猪蓝耳病发病机理及提高非特异性免疫重要性

猪蓝耳病发病机理及提高非特异性免疫重要性图一蓝耳病病毒（PRRSV）1 猪蓝耳病（PRRS）的发病机理蓝耳病病毒（PRRSV）进入猪机体后，侵入肺泡巨噬细胞，造成严重的间质性肺炎，入侵的第二天即可造成肺的损害，7天后损伤整个肺尖叶，呈多中心病状，病毒侵入细胞后在细胞内增殖，使巨噬细胞破裂，溶解崩溃，造成巨噬细胞数量减少，肺泡壁增厚，淋巴组织呈衰竭状态，同时降低了肺泡巨噬细胞对其他细菌和病毒免疫力。

另外，因为毒株的变异，导致免疫细胞识别能力降低，从而逃避抗体的作用，极易继发或并发其它疾病，使病情非常复杂。

图二正常巨噬细胞（Healthy macrophage）图三巨噬细胞被PRRSV攻击破裂（Unhealthy macrophage）2非特异性免疫与巨噬细胞2.1 非特异性免疫猪在进化过程中形成的、天生即有、相对稳定、无特殊针对性的对病原微生物的天然抵抗力，称为非特异性免疫或先天免疫。

非特异性免疫主要由猪体的屏障结构（血脑屏障、胎盘屏障）、吞噬细胞的吞噬功能、正常组织和体液中的抗菌物质以及炎症反应等所组成。

其中吞噬细胞包括大吞噬细胞（即单核巨噬细胞）和小吞噬细胞（即中性粒细胞）。

2.2巨噬细胞及其特点2.2.1 巨噬细胞巨噬细胞（Macrophage，Mφ）由单核细胞发育而成，成熟后的体积较大。

游离于血液中与固定在不同组织中的巨噬细胞其形态与名称不同。

在光学显微镜下，可见有圆形或其他形状的核，染色质较浓缩，经特殊染色还可见到线粒体、高尔基体和中心体等。

在电子显微镜下，还可进一步看到内质网、溶酶体、微丝、微管和吞噬体等。

巨噬细胞在机体免疫中有着极其重要的作用。

最初只知道它有吞噬外来异物的作用，因此只认为是一种非特异性的免疫作用。

随着研究的深入，发现其在协同T、B淋巴细胞参与特异性免疫反应及在抗感染方面都有着重要的作用。

2.2.2巨噬细胞特点巨噬细胞具有多种免疫功能，它可吞噬消灭入侵的病原体、有害异物，清除损伤、衰老、死亡和突变细胞及代谢废物，能加工、提呈抗原给淋巴细胞。

所以特异性免疫功能是建立在非特异性免疫功能基础之上，使机体免疫功能进一步完善。

巨噬细胞之所以能完成这些功能是由于它具有三个特点：（1）巨噬细胞是机体最早识别外来异物的细胞。

人们惊异地发现，巨噬细胞可以识别和吞噬各种各样的外来的或“自身”的物质，没有这种广泛而有效的识别，也就谈不上免疫系统对抗原物质的免疫应答和有效保护。

研究表明这种识别的基础是在巨噬细胞膜上存在很多的受体（表1），这种能力是在物种系统发生中逐渐形成的。

注：（1）MIF可阻止巨噬细胞游动。

CSF可促进单核巨噬细胞生长，LDCF（淋巴细胞衍生的趋化因子）招引单核巨噬细胞趋向异物；（2）包括对各种激素、神经肽、多糖质、糖蛋白、脂蛋白及脂多糖的受体，可调控单核巨噬细胞功能。

