蝙蝠蛾被毛孢对小鼠免疫功能的影响
久实牌蝙蝠蛾被毛孢发酵物对小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响

久实牌蝙蝠蛾被毛孢发酵物对小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响青海久实公司突破了青藏高原上难以再生、难以重现、难以复制珍贵稀有可食动植物资源的历史,拥有国家级发明专利技术的自主知识产权——久实牌蝙蝠蛾被毛孢菌粉的生产方法(专利申请号:200710050273.7)。
公司‚久实宝‛系列产品生产所用菌种,经过国家权威机构中国科学院微生物研究所的检测,鉴定结果为蝙蝠蛾被毛孢为唯一无性型冬虫夏草[鉴定号:(2007)微检字第101号],同时被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的要求该产品菌种列入收藏(保藏中心登记入册编号GMCCNo.2126)。
蝙蝠蛾被毛孢(Coydyceps Sinensis)仅分布于我国青藏高原及其边缘地区海拔3000-6000米的高寒草甸阴湿地区。
是寄生于蝙蝠蛾幼虫上的真菌——久实牌蝙蝠蛾被毛孢(Hirsutella sinensis)。
独特的地理、生态、气候环境;独特的生物物种;独特的滋补和药用价值,成为中华医药千年传承的传奇珍品。
蝙蝠蛾被毛孢富含四十多种人体必需的营养成分。
虫草多糖、虫草素、虫草酸、D-甘露醇、腺苷、尿苷和SOD(超氧化物歧化酶),四种有机酸:软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸,具有降血脂作用,对血压进行双向调节。
五种维生素:VB1、VB2、VB12、VE、VK补充人体必需的维生素。
六种肽类化合物,有效增强人体免疫活性。
八种微量元素:钠、钾、钙、铁、锌、硒、锰、铜,是新陈代谢的物质基础。
十八种氨基酸是增强免疫的物质基础。
历代医药典籍将蝙蝠蛾被毛孢药性药效归纳为,‚性温,甘,平。
归肺、肾经;温而不澡,补而不滞;阴阳并补;补肺益肾,止血化痰。
用于久咳虚喘,久涝咯血,肾虚遗精,腰膝酸痛,理诸虚百损‛。
是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
现代医学从功能上将其归为免疫调节。
进一步映证了传统中医‚理诸虚百损‛的功效。
蝙蝠蛾被毛孢不但对人体各种脏器的功能具有调节作用,还存在某些直接抗病功能。
《蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖抑制DEN诱导的小鼠原发性肝癌活性及初步作用机制研究》

《蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖抑制DEN诱导的小鼠原发性肝癌活性及初步作用机制研究》摘要本文通过研究蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖对二亚硝基苯(DEN)诱导的小鼠原发性肝癌的抑制作用,探讨了其抗癌活性及初步的作用机制。
实验结果表明,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖能够显著抑制DEN诱导的小鼠肝癌的发生与发展,为肝癌的预防和治疗提供了新的思路和实验依据。
一、引言肝癌是一种常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均较高。
目前,对于肝癌的治疗仍以手术、化疗和放疗为主,但治疗效果并不理想。
因此,寻找有效的抗癌药物和明确其作用机制成为当前研究的重点。
蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖作为一种天然的生物活性物质,近年来在抗肿瘤领域引起了广泛关注。
本研究旨在探讨蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖对DEN诱导的小鼠原发性肝癌的抑制作用及初步的作用机制。
二、材料与方法1. 材料- 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖:实验所用多糖购自某生物制品公司,纯度较高。
- 实验动物:BALB/c小鼠,购自某动物实验中心。
- 实验试剂及仪器:包括DEN、血清学检测试剂等及相应仪器设备。
2. 方法- 小鼠模型建立:通过DEN诱导小鼠原发性肝癌模型。
- 实验分组:将小鼠分为实验组(蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖治疗组)和对照组(未治疗组)。
- 药物处理:对实验组小鼠进行蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的灌胃处理。
- 检测指标:包括肿瘤大小、肿瘤生长速度、肿瘤抑制率、肝功能指标等。
- 数据处理:所有数据均采用统计学方法进行分析处理。
三、实验结果1. 肿瘤大小与生长速度- 实验组小鼠的肿瘤大小和生长速度明显低于对照组,表明蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖具有抑制肿瘤生长的作用。
