基因工程考试试题
基因工程高考题

生物基因工程高考真题1、【来源】 2020年高考真题江苏卷第33题8分如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如下图(以EcoRⅠ酶切为例):请据图回答问题:(1) 步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶,它通过识别特定的切割特定位点。
(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′−羟基与5′−磷酸间形成;PCR循环中,升温到95∘C是为了获得;Taq DNA聚合酶的作用是催化。
(3) 若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物,步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是(从引物①②③④中选择,填编号)。
(4) 对PCR产物测序,经分析得到了片段F的完整序列。
下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列),结果正确的是()A. 5′−AACTATGCG⋯⋯⋯AGCCCTT−3′B. 5′−AATTCCATG⋯⋯⋯CTGAATT−3′C. 5′−GCAATGCGT⋯⋯⋯TCGGGAA−3′D. 5′−TTGATACGC⋯⋯⋯CGAGTAC−3′1 、【答案】 (1) 限制性核酸内切(或限制);核苷酸序列;(2) ;DNA单链;以DNA为模板的DNA链的延伸;(3) ②④;(4) B;【解析】 (1) 步骤Ⅰ中的EcoRⅠ酶是一种限制性核酸内切酶,简称限制酶;EcoRⅠ酶能够识别并切割双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。
(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化DNA分子每一条链中特定部位的两个核苷酸之间形成磷酸二酯键;PCR循环中,升温到95∘C是为了断开DNA两条链间的氢键,得到DNA单链;Taq DNA聚合酶是一种热稳定性高的DNA聚合酶,其作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸。
(3) 引物是根据目的基因的一段核苷酸序列合成的,且与模板DNA链根据碱基互补配对合成,引物的3′端和DNA模板链的5′端根据碱基互补配对原则连接,由题目中已知序列5′−AACTAT⋯⋯−,对应的引物为3′−TTGATA⋯⋯−即④选项,由题目中另一段已知序列5′−AGAGGC⋯⋯−,对应的引物为3′−TCTCCG⋯⋯−即②选项。
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基因工程一名词解释DNA,1、限制与修饰系统:限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染,可讲解外来从而阻止其复制和整合到细胞中。
一般来说,与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶,或者说是甲基化酶,能保护自身的 DNA不被讲解。
限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。
2、各种限制与修饰系统的比较Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型识别位点4~6bp,大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性,至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp简答1. 何谓 Star activity?简述Star activity的影响因素及克服方法?答:在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特征称为星星活性。
pH 引起星星活性的的因素:①高甘油浓度(>5%);②酶过量( >100U/μl );③低离子强度( <25mmol/L);④高(> ;⑤有机溶剂如DMSO (二甲基亚砜)、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等;⑥用其它二价阳离子星星活性的抑制措施:①减少酶的用量,避免过量酶切,减少甘油浓度;②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇;③提高离子强度到100 ~ 150mM(在不抑制酶活性的前提下);④降低反应pH至;⑤使用Mg2+作为二价阳离子。
2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素?(影响酶活性的因素?)答:外因:反应条件、底物纯度(是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染)、何时加酶、操作是否恰当,反应体系的选择、反应时间的长短内因:星星活性、底物甲基化、底物的构象3、 DNA末端长度对酶切割的影响答:限制酶切割 DNA 时,对识别序列两端的非识别序列有长度要求,也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的核苷酸,否则限制酶将难以发挥切割活性。
在设计PCR引物时,如果要在末端引入一个酶切位点,为保证能够顺利切割扩增的 PCR产物,应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。
基因工程期末试题及答案

