盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性研究
盐酸精氨酸注射液的细菌内毒素检查方法验证及检查方法的建立
盐酸精氨酸注射液的细菌内毒素检查方法验证及检查方法的建立发表时间：2012-03-02T09:27:18.413Z 来源：《心理医生》2011年9月（下）总第200期供稿作者：魏淑梅王宝庆[导读] 三批盐酸精氨酸注射液用细菌内毒素检查法进行验证，可以用细菌内毒素检查法检查盐酸精氨酸注射液的热原。
魏淑梅王宝庆（牡丹江市食品药品检验检测中心黑龙江牡丹江 1 5 7 0 1 1）【摘要】目的:建立盐酸精氨酸注射液细菌内毒素检查方法。
方法：按中国药典2010版二部附录收载的细菌内毒素检测方法及指导原则进行实验。
结果：盐酸精氨酸注射液在至少10倍稀释后，不干扰鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应。
结论：三批盐酸精氨酸注射液用细菌内毒素检查法进行验证，可以用细菌内毒素检查法检查盐酸精氨酸注射液的热原。
【中图分类号】R 4 4 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8231（2011）09-13 15-021 仪器与试药微量取液器（50-250μl）,XW-80A型旋涡混合器,AL-40型试管恒温仪,细菌内毒素检查用水（BET）1001220,细菌内毒素工作标准品1 5 0 6 0 6 - 2 0 1 0 6 0 1 6 0 EU /m l , 鲎试剂（TAL）1005363 1008235 1016485盐酸精氨酸注射液,规格20ml:5g批号090705 090801 090906 用法：滴注：5～10g,一日：10～12g。
2 方法与结果2.1 鲎试剂灵敏度复核鲎试剂灵敏度复核试验按细菌内毒素检查法操作，结果灵敏度在0.5λ～2.0λ之间，表明鲎试剂灵敏度标示值符合规定。
2.2 内毒素限值的确定[1]L=K/M,其中K为按规定的给药途径，人每公斤体重每小时可接受的内毒素最大剂量，注射剂的K=5EU/（kg·h）M为人用每公斤体重每小时给的最大剂量M=6000mg/60kg·h,则L=K/M=5×60/6000=0.05EU/mg，则本品的细菌内毒素理论限值,L 为0.05 EU/mg。
盐酸赖氨酸葡萄糖注射液细菌内毒素检查法的研究
１０ Ｕ支 ， 国药 品生物 制 品检定所 ）盐 酸赖 氨 酸 ２Ｅ ／ 中 ； 葡 萄糖 注 射 液 （ 规格 ：５ ｍ ： 酸赖 氨 酸 ３０ ２ ０ ｌ盐 ． ｇ与葡 萄糖 ｌ．ｇ ２５ ，四川科 伦 药业 有 限公 司 产 品 ，批 号 ：
（０ ２ ，６ ６ １ ０ ０ １ ，６ ７ ９ ０ ０ ２ ，６ ７ ５ ６４ ２ ０ｏ ｌ ，６７６ ０ ０ ｌ ，６７２ ００ ２ ）
灵 敏度 为 ０２ Ｅ ・ ｌ 的 鲎试 荆检 测其 细 茵 内毒 素 。 结果 ：盐 酸 赖氨 酸 葡萄 糖 注射 液 稀释 １ 对 鲎 试 刺 无 干扰 作 ． ｕ ｍ－ ５ ‘ ０倍 用。 结 论 ： 以 用细 茵 内毒 素 检 查 法 对 盐酸 赖 氨 酸 葡 萄糖 注射 液 进行 热原 检 查 。 可
维普资讯
・
８ ・ ６
医学 基 础 与药 学 研 究
盐酸赖氨酸葡萄糖注射液细菌 内毒素检查法的研究
张
【 中重分类号】Βιβλιοθήκη １ ５ １４ ９静 ・邢蓉
【 文献标识码 】 Ａ 【 文章编号ｌ １７ ６１ 建立 将 ０倍稀 释 。 用标 示 【 耍 】 目的 ： 盐 酸 赖氨 酸 葡 萄糖 注射 液 的 细 茵 内毒 素 检 查 法 。方 法 ： 盐 酸 赖氨 酸 葡萄糖 注射 液 经 １ 摘
Ｌ Ｋ／ ５ Ｕ ・ ｇ ｌ ５ ｌ Ⅱ ・ ｇ ｌ ２４ Ｕ・ ～。 ＝ Ｍ＝ Ｅ ｋ － ２ ， ２ ｄ ｋ － ． Ｅ ｍｌ ／ ＝
糖 注 射 液 的最 大有 效 稀 释倍 数 ＭＶ １ Ｌ ／＝ Ａｘ／ Ｄ ＝ Ｃｈ ２ ｌ ０＝ ． ５倍 ；当 鲎试剂 的 灵敏 度值 为 ０２ Ｅ ｍ 时 。 ５ ．５ Ｕ・ ｌ 盐 酸 赖 氨 酸 葡 萄 糖 注 射 液 的最 大 有 效 稀 释 倍 数 ＭＶ ２ Ｌ ／＝ ．ｘ ／． ＝ ０倍 。 Ｄ ＝ Ｃｋ ２４ ｌ ２ １ ０５ ２４ 供 试品 干扰 试验 ． ２４１ 试验 首先选 用 ０ Ｅ ｍ 的 鲎试剂 。 ．． 预 ． Ｕ・ ｌ ５ 则最 大有效 稀释倍 数 Ｍ Ｄ Ｌ ／＝ ． ｌ ．＝ 。因此 。 Ｖ ＝ Ｃｋ ２４ ／ ５ ５倍 ｘ０ 供 试 品最大有 效稀 释倍数 为 ５倍 。