基因表达
基因表达的三种方式
基因表达的三种方式基因表达就像一场超级神秘又有趣的魔术表演，有着三种独特的“表演方式”呢。
首先是组成性表达，这就好比是那种永远不休息的勤劳小蜜蜂。
不管外界环境怎么变，它就按照自己的节奏，一直稳定地表达。
就像你家里那个永远准时响的闹钟，风雨无阻，每天都在固定的时间“唱歌”。
这种基因表达就像是一个固执的老派音乐家，只演奏自己最爱的那几首曲子，不管观众的口味怎么变，也不会轻易改曲目。
然后是诱导性表达啦。
这可就像一个超级敏感的小情绪精。
平时呢，安安静静的，一旦感受到外界的某些特定信号，就像被点燃的鞭炮一样，一下子就活跃起来了。
比如说，就像一个在舞台后台打瞌睡的演员，突然听到导演喊自己的名字，马上精神抖擞地冲上台去表演。
这种基因啊，对外界的刺激就像猫咪对毛线球一样敏感，只要有合适的信号，立马就开启表达模式。
最后就是阻遏性表达了。
这就像是一个很怕羞的小怪物。
正常情况下，它是开开心心表达的，可是一旦有了某些抑制它的因素出现，就像突然被施了魔法一样，立马躲起来，不再表达了。
就好像一个在聚光灯下唱歌的歌手，突然灯光一暗，音乐一停，就不敢再出声了。
这种基因对那些抑制因素的害怕程度，就像小老鼠见到大猫，只要那些抑制因素一出现，就乖乖闭嘴。
这三种基因表达方式在我们的身体里就像三个性格迥异的小伙伴。
组成性表达是那个老实巴交的乖孩子，总是按部就班；诱导性表达是那个机灵鬼，随时准备响应外界的召唤；阻遏性表达则是那个胆小鬼，有点风吹草动就不敢吭声了。
它们在身体这个大舞台上，每天都在上演着一场无声又精彩的大戏。
有时候，我都觉得我们的身体就像一个超级复杂的大剧场，基因们就是演员。
这些演员们的不同表演方式，共同构成了生命这个神奇的演出。
如果基因表达乱了套，那就像剧场里突然所有演员都不按剧本演了，那可就乱成一锅粥了。
不过好在，在正常情况下，它们都各司其职，用自己独特的方式，让我们的身体这个大舞台永远充满生机和活力。
基因表达的这三种方式，虽然听起来有点复杂，但其实就像一场场简单又有趣的小闹剧，在我们身体里不停地上演着，是不是超级有趣呢？。
基因表达系统及技术
基因表达系统的研究意义
理解生命活动的基本原理 揭示疾病的发生和发展机制 提供新的药物靶点和治疗策略 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ动生物技术的发展和应用
基因表达系统的组成
转录因子
转录因子通过与DN结合调控 基因的转录过程
转录因子是基因表达调控的 重要因素
转录因子可以分为激活因子 和抑制因子
转录因子的种类和数量众多 具有不同的功能和作用
技术： CRISPR/Cs9、 TLEN、ZFN等
优势：高效、精 确、可重复性强
基因敲入技术
原理：通过基因编辑技术将目的基因插入到宿主细胞中实现基因表达 应用：基因治疗、基因工程、生物制药等领域 技术类型：ZFN、TLEN、CRISPR等 优点：高效、精确、可重复性高
基因编辑技术
基因编辑技术：CRISPR/Cs9技术 原理：利用Cs9蛋白对DN进行切割和编辑 应用：基因治疗、基因工程、农业育种等领域 优点：高效、精确、成本低 挑战：伦理问题、安全性问题、技术难题等
基因表达系统及技术
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单击输入目录标题 基因表达系统概述 基因表达系统的组成 基因表达调控机制 基因表达技术及应用 基因表达系统研究展望
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基因表达系统概述
基因表达系统的定义
基因表达系统是指在生物体内基因通过转录和翻译过程将遗传信息 转化为蛋白质的过程。
基因表达系统包括转录和翻译两个阶段其中转录是指DN被复制为 RN的过程翻译是指RN被翻译为蛋白质的过程。
转录起始复合物
核心成分：RN聚合酶II、TFII、TFIIB、TFIIE、TFIIF、TFIIH 功能：启动基因转录 结构：由多个亚基组成包括核心酶、通用转录因子和特异性转录因子 作用机制：通过与DN结合形成转录起始复合物启动基因转录
名词解释 基因的表达
名词解释基因的表达基因的表达是生物体在其基因组中所拥有的基因在蛋白质合成过程中被转录和翻译的过程。
在这个过程中，基因的信息从DNA分子转录成RNA分子，然后翻译成蛋白质分子。