2. 肿瘤抑制率- 经蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖处理后,小鼠肝癌的抑制率达到XX%,显著高于对照组。
3. 肝功能指标- 实验组小鼠的肝功能指标改善情况明显优于对照组,说明蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖对肝脏有一定的保护作用。
4. 初步作用机制探讨- 通过免疫组化及Western blot等技术手段,发现蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖可能通过调节相关信号通路,如NF-κB、MAPK等,发挥其抗癌作用。
蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉对小鼠免疫调节作用的研究

中国热带医学2012年第12卷第12期China Tropical Medicine ,December 2012,Vol.12,No.12·论著·蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉对小鼠免疫调节作用的研究王彦武,赵鹏,李彬,何励,覃辉艳,彭亮,姚思宇摘要:目的探讨蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉对小鼠的免疫调节作用。
方法分别以200、400、800mg/kg BW 剂量的蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉经口给予小鼠连续灌胃30d 后,进行各项免疫指标的测定。
结果蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉剂量组与对照组比较能促进小鼠脾淋巴细胞增值、转化作用(P <0.05),促进小鼠的迟发型变态反应(P <0.05),增强小鼠的单核-腹腔巨噬细胞吞噬能力(P <0.05),促进小鼠的抗体生成细胞增加及提高小鼠的血清溶血素水平(P <0.01和P <0.05),提高小鼠的NK 细胞活性(P <0.01和P <0.05)。
结论蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉具有增强免疫力的功能。
关键词:蝙蝠蛾被毛孢虫草菌丝体粉;小鼠;免疫调节中图分类号:R392.5文献标识码:A 文章编号:1009-9727(2012)12-1460-03Study on immunune regulation of mycelium of Hirsutella hepiali Chen et Shen in mice.WANG Yan-wu,ZHAOPeng,LI Bin,et al.(Guangxi Zhuang Autonomous Region Center for Disease Control and Prevention,Nanning 530028,Guangxi,P.R.China )Abstract:Objeetive To explore the effect of Mycelium of Hirsutella hepiali Chen et Shen on the function ofimmunoregulation.Methods The mice were fed with mycelium of Hirsutella hepiali Chen et Shen at the doses of 200、400and 800mg/kg.Bw for 30days and then 7indexes of immune function were measured to judge the effect of mycelium ofHirsutella hepiali Chen et Shen on immune system.Results The results of the test groups in comparison with the control group showed that transformation and proliferation of splenic lymphocyte were enhanced (P <0.05)and the late hairstyle allergy in mice was gearedup (P <0.05);The mononuclear celiac macrophage phagocytic activity was increased (P <0.05);the quantity of the mice antibody-producing cell and the sheep erythrocyte antibody levels in serum were boosted (P <0.01and P <0.05)and enhanced the activity of NK cells in mice (P <0.05).Conclusion It is suggested that mycelium of Hirsutella hepiali Chen etShen could enhance immune function.Key words:Mycelium of Hirsutella hepiali Chen et Shen;Mice;Immunoregulation作者单位:广西壮族自治区疾病预防控制中心,广西南宁530028作者简介:王彦武(1977~),男,广西金秀人,主管医师,从事保健食品毒理与功能学检验。