基因工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中,限制性内切酶用于切割DNA分子,产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物,通过对生物基因进行改造,使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具,可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗,通过修复或替换异常基因,治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域,基因工程可以用于改良作物,提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术,可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题(每题10分,共30分)1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中,然后转化到宿主细胞中,使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术,通过在DNA复制过程中加入特定引物,使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物?请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造,将外源基因导入到目标生物体中,使其具有新的遗传性状的生物。
例如,将耐旱基因导入水稻,使其具有抗旱能力;将Bt毒素基因导入棉花,使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用?举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如,利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因,治疗遗传性疾病。
另外,基因工程也可以用于疫苗研发,通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞,产生病原体的抗原蛋白,从而刺激免疫系统产生抗体,用于预防传染病。
基因工程技术考试试题

基因工程技术考试试题一、选择题(共10题,每题2分,共计20分)1. DNA是由以下哪种分子组成的?A. 蛋白质B. 脂质C. 糖类D. 细胞膜2. 下列哪种是基因工程技术的一种应用?A. 组织工程B. 基因治疗C. 生物降解D. 太阳能发电3. PCR技术用于什么目的?A. 基因克隆B. 基因敲除C. 基因突变D. 基因治疗4. 基因工程技术最早起源于哪个国家?A. 美国B. 英国C. 中国D. 日本5. 下列哪种是基因编辑的一种主要方法?A. RNA干扰B. 全基因组测序C. 基因枪D. CRISPR-Cas96. 基因工程技术在农业领域的主要应用是什么?A. 作物抗虫性改良B. 增加作物产量C. 提高作物口感D. 减少作物生长周期7. 双链RNA干扰主要用于什么目的?A. 基因敲除B. 基因突变C. 基因治疗D. 基因表达调控8. 基因工程技术在医药领域的主要应用是什么?A. 生产抗生素B. 疾病诊断C. 组织工程D. 基因改良9. 基因工程技术是否可以用于人类克隆?A. 可以B. 不可以10. 基因工程技术是否会对生态环境造成影响?A. 会B. 不会二、简答题(共5题,每题10分,共计50分)1. 请简要介绍基因工程技术的原理和主要方法。
2. 基因工程技术在农业领域的应用有哪些?请举例说明。
3. 什么是基因编辑?请详细描述CRISPR-Cas9基因编辑系统的工作原理。
4. 简要介绍基因工程技术在医药领域的应用,包括基因治疗和药物生产。
5. 基因工程技术是否存在伦理道德问题?请阐述你的观点。
三、论述题(共1题,30分)请阐述基因工程技术对人类社会和生态环境的影响,包括积极和消极两方面。
基因工程考试试题

基因工程一名词解释1、限制与修饰系统:限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染,可讲解外来DNA,从而阻止其复制和整合到细胞中。
一般来说,与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶,或者说是甲基化酶,能保护自身的DNA不被讲解。
限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。
3、回文序列palindrome:这样的序列呈现为旋转对称,反向重复。
4、切口酶Nicking enzyme:有些限制酶只切割双链DNA中的一条链,产生单链缺口,这种酶称为切口酶。
5、同裂酶 Isoschizomer:识别相同序列的限制酶称同裂酶,但它们的切割位点可能不同。
6、同尾酶Isocaudarmer:许多不同的限制酶切割DNA产生的末端是相同的,且是对称的,即它们可能产生相同的粘性突出末端。
其切割得到的产物可进行互补。
7、位点偏爱Site preferences:某些限制酶对同一介质中的不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称为位点偏爱。
8、星星活性Star activity:在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。
实际上星星活性是限制内切酶的一般性质,任何一种限制酶在极端非标准条件下都能切割非典型位点。
9、Klenow 片段Klenow fragment :Klenow DNA 聚合酶是 E.coli DNA polymerase 经蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)裂解而从全酶中除去 5'--3' 外切活性的多肽大片段,而聚合活性和 3'--5' 外切活性不受影响。
10、反转录酶Reverse transcriptase:即依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶,它有 5'--3' 合成 DNA 活性,但是无 3'--5' 外切活性。
它来自 AMV (禽成髓细胞瘤病毒)或 Mo-MLV (Moloney 鼠白血病病毒,又称 M-MuLV)。