用 细菌 内毒素检 查 用 水 （Ｅ Ｂ Ｔ水 ） 热 原 检查 符 合 规 定 的供 试 品原 及 液、 ５倍稀 释液 （ ５ ， １ ）分别 将细 菌 内毒素工 作标 准 品稀 释 成 ２０ 。．入 ０ 入，． ｋ ． １ 。． ０２ ４个 浓 度 的 内毒 素 入 ０ ５ ５ 溶液 ， 每一 浓度 平 行 做 ４支 ， 分 别 做 ２支 阴性 对 并 照。 结果 见表 １ 。表 １ 示 ： 显 两种 浓度 的供试 品溶 液 均 对 试验 有 干扰 ， 因此 ， 需选 用更 灵 敏 的鲎 试剂 ， 对 供 试 品进 行 大倍 数稀 释来 消除干扰 。 ２４２ 干扰 试验 选 用 ０ ５ Ｕ・ ｌ 灵 敏度 的 鲎试 ．． ． Ｅ ｍ－ ２ 剂 。 ＭＶ ＝ Ｃｋ ２４ ｌ ．５ １ 则 Ｄ Ｌ ／＝ ． ／ ２ ＝ ０倍 。将供 试 品稀释 ｘ ０ ｌ ０倍后 （ ｌ ） 用两个 批 号的鲎 试剂 ， １ ０， 分别 对六 批 供 试品进行 干扰 试验 ， 结果见 表 ２ 。试 验表 明 ， Ｅ 其 ｓ 在 ０ 入 ２０ ． ．入之 间 ． ｔ ０５ ｓ２０ ｓ 间 ，对供 试 ５ Ｅ 在 ． 一． 之 Ｅ Ｅ 品 进行 １ 稀释可 消 除干扰 。 ０倍
盐酸赖氨酸注射液细菌内毒素检查法方法学验证
和 ２支供试 品阳性对照 （ 即含 ２０ 浓度标准 内毒素的该浓度 ．
的供 试 品稀 释 液） 。
５ １ 鲎 试剂 ．
批 号 为 １０ １ １ １２ ５ ；生 产 厂 家 为 湛 江安 度 斯 生 物 有 限公 司 。
盐 酸赖氨酸 注射液 限值 Ｌ：０ ＵｍＬ，按最 大有效稀 释 ．Ｅ ／ ５
ｌ － （ ／） ｏ ＹＸ４ ｇ
（） 待复核鲎试剂 ：批号为 １０ １ １ １ １ ２５ ；生 产厂家为湛江安
度斯生物有 限公 司；终 点浓度 （ Ｕｍ ）为 ０ ５ ．５ ． 、 Ｅ ／Ｌ ． 、０２ 、０ ５ ２ ２
０２ 。 ．５
ｌ ｏ （ ／ ） ｏ ［１ｇ．５＋ｌ ｏ２ ＝ｌ ｇ ∑Ｘ４ ＝ｌ ｇ （ ０２ ｏ ｏ ．５＋ｌ ０２ ｇ ｏ ． ｇ ５＋ ｌ ０２ ） ］ ．５ ＵｍＬ ｏ ． ／ ＝０２ ／ ｇ ５４ Ｅ （）待复核鲎试剂 ：批 号为 １０ ２ ０ ２ ６ １ ；生产厂家 为湛 江博 １ 康海 洋 生物 有 限公 司 ；终 点 浓 度 （ Ｕｍ ） 为 ０１５ ．５ Ｅ ／Ｌ ．２ 、０ 、 ２
司。
（） 阴性对照管 （ Ｃ管） ４ Ｎ ：加入 ０２ｍ 细菌内毒素检查用 ． ｌ
水 ，其作用是防止试剂或器具 自身的污染影响检查结果的准确 性 ，做 ２ 。 支
（） 标 准对 照反 应 终点 浓 度 （ ＵｍＬ ：０１５ ． ５ １ Ｅ ／ ） ．２ 、０１ 、 ２
０．５、 ０．５。 ２ ２
（） 标 准对 照 反 应终 点 浓 度 （ ＵｍＬ 为 ０２ 、０ ５ １ Ｅ／ ） ． ５ ． 、 ２
０２ ．５、 ０２ 。 ．５
倍数 Ｍ Ｄ＝ Ｌ 计算 ，确定稀释倍数 为 ２ ４ 、１ 、１ Ｖ Ｃ× ／ 、 、８ ２ ６
盐酸赖氨酸检验操作规程
盐酸赖氨酸检验操作规程1．目的：建立盐酸赖氨酸检验操作规程，便于检验人员规范操作。
2．范围：适用于配制各种氨基酸注射液的盐酸赖氨酸测定。
3．责任：质检科检验员对实施本规程负责。
4．程序：4.1性状：白色结晶或结晶性粉末，无臭。
4.2鉴别试验（1）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集1035图）一致。
（2）取本品的水溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。
4.3酸度（ pH值）测定4.3.1范围：5.0～6.04.3.2配制溶液称取本品1.0g，加新沸过的冷水10ml，溶解。
4.3.3操作步骤：同亮氨酸。
4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围>99.0%4.4.2溶液配制取本品0.5g溶于10ml水中。
4.4.3操作步骤：同亮氨酸。
4.5比旋度测定4.5.1测定范围：+20.80～+21.504.5.2试剂和试液：6mol/L 盐酸：取54ml盐酸用水稀释至100ml，即得。
4.5.3操作步骤取本品，精密称定，加6mol/L 盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中约含80mg的溶液，依法测定（见旋光度测定操作规程）。
4.6含氯量测定4.6.1测定范围：19.12%～19.51%4.6.2试剂和试液：同盐酸精氨酸。