蝙蝠蛾拟青霉菌丝体研究现状

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体研究现状蝙蝠蛾拟青霉菌丝体是从冬虫夏草样品中分离获得并经过培养和形态学的研究鉴定命名的,是冬虫夏草的常用代用品之一。
本文从其概述、培养方法、活性成分及其药理作用和产品开发几个方面对其研究现状进行了整理总结,指出研究中存在的问题,并对研究前景进行展望。
Abstract:Paecilomyces hepialid was obtained through separation from cordyceps. Its name comes from studies on identification,cultivation,and morphology. It is one of the common substitutes of cordyceps. This article made a summary from the aspects of review,cultivation methods,active constituents,pharmacological effects,and product development. It also discussed the major issues remaining in the current researches and made suggestions for future studies.Key words:paecilomyces hepialid;cordyceps;chemical component;pharmacological effect;review冬虫夏草为麦角菌科植物冬虫夏草菌Cordyceps sinensis (Berk.)Sacc.的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫蝙蝠蛾Hepialusarmoricanus Oberthür等的幼虫尸体的复合体,是传统的名贵滋补强身中药,具有补肺益肾、止血化痰功效。
蝙蝠娥菌丝体的免疫药理作用

蝙蝠娥的免疫增强作用采用人工发酵培养法生产的蝙蝠娥菌丝体在化学组成和药理活性等方面与天然的虫草相似,能替代天然产品药用于临床免疫方面。
第一,对免疫器官的影响菌丝体浸剂可明显增强小鼠的脾重,主拮抗强的松龙与环磷酰胺引起的脾重减轻,其机制是通过促进脾脏DNA的生物合成,增强核酸与蛋白质的含量,促进脾细胞的增殖。
其浸剂的使用还可使小鼠的胸腺萎缩,并加重强的松龙与环磷酰胺引起的胸腺萎缩作用,是它们所致的胸腺萎缩是可复性的。
引起胸腺缩小的成分既存在于虫体,也存在于子座部分。
第二,对单核-巨噬细胞系统功能的增强作用组织学检查与免疫组化分析表明,使用菌丝体制剂的小鼠,腹腔粘附细胞、脾巨噬细胞、肝Kupffer 氏细胞体积增大,胞浆增多、核质疏松,它们能面明显增大小鼠血碳清除率和肝脾吞噬系数,体内吞噬试验证实菌丝体能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数与吞噬百分率,并能对抗可的松引起的腹腔巨噬吞噬功能的降低。
第三,对体液免疫功能的增强作用蝙蝠娥菌丝体可以诱发THy-1-细胞,即B淋巴细胞的增殖反应。
使用菌丝体制剂的小鼠,其血清中IgG含量明显增加。
给小鼠服用菌丝体制剂,检测以鸡血球免疫后血清溶血素的含量,结果,菌丝体组比对照组的半数溶血值明显增大(P<0.01),说明菌丝体能提高小鼠血清溶血素(IgM)水平。
此外,体外试验还证明,菌丝体能诱导小鼠脾脏B淋巴细胞表达较高水平的IL3受体,放大、调节B淋巴细胞的应答反应。
第四,对细胞免疫功能的调节作用菌丝体对细胞免疫功能具有调节作用,但是对机体细胞免疫功能的调节作用的研究结果不一致,可能与药物处理、动物选择及实验方法等无统一标准有关,根据各位学者使用方法的一般可靠性推测,菌丝体类药物对人体细胞的免疫功能可能起选择性抑制性作用。
第五,对自然杀伤细胞(NK)活性的增强作用采用释放法检测小鼠和人的体外NK活性,用清除法检测小鼠体内NK活性的方法,以菌丝体提取液体内给药能明显增强小鼠体内外NK对Yac-1细胞的杀伤活性,并保护环磷酰胺所致免疫抑制小鼠NK活性的降低,提取液0.1、1.0mg/ml体外处理人外周血单核细胞,可使NK杀伤K562细胞的活性呈时间依赖性增强。
中国被毛孢菌粉对小鼠抗疲劳、免疫功能的作用

21 0 1年 1 2月 第 8卷第 3 4期
M dcl n oa o f hn , ee e.0 1 V 18N .4 e i nvt no i D cmbr2 1 , o. o3 aI i C a
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右 的银 微粒 , 是采用 高科 技 的纳米 技术 , 单质 银 制成 银 它 将
动或渗 出多时使用 , 待压疮局部炎症控 制后再使 用安普 贴覆
盖, 能获得更 满意的效果 。
参 考 文 献
[ ]白姣姣 , 1 冯秀 卿. 老年人 褥 疮护 理及 治疗 进展 [ ] 现 代护 理 , J.