基因工程期末考试试题及答案

基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指:A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案:B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶?A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案:C3. 基因枪技术主要用于:A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案:A二、填空题1. 基因工程中,常用的载体有________、________和________。
答案:质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中,________是基因表达的调控元件。
答案:启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。
答案:基因工程的基本步骤包括:目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。
2. 基因工程在医学领域的应用有哪些?答案:基因工程在医学领域的应用包括:生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。
答案:基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面:提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。
2. 基因工程在环境保护中的应用。
答案:基因工程在环境保护中的应用主要包括:开发生物修复技术,用于污染土壤和水体的净化;利用基因工程改造微生物,用于处理工业废水和废气;通过基因工程改良植物,用于重金属污染土壤的修复等。
五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉,该抗虫棉能够减少农药的使用,降低农业生产成本。
请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。
答案:该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量,减少因农药使用带来的健康风险。
经济效益包括降低农药成本,提高作物产量,增加农民收入。
环境效益包括减少农药对环境的污染,保护生态平衡,促进农业的可持续发展。
基因工程试题

基因工程试题基因工程是一门研究如何改变、操控和利用生物体的基因结构和功能的学科。
它可以通过改变生物体的基因组,从而改变其遗传性状,并对其进行精确的调控。
基因工程技术的广泛应用在医学、农业、环境、工业等领域具有重要作用。
下面是一些关于基因工程的试题,供大家参考和学习。
试题一:基因编辑技术基因编辑技术是一种通过直接修改生物体基因组DNA序列来实现精确遗传编辑的技术,请简要介绍CRISPR-Cas9系统及其应用。
试题二:转基因作物安全性评价转基因作物是指通过基因工程技术将外源基因导入植物的基因组中,使其获得一定的优势特性。
请简要介绍转基因作物的安全性评价内容和方法。
试题三:基因药物的开发与应用基因药物是通过基因工程技术制备的一类新型药物,具有针对性强、疗效持久等特点。
请以人类胰岛素为例,简要介绍基因药物的开发和应用。
试题四:基因工程在环境修复中的应用基因工程技术在环境修复中有着重要地位,可以利用生物体修复受到污染的土壤、水体等环境。
请以重金属污染土壤修复为例,简要介绍基因工程在环境修复中的应用。
试题五:基因工程在动物育种中的应用基因工程技术在动物育种中有着广泛的应用,可以加速优良基因的传播和培育出具有特定优势的新品种。
请以瘦肉型猪育种为例,简要介绍基因工程在动物育种中的应用。
试题六:基因工程伦理问题基因工程技术的发展也带来了一系列伦理问题,如基因改造的人类是否具有平等的生存权利等。
请简要讨论基因工程伦理问题,并提出你自己的观点。
试题七:基因工程在抗疾病治疗中的前景基因工程技术在抗疾病治疗中具有广阔的前景,包括基因治疗、基因诊断等。
请简要介绍基因工程在抗疾病治疗中的前景和应用。
试题八:基因工程与传统育种的比较基因工程技术与传统育种方法相比,具有许多优势和特点。
请以粮食作物的改良为例,比较基因工程技术和传统育种方法在作物改良中的差异和优势。
以上是关于基因工程的一些试题,希望能够帮助你了解和学习基因工程技术的相关知识。
基因工程期末考试题及答案

基因工程期末考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 基因工程中常用的工具酶是:A. 纤维素酶B. 限制性内切酶C. 淀粉酶D. 过氧化氢酶答案:B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤?A. 目的基因的获取B. 基因的表达C. 基因的克隆D. 基因的测序答案:D3. 基因枪法是一种:A. 植物转基因方法B. 动物转基因方法C. 微生物转基因方法D. 所有生物的转基因方法答案:A4. 重组DNA技术中,通常使用哪种质粒作为载体?A. 质粒DNAB. 线粒体DNAC. 核糖体RNAD. 染色体DNA答案:A5. 基因工程中,目的基因的表达通常需要:A. 启动子B. 终止子C. 增强子D. 所有选项答案:D二、填空题(每空2分,共20分)1. 基因工程是指按照人们的意愿,将不同来源的基因在体外构建杂合DNA分子,然后导入到活细胞和生物体内,以改变生物的遗传特性并取得新品种或新产品。
2. 基因工程中常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母菌和________。
答案:哺乳动物细胞3. 基因工程中,________是连接目的基因和载体DNA的关键酶。
答案:DNA连接酶4. 目的基因的表达需要________和________的协同作用。
