评价试验进行全面综述，有助于深入了解其安全性和风险性，为相关研究和应用提供有力支持。