4.6.3操作：取本品约0.35g ,精密称定，加水20ml溶解后，加稀醋酸2ml与溴酚蓝指示液8~10滴，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定至蓝紫色。
4.6.4计算公式：同盐酸精氨酸。
4.7硫酸盐测定4.7.1测定范围：<0.02%4.7.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.7.3操作步骤：同亮氨酸4.8铵盐测定4.8.1测定范围：<0.02%4.8.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.8.3操作步骤：同亮氨酸4.9铁盐测定4.9.1测定范围：<0.001%4.9.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.9.3操作步骤：同亮氨酸4.10重金属测定4.10.1测定范围：<百万分之十4.10.2试剂和试液：同亮氨酸。
注射用复方甘草酸苷细菌内毒素检查方法的研究
注射 用复 方甘 草 酸 苷是 由甘 草 酸 苷 、 氨 酸 和 甘 盐 酸半胱 氨酸组 成 的复方 制剂 ， 有调节 免疫 、 具 抑制
射用 复方 甘草 酸苷 （ 四环 药 业股 份 有 限公 司 ， 号 ： 批 ２ ０ ０ ２ ２、０ ９ ５ １ 、 ０ ９ ７ ８ ， 格 为 ８ ｇ ０ ９５６ ２００ ３２ ２００ １２ 规 ０ｍ ／
ｓ ｅ ｓ ｄｆｒ ｈ ｔ ｅｅ ｃ ｓ ｕｉｇｔ ｈ ｐｅ ｓ ｍ ｂ ｃ ｔ ｌ ａ （ｒ Ｌ ｒｍ ｄｆ ｒｎ ｍ ｎ ｆ ｔｒ ｓ Ｒ ｓ ｈ Ｔ ｅｍａｉ ｕ ｉ ｌ ｔ ｔ ｅｉ ｅ ｒｎ ｅｔ ｔ ｓ ｃ ｙ ｌ ｅ ｏ ｙｅ ｙ ｔ Ａ ）ｆ ｉｅｅ ｔ ａ ｕａ ｕ ｅ ． ｅｕ ｓ ｈ ｘ ｍ ｖ ｙ ｅｅ ｏ ｔ ｎ ｒ ｆ ｅ ｎ ａ ｕ ａ ｓｅ ｏ ｆ ｃ ｒ ｍ ｎ ｎｎｅ ｅｅ ｃ ｏ ｃ ｎ ａｉ ｆ ｏ ｐ ｕ ｄｇｙ ｙ ｈｚ ｒ ｎｅ ｔ ｎ ｗ ｓ０ ２ ／ １ Ｃ ｎｉ ｏ Ｔ ｅｒｓ ｌ ｕ ｇ ｓ ｔ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｉｔ ｒｎ ｅｃｎ ｅ ｔ ｔ ｎｏ ｍ ｏ ｎ ｌｃｒ ｉ ｎｆ ｊｃ ｏ ａ ． ５ ｍｇ ｍ ． ｏ ｃ ｎ ｈ ｕｔ ｓ ｇ ｅｔ ｈ ｃ ｒ ｌ ｆ ｒ ｒ ｏ ｃ ｒ ｉｏ ｉ ｉ ｓｉ ｅ ｓ ａｂ ｅａ
检查 。
关键 词 ： 注 射 用 复 方 甘 草 酸 苷 ； 细 菌 内毒 素 ； 凝 胶 法 ； 干扰 试 验
中 图 分 类 号 ： Ｒ ２ ． ９７ １ 文献标志码 ： Ａ 文章 编 号 ： １０ ６ １ （ ０ ０ １ ０７— ６ １ ２ １ ） ２—１４ ０ ０ ７— ３
马 建丽 朴晋 华 ， 陈新 文 周 亮 （ ， ， 解放军总医院第一附属医院药剂药理科， 北京 １ ０ ８ ０ ４ ； 山西 ０
注射用复方甘草酸苷细菌内毒素检查方法的研究
注射用复方甘草酸苷细菌内毒素检查方法的研究马建丽;朴晋华;陈新文;周亮【摘要】目的研究注射用复方甘草酸苷对细菌内毒素检查试验的干扰情况,建立其细菌内毒素限量检查的方法 . 方法采用细菌内毒素凝胶法,用不同厂家的鲎试剂对3批注射用复方甘草酸苷进行干扰试验. 结果注射用盐酸赖氨酸最大非干扰浓度为0.25 mg/ml. 结论注射用复方甘草酸苷细菌内毒素限值确定为1.5 EU/mg,可应用鲎试剂进行细菌内毒素检查.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2010(041)012【总页数】3页(P1047-1049)【关键词】注射用复方甘草酸苷;细菌内毒素;凝胶法;干扰试验【作者】马建丽;朴晋华;陈新文;周亮【作者单位】解放军总医院第一附属医院药剂药理科,北京,100048;山西省药品检验所;解放军总医院第一附属医院药剂药理科,北京,100048;解放军总医院第一附属医院药剂药理科,北京,100048【正文语种】中文【中图分类】R927.1注射用复方甘草酸苷是由甘草酸苷、甘氨酸和盐酸半胱氨酸组成的复方制剂，具有调节免疫、抑制病毒增殖及灭活病毒、降低转氨酶和改善肝组织损伤等作用。
该药具有较强的抗炎、抗变态反应活性及皮质激素样作用，并且取得了良好的疗效。
临床用于治疗慢性肝病，改善肝功能异常，亦可用于治疗湿疹、皮肤炎、荨麻疹。
为了保证临床用药安全，本文依据中国药典2005年版二部细菌内毒素检查法［1，2］，对应用鲎试剂检测注射用复方甘草酸苷中细菌内毒素的可行性进行了方法学研究，并给出了细菌内毒素限值，为其质量控制提供了实验室依据，该法具有灵敏度高、成本低、操作简便、不需要特殊仪器等优点，便于药品生产流通各个环节的监控。