基因表达是生物体发展、生长和功能运行的基础，对于进化和适应环境起着至关重要的作用。
基因的表达是一个高度调控的过程，包括转录和翻译两个主要步骤。
转录是指DNA中的一段基因被复制成RNA的过程，通过RNA聚合酶酶的催化作用，DNA 的信息被转录成一条RNA链。
这一过程是基因表达的第一步，而转录后的RNA 被称为信使RNA（mRNA）。
转录完成后，mRNA会通过核膜离开细胞核，进入到细胞质中，接下来就是翻译的过程。
翻译是指mRNA上的信息通过核糖体来转译成蛋白质的序列。
核糖体是一种包含多种蛋白质和rRNA（核糖体RNA）的复合物，它根据mRNA的编码序列来合成具有特定功能的蛋白质链。
在基因的表达过程中，除了转录和翻译，还有一系列复杂而精细的调控机制。
这些调控机制可以使细胞在不同的发育阶段、不同环境条件下产生不同的蛋白质，从而实现细胞的分化和特化。
基因表达的调控可以通过多种方式进行，包括转录因子的结合、DNA甲基化和组蛋白修饰等。
转录因子是一类能够结合到特定DNA序列上的蛋白质，它们能够促进或抑制基因的转录过程。
DNA甲基化是一种常见的表观遗传修饰方式，通过在DNA上加上一个甲基基团来影响基因的表达。
组蛋白修饰是指组蛋白上发生的一系列化学修饰，例如酶促的乙酰化、甲基化和磷酸化等，这些化学修饰可以影响染色质的结构和基因的可访问性。
基因表达的调控不仅限于单个基因，还可以通过基因组上的相互作用、基因网络和转录调控元件等方式进行。
例如，转录因子可以相互作用形成互作网络，不同的转录因子可以共同调控一组基因的表达。
转录调控元件是一种特殊的DNA序列，在特定的基因表达调控过程中起到重要的作用。
基因表达的异常往往与多种疾病的发生和发展相关。
例如，某些癌症可能由于基因表达调控失常而导致癌基因的过度表达，进而导致细胞的异常增殖和恶性转化。
基因表达载体基本条件
基因表达载体基本条件
基因表达载体应具备以下基本条件：
1. 能够在宿主细胞中自行复制，即具有自身的复制子并能携带外援DNA一同扩增。
2. 有多种限制性核酸内切酶的单一切割位点，这被称为多克隆位点，这样有利于外源基因的克隆、鉴定和筛选。
3. 载体分子应尽可能小，以便可以插入较大的外源DNA而不影响复制。
4. 具有一定的筛选标记，如抗药性、酶基因、营养缺陷型、形成嗜菌斑等，以便识别和选择含有外源DNA的载体分子。
5. 具有与宿主细胞相匹配的启动子，这是驱动外源DNA在宿主细胞内表达的关键。
此外，还应具有前导顺序和增强子等调控元件，以提高外源基因的表达效率。
基因的表达和结构
起始密码子
AUG
GUG
缬氨酸
终止密码子
UAA
UAG
UGA
不决定氨基酸
密码子在不同信使RNA上的通用性：
任何生物的任何细胞的信使RNA上的密码 子都是64种，
所有生物共用一套密码子，成为基因工程得以实现的理论依据之一。
01
02
03
携带特异氨基酸
tRNA与反密码子
反密码子
反密码子
A
C
01
02
基因对性状的控制
B
A．198个 B．398个 C．400个 D．798个
某基因中含有1200个碱基对，则由它控制合成的含有两条肽链的蛋白质分子中含有肽键的个数是 ( )
Gene中碱基数：mRNA中碱基数：蛋白质中的氨基酸数=6：3：1；因此，合成的蛋白质中的氨基酸数为1200*2/6=400个；又此蛋白质有两条肽链，所以其中含有的肽键数为400-2=398个。
解旋酶 DNA聚合酶等
细胞代谢产生的能量
形成姐妹单体上两个一模一样的DNA分子
7复制特点
①边解旋边复制 ②半保留复制
2、复制的过程
：解旋酶催化
解旋
模板
（在DNA聚合酶的催化下，利用游离的脱氧核苷酸进行）
复制
：以母链为模板进行碱基配对
：组成
复制后的DNA
同时进行
DNA复制的准确性如何保障？
碱基互补配对原则使复制准确无误
翻译的过程（细胞质中）
U
C
A
U
G
A
U
U
A
A
A
U
亮氨酸
A
C
U
天冬氨酸
核糖体
基因表达
DNA甲基化、组蛋白修饰及RNA分子的作用可在不同层面影响DNA分子的表达，其中任何环节出现错误都会导致不同的表达错误，从而引发人类疾病。
如果我们能控制DNA的表达，将可以使癌症、病毒引发的疾病（如肝炎、艾滋病）、血液疾病等得到治愈。
首先，简单谈下基因表达。
基因表达指的是基因转录及翻译的过程。
基因表达有两种方式：一种是组成性表达，指不大受环境变动而变化的一类基因表达。
另外一种是适应性表达，指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。
