高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法的原理
高压蒸汽灭菌法的原理高压蒸汽灭菌法是一种常用的灭菌方法，它利用高压蒸汽对物品进行灭菌。
高压蒸汽灭菌法的原理是利用高温高压的蒸汽对微生物进行灭活，从而达到灭菌的目的。
下面我们将详细介绍高压蒸汽灭菌法的原理。
首先，高压蒸汽灭菌法的原理基于蒸汽的物理特性。
在高压环境下，水的沸点会升高，当水达到一定的压力时，其沸点会超过100摄氏度，这时的蒸汽温度会达到灭菌所需的高温。
因此，高压蒸汽能够在较短的时间内将物品表面和内部的微生物迅速灭活，从而实现灭菌的效果。
其次，高压蒸汽灭菌法的原理还涉及到蒸汽的渗透性。
高压蒸汽能够渗透到物品的每一个角落和缝隙中，将微生物彻底清除。
这种渗透性使得高压蒸汽灭菌法能够对各种形状和材质的物品进行灭菌，而且能够有效地避免死角，确保灭菌的全面性和彻底性。
另外，高压蒸汽灭菌法的原理还包括蒸汽的热量传递性。
高温高压的蒸汽能够快速地将热量传递给物品表面和内部，使得微生物迅速被高温灭活。
这种热量传递性使得高压蒸汽灭菌法能够在较短的时间内完成灭菌过程，提高工作效率，减少生产时间。
此外，高压蒸汽灭菌法的原理还涉及到蒸汽的杀菌作用。
高温高压的蒸汽能够破坏微生物的细胞结构，使得细菌、真菌、孢子等微生物无法生存，从而达到灭菌的效果。
这种杀菌作用使得高压蒸汽灭菌法能够广泛应用于医疗器械、药品、食品等领域，确保产品的安全和质量。
综上所述，高压蒸汽灭菌法的原理是基于高压蒸汽的物理特性、渗透性、热量传递性和杀菌作用，利用这些特性对微生物进行灭活，从而达到灭菌的目的。
高压蒸汽灭菌法以其快速、全面、高效的特点，成为目前广泛应用的一种灭菌方法，为各行各业提供了可靠的灭菌保障。
高压灭菌操作方法有哪些
高压灭菌操作方法有哪些高压灭菌是一种常用的灭菌方法，通过将物体置于高压环境中，将细菌、病毒和其他微生物彻底杀灭。
下面是高压灭菌的几种常见操作方法的详细介绍：1. 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是一种常用的高压灭菌方法，适用于坚固耐热的物体。
其操作方法如下：(1) 准备：将要灭菌的物体放置在高压蒸汽灭菌器的适当位置，如培养皿、培养瓶等。
(2) 调整参数：根据物体的特性和要求，调整灭菌器的参数，如温度、压力、灭菌时间等。
(3) 灭菌：将灭菌器密封，启动加热系统，提升温度和压力，维持一段时间，将物体中的微生物杀死。
(4) 降压：在一定时间后，关闭加热系统，使温度和压力逐渐降低。
(5) 取出：待容器压力彻底降至大气压后，打开灭菌器，取出灭菌的物体。
2. 高压气体灭菌高压气体灭菌适用于对热敏感物体的灭菌，常使用的气体有乙烯氧、二氧化碳等。
其操作方法如下：(1) 准备：将要灭菌的物体放入高压容器中，如胶囊或灭菌袋。
(2) 封闭容器：将容器严密封闭，确保无气体外泄。
(3) 充气：按要求向容器中充入灭菌气体，并维持一段时间，使气体渗透到物体中，杀死微生物。
(4) 排气：将容器的气体排出，使压力逐渐恢复至大气压。
(5) 取出：打开容器，将灭菌的物体取出。
3. 高压水流灭菌高压水流灭菌适用于对表面进行灭菌的物体，常用于食品行业。
其操作方法如下：(1) 准备：将物体放置在设备上，如输送带或容器。
(2) 注水：通过泵将水注入设备中，使压力升高。
(3) 喷射：调整出水口，将高压水流喷洒到物体表面，冲刷并杀灭微生物。
(4) 排水：停止注水，将设备中的水排出。
(5) 清洁：对设备进行清洁，去除残留的微生物和污渍。
4. 高压化学灭菌高压化学灭菌常使用过氧乙酸、臭氧等化学物质灭菌，适用于热敏感物体。
其操作方法如下：(1) 准备：将物体放入灭菌室中，确保容器密封。
(2) 加药：向灭菌室中加入适量的化学物质，如过氧乙酸或臭氧。
(3) 灭菌：启动灭菌设备，使化学物质充分接触并杀死微生物。
培养基的灭菌方法
培养基的灭菌方法培养基的灭菌是微生物实验中非常重要的一步，它直接关系到后续实验结果的准确性和可靠性。
正确的灭菌方法能够有效地杀灭培养基中的细菌、真菌和其它微生物，保证培养基的纯净度。