1 材料1.1 试药鲎试剂(TAL)有2种:①湛江博康海洋生物有限公司，批号0802290，灵敏度为0.25 EU/ml，0.1 ml/支;② 厦门市鲎试剂实验厂，批号090741，灵敏度为0.125 EU/ml，0.1 ml/支。
盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性研究
盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性研究摘要：目的：建立检查盐酸赖氨酸中细菌内毒素的方法，确保盐酸赖氨酸细菌内毒素分析方法的专属性、灵敏度在本实验室条件下的适用性。
方法：按《中国药典》2015年版通则1143的规定，用2个不同厂家的鲎试剂对盐酸赖氨酸分别进行检查。
结果：盐酸赖氨酸在浓度为0.025g/ml时对细菌内毒素试验不干扰，其细菌内毒素限值为10EU/g。
结论：盐酸赖氨酸可用细菌内毒素检查法进行细菌内毒素的检查，该方法简便快速，检查结果准确可靠。
关键词：盐酸赖氨酸、细菌内毒素、鲎试剂、干扰试验盐酸赖氨酸是我公司专利产品盐酸赖氨酸注射液的原料药。
根据《中国药典》规定，作为注射液用的原料药需要进行内毒素含量的控制。
本文按照《中国药典》2015年版四部通则1143细菌内毒素检查法的要求，研究探讨盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性，建立细菌内毒素检查法，进行日常检测，确保药品的质量及临床用药安全性。
1、仪器：恒温电热鼓风干燥箱、电热恒温水箱、旋涡混合器、电子天平2、试剂与样品2.1 试剂：（1）生产厂家湛江安度斯生物有限公司鲎试剂：批号为1611281灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1609090效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水批号为1609260规格为5ml/支。
（2）生产厂家湛江博康海洋生物有限公司鲎试剂：批号为1607280灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1607302效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水批号为1612290规格为5ml/支。
2.2 样品盐酸赖氨酸批号为17010102、17010201、17010301生产厂家广西南宁邕江药业有限公司3、实验准备将玻璃试验用品放入铬酸洗液充分浸泡后，放置入烤箱。
将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1小时除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素。
4、方法与结果4.1 鲎试剂灵敏度复核（1）细菌内毒素标准溶液的制备:取细菌内毒素工作标准品一支（10EU/ml），加入细菌内毒素检查用水1.0ml，置旋涡混合器上混合5分钟，得到浓度为10EU/ml的内毒素溶液。
注射用盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测
注射用盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测1. 引言1.1 背景介绍盐酸溴己新是一种常见的药物原料，广泛应用于临床注射和治疗过程中。
由于生产和储存过程中可能受到细菌污染，导致盐酸溴己新原料中潜在存在细菌内毒素的风险。
细菌内毒素是细菌生长代谢过程中产生的一种有毒物质，对人体健康会造成严重危害。
对盐酸溴己新原料中细菌内毒素进行检测具有重要的意义和必要性。
通过有效的检测方法，能够及时发现和处理含有细菌内毒素的原料，保障临床用药的安全性和有效性。
本研究旨在探讨盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测方法，为药品生产和临床注射提供更加科学的保障和指导。
【字数: 135】1.2 研究目的研究目的是为了在制药生产过程中对注射用盐酸溴己新原料中的细菌内毒素进行有效检测，确保药品质量和安全。
细菌内毒素是一种致病性物质，如果存在于药品原料中会对人体健康产生严重危害，甚至引发严重的药物中毒反应。
通过研究盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测方法，可以提高药品生产过程中细菌内毒素的检测准确性和可靠性，保障医药产品的质量和安全性，为人们使用药品提供更加可靠的保障。