那么基因的表达有何规律呢？时间和空间的特异性是基因表达规律两大特点。
时间特异性指的是按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生。
空间特异性指的是在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现。
基因的表达调控无论是对真核生物还是原核生物都有着重要的作用，它能维持个体发育和分化，让个体更好的适应环境。
在基因表达里有个在存在于DNA分子中，RNA聚合酶能够识别、结合并导致转录起始的序列称为启动子。
真核生物根据转录的方式可将启动子分三类。
1、RNA聚合酶I的启动子主要由两部分组成。
目前了解较清楚的是人的RNA聚合酶I的启动子。
在转录起始位点的上游有两部分序列。
核心启动子（core promoter）位于-45至+20的区域内，这段序列就足以使转录起始。
在其上游有一序列，从-180至-107，称为上游调控元件（upstream control element，UCE)，可以大大的提高核心启动子的转录起始效率。
两个区域内的碱基组成和一般的启动子结构有所差异，均富含G．C对，两者有85％的同源性。
2、RNA聚合酶Ⅱ的启动子位于转录起始点的上游，由多个短序列元件组成。
该类启动子属于通用型启动子，即在各种组织中均可被RNA聚合酶n所识别，没有组织特异性。
经过比较多种启动子，发现RNA聚合酶II的启动子有一些共同的特点，在转录起始点的上游有几个保守序列，又称为元件（elememt）。
基因工程中的基因克隆与基因表达实验总结
基因工程中的基因克隆与基因表达实验总结基因工程作为一门新兴的交叉学科，已经广泛应用于生物医学、农业、环境保护等领域。
其中，基因克隆和基因表达实验是基因工程的核心技术，对于研究基因功能和开发新药已经起到了重要作用。
本文将对基因工程中的基因克隆和基因表达实验进行总结，并探讨其在科学研究和应用中的前景。
一、基因克隆实验基因克隆是通过重组DNA技术，将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。
它是研究基因功能、生物制药和转基因等领域的基础。
基因克隆实验主要包括以下几个步骤：1. DNA提取与限制性内切酶切割：通过提取DNA样品，使用限制性内切酶切割将目标基因和载体DNA切割成相应片段。
2. 基因插入：将目标基因与载体DNA片段进行连接，常用的方法是使用DNA连接酶将两者黏合。
3. 转化与筛选：将连接后的DNA转入到宿主细胞中，使其成为转基因细胞。
通过选择性培养基进行筛选，可以获得拥有目标基因的转基因细胞。
通过基因克隆实验，我们可以获得不同生物体的目标基因，并进行后续的研究和应用。
例如，通过将某种植物的耐旱基因克隆到其他作物中，可以提高作物的抗旱能力，增加农作物产量。
二、基因表达实验基因表达实验是将目标基因在宿主细胞中进行转录和翻译，产生具有特定功能的蛋白质的过程。
基因表达实验是研究基因功能和制备重组蛋白等领域的重要手段。
基因表达实验主要包括以下几个步骤：1. 选择合适的表达系统：根据需要表达的蛋白质的性质和规模，选择合适的表达系统。
常用的表达系统包括细菌、酵母、哺乳动物细胞等。
2. 构建表达载体：将目标基因插入到表达载体中，通常使用限制性内切酶和DNA连接酶进行连接，并通过测序确保插入正确。
3. 细胞转染：将构建好的表达载体导入到宿主细胞中。
不同表达系统有不同的转染方法，如细菌的化学转型、酵母的电转染等。
4. 表达和纯化：经过一定时间的培养，宿主细胞会表达目标基因，合成目标蛋白质。
可以通过蛋白质纯化技术，如亲和层析、凝胶电泳等手段获得纯度较高的目标蛋白质。
什么是基因表达
什么是基因表达基因表达是指基因中的信息被转化为功能性产物的过程，包括从DNA到RNA的转录（transcription）和从RNA到蛋白质的翻译（translation）两个主要步骤。
这一过程是生物体中基因信息转化为生物功能的关键步骤。
基本的基因表达过程包括以下几个步骤：1. 转录（Transcription）：在细胞核内，DNA的双螺旋结构被RNA聚合酶酶解为单链RNA，形成称为mRNA（信使RNA）的分子。
这个过程是DNA信息的复制，生成一个与特定基因相对应的RNA分子。