（2）巨噬细胞具有多种胞内酶和胞外酶(表2)，使之有效地消化、杀灭被吞噬进入细胞内的病原体及异物。

表2 单核巨噬细胞的酶类及其功用酶系名称主要功能溶酶体水解酶组织蛋白酶B（cathepsin B）细胞内水解消除吞噬的异物及病原体透明质酸酶（hyaluronidase）糖苷酶（gucosidase ） 细胞外破坏炎症组织脱氧-/核糖核酸酶（DNase/RNase ） 溶酶体中性蛋白酶 胶原蛋白酶（collagenase ） 促进创伤愈合 弹性蛋白酶（elastase ） 降解弹性蛋白 血纤维蛋白溶酶原激活剂（PA ） 促进溶解血块 血管紧张素转化酶（angiotensin Cse ）促进降低血压溶酶体脂酶脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase ）降解脂质及磷脂、消除内毒素脂多糖 氧化及催化Cl -水解杀菌磷脂酶（phospholipase ） 溶菌酶（lysozyme ）髓过氧化物酶（myeloperoxidase ）胞外酶核苷酸酶（nucleotidase ） 在细胞外进行物质代谢，供给养分及能量亮氨酸氨肽酶（leucineaminopepto dase ）碱性磷酸酯酶（alk.phophoesterase ） 精氨酸酶（arginase ） 脱氨酶（deaminase ）其他酶类（3）巨噬细胞还可以分泌很多活性物质，其分泌产物之多，可与肝细胞相比拟。

这些分泌产物对组织、细胞起着重要调节作用（表3）。

表3 巨噬细胞的分泌产物1 . 单核因子（mo nokines ）5 . 细胞外基质及连接蛋白 IL-1＝LAF纤维连接素（Fibronectin ）IL-3＝CSF 95000明胶结合蛋白IL-6＝BCDF 凝血扬升素（thrombospodin）干扰素（IFN-α/y）＝MAF 6 . 反应性中间物肿瘤坏死因子（TNF）超氧化物（superxide）2 . 激素（normones）样物过氧化氢（H2O2）前列腺素（PGE2，PGF2a）羟基（hydroxylradical）凝血噁烷（thromboxane）亚硝酸盐、硝酸盐白三烯（leukotriene）7. 生长因子及活化因子花生四烯酸（eicosatetraenoicacid）粒细胞集落刺激因子（G-CSF）促肾上腺皮质激素（ACTH）中性粒细胞活化因子（NAF）胰岛素样物（insuline-like）单核细胞/巨噬细胞集落刺激因子（G/M-CSF）胸腺素B4（thymosine B4）促红细胞生成素β-内啡肽（β-endorphin）细胞集落增强因子二羟基维生素D 成纤维细胞生成因子、活化因子及转化因子3 . 补体（comlement, C）成分浆细胞瘤生长因子C1、C2、C3、C4及C5 血小板衍生的生长因子备解素（P）、B因子、D因子谷胱甘肽（glutathione）抑制物：C3b抑制物、β1H 8 . 酶及细胞抑制物补体裂解成分（由Mφ蛋白酶裂蛋白酶抑制物解）：C3a、C3b、C5a、Bb a1抗胰蛋白酶4 . 凝血因子a2巨球蛋白（a2M）凝血因子V、V11、1X及X 胶原蛋白酶抑制物凝血酶原、凝血酶原酶磷脂酶抑制物组织因子、血纤维蛋白溶酶脂调节素（lipomodulin）抑制物、血纤维蛋白溶酶1L-1抑制物原激活剂及抑制物9 . 嘌呤及嘧啶产物转铁蛋白（transferrin）胸腺嘧啶脱氧核苷（dT）同族铁蛋白（isoferrin）脱氧胸苷（deoxycytidine）转钴胺素Ⅱ（rtanscobalamine Ⅱ）尿嘧啶（uracil）尿酸脱辅基脂蛋白E（apolipopreoteinE）新蝶呤（neopterin）脂质转移蛋白（lipid transferpreotein）10 . 其他结合蛋白亲和素（avidin）3 特异性免疫与蓝耳病疫苗3.1 特异性免疫特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫，是经后天感染(病愈或无症状的感染)或人工预防接种(菌苗、疫苗、类毒素、免疫球蛋白等)而使机体获得抵抗感染能力。