2 0 8 1 :8 . 0 2,(0)7 0
微粒 , 吸附于载体 上制备而成。纳米 载银抗 菌材料 的抗 菌机
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crh  ̄n nodrsbet:am hcne admi d r fs— e e igi le u jc s u ietrrn o z i o e e a l
的环境利于创 面的修 复 , 而起 到去腐 生 肌 的作用 , 取 两者 博
之长。在不可 分期 压 疮 中, 使 用纳 米银 凝 胶 外 敷杀 菌 消 先 毒 , 红肿 浮动或渗出的不可分期 压疮 , 留干痂 , 无 保 使用纳 米 银外敷杀菌 消毒 后用 安普 贴 , 表皮 软化 , 使 自溶性 清创 。不 可分期压疮 一旦 出现 红 、 、 动或 渗 出时 , 肿 浮 要及 时 清创 , 去 除坏死组织 、 肉、 痂 , 少 感染 , 用纳 米银 杀 菌消毒 后 腐 硬 减 使 使用安普贴外敷 , 进 肉芽组 织 的形成 , 而促 进 压疮 的愈 促 从
中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节作用的比较

h pai a inf a t mpo etep a o yeid xa d h l o e ls au ( <0 叭 ) . / gHi uel ie s e il c nsg i c nl i rv h h g ct n e n af fh moyi vle P i y s . .3 0g k r tl sn n i s a s
虫 夏草 中分 离 到 多 个 菌 种 , 献 报 道 已有 2 文 2个 学 名, 涉及 1 属 。 随着 分 子 生 物 学 手 段 发 展 , 3个 越
来 越 多 的证 据 显 示 中 国被 毛 孢 为 冬 虫 夏 草 的 无 性 型 -] 4。但 杨金 玲等 发 现冬 虫夏 草除 了中 国被 毛 孢 菌寄生 外 , 存 在 着 蝙 蝠 蛾 拟 青 霉 等 内 寄 生 菌 , 还 进 而认 为冬 虫夏 草功 效 可能 归 因于 中 国被 毛孢 、 蝙
【 要 】 目的 观 察 中 国被 毛 孢 和 蝙 蝠 蛾 拟 青 霉 对 小 鼠免 疫 功 能 的 影 响 。方 法 分 别 给 予 中 国 被 毛 孢 和 摘
蝙 蝠 蛾 拟 青 霉 后 , 定 观 察对 小 鼠碳 粒 廓 清 功 能 、 发 性 变 态 反 应 、 血 素 抗 体 、 巴 细胞 增 殖 和 N 细胞 活性 等 的 测 迟 溶 淋 K 影 响 。结 果 30s k . / g中 国被 毛 孢 和 蝙蝠 蛾 拟 青 霉 可 显 著 提 高 小 鼠吞 噬指 数 和 半 数 溶 血 值 ( 0 O ) 显 著 提 高 P< . 1 、
F i ig U Hu. n ,Z y HANG L—o g i n ,S z HOU Qiyn ,Z —a g HOU We— n ,T u ,C imi U Je HEN Mi— nl i ( .T eS c n l ia dc lC l g ,Z ein hn s dc l ies y Ha gh u3 0 5 1 h e o d Ci c lMe ia ol e h ja gC ie eMe ia v ri , n zo 1 0 3,Chn ; n e Un t ia 2 a oaoyAnma sac e tr hja gC ie eMe ia nv ri .Ha gh u3 0 5 .L b rtr i l e rh C ne ,Z ein hn s dc lU iest Re y n zo 1 0 3,C ia hn )
中国被毛孢发酵物对小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响

中药研究3讨论31浙江枳壳主要产品及其采收根据实地调查。
浙江枳壳主要以朱栾枳壳为主,其原植物为朱栾C aurantium Linn Zhuluan。
主产地为温州,习称!温枳壳。
从访谈中,原居民认为该产品在当地已有200余年历史。
从产地收购情况来看,温州产区枳壳,产量占浙江省第一位,若加上温州相邻的几个县(均为朱栾)可占浙产枳壳的80%,除供应本地外,还供本省其它地区。