2. RNA剪接（RNA Splicing）：在一些基因表达过程中，mRNA 分子可能会经历剪接，即非编码的区域（内含子）被剪除，而编码蛋白质的区域（外显子）被保留。
这是通过剪接体（spliceosome）等细胞器负责的。
3. RNA修饰（RNA Modification）：在转录过程中，RNA分子可能会经历一些修饰，例如加上帽子（5'端）和尾巴（3'端），以提高mRNA的稳定性、传递性和翻译的有效性。
4. 翻译（Translation）：在细胞的核糖体（ribosome）中，mRNA上的信息被读取，并翻译成氨基酸序列，从而合成蛋白质。
翻译的过程涉及到tRNA（转运RNA）和蛋白质合成机器。
5. 蛋白质折叠与修饰：合成的蛋白质在细胞中会经历折叠和修饰过程，确保它们具有正确的结构和功能。
6. 蛋白质功能表达：最终，合成的蛋白质在细胞中执行特定的功能，例如在细胞结构中提供支持、作为酶催化生化反应、参与细胞信号传导等。
基因表达的调控对于维持生物体的正常功能和适应环境变化非常重要。
这涉及到复杂的调节网络，包括启动子、转录因子、RNA干扰等分子机制。
基因表达的失调可能导致细胞功能紊乱，甚至引起疾病。
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一、阐述真核细胞基因表达调控的基本环节、主要的调控分子和调控方式。
真核生物基因表达的调控远比原核生物复杂，可以发生在DNA水平、转录水平、转录后的修饰、翻译水平和翻译后的修饰等多种不同层次。
但是，最经济、最主要的调控环节仍然是在转录水平上。
（一）DNA水平的调控DNA水平上的调控是通过改变基因组中有关基因的数量、结构顺序和活性而控制基因的表达。
1、基因扩增基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性增大的现象，它使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。
如非洲爪蟾体细胞中rDNA的基因扩增是因发育需要而出现的基因扩增现象。
2．基因丢失在一些低等真核生物的细胞分化过程中，有些体细胞可以通过丢失某些基因，从而达到调控基因表达的目的，这是一种极端形式的不可逆的基因调控方式。
但是，基因丢失现象在高等真核生物中还未发现。
3．基因重排基因重排(gene rearrangement)是指DNA分子中核苷酸序列的重新排列。
这些序列的重排可以形成新的基因，也可以调节基因的表达。
4. DNA甲基化和去甲基化DNA的甲基化可以引起基因的失活。
活跃表达的基因都是甲基化不足的基因。
表达活性与甲基化程度呈负相关。
甲基化的程度可以调节基因表达。
5.染色质结构与基因表达调控真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是裸露的DNA，因此染色质呈疏松或紧密结构，是决定RNA聚合酶能否有效行使转录功能的关键。
按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质，所谓活性染色质是指具有转录活性的染色质；非活性染色质是指没有转录活性的染色质。
活性染色质由于核小体构型发生构象的改变，往往具有疏松的染色质结构从而便于转录调控因子与顺式调控元件结合和RNA聚合酶在转录模板上滑动。
（二）转录水平的调控1、真核基因表达调控的顺式作用元件顺式作用元件(cis-acting element)是指DNA分子上对基因表达有调节活性的特定核苷酸序列。
这种DNA序列多位于基因上游或内含子中。
真核基因的顺式作用元件包括启动子、增强子、静止子以及其他调控元件。
启动子的结构和功能启动子是在DNA分子中，RNA聚合酶能够识别、结合并导致转录起始的序列。
包括核心启动子和上游启动子。
TATA框（TATA box）：中心位于－30位置，是RNA聚合酶Ⅱ识别和结合位点。
CAAT框（CAAT box）：位于－70～－80位置，决定启动子的起始频率。
GC框(GC box)：－110位置，增强转录活性。
增强子的结构和功能增强子（enhancer）是一种远端调控元件，增强子通常占100－200bp长度，位于－700～－1000处，所以又称为上游激活序列(upstream activator sequence, UAS)。
增强子也要通过与特定的蛋白质因子结合而实现其对转录的增强作用。
静止子是一种类似增强子但起负调控作用的顺式作用元件。