下面将介绍几种常用的培养基灭菌方法。
一、高压蒸汽灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是实验室中常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽的热量能够迅速杀灭细菌和真菌，保证培养基的纯净度。
在进行高压蒸汽灭菌时，首先要将培养基装入耐高温的容器中，然后将容器密封好，放入高压灭菌器中进行灭菌处理。
处理时间和温度需要根据不同的培养基种类和容器大小来确定，一般情况下需要在121摄氏度下压力为15磅的条件下进行20分钟的灭菌处理。
高压蒸汽灭菌法能够有效地杀灭培养基中的各种微生物，是一种非常可靠的灭菌方法。
二、紫外线灭菌法。
紫外线灭菌法是一种常见的表面灭菌方法，它适用于一些不耐高温的培养基或器皿。
在进行紫外线灭菌时，首先要将培养基或器皿放置在紫外线灯下，保持一定的距离，然后开启紫外线灯进行照射。
照射时间一般为15-30分钟，可以有效地杀灭表面的细菌和真菌。
但需要注意的是，紫外线灭菌只能杀灭表面的微生物，对于内部较深的微生物可能效果不佳，因此在使用紫外线灭菌法时，需要搭配其它灭菌方法来确保培养基的纯净度。
三、化学灭菌法。
化学灭菌法是利用化学药剂来进行培养基的灭菌处理。
常见的化学灭菌药剂有过氧化氢、乙醛等。
在进行化学灭菌时，首先要将培养基或器皿浸泡在化学药剂中一定时间，然后取出晾干即可。
化学灭菌法能够有效地杀灭各种微生物，并且操作简单，适用于一些不耐高温的培养基或器皿。
但需要注意的是，化学灭菌药剂可能对培养基产生一定的影响，因此在使用时需要根据实际情况选择合适的药剂和浸泡时间。
综上所述，培养基的灭菌是微生物实验中不可或缺的一环，选择合适的灭菌方法能够有效地保证培养基的纯净度，为后续实验结果的准确性提供保障。
在进行培养基灭菌时，需要根据培养基的种类和实验需求选择合适的灭菌方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保实验结果的可靠性。
培养皿灭菌方法
培养皿灭菌方法培养皿灭菌是微生物实验中非常重要的一步，它可以有效地杀灭培养皿中的细菌和真菌，确保实验结果的准确性。
下面我们将介绍几种常用的培养皿灭菌方法。
一、高压蒸汽灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是最常见的培养皿灭菌方法之一。
首先将培养皿装入专用的培养皿架中，然后放入高压灭菌锅中。
在高压蒸汽灭菌锅中，将水加热至100摄氏度以上，产生高压蒸汽，持续一定时间后，将培养皿取出晾干，即可完成培养皿的灭菌工作。
二、紫外线灭菌法。
紫外线灭菌法是一种快速、方便的培养皿灭菌方法。
将待灭菌的培养皿放入紫外线灭菌箱中，启动紫外线灯管，让紫外线照射培养皿表面一定时间，即可完成培养皿的灭菌工作。
需要注意的是，紫外线具有一定的杀菌作用，但并不能彻底灭菌，因此在使用紫外线灭菌后，还需谨慎操作，避免再次污染。
三、化学灭菌法。
化学灭菌法是利用化学药剂对培养皿进行灭菌的方法。
常用的化学灭菌剂有过氧乙酸、乙醛等。
将培养皿浸泡在稀释后的化学灭菌剂中一定时间，然后取出晾干即可。
需要注意的是，在使用化学灭菌剂时，应该注意剂量和浸泡时间，避免对实验产生不良影响。
四、干热灭菌法。
干热灭菌法是利用高温对培养皿进行灭菌的方法。
将培养皿放入干热灭菌箱中，加热一定时间，达到一定温度后保持一段时间，即可完成培养皿的灭菌工作。
需要注意的是，干热灭菌法对一些热敏感的培养基可能会产生影响，因此在选择灭菌方法时需要根据实验要求进行选择。
总结。
在进行微生物实验时，培养皿灭菌是至关重要的一步。
不同的灭菌方法有着各自的特点和适用范围，实验者应根据实际情况选择合适的灭菌方法，并严格按照操作规程进行操作，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望以上介绍的培养皿灭菌方法能对大家有所帮助，祝大家实验顺利！。
高压灭菌法
高压蒸汽灭菌法的原理和注意事项高压蒸气灭菌法是一种迅速而有效的灭菌方法。