研究也旨在为未来的研究和技术应用提供基础和参考，促进相关领域的进步和发展。
1.3 研究意义盐酸溴己新是一种常用的药物原料，广泛应用于医药、化工等领域。
由于生产过程中可能存在细菌污染，导致产品中存在细菌内毒素。
细菌内毒素是一种极具毒性的物质，对人体健康造成严重危害。
对盐酸溴己新原料中的细菌内毒素进行检测显得尤为重要。
本研究旨在建立一种高效、准确的盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测方法，为生产实践提供科学依据，并保障产品质量和人体健康。
通过对细菌内毒素的概念、危害以及检测方法进行深入研究，可以帮助生产企业更好地监控产品质量，避免因细菌内毒素污染而造成的各种问题。
对盐酸溴己新原料中细菌内毒素的检测也有助于完善相关法规标准，提高产品的竞争力和市场拓展空间。
本研究的意义在于为促进盐酸溴己新原料生产的质量控制和安全性提供技术支持，为健康产业的发展做出积极贡献。
注射用赖氨匹林细菌内毒素检查法的研究
Ｅ ｕ ／ ｍｌ ， 福 州新 北生 化工 业 有 限公 司 ， 批号 １ ２ １ １ ０ １ １ ２ ） ；
细菌 内毒 素工作 标 准 品 （ １ ６ ０ Ｅ ｕ ／ 支， 中国 药 品 生物 制 品检定 研究 院 ， 批号 １ ５ ０ ６ ０ １— ２ ０ １ １ ７ ４ ） ； 细 菌 内 毒 素检 １ １ ０ １ ０ ４ ０ ５ ） ； 注 射用 赖氨 匹林 （ ０ ． ９ ｇ ／ 支， 扬州 一 洋 制药
行细菌 内毒 素检查法 干扰试验 。结果 ： 注射用赖 氨匹林 在稀释至 ３ ． １ ２ ｍ ／ｍ ｓ ｌ 时， 对灵 敏度为 ０ ． ２ ５ Ｅ ｕ ／ ｍ ｌ 的鲎试剂无干扰 作用 。结论 ： 注射用赖氨匹林可 以用细菌 内毒 素检查 法取代热原检查法 。 关键词 注射用 赖氨匹林 ， 细菌 内毒 素检查 ， 鲎试剂
镇痛药 ； 其 水 溶 性好 ， ｐ Ｈ 值 为 ５～６ ， 适 用 于 肌 肉和 静 查 用 水 （ ５ ｍ１ ， 福 州新 北 生 化 工业 有 限公 司， 批 号
机制 、 肝 肾功 能 均 无 影 响 ， 同 时 含 有 人 体 必 需 的 赖 氨 有 限公 司 ， 批号 １ ２ ０ ５ ２ ８ 、 １ ２ ０ ４ １ ５ 、 １ ２ ０ ４ １ ０ ） 酸， 临床 用 于小 儿解 热 镇 痛 及 癌 症 患 者 二 、 三级止痛， ２ 方 法 与结果
Ｌｉ ｎ ｇ Ｚｈｅ ｎ
（ Ｙ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆ ｏ ｒ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｙ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ２ ２ ５ ０ ０ ９ ） Ａ Ｂ Ｓ Ｔ Ｒ ＡＣ Ｔ Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｏ ｘ ｉ ｎ ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｌ ｙ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｃ ｅ ｔ ｙ ｌ ｓ ａ ｌ ｉ ｃ ｙ ｌ ａ ｔ ｅ ｆ ｏ ｒ Ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ： Ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ ｌ ｙ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｃ ｅ ｔ ｙ ｌ ｓ ａ ｌ ｉ ｃ ｙ ｌ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｒ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ｅ ｒ ｅ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ Ｔ Ａ Ｌ ｆ ｒ ｏ ｍ ｖ ａ ｉ ｒ ｏ ｕ ｓ ｍ ａ ｎ ｕ ｆ ａ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ．Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｗｈ ｅ ｎ ｄ ｉ ｌ ｕ ｔ ｅ ｄ ｔ ｏ ３ ． １ ２ ｍ ｓ ／ ｍ ｌ 。