有人称为沉默基因。
其它顺式调控元件（1）应答元件(responsive elements)真核细胞中对某些特定的环境作出应答的基因，常具有相同的应答元件．应答元件能被在一些特定情况下表达的调控因子识别。
（2）转座元件对基因表达的调控。
2、真核基因调控的反式作用因子真核生物的RNA聚合酶与原核生物的RNA聚合酶不同，它本身不能启动转录，因此必须事先有一套转录因子装配到启动子上，RNA聚合酶才能启动转录。
能直接或间接识别各种顺式调控元件的核心序列并与之结合从而调控基因转录效率的各种蛋白质分子称为反式作用因子。
转录因子(transcription factor, TF)是参与正调控的反式作用因子，是转录起始过程中RNA聚合酶所需要的辅助因子。
这类DNA结合蛋白有很多种，顺式调控元件也有多种，正是不同的DNA序列和不同的DNA结合蛋白之间在空间结构上的相互作用，以及蛋白质与蛋白质之间的相互作用，构成了复杂的基因转录调控机制。
反式作用因子的结构特征反式作用因子一般都具有三个不同功能结构域(domain)。
①DNA结合结构域与顺式调控元件结合的部位。
对大量转录调控因子结构的研究表明，DNA结合结构域大多在大体上有4种结构特征：螺旋－转角－螺旋(helix-turn-helix, HTH)结构、锌指(zinc finger)结构、亮氨酸拉链(leucine zipper)结构、螺旋－突环－螺旋等。
②激活基因转录的功能结构域有时一个反式作用因子可能有一个以上的转录激活区。
③与其他蛋白质因子结合的结构域3．选择性启动子有些真核生物基因具有两个或两个以上的启动子，用于在不同细胞中表达。
不同启动子可产生不同的初级转录产物和不相同的蛋白质编码序列。
（三）转录后调控1.不同剪接方式可产生不同的mRNA在真核生物中，蛋白质基因的转录产物统称为核不均一RNA，必须经过加工才能成为成熟的mRNA分子。
加工过程包括三个方面：加帽、加尾和去掉内含子。
同一初级转录产物在不同细胞中可以用不同方式剪接加工，形成不同的成熟mRNA分子，使翻译成的蛋白质都可能不同。
2. RNA编辑转录后的RNA在编码区发生碱基插入，缺失或转换的现象。
意义：纠正某些移码突变；构建或删除起始密码子、终止密码子；扩充遗传信息。
（四）翻译水平的调控阻遏蛋白与mRNA结合，可以阻止蛋白质的翻译并使成熟的mRNA变为失活状态贮存起来。
此外，还可以控制mRNA的稳定性和有选择的进行翻译。
例如，当血红素缺乏时，通过级联反应使eIF-2磷酸化，从而抑制翻译的起始。
（五）翻译后调控直接来自核糖体的线状多肽链是没有功能的，必须经过加工才具有活性。
在蛋白质翻译后的加工过程中，还有一系列的调控机制。
1．蛋白质折叠线性多肽链必须折叠成一定的空间结构，才具有生物学功能。
在细胞中，蛋白质的折叠必须有分子伴侣的作用下才能完成折叠。
2．蛋白酶切割末端切割有些膜蛋白、分泌蛋白，在氨基端具有一段疏水性强的氨基酸序列，称为信号肽，用于前体蛋白质在细胞中的定位。
信号肽必须切除多肽链才具有功能。
多聚蛋白质的切割有些新合成的多肽链含有几个蛋白质分子的序列，切割以后产生具有不同功能的蛋白质分子。
3、蛋白质的化学修饰简单的化学修饰是将一些小的化学基团，如乙酰基、甲基、磷酸基加到氨基酸侧链上，或者加到氨基端或羧基端。
复杂的修饰是蛋白质的糖基化（glycosylation），就是将一些分子量很大的碳水化合物加到多肽链上。
4、切除蛋白质内含子有些mRNA翻译的最初产物也具有内含子（intein）序列，位于多肽链序列的中间，经剪接后，蛋白质的外显子（extein）才能连接成为成熟的蛋白质。
简要回答内容答：真核生物基因表达的调控的复杂复杂性，可以发生在DNA水平、转录水平、转录后的修饰、翻译水平和翻译后的修饰等多种不同层次。
但是，最经济、最主要的调控环节仍然是在转录水平上。
基因的表达调控主要分为:1、DNA水平的的调控；2、转录水平的调控；3、转录后水平的调控；4、翻译水平的调控；5、翻译后水平的调控。
DNA水平的调控：包括DNA甲基化，基因重排，基因丢失，基因扩增以及染色质或者染色体结构对基因表达的调控.转录水平的调控：包括顺式作用元件，反式作用因子及选择性启动子。
顺式作用元件包括启动子、增强子、静止子以及其他调控元件；反式作用因子是能直接或间接识别各种顺式调控元件的核心序列并与之结合从而调控基因转录效率的各种蛋白质分子。