使用高压蒸气灭菌器，利用加热产生蒸气，随着蒸气压力不断增加，温度随之升高，通常压力在103.4kPa(相当旧制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )时，器内温度可达121.3℃，维持15～3 0min，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。
此法常用于一般培养基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌。
高压蒸汽灭菌法的原理和注意事项。
高压蒸汽灭菌法的注意事项：第一，无菌包不宜过大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。
消毒前，打开贮槽或盒的通气孔，有利于蒸汽流通。
而且排气时使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。
消毒灭菌完毕，关闭贮槽或盒的通气孔，以保持物品的无菌状态。
第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌效果。
第三，定期检查灭菌效果。
经高压蒸汽灭菌的无菌包、无菌容器有效期以1周为宜。
高压蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法。
第一种是工艺监测，又称程序监测。
根据安装在灭菌器上的量器(压力表、温度表、计时表)、图表、指示针、报警器等，指示灭菌设备工作正常与否。
此法能迅速指出灭菌器的故障，但不能确定待灭菌物品是否达到灭菌要求。
此法作为常规监测方法，每次灭菌均应进行。
第二种是化学指示监测。
利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点，以判断是否达到灭菌所需参数。
常用的有：自制测温管：将某些化学药物的晶体密封于小玻璃管内(长2cm,内径1～2m m)制成。
常用试剂有苯甲酸(熔点121-123℃)等。
灭菌时，当湿度上升至药物的熔点，管内的晶体即熔化，事后，虽冷却再凝固，其外形仍可与未熔化的晶体相区别，此法只能指示温度，不能指示热持续时间是否已达标，因此是最低标准。
主要用于各物品包装的中心情况的监测。
高压蒸汽灭菌法的要求
高压蒸汽灭菌法的要求高压蒸汽灭菌法是一种常用的灭菌方法，适用于各种医疗器械、药品、食品等物品的灭菌。
该方法可以在较短的时间内达到高效灭菌效果，但是也有一定的要求和限制。
下面将从不同方面详细介绍高压蒸汽灭菌法的要求。
一、设备要求1.设备必须符合国家相关标准和规定，能够提供稳定、可靠的高压蒸汽生成和控制系统。
2.设备必须具有足够的容量，能够容纳待灭菌物品，并保证每个物品都能充分暴露在高压蒸汽中。
3.设备必须具有完善的安全保护装置，能够确保操作人员和环境安全。
4.设备必须经过严格的检验和验证，确保其符合设计要求，并能够稳定运行。
二、操作要求1.操作人员必须经过专业培训，并持有相关证书或资质。
2.操作人员必须了解设备使用说明书和相关标准，能够正确地进行操作和维护。
3.操作人员必须对待灭菌物品进行分类和包装，确保每个物品能够充分暴露在高压蒸汽中，并且不会对其他物品产生污染。
4.操作人员必须严格按照设备预设的灭菌程序进行操作，不能随意更改或调整。
5.操作人员必须记录每次灭菌的相关信息，包括待灭菌物品的名称、数量、灭菌程序、灭菌时间等。
三、环境要求1.灭菌室必须保持干燥、清洁、无尘等环境条件，以避免污染待灭菌物品或影响高压蒸汽的质量。
2.灭菌室必须具有足够的通风设施，能够保证操作人员和待灭菌物品的安全和舒适。
3.灭菌室必须符合相关标准和规定，能够满足高压蒸汽生成和控制的要求。
4.灭菌室必须经过定期检查和验证，确保其符合设计要求，并能够稳定运行。
四、待灭菌物品要求1.待灭菌物品必须符合高压蒸汽灭菌法适用范围，并且不会因为高温高压而产生变形、损坏或失效。
2.待灭菌物品必须经过严格的清洗和消毒处理，以避免灭菌过程中的污染。
3.待灭菌物品必须正确地包装和标记，以便操作人员进行分类和识别，并能够保证灭菌效果。