论TOC检测技术在制药企业中的应用
论TOC检测技术在制药企业中的应用摘要：药品生产企业作为一种特殊的行业，质量是安全的保障，是企业的生命。
TOC检测在制药行业中便是质量保证的一个必备的有效控制手段。
TOC分析仪凭借自身的性能特点及独特优势，可快速地对制水系统进行有机杂质的监测，还可用于设备清洁验证，评价设备的清洗效果是否达到理想要求。
关键词：TOC；TOC分析仪；水质监控；清洁验证TOC是总有机碳Total Organic Carbon的简称，是指样品中各种有机物含碳的总量。
总有机碳（TOC），由专门的仪器来测定。
TOC分析仪，是将水溶液中的总有机碳氧化为二氧化碳，并且测定其含量，利用二氧化碳与总有机碳之间碳含量的对应关系，从而对水溶液中总有机碳进行定量测定，检测非常的便捷准确。
1.TOC分析技术的应用1.1制水系统中TOC监控制药用水是生物制药生产工艺中使用量最大且最为重要的原料、溶剂与清洗用水，其质量对于药品质量来说至关重要。
制药用水中的有机物质一般来自水源、供水系统以及水系统中菌膜的生长。
检查制药用水中有机碳总量，可以间接控制水中的有机物含量。
由于有机物是以碳链为骨架的一类化合物，所以这个指标通常作为评价水体有机物污染程度的重要依据。
随着2019年新药品管理法的颁发实施，全国的制药企业，针对制药用水，尤其是注射用水的安全性，面临着更严格的法规要求。
美国、欧洲和日本上世纪90年代就已经提出对“总有机碳（TOC）”的检测，2010年版《中国药典》二部的“注射用水”也收载了TOC检测法。
各种有机污染物，微生物及细菌内毒素经过催化氧化后变成二氧化碳，进而改变水的电导，电导的数据又转换成总有机碳的量。
如果总有机碳控制在一个较低的水平上，意味着水中有机物、微生物及细菌内毒素的污染处于较好的受控状态。
所以说TOC指标的监测，在一定意义上说明的是对水污染的监控。
通过在线TOC分析仪的实时监控，如若发现TOC数据偏高，极有可能是微生物污染达到某一数值即微生物超标，表明注射用水系统已经偏离了正常运行的条件，此时应积极采取相应措施，及时控制，使系统回到正常的运行状态。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性研究发表时间：2018-09-12T16:07:55.900Z 来源：《基层建设》2018年第22期作者：宁航忠[导读] 摘要：目的：建立检查盐酸赖氨酸中细菌内毒素的方法，确保盐酸赖氨酸细菌内毒素分析方法的专属性、灵敏度在本实验室条件下的适用性。
广西南宁邕江药业有限公司摘要：目的：建立检查盐酸赖氨酸中细菌内毒素的方法，确保盐酸赖氨酸细菌内毒素分析方法的专属性、灵敏度在本实验室条件下的适用性。
方法：按《中国药典》2015年版通则1143的规定，用2个不同厂家的鲎试剂对盐酸赖氨酸分别进行检查。
结果：盐酸赖氨酸在浓度为0.025g/ml时对细菌内毒素试验不干扰，其细菌内毒素限值为10EU/g。
结论：盐酸赖氨酸可用细菌内毒素检查法进行细菌内毒素的检查，该方法简便快速，检查结果准确可靠。
关键词：盐酸赖氨酸、细菌内毒素、鲎试剂、干扰试验盐酸赖氨酸是我公司专利产品盐酸赖氨酸注射液的原料药。
根据《中国药典》规定，作为注射液用的原料药需要进行内毒素含量的控制。
本文按照《中国药典》2015年版四部通则1143细菌内毒素检查法的要求，研究探讨盐酸赖氨酸细菌内毒素检查法的适用性，建立细菌内毒素检查法，进行日常检测，确保药品的质量及临床用药安全性。
1、仪器：恒温电热鼓风干燥箱、电热恒温水箱、旋涡混合器、电子天平2、试剂与样品2.1 试剂：（1）生产厂家湛江安度斯生物有限公司鲎试剂：批号为1611281灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1609090效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水批号为1609260规格为5ml/支。
（2）生产厂家湛江博康海洋生物有限公司鲎试剂：批号为1607280灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1607302效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水批号为1612290规格为5ml/支。
2.2 样品盐酸赖氨酸批号为17010102、17010201、17010301生产厂家广西南宁邕江药业有限公司3、实验准备将玻璃试验用品放入铬酸洗液充分浸泡后，放置入烤箱。