答案:启动子;终止子5. 基因工程产品在医学领域的应用包括生产________、________和基因治疗等。
答案:重组蛋白;单克隆抗体三、简答题(每题10分,共30分)1. 请简述基因工程在农业中的应用。
答案:基因工程在农业中的应用主要包括提高作物的抗病性、抗虫性、抗旱性和提高作物的产量和品质。
例如,通过基因工程培育的抗虫棉可以减少农药的使用,提高棉花的产量和质量。
2. 基因工程在医学领域有哪些应用?答案:基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、单克隆抗体、基因治疗和疫苗开发等。
例如,利用基因工程技术生产的胰岛素可以治疗糖尿病,单克隆抗体用于治疗癌症和自身免疫性疾病。
3. 请解释什么是转基因生物,并简述其潜在的风险。
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基因工程一名词解释1、限制与修饰系统:限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染,可讲解外来DNA,从而阻止其复制和整合到细胞中。
一般来说,与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶,或者说是甲基化酶,能保护自身的DNA不被讲解。
限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。
3、回文序列palindrome:这样的序列呈现为旋转对称,反向重复。
4、切口酶Nicking enzyme:有些限制酶只切割双链DNA中的一条链,产生单链缺口,这种酶称为切口酶。
5、同裂酶 Isoschizomer:识别相同序列的限制酶称同裂酶,但它们的切割位点可能不同。
6、同尾酶Isocaudarmer:许多不同的限制酶切割DNA产生的末端是相同的,且是对称的,即它们可能产生相同的粘性突出末端。
其切割得到的产物可进行互补。
7、位点偏爱Site preferences:某些限制酶对同一介质中的不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称为位点偏爱。
8、星星活性Star activity:在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。
实际上星星活性是限制内切酶的一般性质,任何一种限制酶在极端非标准条件下都能切割非典型位点。
9、Klenow 片段Klenow fragment :Klenow DNA 聚合酶是 E.coli DNA polymerase 经蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)裂解而从全酶中除去 5'--3' 外切活性的多肽大片段,而聚合活性和 3'--5' 外切活性不受影响。
10、反转录酶Reverse transcriptase:即依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶,它有 5'--3' 合成 DNA 活性,但是无 3'--5' 外切活性。
它来自 AMV (禽成髓细胞瘤病毒)或 Mo-MLV (Moloney 鼠白血病病毒,又称 M-MuLV)。
11、末端转移酶Terminal transferase:来源于小牛胸腺,是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的 DNA 聚合酶,在二价阳离子存在下,末端转移酶催化 dNTP 加于 DNA 分子的 3' 羟基端。
若 dNTP 为 T 或C ,此二价阳离子首选钴离子;若 dNTP 为 A 或 G,此二价阳离子首选镁离子。
12、连接酶Ligase:催化 DNA 5' 磷酸基与 3' 羟基之间形成磷酸二酯键,将两段核酸连接起来的酶。
13、T4 多核苷酸激酶T4 polynucleotide kinase、:催化 ATP 的γ-磷酸基转移至 DNA 或 RNA 的 5' 末端。
14、碱性磷酸酶Alkaline phosphatase:主要来源于牛小肠(Calf intestinal alkaline phosphatase),简称 CIP 或CIAP,也有来自细菌(BAP)。
催化除去 DNA 或 RNA 5' 磷酸的反应。
15、核糖核酸酶A ribonuclease A或Rnase A:来源于牛胰,为内切核酸酶,可特异攻击RNA上的嘧啶残疾的3’端。
可出去DNA:RNA中未杂交的RNA区,可用来确定DNA或RNA上单碱基突变的位置。
广泛用来除去DNA样品中的RNA.16、脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ):来源于牛胰,是内切核酸酶,可优先从嘧啶核苷酸的位置水解双链或单链DNA。
可用于出去RNA中的DNA。
17、核糖核酸酶H ribonuclease H:是内切核酸酶,特异性水解与DNA杂交的RNA上的磷酸二脂键,产生带有3’羟基和5’磷酸基末端的产物,不降解单链核酸。
dsDNA或dsRNA。
该酶主要用于在cDNA克隆合成第二链之前去除。
18、Ct 值的含义C 代表 Cycle,t 代表 threshold,是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。
19、质粒:是染色体外的遗传因子,能进行自我复制(但依赖宿主细胞编码的酶和蛋白质);大多数为超螺旋的双链共价闭合环状DNA分子(covalently closed circle,cccDNA),少数为线性,大小一般为1—200kb。
20、质粒拷贝数:按照质粒控制拷贝数的程度,可将质粒的复制方式分为严谨型与松弛型。
严谨型质粒在细胞中的拷贝数有限,大约1—几个;松弛型质粒拷贝数较多,可达几百。
21、pMB1质粒的复制并不需要质粒编码的功能蛋白,而完全依靠宿主提供的半衰期较长的酶来进行。
22、质粒的不相容性Plasmid incompatibility:两个质粒在同一宿主中不能共存的现象。