4.待灭菌物品必须按照设备预设的灭菌程序进行操作，不能随意更改或调整。
五、质量控制要求1.每次灭菌前必须进行验证，以确保设备和待灭菌物品符合要求，并能够达到高效灭菌效果。
高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法是用于灭菌的方法之一，它具有灭菌时间短、温度较低、穿透力强等特点。
一、高压蒸汽灭菌法的操作方法在操作过程中要严格按照操作规范和注意事项进行操作，才能使灭菌达到预期效果。
（一）灭菌容器及工具：高压蒸汽灭菌法适用于耐高温高压蒸汽灭菌。
常用的高压蒸汽灭菌器有手提式和压力锅两种。
1、手提式高压蒸汽灭菌器：适用于奶瓶、量杯、吸管等，在100～180 ℃、 0．8～1．0MPa下灭菌30min即可。
2、压力锅高压蒸汽灭菌器：适用于水浴锅、蒸饭锅等，在130～170 ℃、 0．8～1．0MPa 下灭菌15～30min即可。
（二）高压蒸汽灭菌法的灭菌条件与时间：高压蒸汽灭菌法一般适用于不耐热的物品，如耐热的奶嘴、安瓿等，要达到一定的灭菌效果，就必须保证足够的时间。
通常要求保持121 ℃下， 15～30min。
一般培养基灭菌的时间应控制在10～15min。
在灭菌过程中由于有冷凝水产生，所以每灭完一批必须用蒸馏水或去离子水冲洗灭菌器，以免影响灭菌效果。
（三）高压蒸汽灭菌器的选择： 1、灭菌器容积的选择：①、因为100～180 ℃的蒸汽压力是很大的，而水的沸点是100 ℃，所以灭菌的时间会相对缩短，但蒸汽消耗量也会增加，反之，时间会延长。
所以，对于容积相同的两台高压蒸汽灭菌器，前者所需的水量少。
②、一般情况下， 100～180 ℃的蒸汽压力是很大的，而水的沸点是100 ℃，所以灭菌的时间会相对缩短，但蒸汽消耗量也会增加，反之，时间会延长。
所以，对于容积相同的两台高压蒸汽灭菌器，前者所需的水量少。
2、灭菌器的形状与直径：①、灭菌器的形状与直径，是根据灭菌器内部空气压力来决定的，因此，灭菌器底面的压力愈大，灭菌器的体积就愈小。
②、灭菌器底面的压力越大，则其外表面上升的速率就快；若将灭菌器放置在密闭室里，这样更利于排出蒸汽，从而减轻了灭菌器本身受到的压力。
3、灭菌器材质的选择：①、金属类型的灭菌器比塑料类型的好些，原因是后者易被腐蚀且导热性差。
高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法（autoclaving） 可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。方法是将需灭菌的物品放在高压锅（autoclave）内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15～20分钟。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。
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压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法
（1）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。
（1）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。
（2）布点方法：小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂，置最底层中央；中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂，上层中央放一个，下层前后各一个；大型灭菌器选5个包装物品放入指示剂，上、中层中央各放1个，下层前、中、后部各放1个。
（3）监测方法：采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC 7953，ATCC 12980）作为生物指示剂。