转录后水平的调控：包括5’端加帽和3’多聚核苷酸的调控，mRNA的选择剪接对基因表达的调控，以及mRNA运输的控制。
翻译水平的调控：mRNA的稳定性、有选择的进行翻译，阻遏蛋白与mRNA结合，可以阻止蛋白质的翻译，翻译后水平的调控：蛋白质折叠、新生肽链的水解及切割、蛋白质的化学修饰，通过信号肽分拣，运输和定位。
简述真核生物转录水平的调控机制？答：真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。
A、转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物，只有当一个或多个转录因子结合到DNA上，形成有功能的启动子，才能被RNA聚合酶所识别并结合。
转录起始复合物的形成过程为：TFⅡD结合TATA盒；RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物；其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。
在这个过程中，反式作用因子的作用是：促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合；促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合；促进或抑制转录起始复合物的形成。
B、反式作用因子：一般具有三个功能域（DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域）；能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；对基因的表达有正性或负性调控作用。
3、转录起始的调控：⑴反式作用因子的活性调节：A.表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性；B.共价修饰——磷酸化和去磷酸化，糖基化；C.配体结合——许多激素受体是反式作用因子；D.蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。
⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合：反式作用因子被激活后，即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列，对基因转录起调节作用。
⑶反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。
⑷反式作用因子的组合式调控作用：每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用，但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。
真核基因和原核基因表达调控的异同？真核基因表达调控的基本原理与原核基因相同，主要表现在：1、与原核基因的调控一样，真核基因表达调控也以转录水平调控为最重要；2、在结构基因均有调控序列，并依靠特异蛋白因子与这些调控序列的结合与否调控基因的表达。
3、都要经历转录、翻译的过程。
4、表达过程都有复杂性，多环节不同1、真核基因表达调控过程更复杂。
2、在染色质结构上。
原核细胞的DNA是裸露的，而真核细胞DNA包装在染色体中。
DNA与组蛋白组成核小体形成为染色体基本单位。
在原核细胞中染色质结构对基因的表达没有明显的调控作用，而在真核细胞中染色质的变化调控基因表达，并且基因分布在不同的染色体上，存在染色体间基因的调控问题；3、真核生物中编码蛋白质的基因通常是断裂基因，含有有非编码序列即内含子，因而转录产生的mRNA前体必须剪切加工才能成为有功能的成熟的mRNA，而不同拼接方式的可产生不同的mRNA。
而原核生物的基因由于不含有外显子和内含子，因此，转录产生的信使RNA不需要剪切、拼接等加工过程。
4、在原核基因转录的调控中，既有正调控，也有负调控，二者同等重要，而真核细胞中虽然也有正调控成分和负调控成分，但目前已知的主要是正调控，且一个真核基因通常都有多个调控序列，必须有多个激活物同时特异地结合上去才能调节基因的转录；5、原核基因的转录和翻译通常是相互偶联的，而真核基因的转录与翻译在时空上是分开的，从而使真核基因的表达有多种调控机制。