将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1小时除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素。
4、方法与结果4.1 鲎试剂灵敏度复核（1）细菌内毒素标准溶液的制备:取细菌内毒素工作标准品一支（10EU/ml），加入细菌内毒素检查用水1.0ml，置旋涡混合器上混合5分钟，得到浓度为10EU/ml的内毒素溶液。
然后进行稀释，制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液（2λ、λ、0.5λ、0.25λ。
λ为所复核的鲎试对的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟。
（2）加样：取鲎试剂18支，开启后插入试管浮板的圆孔内，每支加入0.1ml细菌内素检查用水溶解，其中16支分别加入0.1ml4个浓度（2λ、λ、0.5λ、0.25λ）内毒素标准溶液；每一个浓度平行做4支；另2支加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
加样结束后，用封口膜封口，轻轻振动混匀，避免产生气泡，垂直放入37℃±1℃恒温水浴箱中，保温60±2分钟。
取出观察并记录结果。
（3）结果判断:将插有鲎试剂的浮板，取出，缓缓倒转1800管内形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为（+）；未形成凝胶或凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记为（－）（4）实验数据处理：按照标准规定，内毒素最大浓度2λ，4管应均为阳性，最小浓度0.25λ，4管应均为阴性，试验有效，可按下列公式计算鲎试剂灵敏度的复核值；λc=lg-1(∑X/4)（a）待复核鲎试剂批号为1611281灵敏度为0.25EU/ml终点浓度（EU/ml）0.125、0.25、0.25、0.25λc=lg-1(∑X/4)=0.177（EU/ml）（b）待复核鲎试剂批号为1607280灵敏度为0.25EU/ml终点浓度（EU/ml）0.25、0.25、0.25、0.125λc=lg-1(∑X/4)=0.210（EU/ml）结论：2批不同厂家的鲎试剂的λc值均在0.5λ～2λ（包括0.5λ和2λ）内，说明这两批鲎试剂复核结果符合规定。
可用于试验，按标示值λ=0.25EU/ml使用。
4.2 干扰实验4.2.1 预试验：初步确定供试品的最大不干扰浓度，为正式干扰实验提供依据。
将盐酸赖氨酸制成一系列浓度，用来自2个厂家的鲎试剂对每一浓度进行检验，每一浓度下做2支供试品管和2支供试品阳性对照。
根据药典规定，供试品MVD=λ/L，其中λ为鲎试剂标示灵敏度，L 为细菌内毒素限值（盐酸赖氨酸，L为10EU/g），按市面所售鲎试剂的灵敏度有0.25、0.125、0.06、0.03EU•ml-1，确定样品浓度为0.025g/ml、0.0125g/ml、0.006g/ml、0.003g/ml，取一批盐酸赖氨酸，批号：17010102，进行预试验。
（1）将供试品用细菌内毒素检查用水制成系列浓度（g/ml）0.025、0.0125、0.006、0.003。
制备E（内毒素标准）系列，方法与鲎试剂灵敏度复核相同，得到一个系列的2λ、λ、0.5λ、0.25λ浓度溶液。
（2）加样：取鲎试剂20支，样品每个浓度做4支鲎试剂，其中2支分别加01ml细菌内毒素检查用水和0.1ml各浓度的供试品，计为NPC 管；另外2支分别加0.1ml各浓度的供试品和0.1ml内毒素标准溶液2.0λ（E0.5），计为PPC管；另取4支鲎试剂，其中2支加0.2ml细菌内毒素检查用水，记为NC管；另外2支分别加0.1ml细菌内毒素检查用水和0.1ml内毒素标准溶液2.0λ（E0.5），计为PC管。
（3）试验结果：NPC管均为阴性（-）、PC管均为阳性（+）、NC管均为阴性（-），实验有效；浓度0.025g/ml、0.0125g/ml、0.006g/ml、0.003g/ml管均为阴性（—），根据实验数据，初步确定本样品最大不干扰浓度为0.025g/ml。
4.2.2干扰试验：目的是检验在已确定的最大不干扰浓度下，盐酸赖氨酸对于鲎试剂与内毒素的反应有无干扰作用，是否合适做细菌内毒素检查。
取三批盐酸赖氨酸，批号分别为17010102、17010201、17010301，用两个不同厂家的鲎试剂、标准品进行实验。
（1）称取盐酸赖氨酸0.1g，加细菌内毒素检查用水4ml,制成浓度为0.025g/ml的溶液。