一般是在微生物等抗原物质刺激后才形成的(免疫球蛋白、免疫淋巴细胞)，并能与该抗原起特异性反应。

主要参与细胞是T、B 细胞和抗原提呈细胞。

在抗原刺激下，机体的特异性免疫应答（体液免疫或细胞免疫），一般可分为感应阶段、反应阶段和效应阶段。

感应阶段是对抗原的识别及处理阶段。

绝大多数抗原物质第一次进入机体后，须经巨噬细胞处理后将抗原信息传递给免疫活性细胞（T细胞、B 细胞）。

反应阶段是免疫活性细胞接受抗原刺激后，进行分化、增殖，产生大量致敏T细胞和B细胞，由B细胞产生抗体的阶段。

此阶段尚有少量细胞停止分化、增殖，成为保留抗原信息的记忆细胞。

效应阶段是致敏T细胞及抗体发挥免疫功能的阶段。

当再次遇到相同抗原时，致敏T细胞直接作用于抗原，同时释放出多种淋巴因子，消灭抗原，发挥细胞免疫的作用。

而抗体可直接作用于抗原，或与巨噬细胞、补体等协同作用，杀灭或破坏抗原异物，发挥体液免疫的功能。

图四巨噬细胞加工、处理和递呈抗原3.2 猪蓝耳病疫苗随着PRRS的发现，PRRS的疫苗研究也就随之开展，对于蓝耳病的免疫现在养猪界的说法很多，到底应不应该注射疫苗，在疫苗的选择上是应用弱毒苗还是灭活苗，每个人都有自己的看法。

目前，世界上商品化的PRRS疫苗有弱毒苗和灭活苗两类。

弱毒苗的缺点是：把它注射入体内的效果与感染野毒没有多大差别。

对完全蓝耳病阴性的场或已经是蓝耳病阳性的猪，当注入另外一种毒株的的PRRS疫苗后，它会同野毒一样照样穿过胎盘侵害胎儿。

有时，如果我们所使用的疫苗的基因序列与某一群体存在的PRRS病毒基因序列相似性达到70%～80%时，疫苗会比较有效。

如果我们所使用的疫苗的基因序列与我们本场存在的PRRS病毒基因序列不同时，则意味着可能会有一场新的蓝耳病到来。

Botner等报道，在丹麦，对1000多头PRRS血清学阴性猪使用了弱毒疫苗，可是不久后猪群发生了PRRS，而且从流产胎儿和死胎中分离到了疫苗病毒，发现疫苗病毒可经胎盘感染胎儿，并向未接种的母猪传播，有些猪群则表现出急性PRRS样综合症状。

Opriessnig报道从一个多次接种Ingelvac PRRS MLV的猪场发生PRRS后分离到一株PRRSV 98-38803，并证实该毒株来自于Ingelvac PRRS MLV。

所以PRRS 弱毒疫苗的毒力返强的可能性是存在的。

从以上结果来看，PRRS弱毒疫苗免疫产生期快，在控制PRRS临床症状上明显好于PRRS灭活疫苗。

但PRRS强毒和弱毒在猪体内的反应过程是一致的，所以长期使用PRRS弱毒疫苗所带来的安全问题仍是目前PRRS免疫中最大的争议。

灭活苗的缺点是：免疫剂量大、免疫次数多、免疫力产生期较长，诱导有效免疫力的能力比较差。

但毫无疑问，灭活苗在使用上是比较安全的，可以诱导一定的抗体产生，如果抗体与野毒的基因序列比较相似，同样还会产生保护；如果基因序列不相似，则保护力比较差。

这就是这两种疫苗的不同之处，了解到他们的缺点后我们在生产实践中就要避免它。

所以要根据每个养殖场不同的情况来选择疫苗。

灭活苗的安全性大大高于弱毒苗，而且不存在散毒的危险，然而再好的灭活苗的效果也不能和弱毒苗的效果相比较的。

所以对于种猪和阴性场应该选用灭活苗，而阳性场为了净化蓝耳病最好选用免疫效果好的弱毒疫苗。

专家之音南方农村报：当前，不少地方养殖场出现接种蓝耳病疫苗(尤其是弱毒苗)后大量死猪的现象，这是否意味着弱毒苗有很大的危险性？樊福好：我个人觉得，接种疫苗只是防控高致病性猪蓝耳病的权宜之计，市场上个别厂家的产品也存在着灭活疫苗灭活不完全、弱毒疫苗混有强毒的情况，建议养殖户在选用疫苗产品时，一定要慎重。

从理论上说，弱毒苗虽然在实际效果上会好于灭活疫苗，但是在目前的情况下，蓝耳病的免疫还存在着许许多多的问题尚未解决，匆匆忙忙推荐某些疫苗(弱毒或灭活疫苗)的做法值得商榷。