它是指在第二个质粒导入后,在不涉及DNA限制系统是出现的现象。
不相容的质粒一般都利用同一复制系统,从而导致不能共存于同一宿主。
23、标记基因:按其用途可分为选择标记基因和筛选标记基因,选择标记基因用于鉴别目的DNA(载体)的存在,讲成功转化了载体的宿主挑选出来。
而筛选标记基因可用于将携带了外源DNA片段的重组子挑选出来。
24、基因文库(gene library)某个生物的基因组DNA或cDNA片段与适当的载体在体外重组后,转化宿主细胞,并因文库由外源DNA片段,载体和宿主等3个部分组成。
25、基因组DNA文库genomic DNA library:按照外源DNA的来源,可将基因文库可以分为基因组DNA文库和cDNA 文库。
基因组DNA文库是指将某生物的全部基因组DNA用限制内切酶或机械力量切割成一定长度范围的DNA片段,再与合适的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞获得的阳性菌落。
26、cDNA文库(complementary DNA library)是由生物的某一特定器官或特定发育时期细胞内的mRNA经体外反转录后形成的,即cDNA文库代表生物的某一特定器官或特定发育时期细胞内转录水平上的基因群体。
27. 载体Vehicle:将外源 DNA 或基因携带入宿主细胞(host cell)的工具称为载体。
具备以下三个必须元件:复制原点、多克隆位点和筛选标记。
28. 质粒不相容性Plasmid incompatibility:利用同一复制系统的两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称质粒不相容性,它是指在第二个质粒导入后,在不涉及 DNA 限制系统时出现的现象。
29.α-互补α-complementation:指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的α-半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现的互补。
这两个无酶学活性的产物混合在一起时,可恢复α-半乳糖苷酶的活性。
30.裂解生长状态lytic growth:噬菌体侵染宿主细胞后,大量复制并组装成子代噬菌体颗粒,导致宿主细胞裂解的现象称裂解生长状态。
31. 溶源状态lysogenic state:噬菌体侵染宿主细胞后,将λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主的染色体 DNA 中,并随宿主的繁殖传给子代细胞的现象称溶源状态。
32.感染复数Multiplicity of infection指单个宿主细胞感染的噬菌体颗粒数,等于实验所用的噬菌体与细胞的数量之比。
33.插入型载体Insertion vectors:通过特定的酶切位点允许外源 DNA 片段插入的载体称为插入型载体。
34.置换型载体Replacement vectors:而允许外源 DNA 片段替换载体的非必须 DNA 片段的载体,称为置换型载体。
35.粘粒Cosmid:带有将 DNA 包装到噬菌体颗粒中所需的 cos 序列的质粒。
包括质粒复制起点,可以象质粒一样转化并增殖;包括 cos 位点,可以象噬菌体颗粒一样包装、侵染。
36噬菌粒Phagemid具有 ColE1 复制起点及单拷贝的丝状体噬菌体主要基因间隔区的质粒载体。
此基因间隔区含病毒DNA 合成的起始与终止及噬菌体颗粒形态发生所必须的全部顺式作用序列。
含 phagemid 的细菌被噬菌体感染后,基因Ⅱ蛋白作用于间隔区,启动滚环复制产生 ssDNA 并进行包装。
37. 扣除杂交Subtractive hybridization。
将含目标基因的组织或器官的 mRNA 群体作为待测样本(Tester),将基因表达谱相似或相近但不含目标基因的组织或器官的 mRNA 群体作为对照样本(Driver),将 Tester 和 Driver 的cDNA 进行多次杂交,去掉在二者之间都表达的基因,而保留二者之间差异表达的基因。
38.酵母双杂交系统Two-hybrid system,简称双杂交系统,也叫相互作用陷阱(interaction trap)。
是根据酵母转录激活因子 GAL4 的特点创建的一种体内鉴定基因的方法。
该法所使用的“探针”不是核酸和抗体,是一种筛选策略。
其筛选的基因不是“探针”的直接编码物,而是与其能够相互作用的蛋白质的编码基因,即筛选与已知基因的产物发生相互作用的蛋白的编码基因。
39、遗传图谱(genetic map)又称连锁图谱(linkage map),它是以具有遗传多态性(在一个遗传位点上具有一个以上的等位基因,在群体中的出现频率皆高于1%)的遗传标记为“路标”,以遗传学距离(在减数分裂事件中两个位点之间进行交换、重组的百分率,1%的重组率称为1cM)为图距的基因组图。
意义:6000多个遗传标记已经能够把人的基因组分成6000多个区域,(看连接顺序)40、物理图谱(physical map)是指有关构成基因组的全部基因的排列和间距的信息,它是通过对构成基因组的DNA分子进行测定而绘制的。
绘制物理图谱的目的是把有关基因的遗传信息及其在每条染色体上的相对位置线性而系统地排列出来。
DNA物理图谱是指DNA链的限制性酶切片段的排列顺序,即酶切片段在DNA链上的定位。
(看连接距离)41、序列图谱随着遗传图谱和物理图谱的完成,测序就成为重中之重的工作。
DNA序列分析技术是一个包括制备DNA片段化及碱基分析、DNA信息翻译的多阶段的过程。
通过测序得到基因组的序列图谱。
42、基因图谱是在识别基因组所包含的蛋白质编码序列的基础上绘制的结合有关基因序列、位置及表达模式等信息的图谱。
在人类基因组中鉴别出占具2%~5%长度的全部基因的位置、结构与功能,最主要的方法是通过基因的表达产物mRNA反追到染色体的位置。
44、重叠群图谱(contig map):描述代表完整染色体片段的大片段重叠克隆的排列顺序的图谱。
45、荧光标记原位杂交:是通过荧光标记的探针与染色体杂交,从而确定分子标记在染色体上的实际物理位置。
46、顺式载体:对于一元载体来说,因其T-DNA区与Vir区是在同一载体上的,故称为顺式载体。