制备E系列（内毒素标准溶液），方法同鲎试剂灵敏度复核。
用三批浓度为0.025g/ml的供试液，将同支细菌内毒素标准品稀释成4个浓度(2λ、λ、0.5λ、0.25λ)的含内毒素的供试品溶液（Eλ）。
（d）加样：取鲎试剂18支,同鲎试剂灵敏度复核操作。
再另取18支鲎试剂插入浮板中，其中的4支4列每列每支分别加入0.1ml的含2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ的内毒素的供试品溶液，另一列2支加入0.1ml供试品溶液作为样品阴性对照。
加样结束后，用封口膜封口，轻轻振动混匀，避免产生气泡，垂直放入37±1℃恒温水浴箱中，保温60±2分钟后取出观察并记录结果。
（c）结果判断：最大浓度2λ4管均为阳性，最低浓度0.25λ4管均为阴性，阴性对照4管均为阴性，实验有效，按下列公式计算分别计算内毒素标准溶液的反应终点浓度几何平均值（Es）和含供试品的内毒素溶液的反应终点浓度的几何平均值（Et）Es=log-1(∑Xs/4)；Et=olg-1(∑Xt/4)鲎试剂批号：1611281（1）标准对照反应终点浓度（EU/ml）为0.25、0.25、0.25、0.25Es=log-1(∑Xs/4)=0.25EU/ml（2）含供试品的内毒素溶液反应终点浓度（EU/ml）批号170102浓度（EU/ml）为0.125、0.125、0.25、0.25Et1=olg-1(∑Xt/4)=0.177EU/ml批号170201浓度（EU/ml）为0.25、0.25、0.25、0.25Et2=olg-1(∑Xt/4)=0.25EU/ml批号170301浓度（EU/ml）为0.125、0.25、0.25、0.25Et3=olg-1(∑Xt/4)=0.210EU/ml2、鲎试剂批号1607280（1）标准对照反应终点浓度（EU/ml）为0.25、0.25、0.25、0.25Es=log-1(∑Xs/4)=0.25EU/ml（2）含供试品的内毒素溶液反应终点浓度（EU/ml）批号170102浓度（EU/ml）为0.25、0.125、0.25、0.25Et1=olg-1(∑Xt/4)=0.210EU/ml批号170201浓度（EU/ml）为0.25、0.25、0.25、0.25Et2=olg-1(∑Xt/4)=0.25EU/ml批号170301浓度（EU/ml）为0.25、0.25、0.25、0.125Et3=olg-1(∑Xt/4)=0.210EU/ml结论：根据上述实验数据，用两个厂家的鲎试剂进行实验，Es均在0.5λ～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）范围内，三个批次供试品的Et也均在0.5Es～2.0Es（包括0.5Es和2.0Es）范围内，说明该供试品在此浓度下（0.025g/ml）对不同厂家的鲎试剂与内毒素的反应均无干扰作用，在低于或等于此浓度下（0.025g/ml）可使用细菌内毒素检查法，符合《中国药典》2015年版通则1143的规定。
5、供试品细菌内毒素检查用2个不同厂家灵敏度为0.25EU/ml的鲎试剂对3批产品进行细菌内毒素检查（1）试剂（a）生产厂家湛江安度斯生物有限公司鲎试剂：批号为1610171灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1609090效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水：批号为1609260规格为5ml/支（b）生产厂家湛江博康海洋生物有限公司鲎试剂：批号为1607280灵敏度为0.25EU/ml；细菌内毒素工作标准品：批号为1607302效价为10EU/支；细菌内毒素检查用水：批号为1612290规格为5ml/支(2)实验操作将供试品制成0.025g/ml的溶液。
NPC管：取2支鲎试剂各加0.1ml细菌内毒素检查用水和0.1ml供试品溶液，PC管：取2支鲎试剂各加0.1ml细菌内毒素检查用水和0.1ml工作标准品溶液，PPC管：取2支鲎试剂各加0.1ml供试品溶液和0.1ml工作标准溶液，NC管：取2支鲎试剂各加0.2ml细菌内毒素检查用水。
加样结束后，轻轻混匀，用封口膜封闭管口，垂直放入37℃±1℃恒温水浴箱中，保温60±2分钟。
避免受到振动造成假阴性结果。
判断标准：当PC管为阳性（+），PPC管为阳性（+），NC管为阴性（-）时，若供试品管PPC管为阴性（-）表明供试品中的内毒素含量小于规定的限值，判为符合规定；若供试品管为阳性（+）表明供试品中的内毒素含量大于规定的限值，判为不符合规定。