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（2）预真空压力蒸汽灭菌器
预真空压力蒸汽灭菌器，配有真空泵，在通入蒸汽前先将 内部抽成真空，形成负压，以利蒸汽穿透。在压力205.8kPa时， 温度达132~134℃，4min即可灭菌。
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（3）压力蒸汽灭菌器前的准备
1）物品必须清洗与干燥，凡需灭菌的物品必须先清洗处理，达到除污 染，除污垢、除热原目的，污染严重的物品应先消毒，达到安全、无 害，再进行清洗。清洁后的物品要晾干或烘干。
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3、 注意事项
（1）灭菌包不宜过大过紧（体积不应大于 30cm×30cm×30cm），灭菌器内物品的放置总量不 应超过灭菌器柜室容积的85%。各包之间留有空隙， 以便于蒸汽流通、渗入包裹中央，排气时蒸汽迅速 排出，保持物品干燥。 （2）盛装物品的容器应有孔，若无孔，应将容器盖 打开。 （3）布类物品放在金属、搪瓷类物品之上。
5、 压力蒸汽灭菌效果的监测
2、监测方法 （1）物时的温度、压力和时间等灭菌参 数。温度波动范围在+3°C以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同时 应记录所有临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。
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4、 压力蒸汽灭菌效果的监测
（2） 化学监测法：
（1）通用要求： ① 对灭菌质量采用物理监测法、化学监测法和生物监测法进行。 ② 物理监测不合格的灭菌物品不得发放；并应分析原因进行改进，直 至监测结果符合要求。 ③包外化学监测不合格的灭菌物品不得发放，包内化学监测不合格的 灭菌物品不得使用。并应分析原因进行改进，直至监测结果符合要求。
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4、 压力蒸汽灭菌效果的监测
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（3）压力蒸汽灭菌器前的准备
2） 包裹材料：要求有良好的蒸汽穿透性，允许物品内部空气的排出 和蒸汽的透入，能阻挡外界微生物、有一定的强度和耐温性。市售的普 通铝饭盒与搪瓷盒不得用于装放灭菌的物品应用自动启闭式或带通气孔 的器具装放，常用的包装材料包括棉布，一次性无纺布，一次性复合材 料（如纸塑包装）；带孔的金属或玻璃容器等。使用的一次性无纺布、 一次性复合材料必须经过国家卫生行政部门批准。新包装材料使用前应 放在温度18℃~22℃，相对湿度35%~70%的条件下放置2小时，仔细检查 有无残缺破损，布包装层数不少于2层。
高压蒸汽灭菌法
张云
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1 概述
4 压力蒸汽灭菌效果的监测
2 高压蒸汽灭菌器分类
5 无菌物品的卸载
3 注意事项
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1.概述
（1）高压蒸汽灭菌法 可杀灭
包括芽胞在内的所有微生物，
是灭菌效果最好的一种。主要
利用高压饱和蒸汽的高热所释
放的潜热灭菌。
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（2）适应范围：主要利用高压饱和蒸汽的高热所释放的潜 热灭菌。适用于耐高压、耐高温、耐潮湿物品的灭菌，如 各类器械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液灭菌。不 适用于凡士林等油剂类和滑石粉等粉剂的灭菌。 （3）压力蒸汽灭菌方法的主要特点是杀菌谱广、杀菌作用 强、效果可靠、作用迅速、无任何残余毒性