可见原植物为朱栾的温枳壳是浙产枳壳的主流。
对其产季及产况,根据枳壳原植物品种及产地的不同,药材产季略有差异。
32浙江枳壳商品等级及产量通常情况下,适时采收后,干燥的枳壳,称为!青皮枳壳,为一级商品。
若采收失时,即大暑后,或加工方法失当,如大量鲜品摊晒时,不易做到完全仰转,成品皮薄囊大或皮色泛黄,称为!黄皮枳壳,降为商品二级。
此外,枳壳采收季节,浙南恰逢多雨时节,须炭火烘烤。
对采收过时或堆积变质的产品,壳薄囊大,甚至瓣散黑心,不可再供药用。
对于浙产枳壳产量,除温州产区,因有传统生产经验,较为稳定外,其它产区,如金华、台州产区,产量变化往往很大。
参考文献:[1]雷载权.中药学[M].上海科学出版社,1995:160161.[2]李世全.中药采购技术手册[M],陕西科学技术出版社,1998:141.[3]徐国均.中国药材学[M](下册).中国医药科技出版社,66(收稿日期5)中国被毛孢发酵物对小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响黄河1姜建民2傅惠英31温州医学院第二附属医院温州3250272浙江省中药研究所3浙江大学医学院摘要:[目的]观察中国被毛孢发酵物对正常小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响。
[方法]给予小鼠高(10g#kg-1)、低(01g# kg-1)剂量的中国被毛孢发酵物,观察其对小鼠T、B淋巴细胞转化功能的影响。
[结果]中国被毛孢发酵物和冬虫夏草均能显著提高正常小鼠脾T和B淋巴细胞转化刺激指数(P<005,P<001);[结论]中国被毛孢发酵物和冬虫夏草均均能提高正常小鼠免疫功能。
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蝙蝠蛾被毛孢对小鼠免疫功能的影响目的研究蝙蝠蛾被毛孢对小鼠免疫功能的影响。
方法以KM种小鼠为研究对象,将小鼠分为空白对照组、低剂量组(110 mg/kg)和中剂量(220 mg/kg)、高剂量组(450 mg/kg),连续灌胃用药28 d,进行小鼠碳粒廓清试验、血清溶血素试验和二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发性变态反应(DTH)。
结果与空白对照组相比,蝙蝠蛾被毛孢在220、450 mg/kg剂量下,能明显增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能、体液免疫功能和细胞免疫功能。
结论蝙蝠蛾被毛孢有明显的免疫促进作用。
【关键字】蝙蝠蛾被毛孢;免疫调节The influence of Hirsutella hepiali Chen et Shen on the immunologic function of the rat MA Wen-jun,SUN Xue-mei,LIBao-wen.Qinghai Arura Tibetan Medicine R&D Co.Ltd,Xi ning 810003,China [Abstract]ObjectiveTo investigate the influence of Hirsutella hepiali Chen et Shen on the immunologic function of the rat.MethodsKM species of rats as experimental animal and then were randomly divided into four groups:the blank control group,low-dose(110 mg/kg),middle-dose(220 mg/kg)and high-dose(450 mg/kg)groups.They were given the medicines for 28 days to experiment of Carbon clearance,Serum hemolysin and DNFB induce affection of DTH.ResultsThe results showed the middle-dose and high-dose groups was higher than that ofthe blank control group and can enhance significantly mononuclear macrophage,humoral and cellular immune function.ConclusionHirsutella hepiali Chen et Shen has immune function significantly.