1） 物品摆放应利于蒸汽进入和冷空气排出，大型灭菌器，物品应放 于柜室或推车上的载物架上，无载物架的中小型灭菌器，可将物品放 于网篮中。 2 ）手术器械包类、硬式容器应平放
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（4）灭菌包摆放及包裹要求
3） 所有灭菌物品应分类包裹，包内物品应按顺序摆放，盘、碗、盆 等器具尽量单个包装，包装时应将盖打开，若必须多个包装在一起时， 所有器具的开口应朝向一个方向，摞放时，器具间用吸湿巾或纱布隔 开，以利蒸汽的渗入，灭菌物品能拆开的必须拆开，如对注射器进行 包装时，必须将管芯抽出。必须暴露物品的各个表面（如剪刀、钳子 必须撑开）
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（3）压力蒸汽灭菌器前的准备
3） 灭菌包大小的要求：装载于下排式压力蒸汽灭菌器的物品包， 体积不得超过30×30×25㎝，金属包的重量不超过7㎏，敷料包不超过 5㎏，包裹封口，物品捆扎不宜过紧，外用化学指示胶带贴封，灭菌包 每大包内和难灭菌部位的包内应放置化学指示物。
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（4）灭菌包摆放及包裹要求
①应进行包外、包内化学指示物监测。具体
要求为灭菌包包外应有化学指示物，高度危险性
物品包内应放置包内化学指示物，置于最难灭菌
的部位。如果过包装材料可直接观察包内化学指
示物的颜色变化，则不必放臵包外化学指示物。
通过观察化学指示物颜色的变化，判定是否达到
灭菌合格要求。
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4、 压力蒸汽灭菌效果的监测
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（4）灭菌包摆放及包裹要求
4 ）玻璃瓶等底部无孔器具类物品应倒立或侧放 5 ）下排气式压力蒸汽灭菌器中，大包宜摆放于上层，小包可摆放于 下层。金属物品放在下层，织物包放上层，金属物应平放，盘、碟、 碗等应处于竖立的位置，纤维织物应使折叠的方向与水平面成垂直状 态，玻璃瓶等应开口向下或侧放以利蒸汽进入和空气排出。 6）下排气式压力蒸汽灭菌器的装载量不得超过室内容积80%。
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3、 注意事项
（4）被灭菌物品应待干燥后才能取出备用。 （5）灭菌锅密闭前，应将冷空气充分排空。 （6）随时观察压力及温度情况。 （7）注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器是否处于良好的工 作状态。 （8）灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归“0”位后才可打开盖或 门。
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4、 压力蒸汽灭菌效果的监测
④ 生物监测不合格时，应尽快召回上次生物监测合格以来所有尚未使 用的灭菌物品，重新处理；并应分析不合格的原因，改进后，生物监 测连续三次合格后方可使用。 ⑤灭菌植入性器械应每批次进行生物监测。生物监测合格后，方可发 放。 ⑥按照灭菌装载物品的种类，可选择具有代表性的PCD进行灭菌效果的 监测。
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2.高压 蒸汽灭 菌的分
类
（1）下排式压力蒸汽灭菌器
（2）预真空压力蒸汽灭菌器
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（1）下排式压力蒸汽灭菌器
下排气压力蒸汽灭菌器，下部有排气孔，灭菌时利用冷热 空气的比重差异，借助容器上部的蒸汽压迫使冷空气自底 部排气孔排出。灭菌所需的温度、压力和时间根据灭菌器 类型、物品性质、包装大小而有所差别。当压力在 102.97～137.30kPa时，温度可达121～126℃，15～30分钟 可达到灭菌目的。