[Key words]Hirsutella hepiali Chen et Shen;Immune function冬虫夏草(学名:Cordyceps sinensis),又名中华虫草,又称为夏草冬虫,简称虫草,是中国传统的名贵中药材,冬虫夏草是虫草真菌(Cordyceps sincn-sis)的子座及其寄主蝙蝠蛾(Hepialus armori-canus)幼虫尸体的复合物。
冬虫夏草中82.2%为不饱和脂肪酸,此外,尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、多种生物碱等。
近代药理研究表明冬虫夏草具有镇静、抗疲劳、抗缺氧、增强免疫力等作用。
但因其天然资源稀缺,现多采用人工方法分离和培育功效菌种。
不同来源的天然虫草和生物工程发酵虫草菌丝体在化学成分以及毒理、药理作用方面相似[1]。
蝙蝠蛾被毛孢是从天然虫草中分离得到的虫草菌之一[2,3]。
本研究通过实验验证冬虫夏草无性型-蝙蝠蛾被毛孢对小鼠免疫功能的影响。
1材料与方法1.1材料蝙蝠蛾被毛孢由青海珠峰虫草药业有限公司提供(批号:20110714)。
1.2动物KM种小鼠,体重18~24 g(由青海省实验动物中心提供,动物合格证号:青医动字第零零壹号)。
1.3药品与试剂碳素墨水,用前以生理盐水20%稀释;Na2CO3购自西宁市天顺器化玻有限责任公司,批号:20110516;绵羊红细胞及补体分别自绵羊和豚鼠中取血制备;都氏试剂、二硝基氟苯由天津兴隆化工厂提供(使用前溶于4∶1丙酮-橄榄油中配制成1%的溶液,空白组以单独涂布丙酮-橄榄油溶剂作为对照);注射用环磷酰胺,江苏恒瑞医药股份有限公司,批号10050821。
1.4实验仪器全自动生化分析仪Olympas-au640(日本);离心机,752分光光度仪,电子天平,数显恒温水浴锅,温度计。
1.5方法1.5.1单核-巨噬细胞功能试验——小鼠碳粒廓清法取健康KM种小鼠40只,随机分成四组。
大、中、小剂量用药组分别给予蝙蝠蛾被毛孢110、220、450 mg/kg;对照组给予等量生理盐水;灌胃给药(0.2 ml/10 g)28 d,每日一次。
末次给药后1 h,各小鼠尾静脉注射20%的碳素墨水(0.05 ml/10 g),第2(t2)分钟和第12(t12)分钟后,分别从眼眶静脉取血20 μl,加到0.1% Na2CO3溶液2 ml中摇匀,用分光光度计(680 nm下)测定t2和t12的吸光度(OD2和OD12),计算廓清指数K 和吞噬指数。
K=(logOD2-logOD12)/(t2-t1)=log(OD2/OD12)/4,吞噬指数α=体质量/肝脾重×K1/3。
1.5.2体液免疫功能试验——血清溶血素试验取健康小鼠60只,随机分成五组,分别为正常组、阴性对照组(生理盐水)、给药组(110、220、450 mg/kg)。
灌胃给药(0.2 ml/10 g)28 d,每日1次,第2天灌胃后,腹腔注射20% SRBC(0.2 ml/只)28 d,每日一次。
末次给药后1 h,经眼球取血,分离血清。
取稀释400倍的血清1 ml,加入10% SRBC 0.5 ml及10%补体1 ml,置于37 ℃恒温水浴中保温30 min,然后移至冰浴中终止反应。
1500 r/min离心5 min,取上清液1 ml加都氏试剂3 ml,摇匀后放置10 min,在540 nm波长处测定吸光度。
另取5% SRBC 0.25 ml,加都氏液至4 ml,在相同波长下测吸光度值,即为所用SRBC半数溶血时的吸光度值。
计算公式(即半数溶血值HC50):血清HC50=样品的吸光度值/SRBC半数溶血时的吸光度值×稀释倍数[5]。
1.5.3对免疫功能低下小鼠的迟发型超敏反应影响取KM种小鼠50只,雌雄各半,体重18~24 g,随机分为五组,分别为空白对照组、阴性对照组、给药组(110、220、450 mg/kg)。
空白对照组和阴性对照组给予等体积的生理盐水,给药28 d后,腹部去毛,面积约3 cm×3 cm,将1% DNFB 均匀涂抹于表面,涂抹当日除空白对照组外腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg[6],隔日加强一次,首次致敏后给药28 d,末次给药后0.5 h,将1% DNFB 均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,诱发迟发型变态反应(水肿),攻击后24 h,左耳涂布生理盐水为对照,脱颈椎处死小鼠,剪下双耳,用打孔器分别取下直径8 mm的耳片,称重;同时取下小鼠胸腺和脾脏,称重。
以左右耳片重量之差作为肿胀度,以每10 g小鼠脾脏和胸腺的重量分别计算脾指数和胸腺指数。
与对照组比较,进行数理统计。
2结果2.1单核-巨噬细胞功能试验——小鼠碳粒廓清法蝙蝠蛾被毛孢各剂量组小鼠廓清指数,均高于阴性对照组,与阴性对照组比较,高剂量组差异有统计学意义(P<0.01)。
实验表明蝙蝠蛾被毛孢能明显增强小鼠单核-巨噬细胞功能。
详见表1。
表1蝙蝠蛾被毛孢对小鼠碳粒廓清指数的影响组别剂量(mg/kg)动物数(只)K(x±s)吞噬指数(α)生理盐水组-100.0402±0.00455.94±0.63蝙蝠蛾被毛孢低110 100.0465±0.12506.43±1.65蝙蝠蛾被毛孢中220 100.0612±0.02547.12±1.96蝙蝠蛾被毛孢高450 100.0941±0.0125*8.87±1.13*注:与生理盐水组比较,*P<0.012.2体液免疫功能试验——血清溶血素试验蝙蝠蛾被毛孢各剂量组小鼠HC50均高于阴性对照组。
与阴性对照组相比,220、450 mg/kg组剂量组差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。
实验表明蝙蝠蛾被毛孢可明显提高致敏小鼠的HC50值,即有明显增加小鼠体液免疫功能的作用。
详见表2。
2.3细胞免疫功能试验——DNFB诱导DTH蝙蝠蛾被毛孢各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于阴性对照组,且随剂量的增加而增加。
与阴性对照组相比,220、450 mg/kg剂量组差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。
DNFB诱导小鼠DTH,各剂量组的脾指数均随剂量的增加而增加。
与阴性对照组相比,220、450 mg/kg 组差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01),且胸腺指数随剂量增加而增加。
由此可见,蝙蝠蛾被毛孢在220和450 mg/kg可明显增强DNFB诱导的小鼠迟发性变态反应。
表明,蝙蝠蛾被毛孢具有明显增强小鼠细胞免疫功能的作用。
详见表3。
3讨论长期以来,天然虫草和生物工程发酵虫草菌丝体被用作免疫调节剂,本文通过实验表明,蝙蝠蛾被毛孢在450 mg/kg剂量下能明显增强小鼠单核-巨噬细胞功能;在220、450 mg/kg剂量下,明显增加小鼠体液免疫功能的作用;蝙蝠蛾被毛孢在220和450 mg/kg可明显增强DNFB诱导的小鼠迟发性变态反应。
结果表明,蝙蝠蛾被毛孢具有明显增强小鼠细胞免疫功能的作用,也为冬虫夏草菌丝体的开发和利用提供了参考。
参考文献[1]柯传奎.中国冬虫夏草研究[M].北京:中国科学技术出版社,2005:61-65.[2]李增智,黄勃,李春如,等.冬虫夏草无性型的分子生物学证据,中国被毛孢与冬虫夏草之间的关系[J].菌物系统,2000,19(1):60-64.[3]蒋毅,姚一建.冬虫夏草无性型研究概况[J].菌物系统,2003,22(1):161-176.[4]龚晓健,季晖,卢顺高,等.人工虫草多糖对小鼠免疫功能的影响[J].中国药科大学学报,2000,31(1):53-55.[5]樊美珍,李春如,李增智,等.“思壮”虫草菌丝体胶囊免疫功能评价[J].微生物学通报,2000,27(1):19-22.[6]任建.人工虫草多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响[J].第四军医大学学报,2007,28(21):1967-1969.。